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(共32张PPT)
第2节
第1章　种群及其动态
第2课时
选择性必2 生物与环境
培养液中酵母菌种群数量的变化
2
1
学会利用血细胞计数板对酵母菌计数
探究培养液中酵母菌种群数量的变化
①兼性厌氧型生物（单细胞真核生物）；
②生长周期短，繁殖速度快，易于研究种群数量的变化
酵母菌在生产生活中应用广泛，如酿酒、做馒头等，具有哪些优点，哪种呼吸类型呢？
1
实验原理
酵母菌是兼性厌氧型生物、单细胞真核生物；
酵母菌生长周期短，增殖速度快；
可用含糖的液体培养基(培养液) 培养；
采用抽样检测法，利用血细胞计数板可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化；
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
2
提出问题:
(2)怎样对酵母菌进行计数？
①方法：　　　　　法。
②用具：　　　　　　　　　　　　　、显微镜等。
③步骤：先将　　　　　　　　　　　　　　　　→_________________
→　　　　　　　　→让培养液自行渗入→用滤纸吸去多余的培养液→酵母菌全部沉降到计数室底部→显微镜计数一个小方格内的酵母菌数量→估算试管中酵母菌的总数。
抽样检测
试管、滴管、血细胞计数板
盖玻片放在血细胞计数板的计数室上
用吸管吸取培养液
滴于盖玻片边缘
资料1. 血细胞计数板是一块比普通载玻片厚的特制玻片。它由四条下凹的槽构成三个平台。
任务一：如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
血细胞计数板的构造
计数板正面
方格网
计数室
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数区。每个计数区分为9个大方格。
1. 计数室的长和宽各为 1 mm，深度为 0.1 mm，容积为 _______mm3。
0.1
3
作出假设
①培养液中的酵母菌数量一开始呈“J”形增长；
②随着时间推移，由于营养物质的消耗、有害代谢产物的积累、
pH的改变，酵母菌数量呈“S”形增长。
4
实验设计
(1)变量分析：自变量为　　 ；因变量为　　　　　 ；无关变量为____
　　　　　　等。
时间
酵母菌数量
培
养液的体积
不管计数室是哪一种构造，其每一大方格都是16×25=25×16=400个小方格组成
16×25型： 即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格
25×16型： 即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格
计数室
资料1. 血细胞计数板它由四条下凹的槽构成三个平台。中间的平台较宽，它的中间被一个短横槽隔为两半，每个半边上刻有一个方格网(如图A)。每个方格网上有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供计数用。
规格一：25×16型
A1
A2
A3
A4
A5
规格二：16×25型
A1
A3
A2
A4
每个计数室共有400小格，总容积为0.1mm3。
实验设计
（4）计数方法
例：若使用的血细胞计数板(规格为1 mm×1 mm×0.1 mm)每个计数室分为25个中方格，每个中方格又分为16个小方格，将样液稀释100倍后计数，发现计数室四个角及中央共5个中方格内的酵母菌总数为20个，则培养液中酵母菌的密度为_______________________________________。
20÷80×400×100×10 000＝1×108个/mL
公式=
　实战训练　
3.用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格，由400个小方格组成。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。
2×108
解析 ：根据公式：5×400×10000×10＝2×108
2. 盖盖玻片和滴加培养液哪个步骤在前？
先盖盖玻片，再滴加培养液于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，用滤纸吸去多余的培养液。
如果先加培养液再盖盖玻片，那么盖玻片可能由于已加入液滴的表面张力而不能严密地盖到计数板表面，使计数室内部液体增多，导致计数结果偏高。
先盖盖玻片再滴加培养液，还能避免因直接滴加培养液时，在计数室内产生气泡，导致计数室相对体积减小而造成误差。
3.从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管轻轻振荡几次。这是为什么？
使培养液中的酵母菌分布均匀，以减少误差。
4.滴加培养液后要稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数。请分析原因。
如果酵母菌未能全部沉降到计数室底部，通过显微镜观察时，就可能出现以下现象：要么能看清酵母菌但看不清格线，要么能看清格线但看不清酵母菌。
5. 如果一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清，应当采取什么措施？
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
当小方格中的酵母菌过多时，可以增大稀释倍数然后再计数，即计数前应摇匀→取样→稀释→计数。
6.计数的酵母菌都是活的吗？怎样分辨是否为活菌？
不都是，计数的酵母菌包括活菌和死菌。
可以用台盼蓝染液对菌体进行染色，被染成蓝色的是死菌，没有染色的是活菌。
7.对于压在计数方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？
对于压在计数方格界线上的酵母菌，应只计数相邻两边及其夹角(一般是左上边界及其夹角)的酵母菌。



任务二：实验设计及结果分析
1.探究本实验需要设置对照实验吗？需要做重复实验吗？
酵母菌在不同时间内的数量可以相互对照，不需另设对照实验。需要做分组重复实验获取平均值，以保证计数的准确性(对每个样品可计数三次，再取平均值)。
实验结果
结果用记录表记录，如下：单位（109 个/ mL）
时间/天 1 2 3 4 5 6 7
数量/个
0.12
0.89
3.47
5.23
6.13
6.79
7.02
实验分析
据实验结果绘制的曲线图接近哪种增长模型。
随培养时间继续延长，培养液的环境容纳量会持续下降，酵母菌种群数量将下降。
根据实验结果绘制出坐标曲线图
3.根据实验结果绘制的曲线图如图所示，请分析回答下列问题：
(1)增长曲线的总趋势是　　　　　　　，原因是在开始时培养液的　　　　　、空间充裕、条件适宜，因此酵母菌大量繁殖，种群数量剧增，随着酵母菌数量的不断
先增加再降低
营养充足
增多，营养消耗、pH变化、　　　　　积累等，使生存条件恶化，酵母菌死亡率高于出生率，种群数量下降。
有害产物
(2)根据酵母菌数量的变化曲线，作出对应增长速率的曲线图。
4.进一步探究：其他因素对酵母菌种群数量的影响。
资料2　实验设计如表所示：
试管编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度(℃)
1 10 － 0.1 28
2 10 － 0.1 5
3 － 10 0.1 28
每天同一时间，各组取出试管，用血细胞计数板分别计数酵母菌个数并记录，连续观察7天种群的密度变化如曲线图所示：
(1)本实验的自变量是　　　　　　　　。
(2)A曲线对应的培养条件是什么？
10 mL培养液中28 ℃下培养(试管1)。
温度、营养物质
(3)由实验结果可以得出结论：____________________________________
。
温度和营养物质均会对酵母菌种群数量产
生影响，温度较低时种群增长缓慢，营养缺乏时种群几乎不增长
1.在进行酵母菌计数时，先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上，然后用吸管吸取摇匀的培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余的培养液用滤纸吸去。稍待片刻，将计数板放在显微镜的载物台中央进行观察。下列相关叙述错误的是（ ）
A.稍等片刻再观察，是为了使酵母菌全部沉降到计数室底部便于观察计数
B.对培养液中的酵母菌逐个计数非常困难，可用抽样检测的方法进行估算
C.计数时，计数方格内酵母菌过多难以计数，可将培养液适当稀释后再
　计数
D.实验中没有对酵母菌细胞进行染色，会导致活菌计数值小于活菌实际值
√
2.(2023·河北秦皇岛高二期中)血细胞计数板是对细胞进行计数的重要工具，下列叙述正确的是
A.每块血细胞计数板的正中央有1个计数室
B.计数室的容积为1 mm×1 mm×0.1 mm
C.盖盖玻片之前，应用吸管直接向计数室滴加培养液
D.计数时，不应统计压在小方格角上的细胞
对点训练
√
3.酵母菌是探究种群数量变化的理想材料，血细胞计数板是酵母菌计数的常用工具。如图表示一个计数室(1 mm×1 mm×0.1 mm)及显微镜下一个中方格菌体分布情况(培养液未稀释)。下列有关叙述错误的是
A.培养液中酵母菌主要进行有氧呼吸
　和出芽生殖
B.每天定时取样前要摇匀培养液
C.每次选取计数室四个角和中央的五个中方格计数，目的是重复实验以
　减小误差
D.若五个中方格酵母菌平均数如图乙所示，则估算1 mL培养液中酵母菌
　数共有6×106个
√
4.在放有5 mL培养液的培养瓶中放入少量酵母菌菌种，然后每隔一天统计一次酵母菌的数量。经过反复实验，得出如图所示的结果。下列有关这一结果的分析，不正确的是
A.酵母菌增长呈现出“S”形的原因可能与营养液浓度
　有关
B.酵母菌种群数量达到200时，种内竞争达到最大
C.在第4天至第6天中，种群的出生率与死亡率相当
D.该培养瓶内酵母菌种群的环境容纳量约为400
√
5.用4种不同方式培养酵母菌，其他培养条件相同，酵母菌种群数量增长曲线分别为a、b、c、d，如图所示。
请回答下列问题：
(1)对酵母菌进行计数时，下列哪些操作会使计数结果偏小？________(填序号，多选)。
①从静置的培养液上部取样
②使用未干燥的血细胞计数板
③计数前未对酵母菌进行台盼蓝染色
④仅对计数室内的酵母菌进行计数
①②④
(2)曲线a的增长呈“____”形，其
种群数量增长最快的主要原因是
______________。曲线d为对照组，
对照组的培养方式是____________。
(3)酵母菌种群经过一定时间的增长
后，数量趋于稳定，此时的种群数量称为___________________。限制种群数量不再增长的环境因素有_____________________________________
______(答出2点)。
J
营养物质充足
不更换培养液
环境容纳量(或K值)
营养物质不足、空间有限、有害物质积累
增加

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