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第2课时　动物细胞融合技术与单克隆抗体
学习目标：
1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物|学等手段.使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
2.概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。
3.收集单克隆抗体在临床上实际应用的资料,并进行交流分享。
学习内容：
一、动物细胞融合技术
1．定义：使 个或 个动物细胞结合形成 个细胞的技术。
2．结果：融合后形成的杂交细胞具有原来 个或 个细胞的遗传信息。
3．原理： 。
4．诱导融合常用的方法： 、 、 。
(1) 法是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。
(2) 不灭活的病毒会 细胞，因而不能用于诱导细胞融合。
(3) 与植物原生质体融合方法对比，诱导动物细胞融合的特有方法是 。
5．特点：突破了 的局限，使 成为可能。
6．动物细胞融合技术涉及的变异类型是 。
7．应用
(1) 间、属间、科间，甚至动物与植物之间的细胞融合都已获得了成功。
(2)动物细胞融合技术已成为研究细胞 、细胞 、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。
(3)利用动物细胞融合技术发展起来的 技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。
二、单克隆抗体及其应用
1.常规抗体与单克隆抗体
(1)常规抗体
①产生:抗体的传统生产方法是向动物体内反复注射 ,使动物产生抗体,然后从动物 中分离所需抗体。
②缺点:产量 、纯度 ,制备的抗体特异性 。
(2) 单克隆抗体
①产生：由单一 细胞增殖产生的单一 。
②优点:能准确地识别 的细微差异，与 发生特异性结合,并且可以 。
2. 单克隆抗体的制备
(1)技术手段： 和 。
(2)原理： 和 。
(3)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
①每一个B淋巴细胞只分泌 抗体，但一个B淋巴细胞 在体外培养条件下无限增殖。
②骨髓瘤细胞能在体外 ，但 。
③将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，得到的融合细胞能 ，并产生足够 。
(4)制备过程
①免疫处理
提供B淋巴细胞的动物必须预先注射 进行免疫处理，获得能产生 的B淋巴细胞。
②诱导融合
将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞用 、 、 。其中 法是动物细胞融合特有的诱导方式。
③通过筛选获得杂交瘤细胞
用特定的 培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有 的 细胞才能生长。
④通过筛选获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞
对上述经选择培养的 细胞进行 和 检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需 的细胞(抗体检测呈 性的杂交瘤细胞)。
⑤获取单克隆抗体的场所
若在细胞培养液中进行杂交瘤细胞培养，则从 中提取；若在小鼠或其他动物腹腔中培养，则从 中提取。
(5)单克隆抗体的应用
①被广泛用作 ，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要作用。
如：用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”.在妊娠第8天就可以做出诊断,且准确率高达90%以上。
又如：利用 或 的单克隆抗体在特定组织中成像的技术，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。
②可以运载
抗体——药物偶联物(ADC)通过将 与能特异性识别肿瘤抗原的 结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。
③自身也可用于治疗疾病。
答案
一、1．两 多 一
2．两 多
3．细胞膜的流动性。
4． PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
(1)灭活病毒诱导
(2)感染
(3)灭活病毒诱导法
5．有性杂交 使远缘杂交
6．染色体数目变异
7．(1)种 (2)遗传 免疫 (3)杂交瘤
二、1. (1)①某种抗原 血清 ②低 低 差
(2)①杂交瘤细胞 特异性抗体
②抗原 特定抗原 大量制备
2. (1)动物细胞融合 动物细胞培养
(2)细胞膜的流动性 细胞增殖
(3)①一种特异性 不能 ② 大量增殖 产生抗体 ③大量增殖 数量的特定抗体
(4) ①特定的抗原 特定抗体
②PEG融合法、电融合法或灭活病毒诱导法诱导融合 灭活病毒诱导
③选择 融合 杂交瘤
④杂交瘤细胞 克隆化培养 抗体 抗体 阳
⑤ 细胞培养液 腹水中
(5) ① 诊断试剂 同位素 荧光标记 ②药物
细胞毒素 单克隆抗体

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