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紫外可见
分光光度法
紫外可见
分光光度法
UV-Vis Spectrophotometry
CONTENTS
目
录
1. 认识紫外可见分光光度法
2. 紫外可见分光光度法基本原理
3. 紫外可见分光光度计结构
4. 定量分析实例
紫外可见分光光度法基本原理
郎伯比尔定律
知识目标
1. 掌握朗伯-比尔定律概念、表示及条件；吸光系数的意义、表示。
2. 熟悉吸光系数的运用计算。
3. 了解吸光系数的单位定义。
能力目标
1.能够用朗伯-比尔定律解决吸收系数计算问题 。
思政目标
1. 爱护环境，爱护地球，保护绚烂多彩的世界。
2. 科学需要长时间和大量的验证才能进步。
郎伯比尔定律
一束平行单色光通过均匀、无散射现象溶液时，溶液对光的吸光度A与液层厚度L和溶液浓度c 成正比。（称朗伯-比尔定律）
A为吸光度；L为光程，即吸收池厚度，单位为cm；c为物质的浓度，单位为mol/L、g/L或百分浓度；K 为比例常数。
朗伯-比尔定律是分光光度法进行定量分析的理论依据。
郎伯比尔定律
郎伯比尔定律
光的吸收定律（朗伯-比尔定律）不仅适用于有色溶液，也适用于无色溶液及气体和固体的非散射均匀体系；不仅适用于可见光区的单色光，也适用于紫外和红外光区的单色光。
光的吸收定律成立条件：入射光必须是平行单色光；均匀、无散射的稀溶液（浓度小于0.01mol/L）；吸收过程中，吸收物质间不发生相互作用。
吸光系数
摩尔吸光系数ε和百分吸光系数
A = e cL
c: mol/L
c: g/100mL
ε表示物质的浓度为1mol/L ，液层厚度为1cm时溶液的吸光度。
单位：L/mol · cm
是指溶液浓度为1% (g/100ml)，液层厚度为1cm时的吸光度。
单位：ml/g · cm
吸光系数
摩尔吸光系数ε 与百分吸光系数E 关系为：
M为被测物质的摩尔质量
为吸光物质的特征参数。样品实际检测中常用百分吸光系数。
吸光系数是吸光物质在一定条件下的特征常数。K值与物质的性质、入射光波长、溶剂等有关。
影响光吸收定律的因素
标准曲线 正常情况下应是一条通过坐标原点的直线。
偏离 被测物质浓度与吸光度不成线性关系的现象。
影响光吸收定律的因素
物理因素
单色光不纯、非平行入射光、介质不均匀等。
化学因素
溶液浓度过高，吸光物质的离解、缔合、配位以及与溶剂的作用等。
小结
本节主要介绍光的吸收定律（朗伯-比尔定律），这是分光光度法定量分析的基础。
1
重点阐述分光光度法的基本原理。
2

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