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怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。
从社会中来
1.2 微生物的培养技术及应用
一 生物的基本培养技术（第1课时）
什么是培养基？如何配制？
什么是无菌技术？
怎么进行酵母菌的纯培养？
培养基的配制
1.什么是微生物？研究和应用微生物的前提是？
2.什么是培养基？其用途是？
3.培养基按物理性质怎么分类？
4.培养基中一般包含哪些成分？为满足一些微生物的特殊要求，培养基的配制还需要注意什么？
阅读课本P9-10，完成下列问题
防止杂菌污染
获得纯净的微生物培养基
按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长的营养物质
培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物
培养基的类型及用途
标准 培养基种类 培养基特点 作用
物理性质 固体培养基 加凝固剂，如琼脂 微生物的分离与鉴定，
活菌计数，保藏菌种
半固体培养基 加凝固剂，如琼脂。容器放倒不致流出，剧烈震动则破散 观察微生物的运动、
分类鉴定
液体培养基 不加凝固剂 常用于扩大培养，工业生产
、
、
、
、
培养基的成分
①碳源：
无机碳源
有机碳源
例如CO2、CO32-、HCO3-等
例如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等
无机氮源
有机氮源
例如N2、NO3-、NH3、NH4＋等
例如牛肉膏、蛋白胨、尿素等
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
②氮源：
（1）主要营养物质：
碳源、氮源、水、无机盐
③无机盐：调节酸碱平衡、维持一定的渗透压
一般情况下，添加无机碳源培养基用来培养自养微生物；
添加有机碳源培养基用来培养异养微生物。
一般情况下，不添加氮源培养基可用来培养固氮微生物
有些无机盐离子可以作为化能合成菌的能源（如铁细菌）
（2）还需满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的需求
④培养厌氧微生物时，需要提供_________的条件。
①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加___________；
②培养霉菌时，需要将培养基调至_________；
③培养细菌时，需要将培养基调至__________________；
维生素
酸性
中性或弱碱性
无氧
特殊营养物质:维生素、碱基等
培养基的配制原则
目的要明确：
根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配置量。
营养要协调：
培养基中各营养物质的浓度和比例要适宜
碳氮比为4:1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖，谷氨酸产量少；
碳氮比为3:1时，菌体繁殖受抑制，谷氨酸合成量大增。
PH要适宜：
细菌培养基呈中性或微碱性；霉菌培养基呈酸性。
1．下列有关微生物培养基的配制表述错误的是（ ）
A．培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源
B．在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性
C．培养光能自养型蓝细菌的培养基中不需提供有机物
D．马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源
无菌技术
1.无菌技术的目的是？主要包括？
2.什么是消毒？常用的消毒方法有？分别使用于？
3.什么是灭菌？常用的灭菌方法有？分别使用于？
阅读课本P10-11，完成下列问题
防止杂菌污染
消毒和灭菌
1.概念：
指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。
2.常用的消毒方法：
（1）煮沸消毒法：100℃煮沸5～6min，可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。
（2）巴氏消毒法：62～65℃下消毒30 min或80～90℃处理30s～1min，适合一些不耐高温的液体，如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。
生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中部分微生物的方法。
常用的消毒方法
（3）化学药剂消毒法：用70%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。
（4）紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线照射30min。在照射前，适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，可以加强消毒效果。
归纳：消毒方法较温和，不能杀死所有的微生物，有些方法能杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
常用的灭菌方法
指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
芽孢：
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。
孢子：
某些生物的繁殖体细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性生殖细胞。能直接发育成新个体。
芽孢和孢子具有高度的耐热性，可抗化学药物和抗辐射
1.概念：
原理：高温蒸汽破坏蛋白质、核酸等结构使其变性。
优点：操作简便，效果可靠，可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体。基本保持培养基的营养成分不被破坏。
对象：培养基等
注：使用后的培养基必须灭菌后才能丢弃，以免污染环境。
① 湿热灭菌：高压蒸汽灭菌锅内100kPa、121℃下维持15～30min。
高压蒸汽灭菌锅
2.常用的灭菌方法：
原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等。
对象：耐高温，需保持干燥的物品，适用于
玻璃器皿 (如试管、培养皿、吸管、注射器)
金属器具 (如针头、 镊子、剪刀等)的灭菌。
② 干热灭菌：干热灭菌箱内160～170 ℃下加热2～3h。
干热灭菌箱
③ 灼烧灭菌：酒精灯火焰灼烧
效果：最彻底
原理：使微生物燃烧
对象：接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位。
　实战训练　
2.（2019·江苏·高考真题）下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是（ ）
A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染
D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基
3．消毒和灭菌是微生物培养中常用的操作方法。下列说法正确的是
A．微生物接种技术的方法不同，但核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
B．在100℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法，可杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢
C．无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
D．高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时，才能打开盖子
4．微生物培养时常用到无菌技术避免杂菌污染，相关叙述正确的是（ ）
A．无菌技术包括对操作者的衣着和手进行灭菌
B．倒平板时应该把培养皿盖完全打开，以免培养基溅到培养皿盖上
C．配置好的培养基应放入干热灭菌箱中进行灭菌
D．接种前后接种环都必须灼烧灭菌

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