资源简介

第2节 微生物的培养技术及应用
一、微生物的基本培养技术
1. 了解有关培养基的基础知识
2. 掌握培养基的配制、无菌技术及微生物的纯培养
3. 利用选择培养基分离细菌，运用相应技术解决生产生活中有关微生物的计数
4. 关注有害生物的控制、宣传健康的生活方式等
一、培养基的配制
基础梳理
1. 微生物培养的关键：
2. 实验室培养微生物的基本思路：
（1）
（2）
3. 培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需要，配制出 ——培养基
4. 培养基的用途：用以 、 、 、保存微生物或
5. 培养基的种类： 、
6. 培养基的营养构成：一般含有 、 、 、和 等营养物质；还需要满足微生物生长对 、 以及 的需求
1. 培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利（ ）
2. 同一种物质可能既作碳源又做氮源（ ）
2、 无菌技术
1. 消毒的概念：消毒是指使用较为温和的 、 或 等方法杀死物体表面或内部一部分微生物
2. 灭菌的概念：指用强烈的 杀死物体内外所有的微生物，包括 和
3. 无菌技术的主要内容
（1）消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对 、 和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的 、 和 等进行灭菌
（2）做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经 与周围的物品接触。为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的需要操作都应在 并在 附近进行
1.消毒和灭菌的杀菌程度存在差异（ ）
2.灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子（ ）
3.灼烧法灭菌的对象是金属器具，不可以是操作玻璃器具（ ）
三、微生物的纯培养
1. 培养物的概念：将接种于培养基内，在合适条件下形成的 的群体称为培养基
2. 纯培养物的概念：由 的微生物群体称为纯培养物
3. 纯培养的概念：获得 的过程就是纯培养
4. 菌落的概念：分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成 、
的子细胞群体，就是菌落
5. 微生物纯培养的原理：采用 和 能将单个微生物分散在固体培养基上，之后经培养基得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物
6. 酵母菌的纯培养的方法步骤操作：
7. 平板划线法的概念：通过 在固体培养基表面 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经 后培养，可以分离得到
1.微生物的穿培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物（ ）
随堂训练
1.研究人员利用无机盐、琼脂和石油配制的培养基，欲培养出石油降解菌，以修复被石油污染的土壤。下列相关叙述中，不正确的是( )
A.这种培养基是一种选择培养基
B.这种培养基的唯一碳源是石油
C.能在该培养基上生长的微生物就是石油降解菌
D.石油降解菌在未被石油污染的土壤中含量较高
2.如图为筛选淀粉分解菌的培养基，接种培养后，培养平板经稀碘液处理，出现了两个以菌落为中心的透明圈。相关叙述正确的是( )
A.培养基中除淀粉外还含有氮源等其他营养物质
B.两个菌落中的微生物为同一种微生物
C.两个菌落中的微生物均不能将淀粉酶分泌至细胞外
D.透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明该微生物分解淀粉的能力越小
3.下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法中，错误的是( )
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C.表中各成分的含量按照所培养的微生物的营养需要来确定
D.若除去①，此培养基可用于培养大肠杆菌
4.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是( )
A.紫外线照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果
B.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖
C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落
D.在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
5.下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,据图分析不正确的是( )
A.获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法
B.获得图B效果的接种方法是平板划线法
C.若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高,培养基上的菌落可能会连成一片
D.在接种前要对培养基进行消毒处理
6.利用平板划线法进行微生物的接种和培养实验时，下列叙述错误的是( )
A.培养微生物的培养液和器具都需要进行灭菌处理
B.接种后的培养m要倒置，以防培养污染
C.接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
D.根据菌落的数目多少可以大致估算出菌种的数量
7.漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有若广泛用途。下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关叙述正确的是( )
A.生活污水中含有大量微生物,是分离产漆酶菌株的首选样品
B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C.在涂布平板上通过划线获得单菌落
D.斜面培养基中含有大量营养物,可在常温下长期保存菌株
8.下列关于微生物实验操作的叙述,错误的是( )
A.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B.接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C.接种后的培养皿要倒置,以防培养污染
D.菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
9.[生物——选修1：生物技术实践]
如图为微生物的实验室培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤,请回答下列问题:
(1)①是制备培养基时__________的操作,该操作需待培养基冷却至__________左右时,在__________附近进行。
(2)该实验中纯化醋酸菌的接种方法是__________;在完成步骤④的操作中,为什么在每次划线之前都要灼烧接种环 __________。
(3)纯化的醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产,则可以采用临时保藏的方法保存菌种,但这种方法保存的时间不长,原因是__________。对于需要长期保存的菌种可采用__________的方法。
(4)将醋酸菌加入果汁中,醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变成__________,再变为醋酸。
答案以及解析
1.答案：D
解析：A.选择培养基是指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基。具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能，A正确；
B.石油降解菌能分解石油，为分离该菌株，需要以石油作为唯一碳源，B正确；
C.石油中所含的稠环芳香烃对生物体有剧毒，可导致绝大部分的生物死亡，C正确；
D.石油降解菌是在含油污水及含油土壤中存在着能够降解利用有机物的微生物菌群,所以其在被石油污染的土壤中含量较高，D错误。
2.答案：A
解析：
3.答案：D
解析：由表格可知，该培养基不含有机物，且无碳源，因此可培养自养型微生物，大肠杆菌为异养型，除去①之后，培养基中缺少碳源和氮源，大肠杆菌无法生长。
故选D。
4.答案：A
解析：用紫外线照射30 min,可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适置喷洒石炭酸等消毒液,可以加强消毒效果，A正确;高压灭菌加热结束时，待压力表指针回到零后，才能开启锅盖，不能打开放气阀使压力表指针回到零，B错误;为了防止污染，接种环经火焰灭菌，冷却后才可以快速挑取菌落,C错误；在微生物接种的实验中，一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30 min对超净工作台进行灭菌,D错误。
5.答案：D
解析：从平板中菌落的分布来看,A图和B图的接种方法分别是稀释涂布平板法和平板划线法。如果菌液的稀释度太低,在培养基上的菌落会连成一片。在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌处理。
6.答案：D
解析：
7.答案：B
解析：本题考查微生物的培养和分离。据题干信息，“漆酶属于木质降解酶类”，而生活污水中木质含量较少，因此不是首选样品；筛选能产生漆酶的菌落，需在培养基中加入漆酶的底物作为唯一碳源，据菌落特征筛选；在新的平板上通过划线获得单菌落；保存菌株需在低温下进行。
8.答案：A
解析：无菌技术指通过一定的物理、化学的手段，防止实验室培养物被外来微生物污染，保持微生物的纯培养的技术，其中包括在微生物的分离、转接、保存等过程中防止其他微生物污染的手段。常见的方法：消毒和灭菌。
【详解】接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用高压蒸汽灭菌法处理，A错误；为了防止杂菌污染，每次接种前后，接种环都要进行灼烧灭菌，B正确；接种后，培养皿需要倒置，以防皿盖上水珠落入培养基造成污染，C正确；分离菌种可以用平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于微生物的计数，所用培养基为固体培养基，D正确。故选A。
9.答案：（1）倒平板；50℃酒精灯火焰附近
（2）平板划线法；使得每一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端（为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种）
（3）菌种容易被污染或产生变异；甘油管藏
（4）乙醛
解析：
（1）①是制备培养基时倒平板中的主要操作；该操作需待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，防止空气的杂交污染．
（2）根据图④可知，该纯化醋酸菌的接种方法是平板划线法（或稀释涂布平板法）．平板划线时，每次划线前都要进行灼烧，这样作用的目的是杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使得每一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端．
（3）采用临时保藏法保存菌种时，菌种容易被污染或产生变异，因此这种方法保存的时间不长；对于需要长期保存的菌种可采用甘油管藏的方法．
（4）将醋酸菌加入果汁中，醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变成乙醛，再变为醋酸．
学习目标
易错提示
基础梳理
易错提示
基础梳理
易错提示
2

展开更多......

收起↑