资源简介

(共125张PPT)
转基因
DNA分子
重组DNA
核苷酸序列
磷酸二酯键
一种特定的脱氧核苷酸序列
黏性末端
拼接成新的DNA分子
磷酸二酯键
大肠杆菌
黏性末端
黏性末端和平末端
不是
两个DNA片段
脱氧核苷酸
DNA聚合酶
DNA连接酶
质粒
稳定存在
限制酶切割位点
模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)
性状
表达产物
DNA半保留复制
引物
耐高温的DNA聚
单链
耐高温的DNA聚合酶
指数
琼脂糖凝胶电泳
合酶
构建基因文库
启动子
标记基因
在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代
花粉管通道法
Ca2＋
如果目的基因序列中含有用到的限制酶的识别序列，限制酶
可能将它切断
农牧业
医药卫生
食品工业
结构规律
生物功能
改造
新的蛋白质
结构
氨基酸
脱氧核苷酸
从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，
推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)以上是蛋白质工程特
有的途径
物理和化学性质
NaCl溶液
二苯胺
95%
沸
水
DNA的热变性
相反
大小和构象
微量移液器
离心管
底部
PCR仪
300 nm
第39讲
基因工程
预变性
变性
94℃，1min
94℃，30s
延伸
后延伸
复性
72℃，30s
72℃，1min
58℃，30s
35次循环
EcoR I
Hind l
Xba 1 BamH I BamH I Sal I EcoR I
3
3
5'
转录
方向
S基因
BamH I EcoR I
Xba l
Hind
启动子
终止子
T-DNA
Sal I
复制原点
标记基因
Ti质粒
原理：
条件：、DNA模板，4种脱氧核苷酸
变性：90℃以上时，双链DNA受热变性解聚为
PCR过程
复性：50℃左右时，引物与单链相应互补序列结合
延伸：72℃左右时，在
的作用
下合成子链
循环
结果：每次循环后目的基因的量增加一倍，即成
形
式扩增（约为“2”？其中？n 为扩增循环的次数）
产物的鉴定：
当温度上升至90℃以上时，双链DNA解聚
为单链
变性
35
5
'
加热至90℃以上
3'TTTTTTTTTTT
5′
5-mn3
温度下降至50℃左右时，两种引物通过碱
复性
基互补配对与两条单链DNA结合
3T'5g
3
3
5
引物1
引物Ⅱ
当温度上升至72℃左右时，耐高温的DNA
聚合酶从引物开始进行互补链的合成（从
延伸
5'端向3′端延伸)
3
5'
3
5
3
3
引物工
引物Ⅱ

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