资源简介

(共30张PPT)
第1章 发酵工程
第2节 微生物的培养技术及应用
（第一课时）
学习目标
目标
01
02
03
通过对培养皿和培养基进行灭菌，了解消毒和灭菌的原理及方法。（科学思维）
掌握通过配制培养基，了解配制培养基的基本步骤，以及培养基中各类营养物质的配比。（生命观念）
通过对酵母菌进行纯培养，理解并掌握微生物接种、分离和培养的基本原理和过程。（科学探究）
情景材料一：从社会中来
向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶，由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶，自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事件屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。
问题1：怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？
制作工具和原料灭菌
控制发酵条件避免杂菌进入
接种纯的菌种
微生物的无菌培养技术
问题2：杂菌属于微生物，你知道杂菌属于微生物中的哪种类型吗？
微生物
个体无法用肉眼观察的微小生物。
无细胞结构
原核细胞
真核细胞
真菌：酵母菌、毛霉等；
原生生物：草履虫、变形虫等
微生物的类群
病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌体等DNA病毒
细菌:蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌:链霉菌等
问题3：微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想看某种纯净的微生物,我们该怎么做？若想通过肉眼能看到细菌，我们又该如何？
本章提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。
一、微生物的基本培养技术
微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想得到纯净的微生物，就必须对其进行培养和分离。
实验室培养微生物的条件
(1)要为人们需要的微生物提供合适的___________条件。
(2)要确保 ，并将需要的微生物分离出来。
营养和环境
其他微生物无法混入
——培养基
——无菌技术
问题4：难以用肉眼观察到的微生物吃什么呢？该如何培养呢？
1.培养基的概念、作用、种类及用途？
2.结合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析培养微生物的培养基必备营养成分有哪些？
3.配制培养基时，如何满足不同微生物的特殊需求？举例说明。
合作探究一：请同学们自主学习教材P9-10页，小组合作思考讨论完成问题。
一、微生物的基本培养技术
一、微生物的基本培养技术
（一）培养基的配制：
1.定义：
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2.作用：
用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
有无 凝固剂琼脂
液体培养基
固体培养基
微生物的分离、鉴定、活菌计数
扩大培养、工业生产
3.种类：
微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
化学成分
目的用途
不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、
分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
含化学成分不明确的天然物质
工业生产
培养基成分明确
分类、鉴定
在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长
培养、分离出特定微生物
在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物
鉴别不同种类微生物
选择培养基
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
天然培养基
合成培养基
鉴别培养基
拓展延伸
【注意】病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。
选择培养基鉴别培养基拓展延伸一、微生物的基本培养技术一、微生物的基本培养技术
（一）培养基的配制：
问题3：结合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”，分析培养微生物的培养基必备营养成分有哪些？
组分 含量 提供的主要营养
牛肉膏 5g 碳源、磷酸盐和维生素
蛋白胨 10g 氮源和维生素等
NaCl 5g 无机盐
H2O 定容至1000mL 水
一、微生物的基本培养技术
（一）培养基的配制：
4.培养基的营养成分：
（1）一般都含有碳源、氮源、水、无机盐
碳源
无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-
有机碳源：糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
自养微生物
异养微生物
功能：①构成细胞物质和一些代谢产物②有机碳既是碳源又是能源。
氮源
无机氮源：NH4＋、NO3-、NH3等
有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
功能：主要用于合成蛋白质、核酸及含氮代谢产物等。
含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。
无机盐
功能：提供无机营养
调剂PH
维持渗透压
水
功能：良好的溶剂
维持生物大分子结构的稳定
一、微生物的基本培养技术
（一）培养基的配制：
4.培养基的营养成分：
（2）特殊需求：
满足微生物对 、 、 的需求。
特殊营养物质
pH
O2
01
04
03
02
实例
①培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加 ；
维生素
②培养霉菌时，需要将培养基调至 ；
酸性
③培养细菌时，需要将培养基调至 ；
中性或弱碱性
④培养厌氧微生物时，需要提供 的条件。
无氧
主要提供碳源的是牛肉膏，主要提供氮源的是蛋白胨。
　实战训练　
1.关于微生物的营养，下列说法正确的是
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
　实战训练　
2.微生物的培养需要配制培养基，以下叙述合理的是( )。
A.培养基中都含有碳源、氮源、水、无机盐
B.因成分不同，培养基可分为固体培养基和液体培养基
C.培养基中的氮源能提供氮元素，但不能作为能源物质
D.筛选自养型微生物时，培养基中不需要加碳源
　实战训练　
3. 下表记录了某培养基的配方，下列叙述错误的是( )。
成分
含量
成分 蒸馏水 青霉素
含量 定容至 0.1万单位
A.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B.该培养基不能用于培养大肠杆菌
C.根据培养基的配方可知，该培养基培养的是异养型微生物
D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
　实战训练　
4.下列有关培养基的叙述，错误的是
A.微生物的培养都需要提供水、碳源、氮源、无机盐，缺一不可
B.微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落
C.在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性
D.培养基既能培养细菌，也能培养真菌
问题4：获得纯净的微生物培养物的关键是什么？，防止杂菌污染的方法有哪些呢？
1.无菌操作的对象是什么？
2.获得纯净培养物的关键是什么？如何针对不同的作用对象选择合适的消毒/灭菌方法？
合作探究二：请同学们自主学习教材P10-11页，小组合作思考讨论完成问题。
一、微生物的基本培养技术
类型 适用范围 操作方法
消 毒
灭 菌
一、微生物的基本培养技术
（二）无菌技术：
1.无菌技术的对象：
（1）实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
（2）培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
培养皿
接种环
培养基
注意：实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。为了避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在超净工作台并在酒精灯火焰附近进行。
一、微生物的基本培养技术
（二）无菌技术：
3.无菌技术的类型：
2.无菌技术的关键：
获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min
100℃煮沸5-6 min
62-65℃下煮30 min或80-90℃处理30s-1min
（1）常用的消毒方法
用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒；氯气消毒水源等
煮沸消毒
巴氏消毒
化学药剂消毒
紫外线消毒
一、微生物的基本培养技术
（二）无菌技术：
3.无菌技术的类型：
高压蒸汽灭菌效果最好
常用于接种工具
常用于玻璃器皿和金属器具
湿热灭菌
灼烧灭菌
干热灭菌
（2）常用的灭菌方法
涂布器
类型适用范围操作方法消毒灭菌较为温和理化方法，杀死部分微生物。强烈的理化方法，杀死所有微生物。煮沸消毒家庭餐具等生活用品100℃煮沸5～6min巴氏消毒牛奶等不耐高温的液体62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min化学药剂生物活体（皮肤、伤口）、水源等擦拭等,如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源紫外线紫外线照射30min灼烧灭菌接种的金属工具、接种时用的试管口或瓶口等直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧干热灭菌耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金属用具等物品放入干热灭菌箱,160～170℃加热2～3h湿热灭菌培养基及多种器材和物品高压蒸汽灭菌锅内,100kPa,温度121 ℃,15～30min接种室、接种箱，超净工作台（迅速彻底）4.无菌技术的类型比较：一、微生物的基本培养技术 　实战训练　
5.请回答下列问题：
（1）实验器具用什么方法灭菌？
（2）培养基用什么方法灭菌？
（3）双手用什么方法消毒？
（4）接种环用什么方法灭菌？
（5）涂布器用什么方法灭菌？
（6）为保证无杂菌，实验操作都要在哪里进行？
（7）如何制备无菌水？
高压蒸汽灭菌法
灼烧灭菌法
浸泡在75%酒精中，使用前灼烧
超净工作台的酒精灯火焰旁
用三角瓶装水，高压蒸汽灭菌法灭菌
高压蒸汽灭菌法
75%酒精擦拭
培养基的类型
培养基的营养物质
常用的消毒方法
常用的灭菌方法
微生物的基本培养技术
培养基
无菌技术
煮沸消毒
巴氏消毒
化学药剂消毒
紫外线消毒
湿热灭菌
干热灭菌
灼烧灭菌
基本成分：碳源、氮源、水、无机盐
特殊需求：维生素（如乳酸杆菌）、碱基等
按物理性质划分
按组成成分划分
按功能划分
课堂小结
　实战训练　
6.下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ）
A．灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子
B．消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物
C．消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物
D．常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等
　实战训练　
7.生产、生活和科研实验中常用到无菌技术。下列相关叙述不正确的是( )。
A.腌制泡菜时，泡菜坛内缺氧、呈酸性的环境不利于杂菌生长
B.实验室中的玻璃涂布器、吸管、培养基等均可以用干热灭菌法处理
C.生活中用巴氏消毒法处理牛奶既可消毒，又基本不会破坏牛奶中的营养成分
D.湿热灭菌是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法
　实战训练　
8. 在微生物培养实验中，分别采用了高压蒸汽灭菌、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌？( )。
A.接种环、手、培养基
B.培养容器、手、微生物菌种
C.培养基、手、接种环
D.培养容器、微生物菌种、接种环
　实战训练　
9.下列有关无菌技术的说法，正确的是( )
A.无菌技术的关键是杀灭实验室中的所有的微生物
B.培养微生物的试剂和器具都要进行湿热灭菌
C.经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，不能在常温下长期
　保存
D.无菌技术中，若处理对象为液体，则只能消毒，不能灭菌
　实战训练　
10.培养基、培养皿、接种针、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是( )
①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线消毒　⑤湿热灭菌　⑥巴氏消毒法
A.⑤③②①④⑥ B.⑤③②⑥④①
C.⑤⑥②③④① D.③④②①⑥⑤
　实战训练　
11.养殖池中存在的有毒物质，主要是氨及亚硝酸，这两种物质可被硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离与计数”实验中，说法正确的是（ ）
A.需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌
B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行
C.可以采用平板划线法进行接种，还需与未接种的空白培养基同时培养
D.应将接种后的培养基放在光照培养箱中培养，原因是硝化细菌为生产者
　实战训练　
12．如图显示的是微生物实验过程中的一个操作，则在此操作中（ ）
A．酒精灯用于熔化培养基
B．培养基倒入培养皿后需再灭菌
C．培养皿和培养基均已灭菌
D．培养皿和三角烧瓶无需与酒精灯火焰有接触

展开更多......

收起↑