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专题15 现代生物科技专题
书本黑体字速记
1、基因工程至少需要的三种工具，即准确切割DNA的“手术刀”——限制酶、将DNA片段再连接起来的“缝合针”——DNA连接酶、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“运输工具”——运载体。限制酶切割DNA分子后产生黏性末端、平末端。
2、获取目的基因（主要是编码蛋白质的结构基因）是实施基因工程的第一步。获取目的基因方法有直接获取、从基因文库中获取、人工合成、逆转录获取等
3、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。
4、将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。（植物：农杆菌转化法导入双子叶植物和裸子植物、基因枪法、花粉管通道法；动物：显微注射法；微生物细胞：Ca2+处理成感受态细胞、再完成转化）
5、目的基因的检测与鉴定 这是基因工程的第四步工作。检测目的基因是否导入采用DNA分子杂交法、检测是否转录采用分子杂交技术、检测翻译是否采用抗原-抗体杂交。
6、基因工程的应用：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、其他抗逆转基因植物、利用转基因改良植物的品质、用于提高动物生长速度、用于改善畜产品的品质、用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供体（优点：不发生免疫排斥）。
7、基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，基因工程中DNA分子能正确拼接的结构基础是DNA分子具有规则的双螺旋结构。
基因治疗的实质是利用基因工程获得正常细胞、再回输给病人，原理是基因重组。
8、具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能，也就是说，每个生物细胞都具有全能性的特点。
9、植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞（外植体），培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件（水、无机盐、生长素、细胞分裂素、糖类等），诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
10、植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导方法：物理法（离心、振动、电激），化学法（用聚乙二醇(PEG)处理）。细胞之间若有密度差，则在失重的条件下更好。
11、植物细胞工程的实际应用：植物繁殖的新途径——微型繁殖、作物脱毒、人工种子；作物新品种的培育——单倍体育种、突变体的利用；细胞产物的工厂化生产。
12、动物细胞培养（初次培养-原代培养；转移后的培养-传代培养）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散(用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理)成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境，营养充足（常加入血清、血浆等），适宜的温度和pH，气体环境（主要有O2和CO2）
13、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核（越幼嫩细胞的核越好），移入一个已经去核的卵母细胞（减II中期）中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。
14、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。诱导方法：物理法、化学法及灭活病毒法。应用：利用杂交瘤细胞（既能分泌抗体，又能无限增殖）生产单克隆抗体（第一次筛选得到杂交瘤细胞；第二次筛选得到分泌专一抗体的杂交瘤细胞）。单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高、能大量制备。单克隆抗体另外一种生产方法：基因工程。
15、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。精子（动物体形的大小不影响精子的大小）形成时变形特点：高尔基体→顶体；线粒体→线粒体鞘；中心体→尾；细胞质→原生质滴 。卵子受精的重要标志：在卵黄膜和透明带的间隙出现两个极体。
阻止多个精子入卵的屏障：透明带反应、卵黄膜封闭作用。胚胎发育过程：受精卵→桑椹胚（细胞没分化，之后出现分化）→囊胚→原肠胚
16、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或、8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。要均等分割内细胞团。应用：迅速繁殖大量个体
胚胎的来源：体外受精、冲卵
17、生态经济主要是通过实行“循环经济”的原则，使一个系统产出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的生产原料，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要的手段之一就是生态工程。
生态工程的原理：物质循环再生原理（实质无废物）、物种多样性原理（多种生物）、协调与平衡原理（引入合适的生物、不要超出K值）、整体性原理（社会-经济-自然）、系统学和工程学原理（优化组分之间的结构、组分之间的比例）
在肯定生态工程的作用，特别是对恢复和重建受损一态环境的重要作用的同时，不要忘记大自然固有的强大的生态恢复力量；更不能误认为只要有了生态工程，就可以走发达国家“先污染、破坏后治理”的老路。
必背基础知识点
1.基因工程又叫DNA重组技术，其实质是基因重组，三种基本工具包括限制酶、DNA连接酶和载体。
2.DNA连接酶分为E·coliDNA连接酶（来源大肠杆菌连接黏性末端）和T4DNA连接酶（来源T4噬菌体连接黏性末端和平末端）。
③DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.载体具备的条件①能自我复制②具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入③具有标记基因。
载体的种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒；
4.最常用的载体是 质粒,它是双链环状DNA分子。
5.基因工程操作程序四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建（核心）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
6.原核基因一般采取直接分离获得，真核基因一般是人工合成。常用的获取目的基因的三种方法：从基因文库中获取、利用PCR技术扩增、用化学方法人工合成。
7.基因文库分为基因组文库和部分基因文库（如cDNA文库）。
8.PCR（多聚酶链式反应）①原理：DNA双链复制
②过程：第一步变性：加热，DNA解旋；第二步复性：冷却，引物结合到互补DNA链；第三步延伸：加热，热稳定DNA聚合酶（Taq酶）从引物起始互补链的合成。③前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物。
冷却的目的：使引物结合的互补DNA链上。
9.基因表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 基因表达载体构建目的：使目的基因①稳定存在并可遗传②能够表达和发挥作用。
10.标记基因的作用：为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
11.将目的基因导入植物细胞常采用农杆菌转化法，是将目的基因插入Ti质粒中的T-DNA中，利用了T-DNA可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点;导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。
12.分子水平检测是否插入了目的基因的方法是DNA分子杂交技术；是否转录出mRNA的方法是分子杂交技术；是否翻译成蛋白质的方法是抗原－抗体杂交，原理是抗原抗体特异性结合，均可通过是否有杂交带出现来判断。个体生物学水平的鉴定的方法举例：抗虫的接种实验。
DNA分子杂交技术和分子杂交技术均用放射性同位素标记的目的基因作为探针。
13.提高动物生长速度用外源生长激素基因；降低乳汁中乳糖含量用肠乳糖酶基因。
14.用转基因动物生产药物：将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射方法，导入哺乳动物的受精卵中，将受精卵送入母体内使其发育成转基因动物（必须是雌性动物），后者可以通过泌乳生产药物，称为乳腺生物反应器。
15.基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，是基因替代不是基因修复，原理是基因重组，分为体外基因治疗和体内基因治疗，目前都处于初期的临床试验阶段。
16.基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。
17.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足需求。
18.蛋白质工程的流程：从预期的蛋白质功能出发 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相对应的脱氧核苷酸序列
19.用蛋白质工程制成的电子元件具有体积小、耗电少和效率高的特点；蛋白质工程难度很大是因为对大多数蛋白质的高级（空间）结构了解不够。
20.植物组织培养技术
①理论基础（原理）：植物细胞的全能性
②过程：离体的植物器官、组织或细胞（外植体）→愈伤组织（具分生能力的薄壁细胞）→胚状体或丛芽 →植物体
21.人工种子是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。
22.单倍体育种是通过花药离体培养获得单倍体植物，再经秋水仙素或低温处理使染色体加倍；优点是①后代能稳定遗传②极大缩短育种年限。
23.制作人工种子培养到胚状体阶段；突变体的利用和细胞产物的工厂化生产培养到愈伤组织阶段。
24.植物体细胞杂交技术
①原理：细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
②去细胞壁用纤维素酶和果胶酶
③人工诱导原生质体融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂诱导细胞融合。
④流程：先进行植物细胞融合再进行植物组织培养
⑤原生质体成功融合的标志是再生出细胞壁
⑥意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
25.动物细胞培养（1）原理：细胞增殖
（2）流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，原因分化程度低，增殖能力强）→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
（3）悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁，要求培养瓶表面光滑、无毒，易于贴附。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，称为细胞的接触抑制，此时细胞的层数为一层。
（4）目前使用的细胞在10代以内的原因：保持细胞正常的二倍体核型（或10代以内细胞遗传物质没有发生改变）。
（5）条件①无菌、无毒的环境：培养液进行无菌处理，添加一定量抗生素，以防杂菌污染。应定期更换培养液，防止代谢产物积累对自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。需加入血清、血浆等天然成分。③温度：36.5℃＋0.5℃；pH：7.2～7.4。④气体环境：95%空气＋5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2维持培养液的pH。
26.动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1）原理：动物细胞核的全能性；细胞增殖。
（2）分类：胚胎细胞核移植和体细胞核移植（比较难）。
（3）用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。
（4）过程：取供体细胞进行细胞培养；同时采集卵母细胞，在体外培养到减Ⅱ中期，去核（方法：显微操作）[注：用卵母细胞原因：①营养物质丰富；②体积大，易操作；③含有激发细胞核全能性的物质]；将供体细胞注入去核卵母细胞；通过电刺激使两细胞融合，供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎；将胚胎移入受体母体内；生出与供体遗传物质基本相同的幼体。
27.动物细胞融合
（1）原理：细胞膜的流动性
（2）诱导动物细胞融合的方法：聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电激等。
（3）意义：克服了远缘杂交的不亲和的障碍
（4）最重要应用：制备单克隆抗体
28.单克隆抗体
（1）一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。
（2）杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体。
（3）细胞融合时出现多种类型的原因：细胞融合是随机的，且融合率达不到100％。
（4）单克隆抗体的优点（特点）：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。
（5）制备过程：对注射特定的抗原蛋白免疫小鼠；提取B淋巴细胞；同时用动物细胞培养的方法培养骨髓瘤细胞并提取；促使它们细胞融合；在特定的选择性培养基上筛选出融合的杂交瘤细胞；然后对它进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能够分泌所需抗体的杂交瘤细胞；从细胞培养液或小鼠腹水中可得到大量的单克隆抗体。
29.精子的变形：其中细胞核变成精子头的主要部分，高尔基体发育为顶体，中心体演变为尾，线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘，细胞内其他物质浓缩为原生质滴。
30.精卵相遇首先发生顶体反应，释放顶体酶；透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障，第二道屏障是卵细胞膜反应。
31.早期胚胎发育过程：发育起点是①受精卵，经②卵裂形成③桑椹胚（细胞数目32个左右，细胞团致密，是全能细胞，是胚胎分割的最佳时期），进一步发育形成④囊胚（细胞开始分化，该时期细胞的全能性仍很高，也可用于胚胎分割。个体较大的细胞称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘）再进一步发育成⑤原肠胚。
32.体外受精技术
（1）卵母细胞的采集和培养：方法一：注射促性腺激素使其超数排卵，从输卵管中冲取卵子（即冲卵），可直接受精。方法二：从屠宰母畜或活体的卵巢中采集卵母细胞，要在体外培养成熟后，才能受精。
（2）精子的采集和获能：①收集精子的方法：假阴道法、手握法和电刺激法。②在体外受精前，要对精子进行获能处理。常用获能方法有培养法（放入获能液中）和化学诱导法（放在肝素或钙离子载体A23187溶液中）
（3）受精：获能的精子和培养成熟（即到减Ⅱ中期）的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
33.胚胎的早期培养技术
当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。胚胎移植一般要到桑椹胚或囊胚阶段。
34.胚胎移植技术
（1）移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内
（2）提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体称为“受体”。
（3）意义：充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
（4）生理学基础及意义：①发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。为胚胎的收集提供了可能。③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。为胚胎在受体的存活提供了可能。④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但遗传特性不受影响。
（5）用促性腺激素进行同期发情处理和对供体母牛做超数排卵处理。检查的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段。胚胎进行移植方法有手术法和非手术法。
35.胚胎分割技术
（1）属于无性繁殖。
（2）材料：桑椹胚或囊胚。
（3）分割时，要将内细胞团均等分割，用分割针取样滋养层做DNA分析性别鉴定。
36.胚胎干细胞
（1）是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，又叫ES或EK细胞。
（2）功能上具有发育的全能性；
（3）体外培养下，ES细胞可以只增殖不分化；
（4）可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
（5）加入分化诱导因子，如牛磺酸，可以诱导ES细胞向不同类型组织细胞分化。
37.生态经济实行“循环经济”的原则，实现废弃物的资源化，最重要手段之一是生态工程。
38.生态工程的目的是达到经济效益和生态效益的同步发展，是一类少消耗、多效益、可持续的工程体系。
39.生态工程的基本原理：物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统的结构决定功能原理、系统整体性原理。
易错易混考点
一、基因工程
1．PCR技术中所用的酶是耐高温(热稳定性强)的DNA聚合酶。
2．真核生物的糖蛋白基因导入原核生物一般不能成功表达的原因是原核细胞无内质网。
3．基因工程中农杆菌转化法过程中，双子叶植物可分泌酚类化合物来吸引农杆菌。
4．创造全新蛋白质的生物工程叫做蛋白质工程，该工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础的。
5．为了检测转基因幼苗是否具有抗除草剂特性，可采用的方法是对幼苗喷施除草剂，与不喷的对照组进行对照观察其生长情况。
6．限制酶的主要生物来源是原核生物。
7．基因工程的核心步骤是构建基因表达载体。
8．能连接平末端又能连接黏性末端的是T4DNA连接酶。
9．天然质粒一般都要经过人工改造才能用作载体。
10．PCR扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。
11．钙离子处理受体细菌，使其成为感受态细胞后，将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进其转化，吸收DNA分子。
12．培育体型巨大或生长速度加快的动物，一般是导入了其他动物的生长激素基因。
13．动物乳腺生物反应器中，与目的基因重组的是乳腺蛋白基因的启动子。
14．检测目的基因时，DNA分子杂交技术用放射性标记目的基因做探针。
15．从转基因山羊乳汁中获取药物，该山羊是基因工程培育的乳腺生物反应器。
16．获取目的基因时，若基因较小，核苷酸序列已知，则可通过人工化学合成获取。
17．构建基因表达载体时，一般先用同一种限制酶处理目的基因和载体。
18．构建的基因表达载体中，启动子的化学本质是DNA片段(或脱氧核苷酸序列)。
19．蛋白质工程中直接操作的对象是基因，所获得的是自然界中不存在的全新蛋白质。
20．蛋白质工程在设计蛋白质结构时的依据是蛋白质的功能。
二、细胞工程
21．制备植物细胞原生质体，用纤维素酶和果胶酶；将动物组织制成细胞悬液，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶。
22．诱导植物原生质体融合时常加入的物质是PEG(聚乙二醇)。
23．植物组织培养过程中需要光照的阶段是再分化。
24．动物细胞培养的原理是细胞增殖。
25．动物细胞工程技术的基础是动物细胞培养。
26．动物细胞培养中，原代培养与传代培养的分界线是第一次分装前后。
27．动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，后者所用的细胞分化程度高，所以恢复其全能性难度更大。
28．单克隆抗体制备中，获取B淋巴细胞前，必须对小鼠注射特定的抗原蛋白。
29．每一个B淋巴细胞(浆细胞)只分泌一种特异性抗体，但在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不能无限增殖的。设法将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合后，要用特定的选择性培养基进行筛选，该培养基上，未融合的亲本细胞和相同细胞融合的细胞都会死亡，只有杂种细胞才能生长，杂种细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生专一性抗体。
30．在单克隆抗体制备过程中，有两次筛选：第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择培养基)；第二次是进一步筛选出能产生人们所需抗体的杂交瘤细胞(用抗原—抗体结合法)。
31．植物单倍体育种中用到的细胞工程技术是花药离体培养。
32．制作人工种子时，包埋的一般是胚状体，而诱导基因突变常选择植物组织培养过程中的愈伤组织作材料。
33．针对某白血病患者，可将其正常体细胞的核吸出，注入到另一女性的去核卵母细胞中去，构建的重组细胞可培养出骨髓细胞，再移植到患者的体内，最后其血型不变(血型由供核细胞决定，与供质的卵细胞无关)。
34．动物个体克隆一般是对体细胞核进行核移植，克隆的成功表明体细胞核具有全能性。
35．克隆有多个层次，DNA复制属于分子克隆，细胞有丝分裂属于细胞克隆，动物核移植后产生新个体属于个体克隆。
36．核移植过程中，受体提供的细胞应是次级卵母细胞。
三、胚胎工程
37．胚胎发育的卵裂期，细胞数目不断增加，胚胎总体积并不增加，细胞的相对表面积增大，细胞核质量与细胞质质量比增大。
38．ES细胞将会给人类的移植医学带来一场革命，原因是ES细胞可以诱导分化出新的细胞、组织和器官。
39．体外受精时，卵母细胞一般要培养到减数第二次分裂中期才能受精。
40．精子变形过程中，细胞核变为精子头的主要部分，高尔基体发育为头部的顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体聚集在尾的基部形成线粒体鞘，细胞内的其他物质浓缩为原生质滴，原生质滴逐渐脱落，使精子变轻，运动敏捷。精子长度与动物体型大小无关。
41．哺乳动物初级卵母细胞形成的发育时期是胎儿期；初级精母细胞形成于初情期以后。
42．透明带反应发生于精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜反应发生于精子入卵后。
43．当胚胎细胞数目达到32个左右时，叫做桑椹胚，这时每一个细胞都属于全能细胞。
44．细胞开始出现分化的胚胎发育时期是囊胚期。滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘。
45．胚胎工程中，胚胎能收集成功的生理学基础是早期胚胎形成后一段时间内未与母体子宫建立组织上的联系，处于游离状态。
46．胚胎移植后，要对受体母牛进行妊娠检查。
47．胚胎分割一般选择胚胎处于发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚期。
48．从卵巢中冲卵，卵子必定未成熟；从输卵管中冲卵，卵子一般成熟；从子宫中冲卵，得到的是早期胚胎。
49．精子获能的方法有培养法和化学诱导法。
50．对于某些动物，可采用促性腺激素处理供体母畜，使其超数排卵。此处理方法用促性腺激素而不直接用性激素的原因是性激素过多时会引起负反馈调节抑制下丘脑和垂体分泌相关激素，最终引起性腺功能退化，而促性腺激素无此副作用。
51．胚胎移植前，首先要对供、受体进行选择，并用激素对供、受体进行同期发情处理。
52．ES细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，可诱导ES细胞向不同类型的细胞分化。
53．胚胎移植时，选择供体公母牛的要求是优良品种的同种牛；选择受体牛的要求是同一物种。
54．ES细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性。
55．对囊胚阶段的胚胎进行分割时，最关键的是将内细胞团均等分割，产生的同卵双胎或多胎具有相同的遗传物质(基因型)，做DNA性别鉴定一般取自囊胚期的滋养层细胞。
56．受精作用最终完成的标志是雌雄原核融合的完成。
57．进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。
58．哺乳动物防止多精入卵的机制有透明带反应和卵细胞膜反应。
四、生物技术安全
59．为防止转基因植物通过花粉传播造成基因污染，可将目的基因导入植物细胞的叶绿体或线粒体(结构)中。
五、生态工程
60．猪沼茶生态农业所依据的生态学原理是物质循环再生与能量多级利用。
关于生态工程原理：无废弃物农业，废物资源化，主要体现了物质循环再生原理；天然林比人工林更能抵抗虫害，这主要体现了物种多样性原理；引种时，最好引入当地原有物种更能适应环境，引种数量不能超过环境容纳量，这主要体现了协调与平衡原理；将社会、自然、经济相结合，退耕还林还草的同时，对失地农民进行经济上的补偿，这主要体现了整体性原理；生物之间互利共生，相互依存，这主要体现了系统整体性原理。

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