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第45讲 微生物的培养技术及应用
例1.从自然界分离到的微生物在其发生突变前的原始菌株，称为野生型菌株，而营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种特殊营养物质的能力，只能在完全培养基或补充了相应特殊营养物质的基本培养基中正常生长的变异菌株。精氨酸营养缺陷型谷氨酸棒状杄菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。现通过对野生型谷氨酸棒状杆菌的诱变和筛选过程获得鸟氨酸发酵优良菌种，如图为选育过程，③是向培养基中添加了某种物质后继续培养。回答下列问题：
（1）图中三个培养皿的培养基中都必须包括__________________________等营养要素，图中紫外线的作用是 ，①过程中将野生型菌液接种到了液体培养基中，这种培养基与甲、乙中的培养基最大的差异是
。
（2）从营养组成的角度分析，甲中的培养基类型是_____________（填“基本培养基”或“完全培养基”），③添加的物质为___________。A、B菌落中___________菌落可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。
（3）谷氨酸棒状杆菌是好氧型细菌，在用筛选出的细菌获得鸟氨酸时，要注意进行搅拌，其目的是: 。
碳源、氮源、水、无机盐
诱发基因突变
无琼脂（或凝固剂）
可以增加溶解氧，使菌体与培养液充分接触
基本培养基
精氨酸
B
1.培养基
一.微生物的基本培养技术
(1)概念:人们按照微生物对　 　 的不同需求,配制出的供其　 的营养基质。
(2)培养基的种类、特点及用途分析
用以　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
①按物理状态分类
培养基种类 特点 用途
　 　 培养基 不加凝固剂 工业生产
半固体培养基 观察微生物的运动、分类鉴定
　 　 培养基 加凝固剂(如琼脂) ,菌种保藏
营养物质
生长繁殖　
液体
加凝固剂(如琼脂)
固体
微生物分离、鉴定,活菌计数
培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物
②按化学成分分类
培养基种类 特点 用途
天然培养基 含　 的天然物质 工业生产
合成培养基 　 (用化学成分已知的化学物质配成) 微生物的分类、鉴定
③按功能分类
种类 制备方法 原理 用途 举例
选择培 养基 培养基中加入某些化学物质 依据微生物对某些物质的特殊需求或抗性 . 加入　 　分离得到酵母菌和霉菌　
鉴别培 养基 培养基中加入某种 . 产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用 培养基鉴别大肠杆菌
化学成分不明确　
培养基成分明确　
从众多微生物中分离所需的微生物
青霉素
青霉素
伊红—美蓝　
(3)成分
成分 含义 作用 来源
碳源 _________ 构成生物体的细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机碳源：糖类、牛肉膏、石油等
氮源 _________ _______________ 无机氮源：N2、NH3、铵盐、硝酸盐等；有机氮源：牛肉膏、蛋白胨等
合成蛋白质、核酸等物质
提供碳元素的物质
提供氮元素的物质
(3)成分
成分 含义 作用 来源
无机盐 为微生物提供除碳、氮之外的各种重要元素，包括大量元素和微量元素 ______________ 无机化合物：KH2PO4、K2HPO4、NaCl等
水 生物体含量最高的无机化合物 _________________ 培养基、代谢产物
为微生物提供无机营养，细胞组成成分、调节培养基的pH、酶的激活剂等
良好的溶剂，参与化学反应、维持大分子结构稳定等
(3)成分
除了上述主要营养物质外，还需要满足微生物生长对_________________　　　　 的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加_____ ；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至　　 ；在培养细菌时，一般需要将培养基调至　　　　　　；在培养厌氧微生物时，需要提供_____的条件。
pH、特殊营养物质以及氧气
酸性
中性或弱碱性
无氧
维生素
几种微生物的营养和能量来源
（2023·山东卷）平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（ ）
A．不含氮源的平板不能用于微生物培养
B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
D
下列表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请结合所学知识，回答下列相关问题。
（2）从培养基的成分上看，大肠杆菌的同化类型为　　　　。该培养基能否用于分离筛选出大肠杆菌？为什么？_______________________________。
异养型
不能，原因是培养基中的碳源种类很多，可供多种微生物生存
成分 含量
蛋白胨 10.0 g
乳糖 5.0 g
蔗糖 5.0 g
K2HPO4 2.0 g
显色剂（伊红美蓝） 0.2 g
琼脂 12.0 g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
（1）该培养基属于 (填“固体”或“液体”)培养基，该培养基中的氮源是 。根据用途划分，该培养基属于　　培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基做出的最关键调整是　 　　　　，若还需鉴定分解尿素的细菌，需做出的调整是　 　　　 。
鉴别
将蛋白胨换成尿素
将伊红美蓝换成酚红指示剂
固体
蛋白胨
下列表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请结合所学知识，回答下列相关问题。
（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行　　 (填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需要进行清洗和　　 。
（4）在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是　 　　　　　　　，紫外线可对空气进行灭菌的原因是
___________________________。
（5）某同学尝试纯化大肠杆菌，其中一个平板的菌落分布如上图，推测该同学接种时可能的操作失误是__________________。
防止外来杂菌的感染
紫外线能使蛋白质变性，还能破坏DNA的结构
涂布不均匀
灭菌
消毒
2.无菌技术：
(1)目的: 。
(2)关键: 。
(3)常用方法:灭菌和消毒。
纯净的培养物
防止杂菌污染
2.无菌技术：
比较项目 条件 结果 常用方法 应用范围
消毒 较为温和的______ 或生物等方法 仅杀死物体表面或内部一部分微生物 煮沸消毒法 日常用品
__________ 不耐高温的液体
______________ 操作空间、操作者的衣物和手等
紫外线消毒法 接种室、接种箱或超净工作台
物理、
化学
巴氏消毒法
化学药物消毒法
灭菌 强烈的理化方法 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 __________ 培养基、容器等
__________ 玻璃器皿、
金属用具等
___________ 接种工具等
湿热灭菌法
干热灭菌法
灼烧灭菌法
2.无菌技术：
　教材隐性知识：源于选择性必修3 P10“相关信息”：生物消毒法是指利用生物或其　　　除去环境中的部分微生物的方法。
代谢物
选择无菌技术的原则：
一要考虑无菌技术的效果，灭菌的效果比消毒要好；
二要考虑操作对象的承受能力，活体生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用灭菌。
其他操作：①做好消毒和灭菌工作后，要注意避免已经灭菌处理的材料用具与 接触。
②为了避免周围环境中微生物的污染，接下来的许多操作都应在超净工作台上并在 附近进行。
周围的物品
酒精灯火焰
（2018·全国Ⅱ卷）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：
(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具_______(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_________________。
(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能__________________。在照射前，适量喷洒________，可强化消毒效果。
(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是_______________。
可以
营养物质损失少
破坏DNA的结构
消毒液
氯气
冷空气未排尽
3.微生物的纯培养：
(1)概念:
(2)过程: 、灭菌、接种、 和培养等步骤。
(3)常用方法: 法和 法。
平板划线
稀释涂布平板
配制培养基
分离
固体培养基
一定形态结构
单一个体
3.微生物的纯培养：
P314情境推理:下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析并回答下列问题：
(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么？_________________
____________________________________________________________。
获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法为平板划线法
(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？_______________________
____________________________________________________________________________________________________________________________________。
最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌
3.微生物的纯培养：
15～20 g琼脂
湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法
干热灭菌
3.微生物的纯培养：
酒精灯火焰
灼烧灭菌
①平板冷凝后，要将平板倒置的原因是什么？
因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，平板倒置后，既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
3.微生物的纯培养：
平板划线法
恒温培养箱
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②将接种的平板和未接种的平板，一起培养一段时间，这样做的目的是？
检测培养基平板灭菌是否合格
平板划线法操作步骤
①第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，这样做的目的是什么？
能使微生物的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个微生物繁殖形成的纯培养物。
(1)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。
(　√　)
(2)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(　×　)
(3)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上。(　×　)
(4)平板划线法中每一次划线前要将接种环灼烧。(　√　)
(5)配制培养基时应先灭菌再调pH。(　×　)
(6)为了防止污染,接种环经灼烧灭菌后应趁热快速挑取菌落。(　×　)
易错判断：
例2.(2022·山西高三适应考试)自然界里有多种微生物，将其进行合理的筛选、培养和应用，能给医药和化工等生产领域带来巨大经济效益。回答下列问题：
(1)对培养基进行灭菌时，多采取 法，而对接种环或涂布器灭菌时则用 法，若要将微生物采用平板划线法进行分离操作，在固体培养基表面连续进行了5次划线，则需要对接种环灼烧 次。平板划线在做第二次及其以后的划线操作时，要从上次划线的 开始划线，最后一次划的线不能与第一次划的线 。
高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)
灼烧灭菌
6
末端
相连
②操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧的目的填写下表：
项目 第一次操作 每次划线之前 划线结束
目的 __________ 杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于 ___________________，使每次划线菌种数目减少
_________________________
杀死接种环上原有的微生物
上次划线的末端
杀死接种环上残存的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者
P315T4丁草胺是一种有机除草剂，主要用于水稻田杂草的防除，具有潜在的致畸变和致突变性。而在水稻种植过程中农田有一段很长的淹水期，淹水会导致水稻田深层土壤处于厌氧状态。因此研究丁草胺厌氧降解菌对于水稻田土壤中丁草胺的降解具有重要意义。研究人员要对丁草胺厌氧降解菌进行分离、鉴定和扩大培养(如图)，请回答下列问题：
(1)你认为研究小组应该在哪里取样？___________________________________
频繁使用丁草胺的水稻田深层土壤
P315T4
(2)配制选择培养基时，研究人员先加入了K2HPO4、KH2PO4、FeSO4、MgCl2、NH4Cl、CaCl2、NaCl、微量元素复合液、维生素复合液等，他们还需要加入一定量的________。对培养基灭菌通常采用______________法。灭菌结束后，应趁热将适量培养基分装于锥形瓶中，充入氮气，塞住胶塞并用铝帽固定，这样操作的目的是________________________
(3)步骤③中，应将平板放入厌氧罐中，置于培养箱中恒温培养，对长出的菌落进行初步鉴定。菌落是初步区分微生物类型的重要特征，这些特征包括____________________________________________________(至少答出2点)等。
丁草胺
高压蒸汽灭菌
创造无氧的培养环境
菌落的形状、大小、颜色、隆起程度、边缘特征
P315T4
(4)步骤④中，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，其原因是______________________________________________________
____________________________________________________________________
____________________________________________________________________
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随划线次数的增加逐步减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落
（2020·江苏卷）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是 (　　)
A.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整
B.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从
Ⅲ区挑取单菌落
C.该实验结果因单菌落太多，不能达到菌
种纯化的目的
D.菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果
红染成红色
B
（2023·北京卷）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。
(1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供_______________和维生素等。
(2)A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明______________________。
(3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合
适的菌落密度,因此应将含菌量较高的湖泊
水样_______后,依次分别涂布于不同的浑浊
薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现_______。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。
氮源、碳源
A菌能在培养平板中生长繁殖
稀释
溶菌圈
P319T4（2022·全国甲卷）某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。
实验所用的培养基成分如下。
培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。
培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。
操作步骤：①将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。
(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是_____。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成 ____________（答出2种即可）等生物大分子。
(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是________。
石油
DNA、RNA、蛋白质
N0·2n
P319T4（2022·全国甲卷）
(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示（“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示无透明圈），推测该同学的实验思路是__________。
在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B菌液分别接种到平板Ⅰ的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作，在相同且适宜条件下培养一段时间，比较两个平板的两孔处的透明圈大小并作记录，根据透明圈大降解能力强，透明圈小降解能力弱，进而比较A、B降解石油的能力
P319T4（2022·全国甲卷）
(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是____________，理由是___________。
A
A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长
二.微生物的选择培养和计数
1.选择培养基
常见选择培养基举例：①缺少氮源的培养基可以筛选能利用大气中N2的微生物。②含青霉素的培养基可淘汰细菌，筛选出真菌。③无有机碳源的培养基可筛选出自养微生物。
2.稀释涂布平板法
二.微生物的选择培养和计数
①系列稀释操作：取1mL菌液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。该操作常用在将细胞接种到培养基之前，通过液体稀释的方法分散细胞，随着稀释程度的增大，单位体积中的微生物细胞数量减少，细胞得以分散。
2.稀释涂布平板法
二.微生物的选择培养和计数
②涂布平板操作步骤：
3.微生物的数量测定
二.微生物的选择培养和计数
①稀释涂布平板法：
　因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
3.微生物的数量测定
二.微生物的选择培养和计数
①稀释涂布平板法：
特别提醒关于“选择菌落数在30~300的平板”的两个理解误区
①只得到1个菌落数在30~300的平板:不符合实验的重复原则,易受到偶然因素的影响。
②得到3个或3个以上菌落数在30~300的平板:也不一定正确,如得到3个平板,菌落数分别为230、34、240,虽然菌落数均在30~300之间,但由于34与另外两个平板上的菌落数差异较大,应找出原因并重新实验。
3.微生物的数量测定
二.微生物的选择培养和计数
①稀释涂布平板法：
某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)，那么稀释倍数为106的试管中细菌的浓度是 个/mL，稀释倍数为10的锥形瓶中细菌的浓度为 个/mL，所以每克样品中的细菌数是
个。
2.34×103
2.34×108
2.34×109
4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
二.微生物的选择培养和计数
脲酶
尿素
(1)实验原理
4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
二.微生物的选择培养和计数
(2)操作步骤
30～300
温度
时间
24 h
菌落
教材隐性知识：
源于选择性必修3 P19“探究·实践”：本活动初步筛选了能分解尿素的细菌，请进一步借助于生物化学的方法来鉴定所分离的菌种：
答案　分解尿素的细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，在培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该细菌能够分解尿素
5.分解纤维素的微生物的分离
纤维素
刚果红
红色
复合物
归纳总结：
1.微生物的筛选方法
方法 特点 举例
利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养 通过控制培养基的营养成分,使营养缺陷型微生物不能正常生长 缺乏氮源的培养基可筛选自生固氮微生物
利用某种化学物质进行的选择培养 在培养基中加入某种化学物质,抑制某些微生物,同时选择所需的微生物 加入青霉素的培养基可抑制细菌,分离出真菌
利用培养条件进行的选择培养 改变微生物的培养条件 将培养基放在高温环境中培养,可分离出耐高温的微生物
归纳总结：
2.微生物的鉴别方法
菌落特征鉴别法 根据微生物在固体培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等特征进行鉴别
指示剂鉴别法 如以尿素为氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种微生物后,培养基变红,说明该种微生物能够分解尿素
染色鉴别法 如利用刚果红染色法,根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物
例3.营养缺陷型菌株是野生型菌株经过人工诱变或自发突变失去合成某种成长因子的能力，只能在补充了相应的生长因子的基本培养基中才能正常生长的变异菌株。某研究小组对酵母菌用紫外线照射后将其接种到甲培养皿的培养基上，一段时间后将甲培养皿的菌落影印接种(不改变菌落位置)到乙、丙两培养皿的培养基中，进一步培养得到如下图所示结果。下列分析正确的是( )
A.接种到甲培养皿采用的是平板划线法
B.甲、丙两培养皿中的培养基是基本培养基
C.甲培养皿中菌落数有可能比接种的酵母菌数少
D.甲、乙、丙三个培养皿都可能存在营养缺陷型菌落
C
例4.自生固氮菌是土壤中能独立进行固氮的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究,部分实验流程如下图。已知步骤④获得的三个平板的菌落数分别为90、95、100,对照组平板为0。下列叙述正确的是(　　)
A.步骤②振荡20 min的目的是扩大菌种数量,属于选择培养
B.步骤④使用接种环划线接种,使用前需要灼烧灭菌
C.1 g土壤中平均自生固氮菌数约为9.5×106个
D.所用培养基应加入碳源、氮源、无机盐、水和琼脂
C
（2023广东）研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是（ ）
A．a点时取样、尿素氮源培养基
B．b点时取样、角蛋白氮源培养基
C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基
D．c点时取样、角蛋白氮源培养基
D
（2022·江苏）下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是（ ）
A．选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B．在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C．适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D．可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
D
（2020·全国Ⅰ）某种物质S(一种含有C、H、N的有机物)难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。
(1)实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用 的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是　　。甲、乙培养基均属于_____培养基。
(2)实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100 μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释 倍。
高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)
琼脂
选择
104
(3)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是____________________________ (答出1点即可)。
(4)若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤：_____
_____________________________________________________
(5)上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即 。
S的浓度超过某一值时会抑制菌株的生长
取淤泥加入无菌水中，涂布(或稀释涂布)到乙培养基上，培养后计数
水、碳源、氮源和无机盐
（2021·山东）解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，下列说法错误的是 （ ）
A.甲菌属于解脂菌
B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源
C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比
D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力
B
（2021·山东）含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是
A.乙菌的运动能力比甲菌强
B.为不影响菌的运动需选用液体培养基
C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
B

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