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代生物利技
第一讲基因工程
重点难点突破
破
种容易混淆的酶
突破二目的基因的获取方法
下表中的
成
从部分基因
PCR
文库中获取
形成黏性末端或
磷酸二酯键
成重组D
连接醇DNA分子片段磷酸二酯键
多
蛋白质的
↓反转录基酸序列
形成
聚合酶脱氧核苷酸
磷酸二酯键
推测
补
水解酶D
磷酸二酯
反转录
形成单链D
碱基对
组
物起始
典型例题
〈例1[长沙市明德中学测验]下列
有关酶
环
↓分离
限制酶水解相邻核苷酸间的化学键切
A连接酶
末端碱基互衤
片段连接
C.DNA聚合酶能够从引物
或RNA
录酶以一条
专一性强
不存在的
酶只能从引物末端延仲D
根制
解相邻核苷酸间的化学键
程麻
连接起来
操作过程较
存技术要
为模板合成互
麻烦,技术要
过高
训
典型例题
图
分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次
例2》[泉州市第五中学期中]下图
示从细菌细胞
表示限制酶
A连接酶、解旋酶作用的
的基因的两种方法
的是
TIIIE
①②③④
A.甲方法可建立该细菌的基因组文
方法可建立该细
代生物科技专题
C.甲方
脱氧核苷酸为原料
典型例
例3[福建省漳州第一中学测验]下列
析甲方法是
否转移成功的方法中,不属于分子水平的检测的是
建立该细菌的基
通过害虫吃棉叶看其是否死
建立该
氧核
物基因组D
为原料,且需要反转录酶参
C.转基因生物
的
探针能否形成杂
用人胰岛
过核酸分子杂
的成功表达在
技术从中筛选目的基因,筛选过程
兑法
交,检目的基因
棉叶看
是否死亡,属于个体生物学水平的检测
m③e
探针的应
依据的原理
杂交是指D
在合适的条件下能和
如果对最初的DNA片段进行标记,即成为探
B.图中的菌落是通过稀释涂布法获得的
定
株
从该
筛选到肜
糖素基因
代种群
种方法检出的
基因植株的比例
破
的是
检測内容
分子杂交
进入受体细胞
体杂交总蛋白质
质
分子杂交技术
日的基因是否
洒除
抗除草剂
蛋白质
病的接种实验,以确定是否具有
功能进
经典真题呈现
题型
基因
对重金属污染的土壤进行生物修复,研究者将
隆的重金属转运蛋
3)基因与外源高效
基因工程的叙述,正确的是
A.若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核
该重组质粒进
本并保持结构稳定
B.抗除草剂基因转入某抗盐植物获得
鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明
抗盐性的改
除草剂基因的转入无关
表
除草剂基因转入某植物获得转基因植株,其DNA检測均
为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导
含日的基因,抗性鉴定为抗除草剂和不抗除
同时避免内源HMA3基因的干扰,在进行PCR扩增时,应选定是前者表达了抗
D.已知不同分子量D
同
为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒参考答案
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点难点
解析
酶可在
切
A聚合酶在
分子复制时将脱氧檳苷酸连接成脱氧柲
链;
艮制酶切开的砗酸二酯键连接
起;解旋
作用是
解开螺旋,为复制或转录
模板
录形成
需要逆转录酶
析可知
布法获得的,B正确;核酸
胞中控制胰高血糖
表达,因
获得胰高
体外大量扩增
基
转录,则
杂交检
测目
因转录产物,含量不一定多
除
则喷洒除草剂检
除草剂幼苗出现的概率较低
检出的含目的
经典真
克隆的重金
基因杨树
和高效启动子,需
要检测是否含有高效启动子序列和HMA3基因
的引物组合
解析
受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用
酶,则该酶会
物,获得了抗除草剂抗盐
和抗除
盐
系
诗基
基因,但存
考总
抗除草剂和不抗除
明目的基因
成蛋白质产
基因未转录出
或转录
未能
答案
胞质基
翻译成蛋
错误;某种限制性
酶切环状质
膜、细胞壁
状质
3.【解析
知,两种限制性核酸内切酶切
密个密个密个密个密个密个密个密个密
DNA分子的不同部位,说明两种服制性核酸内切酶识别的
对
切产物是
于构建重
知,该DNA片段
TGITGCIGGCITCAIC
酶
处
核酸
酶
作用的是双
图中被
酸内切酶大多特异性
被改被
核苷酸序列,但也有少数
性核酸
酶能识
造的造的造的造的
或8个核苷酸序列
温度周期性变化是
码密码密码密码
条件。另外
在延伸阶段发挥催
变性和复
程不需要酶的
居图分析
有7个硫基发生了替换,故有第
质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因
码子发生了硫
换
胰岛素A、B肽链编
不是抗生素合成基因。D项
码序列
段短肽编码序列后不应破坏其正常功能
常表
案
种
酶愈伤组织
过短,其翻译成的多肽链将
)继代
发根农杆菌转速
失
确;如果
的短肽編码序列含有终止密
种类和浓度
的翻译过程将提前结束,氨基酸数目
从而导致蛋白质失效,B正确;由题干分析可知,加入短肽编
的遗传多样性和保证药材的品质
的是使
肽链等比例表达,并不应该改变
林下种植,是利用间种技
析题意可知,从
链的氣基酸序列,更不能改变原人胰
的抗原性
DNA复制需妥
聚合酶
知,酚羹化合物诱导发根农
酶切位点
酶切位点
这两种酶充分
系列基因表达,形成D
性核
酶切重组表达载体后将产生三个短链(注意线型的
居植物
培养技术过
被
使叶片
脱分化形成愈伤组织,再
根。(3)剪取毛
的回体培
酸菌为原核生物,没有细胞核
代培养,培养基
核糖体一种细胞器,再结合题意,所形成的蛋白质最终
农
转入液体培养基、置于摇床
分析可知,蛋白质在核糖
悬浮培养,遒过控制摇床的转遠和温度,调节培养基成分中的
经细胞质基质后,先
胞膜再分布到细胞壁
(5)根据
的种类和浓度,获得
疫调节基础知识判
性生
抗
于提取药用成
噬细胞只有识荆能力,但并
案
雄性原核较大,更容易容纳外源D
2)引物
别能力;浆细胞没有识别能力,其分泌的抗
虽然有特异
能力,但是
因生物中提取蛋白质,用相应的抗体(对抗体进行同位素标构。综合分析A、B选项正确
进行抗原一抗体杂
果出现杂交带,表明目的
8.【答案
核酸内切酶和
不发生编码直链
来自精子的雄性原核较大,更容易容纳
粉合成酶的碱基
不含启动子(3)逆转录(反转录)
因此外源基因能够容易整合到精子的染色体上,这是提
物是根据
知序列设计合成的(引物能
转化率的关键
对胚胎的性
有效
DNA特异性结合)(4
隹确的方法是
最少,控制合成的直链淀粉合成酶
链淀粉
囊胚中取出
养层细胞,提取
然后用位于Y染
决定基
硫基作引物,在热
析】(1)将目的基
建基因表达载体
要限制酶的
目的基因插入载体时
连
板,进行PCR扩增,再用SR
探针检测扩
连接
载体进入水稻鈿胞并在细胞内维持稳定和表
增产物,与SRY特异
计出现阳性反应者,说明其含有
程叫做转化
合
酶识别并结合的位点,如果启动
胚胎
代转基因小鼠中是否成
合和识别
影响基因
录水平,在真核生物
达,常用的分子检澜方法
编码蛋白质的序列是基因中編码区,编码区
包括启动
本步骤
中提取蛋白质,用相应的
体子序列,因此直链淀粉合成酶的基因碱基序列中不含有启动
进行同位素标记)进行抗原一抗体杂交,如果出现杂交带,表
合成直链淀粉酶的氨

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