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(共12张PPT)
项目五 酶类的性能与控制
任务一 唾液中淀粉酶活性影响因素的测定
任务要求
1.熟悉影响淀粉酶活性的因素。
2.能够测定温度、pH、激活剂、抑制剂对淀粉酶活性的影响。
知识储备
酶促反应(Enzyme catalysis)是指由酶作为催化剂进行催化的化学反应。生物体内的化学反应绝大多数属于酶促反应，酶作为生物催化剂，其活性受到多种因素调节，这是酶自身的特点，也是生物体能够调控代谢速度，从而适应环境的物质基础。酶促反应的影响因素，主要是pH、温度、激活剂和抑制剂四大类。了解这些影响因素，不论对于生产、生活，还是科学研究，都有重要作用。
一般酶的最适pH在6.0-8.0，少数酶需偏酸或碱性条件。如人体胃蛋白酶最适pH为2.0，而肝脏精氨酸酶为9.7。大部分酶的pH-酶活曲线是钟形曲线，但也有少数酶只有钟形的一半，甚至是直线。如木瓜蛋白酶底物的电荷变化对催化没有影响，在pH4-10之间是一条直线。
1.任务分组
学生依据任务工作要求和任务具体内容，并结合自身兴趣爱好和对任务了解的基本情况自由组合，并要求每2-3人为一组，开展任务实施。
任务实施
２.材料准备
1.仪器准备：试管（3.0cm×20cm）、试管架、4孔恒温水浴锅、冰浴、吸量管（1.00mL、2.00mL、5.00mL）、滴管、量筒、玻璃棒、白瓷板、秒表、烧杯、棕色瓶。
2.试剂准备
（1）新鲜唾液稀释液（唾液淀粉酶液）：每组同学进实验室自己制备，先用蒸馏水漱口，以消除食物残渣，再含一口蒸馏水，0.5min后使其流入量筒并稀释到200倍（稀释倍数因人而异）混合备用。
（2）1.00g/100mL淀粉溶液A（含0.3%氯化钠）：称取1.00g可溶性淀粉和0.30g氯化钠溶于5mL蒸馏水中，搅动后，缓慢倒入沸腾的60mL蒸馏水中，搅动煮沸1min，冷却至室温，加水到100mL，置于冰箱中保存。
（3）缓冲溶液系统，按表5-1混合配制。
２.材料准备
（4）1.00g/100mL淀粉溶液B（不含氯化钠）:称取1.00g可溶性淀粉溶于5mL蒸馏水中，搅动后，缓慢倒入沸腾的60mL蒸馏水中，搅动煮沸1min，冷却至室温，加水到100mL，置于冰箱中保存。
（5）碘液：称取2g碘化钾溶于5mL蒸馏水中，再加入1g碘，待碘完全溶解后，加蒸馏水295mL，混匀储于棕色瓶中。
（6）1.00g/100mL氯化钠溶液：称取1.00g氯化钠溶于50mL蒸馏水中，转移到100mL容量瓶加蒸馏水定容。
（7）1.00g/100mL硫酸铜溶液：称取1.00g硫酸铜溶于50mL蒸馏水中，转移到100mL容量瓶加蒸馏水定容。
（8）1.00g/100mL硫酸钠溶液：称取1.00g硫酸钠溶于50mL蒸馏水中，转移到100mL容量瓶加蒸馏水定容。
3.实施步骤
淀粉溶液配制→温度影响→pH值影响→激活剂抑制剂影响→现象记录与分析
4.实施要点
1.温度对淀粉酶活性的影响
取3支试管，编号后按表5-2操作。
下述各管在不同温度下保温10min后，立即取出，流水冷却3min，向各管分别加入碘液1滴。细观察各试管颜色并记录。
试管 淀粉酶体积/mL 酶液处理温度/℃ pH6.8缓冲溶液体积/mL 1.00g/100mL淀粉溶液A体积/mL 反应温度10min/℃ 观察结果
1 1 0 2 1 0
2 1 37~40 2 1 37~40
3 1 70 2 1 70
4.实施要点
2.pH值对淀粉酶活性的影响
取一支试管，加入1.00g/100mL淀粉溶液A 2mL，pH 6.8缓冲溶液3mL，淀粉酶液2mL，摇匀后，向试管内插入一支玻璃棒，置37%水浴保温。每隔1min用玻璃棒从试管中取出1滴混合液于白瓷板上，随即加入碘液1滴，混匀后，观察溶液的颜色，确认淀粉水解程度后，记录从加入酶液到加入碘液的时间，此时间为保温时间。取4支试管编号，按表5-3进行操作。
试管 缓冲溶液体积/mL 1.00g/100mL淀粉溶A体积/mL 淀粉酶液体积（每隔1min逐管加入）/mL 观察结果
pH5.0 pH5.8 pH6.8 pH8.0 1 5 0 0 0 2 2
2 0 5 0 0 2 2
3 0 0 5 0 2 2
4 0 0 0 5 2 2
4.实施要点
3.激活剂抑制剂对淀粉酶活性的影响
取4支试管编号，按表5-4所示，加入各试剂。将上述各试管溶液混匀后，向1号试管内插入一支玻璃棒，4支试管同时置于37摄氏度水浴保温1min左右，用玻璃棒从1号试管中取出1滴混合液，检查淀粉水解程度（方法同步骤二）。待混合液遇淀粉不变色时，从水浴中迅速取出3支试管，各加碘液1滴，摇匀后观察各试管溶液的颜色并记录。
试管 1.00g/100mL淀粉液B 1.00g/100mLNaCl溶液 1.00g/100mLCuSO4溶液 1.00g/100mLNa2SO4溶液 蒸馏水 淀粉酶液 观察结果
1 2 1 0 0 0 2
2 2 0 1 0 0 2
3 2 0 0 1 0 2
4 2 0 0 0 1 2
5.数据记录
序号 实验名称 结论分析 备注
1 温度对淀粉酶活性的影响
2 pH值对淀粉酶活性的影响
3 激活剂抑制剂对淀粉酶活性的影响
思考题
1.为什么在咀嚼馒头时,会感觉到甜味
2.糖类在口腔中经淀粉酶分解成哪些成分
3.为什么不同人群唾液对淀粉的分解效果不一样

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