资源简介

高二生物
班级_________小组_________姓名______________ 使用时间： 编号：
题目 第一章 发酵工程 第2节 微生物的基本培养技术
学习目标 1.掌握培养基的作用、分类及营养成分。 2.区分消毒和灭菌,掌握不同物品的消毒和灭菌方法。 3.掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。
一、培养基的配制：
1.什么是培养基？
2.培养基分为哪两类？各自的定义是？
3.培养基的营养组成成分是？
4.某些微生物生长还需要的特殊条件
二、无菌技术
获得纯净的微生物培养物的关键是防止　 污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括:
1.消毒:是指使用较为温和的物理、化学或　 等方法杀死物体表面或内部　 微生物。
2.灭菌:是指使用强烈的　 杀死物体　 所有的微生物,包括芽孢和孢子。
归纳拓展
芽孢是某些细菌生长到一定阶段,在细胞内形成的休眠体。孢子是某些微生物的
繁殖体。
3.常用的消毒和灭菌方法
(1)常用的消毒方法有哪些？
(2)常用的灭菌方法有哪些？
归纳拓展
与煮沸消毒法相比,巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时,营养物质损失少。三、微生物的纯培养——以酵母菌的纯培养为例
1.相关概念
(1)培养物:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含 　微生物的群体称为培养物。
(2)纯培养物:由　 繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。
(3)纯培养:获得　 的过程就是纯培养。
2.酵母菌的纯培养
(1)酵母菌纯培养的原理？
(2)方法步骤
a.制备马铃薯琼脂培养基
i.配制培养基
ii.灭菌:培养基需要进行　 灭菌,而培养皿需要进行　 灭菌。
iii.倒平板:待培养基冷却至　 ℃左右时,在　 附近倒平板。倒平板的具体操作步骤:第一步,拔出锥形瓶的棉塞。第二步,将瓶口　 通过火焰。第三步,用拇指和食指将培养皿打开一条　 的缝隙,将培养基(10~20 mL)倒入培养皿,立即盖上皿盖。第四步,等待培养基冷却凝固后,将培养皿　 。
特别提醒
在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,那么这个平
板不能用来培养微生物,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的部位滋生。
b.接种和分离酵母菌
通过接种环在固体培养基表面　 的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经数次划线后培养,可以分离得到　 。
平板划线法操作步骤如下:
c.培养酵母菌
完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和　 的平板倒置,放入　 左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养　 。
【跟踪训练】
1.下表是一种培养基的配方,此培养基提供的主要营养物质有(　易错　)
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
0.5 g 1 g 0.5 g 2 g 200 mL
A.3类 B.4类 C.5类 D.6类
2.关于培养基中满足微生物生长对pH、特殊营养物质及O2的需求,下列叙述错误的是(　深度解析　)
A.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
B.培养霉菌时需将培养基调至碱性
C.培养细菌时需将培养基调至中性或弱碱性
D.培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
3.在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列说法错误的是(　　)
A.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法
B.密闭空间内的空气常采用紫外线照射消毒
C.玻璃实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌
D.水厂供应的自来水通常是经过高锰酸钾消毒的
4.微生物的实验室培养,获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染。下列无菌操作中,错误的是(　　)
A.对实验用的培养基,采用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌
B.对锥形瓶、塞上棉塞的试管或吸管等,用干热灭菌箱进行灭菌
C.对操作者的双手、衣着以及操作空间等,采用紫外线进行消毒
D.对试管口、锥形瓶口等部位,通过火焰灼烧进行灭菌
5.下列有关酵母菌纯培养的叙述,错误的是　(　　)
A.培养酵母菌的试剂和器具不都进行高压蒸汽灭菌
B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C.为了防止污染,接种环经过火焰灭菌,然后立即快速挑取菌落
D.酵母菌菌种分离使用的是固体培养基
8.下列有关平板划线法的操作错误的是　(　　)
A.将接种环放在火焰上灼烧
B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液
C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
D.划线时要将最后一次的划线与第一次的划线相连
9.有关倒平板的操作错误的是(　深度解析　)
A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上
B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上
D.等待培养基冷却凝固后,将培养皿倒过来放置
10.如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5,下列操作方法错误的是(　　)
A.每次划线操作后要将接种环放在火焰上灼烧灭菌
B.划线操作应在超净工作台上进行
C.第3次划线操作可从第2次开始划出,也可从第1次开始
D.在第4次划线区域中也可以得到菌落
11.图1是酵母菌纯培养过程的一些步骤,请据图回答下列问题:
　　　　　　　图1　　　　　　　　　　　　图2
(1)图1中所表示的接种方法是 ,请用线条和箭头在图2空白圆圈内画出该方法接种的路径示意图。
(2)图示接种方法的目的是 　。
(3)在进行 和　　　 　操作之间要对用到的培养基作灭菌处理。
(4)灭菌是指 ,对培养基的灭菌需要在　　　　　　　　　　的条件下维持15~30 min。
参考答案
一、培养基的配制
1.人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.液体培养基:不含凝固剂、呈液体状态的培养基。
固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(如琼脂)制成的培养基。琼脂固体培养基是实验室中最常用的培养基之一,微生物在其表面或内部生长形成肉眼可见的菌落。
3.营养组成:各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源 (提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如维生素、氨基酸等)以及氧气的要求。
4.维生素 酸性 中性或弱碱性 无氧
二、无菌技术
杂菌 1. 生物 一部分 2. 理化方法 内外
3. （1）a.日常生活中杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢,可用煮沸消毒法,在100 ℃煮沸5~6 min。
b.对于一些不耐高温的液体,如牛奶,可用巴氏消毒法,即在62~65 ℃消毒30 min或80~90 ℃处理30 s~1 min。
c.人们也常使用化学药物进行消毒,如酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。
d.接种室、接种箱或超净工作台在使用前进行紫外线消毒,在照射前,适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可加强消毒效果
（2）a.涂布器、接种环、接种针或其他金属用具,可进行灼烧灭菌。
b.耐高温的和需要保持干燥的物品可进行干热灭菌,即将灭菌物品放入密闭容器如干热灭菌箱,在160~170 ℃的热空气中维持2~3 h。
c.湿热灭菌是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。其中高压蒸汽灭菌的效果最好,一般在压力为100kPa、温度为121℃的条件下,维持15~30min来灭菌。
三、微生物的纯培养——以酵母菌的纯培养为例
1.（1）特定种类（2）单一个体 （3）纯培养物
2.（1）分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落 。采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
(2)a. 高压蒸汽 干热 50 酒精灯火焰 迅速 稍大于瓶口 倒过来放置
b. 连续划线 单菌落 火焰旁 棉塞 火焰 冷却 火焰 不要划破培养基 末端 第一次
c. 一个未接种 28 ℃ 24~48 h
【跟踪训练】
1-5 C B D C C 6-8 D C C
9. (1)平板划线法
(2)分离、纯化酵母菌,得到单个菌落　(3)调pH　倒平板　(4)使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子　压力为100 kPa、温度为121 ℃

展开更多......

收起↑