资源简介

学校：临清二中 学科：生物 编写人：黄丽平 审稿人：于振玲
专题二细胞工程——.动物细胞工程
2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体
课前预习学案
一、预习目标
预习动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程，了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。
“二、预习内容
㈠、动物细胞融合
1、概念：_______或_______动物细胞结合形一个细胞的过程，也称细胞杂交。
2、结果：形成___________。
3、过程：两个或多个细胞___________________________________。
4、意义：克服了___________的不亲和性，成为研究___________、___________、肿瘤和
_______________培育的重要手段。
㈡、单克隆抗体
1、抗体
⑴产生细胞：_________________。 ⑵成分：__________。
⑶特点：从__________中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
2、单克隆抗体的制备
(1)过程
( http: / / www.21cnjy.com )
⑵杂交瘤细胞的特点：____________________、____________________。
⑶单克隆抗体的优点：____________、____________、____________。
㈢、单克隆抗体的应用
1、作为诊断试剂，具有__________、__________、__________、__________的优点。
2、用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗_______、可制成___________。
三、提出疑惑
同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑，请把它填在下面的表格中
疑惑点 疑惑内容
课内探究学案
一、学习目标
1、 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
2、 简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。
3、 了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。
学习重难点：单克隆抗体的制备
二、学习过程
(一) 动物细胞的融合
探究一：动物细胞的融合
1、植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别（学生填下表）
植物体细胞杂交 动物细胞融合
细胞融合原理 细胞膜的流动性
融合过程 先使细胞分散开
诱导方法 电激、振动、离心、聚乙二醇
结果
应用 培育植物新品种
意义
相同点 原生质体融合原理相同；原生质体融合的方法相似
2植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区别是什么？
3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？
4、不灭活的病毒能作为诱导剂吗？

知识阅读：阅读课本P52中的小字，了解一下动物细胞融合技术的发展简史。
（二）单克隆抗体
探究二：单克隆抗体制备的原理
1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？抗体是从何来的？
2、B淋巴细胞有什么特点？
3、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？
4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？
5、小结以下内容：
◆ 利用____________________产生特异性抗体的功能。
◆ 利用____________________无限增殖的特性。
◆ 利用____________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。
◆ 利用____________________技术大量培养杂交瘤细胞。
探究三：单克隆抗体制备的过程
1、如何获得B淋巴细胞？
2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？
3、 选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？
4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？（教师讲解为主）
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那么上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
探究四：单克隆抗体的应用
1、单克隆抗体的应用有哪些？
2、生物导弹的组成及优点
（三）反思总结
(四)当堂检测
1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞 ( http: / / www.21cnjy.com )混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 ( )
A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb
2、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 ( )
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同
④都能形成杂种细胞
A.①② B.①③ C.②④ D.③④
3、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 ( )
A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产
4、“生物 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )导弹”是指 ( )
A、单克隆抗体 B、带有特定药物的单克隆抗体
C、杂交细胞 D、B淋巴细胞
课后练习与提高
1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较，在动物细胞融合中有特殊性的是 ( )
A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程
2、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为 ( )
A、抗体、T淋巴细胞
B、抗原、T淋巴细胞
C、抗体、B淋巴细胞
D、抗原、效应B淋巴细胞
3、单克隆抗体和血清抗体相比，其优越性在 于 ( )
A、单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B、单克隆抗体能够在体外制备
C、单克隆抗体比血清抗体的特异性强、免疫活性高
D、单克隆抗体制备过程简单
4、单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是 ( )
A．特异性强、灵敏度高 B．与抗癌药物结合可制成“生物 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )导弹”
C．体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体
D．由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
5、试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其生物 ( http: / / www.21cnjy.com" \o "欢迎登陆21世纪教育网 )学原理及技术的叙述正确的是 ( )
A．都属于无性生殖,能保持母本性状 B．都是细胞工程的技术范围
C．都充分体现了体细胞的全能性 D．都不会发生基因重组和变异
6、右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：
（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用____ __________
____________处理，除去了____________；由A、B到细胞C
的过程中，常用的物理方法是_____________________________。
融合完成的标志是_______________。
（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用__________
____________________技术把D培养成植株。
（3）若A、B是动物细胞，一般取自________________________________，
然后用____________________使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是_______________________，所形成的D称为_____________________ ，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有_____________________。
（4）若该过程是制备单克隆 ( http: / / www.21cnjy.com )抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了 。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_______________________
___________________，图中B为 。
（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A ( http: / / www.21cnjy.com )、B到C的过程中，所形成的C有_____种，用来培养的D细胞应该是_________________。从中选择出它的方法是_________________培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和______________。
动物细胞融合与单克隆抗体导学案答案
预习内容：
( http: / / www.21cnjy.com )探究二：单克隆抗体制备的原理
1、传统的抗体生产方法及缺陷是什么？抗体是从何来的？
传统的抗体生产方法是向动物体内反复 ( http: / / www.21cnjy.com )注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差。
2、B淋巴细胞有什么特点？
B淋巴细胞能产生抗体，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
3、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？
我们必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体
( http: / / www.21cnjy.com )第二步筛选的目的是获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。因为小鼠体内的B淋巴细胞有很多种，因此获得的杂交瘤细胞可能产生不同的抗体，需要从中筛选出能产生我们所需的单一抗体的杂交瘤细胞，筛选的方法是专一抗体检验。
4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？（教师讲解为主）
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔不超过一个细胞，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中 ( http: / / www.21cnjy.com )

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