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第2章 组成细胞的分子
第1节 细胞中的元素和化合物
第二课时
检测生物组织中的糖类、脂肪
和蛋白质
1.还原糖的鉴定
③实验原理：
还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀
水浴加热
①还原性糖与非还原性糖：
还原性糖： 葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。
非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖原。
②实验试剂：斐林试剂
甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
现用现配，等量混匀
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
选材：还原糖含量高的白色或近于白色的植物组织 （排除色素的干扰）
取组织样液：苹果汁、梨匀浆或白萝卜匀浆2mL
显色反应
现象与结论：
50～65℃水浴
加热约2min
④实验步骤：
2mL组织样液
1mL斐林试剂
（甲液和乙液等量混合均匀后再注入）
呈现蓝色
砖红色沉淀
①实验试剂：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ
②实验原理：
脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪 + 苏丹Ⅳ→红色
③实验材料：花生种子或花生种子匀浆
④实验步骤：
方法一：向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察样液被染色情况。
方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。
（取材，切片，制片，观察）
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
2.脂肪的鉴定
2.脂肪的鉴定
取材和切片：花生种子（实验前浸泡），去皮，将子叶削成薄片
制片：
①选取最薄的薄片移至载玻片中央
②染色：在薄片上滴2－3滴苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液，染色３min
③去浮色：滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色(多余染液)
④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片
显微观察与现象：
先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察，可看见染色的脂肪颗粒
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
①实验原理：
蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
②实验材料：豆浆、鸡蛋蛋白
③试剂：双缩脲试剂 (先A液,后B液)
A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
3.蛋白质的鉴定
3.蛋白质的鉴定
选材：
黄豆组织样液(豆浆）、鲜肝提取液或鸡蛋清稀释液
显色反应：
现象与结论：
无色
紫色
（创设碱性条件）
（提供Cu2+）
制备组织样液：
2mL组织液
先加1mL双缩脲试剂A液
震荡摇匀
后加4滴双缩脲试剂B液（不能过量）
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
①实验原理：淀粉 + 碘→蓝色
②实验材料：马铃薯匀浆
③试剂：碘液
④实验步骤
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内滴加两滴碘液，观察颜色变化
实验现象（如右图）
三、实验：检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
4.淀粉的鉴定
比较项目 试剂及成分 原理 溶液浓度 方法 加热与否 结果
可溶还原糖的鉴定 斐林试剂NaOH和CuSO4 砖红色沉淀
蛋白质的鉴定 双缩脲试剂NaOH和CuSO4 溶液呈紫色
4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？
新配制的
Cu(OH)2
溶液
在碱性
环境下
的Cu2+
NaOH浓度为
0.1g/mL
CuS04浓度为0.05g/mL
NaOH浓度为0.1g/mL
CuS04浓度0.01g/mL
先把NaOH溶液和
CuSO4溶液混合，
而后立即使用。
先加入Na0H1mL，再加CuS044滴，摇匀。
(不能过量)
水浴
加热
不需要
3.实验注意问题
（1）实验材料的选择
①还原糖的鉴定实验中，最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织（或器官），而且组织的颜色较浅，易于观察。可选用苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等，但不能选用甜菜、甘蔗，因为它们所含的蔗糖是一种非还原糖；马铃薯因含淀粉较多也不能做实验材料；不能选西瓜、血液（含葡萄糖）、含还原糖的绿色叶片等做实验材料，以避免颜色的干扰。
②脂肪的鉴定实验中，实验材料最好选富含脂肪的种子。
③蛋白质的鉴定实验中，最好选用富含蛋白质的生物组织，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋的蛋清。
(2)做鉴定蛋白质的实验时，在鉴定之前，可以留出一部分样液，以便与鉴定时样液的颜色变化作对比，这样可以增强说服力。
(3)蛋白质要稀释主要是防止蛋白质与双缩脲反应后粘固在试管壁上，使反应不彻底，也不易洗刷试管。
实验的材料的选择和处理有什么要求？
材料的选择 材料的处理
还原性糖的鉴定 含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果和梨 /
脂肪的鉴定 富含脂肪的种子，如花生 浸泡3~4小时
蛋白质的鉴定 富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清 黄豆需浸泡1-2天，鸡蛋清要先稀释
淀粉的鉴定 马铃薯
化合物 糖类 脂肪 蛋白质
原理 还原糖与斐林试剂发生反应，可以产生砖红色沉淀，实质是还原糖将Cu2+还原，生成砖红色的Cu2O
材料 含糖量高且具有还原性、白色或近于白色的植物组织
试剂 斐林试剂由甲液（0.1 g/mL NaOH溶液）、乙液（0.05 g/mL CuSO4溶液）
步骤
结果 产生砖红色沉淀
结论 材料中含有还原性糖
注意事项 1、还原糖种类：葡萄糖，果糖，麦芽糖 2、材料的选择 3、斐林试剂如何用？条件？ 1、切片均匀 2、酒精作用，为什么 3、显微镜使用 4、染色时间 1、双缩脲试剂使用
1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？
作对照
2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？
过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。
3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？
时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。
与实验相关的几个问题
1．下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是(　　)
A．用于检测可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液可以直接用于检测蛋白质
B．脂肪的检测需借助显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪颗粒
C．检测可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加乙液
D．用于检测蛋白质的双缩脲试剂A液与B液混合均匀后，再加入含样品的试管中
小试牛刀
B
2．关于检测还原糖和蛋白质的实验，下列说法正确的是(　　)
A．在蛋白质的检测中，先加入硫酸铜，再加入氢氧化钠
B．检测还原糖时，斐林试剂的甲液和乙液要混匀后加入
C．两个实验都需要加热
D．还原糖的检测实验中，最后现象是溶液颜色变紫色
小试牛刀
B
大量元素
微量元素
无机盐
脂质
核酸
斐林
砖红色
双缩脲
紫色
橘黄色
（红色）
碘液
蓝色
　　课堂小结
THANKS

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