资源简介

(共23张PPT)
教学目标：
1、说出蛋白质工程崛起的原由。
2、概述蛋白质工程的基本原理。
3、举例说明依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
教学重点：
1、蛋白质工程的基本原理。
2、依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
教学难点：
1、蛋白质工程的基本原理。
2、依据人类需要对原有蛋白质结构进行基因改造、生产目标蛋白的过程。
第3章 基因工程
第4节 蛋白质工程的原理和应用
从社会中来
你见过用细菌画画吗？右图是用发出不同颜色荧光的细菌“画"的美妙图案。这些细菌能够发出荧光，是因为在它们的体内导入了荧光蛋白的基因。最早被发现的荧光蛋白是绿色荧光蛋白，科学家通过改造它，获得了黄色荧光蛋白等。这些荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究等领域有着重要应用。那么，科学家是怎样对蛋白质分子进行设计和改造的呢？
科学家解析了多管水母绿色荧光蛋白的晶体结构，并利用计算机进行辅助设计，在此基础上再采用定点突变的技术将绿色荧光蛋白发光基团正下方的第203位的苏氨酸替换为酪氨酸，从而获得了一种新的绿色荧光蛋白的衍生物——黄色荧光蛋白。
用细菌“画”的画
将一种生物的基因转移到另一种生物的体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质 ，进而表现出新性状。
① 基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。
② 天然蛋白质不一定完全符合人类生产和生活的需要。
一、蛋白质工程崛起的原由
1、基因工程的实质：
2、局限性：
是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。
自主学习
为什么要改造？
自主学习
怎么改造？
二、蛋白质工程的基本原理
1、定义：
蛋白质工程
天然蛋白质的缺陷： 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的，它们的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
二、蛋白质工程的基本原理
实例：对天然酶的改造
赖氨酸
天冬氨酸激酶
（含量低）
二氢吡啶二羧酸合成酶
玉米
促进
促进
抑制
抑制
二、蛋白质工程的基本原理
异亮氨酸
（352位）
苏氨酸
（352位）
变为
异亮氨酸
（104位）
天冬酰胺
（104位）
变为
天冬氨酸激酶
二氢吡啶二羧酸合成酶
实例：对天然酶的改造
赖氨酸
天冬氨酸激酶
（含量低）
二氢吡啶二羧酸合成酶
玉米
促进
促进
抑制
抑制
改造
后的
天冬氨酸激酶
异亮氨酸
（352位）
苏氨酸
（352位）
变为
异亮氨酸
（104位）
天冬酰胺
（104位）
改造后的二氢吡啶二羧酸合成酶
变为
玉米
赖氨酸
（含量提高5倍）
促进
（含量提高2倍）
赖氨酸
玉米
促进
二、蛋白质工程的基本原理
根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造。
通过改造或合成基因，来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质。
天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的。基因→表达（转录和翻译）→形成具有特定氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能。
二、蛋白质工程的基本原理
2、蛋白质工程的目标：
3、蛋白质工程的实质：
4、天然蛋白质合成的过程：
预期的蛋白质功能
合成新的基因
设计预期的蛋白质结构
推测应有的氨基酸序列
找到相应的核苷酸序列
所需蛋白质
二、蛋白质工程的基本原理
5、蛋白质工程的基本思路：
思考·讨论 ：蛋白质工程基本思路的应用
某多肽链的一段氨基酸序列是：
丙氨酸
……
……
色氨酸
赖氨酸
苯丙
氨酸
讨论:
1．怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。
2．确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因？
查密码子表得知：丙氨酸（GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG）、谷氨酸（GAA、GAG）、苯丙氨酸（UUU、UUC）。
推知mRNA序列为：GCU（或C或A或G）UGG AAA（或G）GAA（或G）UUU（或C）
进一步推知脱氧核苷酸序列为：CGA（或G或T或C）ACC TTT（或C）CTT（或C）AAA（或G）GCT（或C或A或G）TGG AAA（或G）GAA（或G）TTT（或C）
思考·讨论 ：蛋白质工程基本思路的应用
某多肽链的一段氨基酸序列是：
丙氨酸
……
……
色氨酸
赖氨酸
苯丙
氨酸
讨论
1．怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。
确定目的基因的碱基序列后，可以人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因。对基因的改造经常会用到基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等。
思考·讨论 ：蛋白质工程基本思路的应用
某多肽链的一段氨基酸序列是：
丙氨酸
……
……
色氨酸
赖氨酸
苯丙
氨酸
讨论
2．确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因？
项目 蛋白质工程 基因工程
区别 操作流程
结果
联系
通过改造或合成基因得到符合需求的蛋白质
生产自然界已经存在的蛋白质
在直接化学合成蛋白质很难实现的前提下，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程
蛋白质工程和基因工程的比较
预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到并改变对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新基因→获得所需要的蛋白质
目的基因的筛选与获取→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
是否合成新的基因
蛋白质工程
是否对原有基因进行改造
是
否
是
否
蛋白质工程
基因工程
看蛋白质
看基因
是否为天然蛋白质
是
否
蛋白质工程
基因工程
蛋白质工程和基因工程的比较
思考：如何辨别一个操作是基因工程还是蛋白质工程？
【自主学习】自主阅读课本P95相关内容，总结蛋白质工程可以应用于哪些领域，有哪些案例。
三、蛋白质工程的应用
天然蛋白质易形成二聚体或六聚体
预期结构
改造
B28位脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置
新胰岛素基因
转录
mRNA
折叠
预期功能
行使功能
降低胰岛素的聚合作用
设计结构
改变B链第20～29位氨基酸组成
推测序列
翻译
多肽链
有效抑制胰岛素的聚合
1、医药工业方面
（1）研发速效胰岛素类似物
三、蛋白质工程的应用
天然干扰素不易保存
预期结构
改造
一个半胱氨酸变成丝氨酸
新干扰素基因
转录
mRNA
折叠
预期功能
行使功能
延长保存时间
设计结构
氨基酸替换
推测序列
翻译
多肽链
在-70℃下可以保存半年
（2）延长干扰素体外保存时间
三、蛋白质工程的应用
1、医药工业方面
（3）降低人对小鼠单抗隆抗体的免疫反应
通过改造基因，将小鼠抗体上结合抗原的区域（即可变区）“嫁接”到人的抗体（即恒定区）上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会减低很多。
1、医药工业方面
三、蛋白质工程的应用
蛋白质工程被广泛用于改进酶的性能或开发新的工业用酶。如枯草杆菌蛋白酶具有水解蛋白质的作用，常被用于洗涤剂工业、丝绸工业等。迄今为止，利用蛋白质工程获得的该酶的突变体已有上百种，从中可能筛选出一些符合工业化生产需求的突变体，从而提高这种酶的使用价值。
3、农业方面
（1）改造某些参与调控光合作用的酶，以提高植物光合作用的速率，增加粮食的产量。
（2）利用蛋白质工程的思路设计优良微生物农药，通过改造微生物蛋白质的结构，使它防治病虫害的效果增强。
2、其他工业方面
三、蛋白质工程的应用
蛋白质工程的难点
蛋白质的高级结构
蛋白质的功能
相互关系
蛋白质工程是一项难度很大的工程，主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。科学家要设计出更加符合人类需要的蛋白质，还需要不断地攻坚克难。我们相信，随着科学技术的深入发展，蛋白质工程将会给人类带来更多的福祉。

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