项目十二紫外一可见分光光度法 课件(共19张PPT)《《分析化学基础(供药学类专业用第2版)》

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项目十二紫外一可见分光光度法 课件(共19张PPT)《《分析化学基础(供药学类专业用第2版)》

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紫外-可见分光光度计的结构与光学性能
紫外-可见分光光度计
第四节 紫外-可见分光光度计的结构与光学性能
一、仪器主要部件
光源—单色器—吸收池—检测器—显示器
光源 (提供能量,激发被测物质分子,使之产生电子谱带)
钨灯或卤钨灯
(适用波长范围是 350~1000nm), 必须使用稳压电源。
氢灯或氘灯
(适用波长范围是150~400nm ),必须使用稳流电源。
光源
氘灯—紫外
卤钨灯--可见
氘灯
氢灯
钨灯
作用:将光源发出的复合光按波长顺序分离成单色光。
组成:狭缝、准直镜、色散元件(棱镜、光栅)、聚焦镜。
单色器
①入射狭缝:光源的光由此进入单色器;
②准 直 镜: 使入射光成为平行光束;
③色散元件:将复合光分解成单色光(棱镜或光栅);
④聚焦装置:透镜或凹面反射镜,将分光后所得单色光聚焦至出
射狭缝;
⑤出射狭缝:
吸收池(比色皿、比色杯)
玻璃吸收池只可以在可见光区使用;
石英吸收池可在紫外-可见区使用。
盛放参比溶液与盛放样品溶液的吸收池需互相匹配。
吸收池
光电管(光→电)
光电倍增管
检测器
讯号处理与显示器
放大器
表头显示
数字显示
荧屏显示
常用分光光度计
二、分光光度计的类型
单光束分光光度计
双光束分光光度计
二极管阵列检测分光光度计
特点:全光谱扫描
721型可见分光光度计
5200型可见分光光度计
三、分光光度计的光学性能
波长范围 :大致为190~1100nm不等
波长准确度:一般误差为±0.5nm
波长重现性:波长准确度的1/2左右
狭缝或谱带宽:最小谱带宽度可达0.1~0.5nm
分辨率 :数值越小越好。中等仪器≤0.5nm,高级仪器≤0.1nm
杂散光 :中等仪器≤0.5%,高级仪器≤0.001%
吸光度(透光率)测量范围 :中档仪器为-0.1730~+2.0(0~150% )
测光准确度 :一般仪器约为 ± 0.5%
测光重现性:测光准确度误差范围的1/2左右
紫外可见分光光度计的组成。
(光源、单色器、样品池、检测器、讯号处理与显示器)
2. 紫外可见分光光度计的使用。
开机自检—设置测量模式和波长—溶液装入比色皿—放入参比液调零—放入待测液测吸光度
小结

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