资源简介

(共28张PPT)
PCR-聚合酶链式反应
学科：高中生物
教材：新教材-2019人教版
选择性必修三
它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行迅速并大量复制的技术。
聚合酶链式反应（缩写为PCR）
类似细胞内的DNA复制
教材
1
真题
2021全国甲卷
2022全国乙卷
2
PCR原理
PCR反应过程
课堂小练
目录
CONTENTS
一
二
三
四
PCR应用
一、PCR原理
问答环节
一、PCR原理
问答环节
你还记得DNA分子的复制方式吗？
01
你能复述细胞内DNA分子的复制过程吗？
02
我们想要在体外模拟DNA的复制环境，需要提供哪些条件呢？
03
可按下空格键暂停1min
体内DNA复制
解旋酶
DNA聚合酶
模板：
原料：
能量：
酶：
条件
DNA的两条母链
4种游离的脱氧核苷酸
解旋酶、DNA聚合酶
解旋
合成子链
形成新DNA
ATP
复制特点：
①边解旋边复制 ②半保留复制
[阅读教材]根据体内DNA复制所需的基本条件及基本过程，阅读P77最后一自然段以及P78-79的图3-5和有关文字，总结PCR技术所需的条件和基本过程。
可按下空格键暂停5min
一、PCR原理
一、PCR原理
一、PCR原理
90℃以上
加热变性
缓慢冷却复性
DNA的热变性原理
一、PCR原理
不使用解旋酶
通过控制温度来控制双链的解聚与结合，PCR仪实质上也是一台能够自动调控温度的仪器
解旋酶
耐高温的DNA聚合酶
请阅读选择性必修三课本86页内容，在耐高温的DNA聚合酶发现历程中，有我们国家科学家的一枚勋章
DNA聚合酶
一、PCR原理
一、PCR原理
引物
引物
引物是一小段能与 的一段碱基序列__________的____________。
DNA母链
互补配对
短单链核酸
（通常20-30个核苷酸）
一、PCR原理
由于DNA双链是反向平行的，所以需要2种引物。
PCR技术所需条件
耐高温的DNA聚合酶
DNA模板
引物
缓冲溶液
四种脱氧核苷酸
（2种）
激活真核细胞和细菌的DNA聚合酶
（一般添加Mg2+）
一、PCR原理
微量离心管
特异性
双链DNA
4种脱氧核苷酸
耐高温的DNA聚合酶
一定的缓冲溶液
温控设备
模板
和
原料
两种引物
酶
其他条件
二、PCR的反应过程
变性
复性
延伸
变性
复性
延伸
超过90℃
50℃左右
72℃左右
DNA解旋为单链
单链DNA与引物结合
DNA聚合酶合成新的DNA子链
引物Ⅰ
引物Ⅱ
二、PCR的反应过程
变性
复性
延伸
循环2次
循环3次
循环n次
循环1次
模板DNA
2n
特定DNA片段呈指数式扩增
二、PCR的反应过程
三、课堂小练
1、用于PCR的引物长度通常为20-30个核苷酸，是一小段( )
A.单链DNA
B.RNA
C.DNA或RNA
D.双链DNA
可按下空格键暂停30s
三、课堂小练
1、用于PCR的引物长度通常为20-30个核苷酸，是一小段( )
A.单链DNA
B.RNA
C.DNA或RNA
D.双链DNA
三、课堂小练
2、标准的PCR过程一般分为变性、复性和延伸，这三个步骤所需温度依次为( )
A.90℃以上、50℃左右、72℃左右
B.72℃以上、50℃左右、90℃左右
C.50℃以上、90℃左右、72℃左右
D.80℃以上、50℃左右、72℃左右
可按下空格键暂停30s
三、课堂小练
2、标准的PCR过程一般分为变性、复性和延伸，这三个步骤所需温度依次为( )
A.90℃以上、50℃左右、72℃左右
B.72℃以上、50℃左右、90℃左右
C.50℃以上、90℃左右、72℃左右
D.80℃以上、50℃左右、72℃左右
三、课堂小练
3、假设PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有多少这样的DNA片段( )
A.215
B.230
C.260
D.231
可按下空格键暂停30s
三、课堂小练
3、假设PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，请计算在30次循环后，反应物中大约有多少这样的DNA片段( )
A.215
B.230
C.260
D.231
四、PCR应用(核酸检测思路)
感谢您的耐心聆听
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