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2.1植物细胞工程第一课时目录01.导入02.植物组织培养技术行业PPT模板http:///hangye/01.导入如何能让名贵的兰花大量、快速繁殖呢？植物组织培养02.植物组织培养技术1.概念：指的植物器官、组织或细胞等，培养在人工控制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其分化为的技术。离体完整植株外植体2.原理：植物细胞的全能性3.生殖方式：无性生殖4.分裂方式：有丝分裂02.植物组织培养技术1.细胞的全能性：2.原因：每一个细胞含有控制该生物发育的全部基因3.比较：（1）受精卵＞胚胎干细胞＞生殖细胞＞体细胞（2）植物细胞＞动物细胞4.物体内细胞并不都表现全能性的原因在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性表达细胞经过分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能——如何才能让细胞表现出全能性？02.植物组织培养技术5.表现出全能性的条件：①、离体②、一定的营养物质、植物激素③、适宜的温度、pH等外界条件④、无菌环境——如何才能让细胞表现出全能性？1958年Steward利用胡萝卜韧皮部诱导分化产生了胚状体，这是人类第一次获得了人工胚状体，并获得个体植株。02.植物组织培养技术自主阅读教材35页—37页，小组思考并讨论以下问题：1.概述植物组织培养的基本过程？2.什么是脱分化 再分化 愈伤组织？3.请从条件、关键因素、产物等方面比较脱分化和再分化异同。4.在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？脱分化：已经分化的细胞，经过诱导，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。再分化：愈伤组织继续进行培养，又重新分化成根或芽等器官的过程。细胞排列疏松且无规则，高度液泡化，无定形状态的薄壁细胞团。外植体：用于植物组织培养的离体植物器官、组织或细胞。愈伤组织：接种外植体诱导愈伤组织诱导生芽诱导生根脱分化再分化移栽成活植物组织培养过程：再分化02.植物组织培养技术生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向。决定植物脱分化、再分化的关键因素：生长素用量/细胞分裂素用量结果比值≈1比值＞1比值＜1促进愈伤组织的形成促进根的分化促进芽的分化巧记：高根低芽中愈伤细胞分裂素生长素芽分化愈伤组织根分化1.目的：
（1）了解植物组织培养的基本原理
（2）了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响
（3）尝试进行植物组织培养
2.材料：
离体的茎尖、根尖、叶片、花药等（外植体）。
3.MS培养基：
水（去离子水）、无机营养（大量元素、微量元素）、有机营养（蔗糖、维生素、氨基酸）、天然附加物、植物激素（生长素、细胞分裂素等）
探究-实践：菊花的组织培养
4.步骤：制备外植体接种培养试管苗移栽消毒：切割：（无菌操作）酒精30S无菌水2-3次次氯酸钠溶液30min材料：幼嫩的菊花茎段2-3次无菌水洗消毒与无菌水冲洗切割与接种探究-实践：菊花的组织培养思考：为什么整个过程要保证无菌操作？避免杂菌在培养基上迅速生长消耗营养，同时防止有些杂菌危害培养物的生长。制备外植体接种培养试管苗移栽①接种到诱导愈伤组织培养基形成愈伤组织培养温度：18-220C、避光愈伤组织有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。探究-实践：菊花的组织培养4.步骤：接种时应将菊花茎段形态学下端插入培养基，不能倒插制备外植体接种培养试管苗移栽探究-实践：菊花的组织培养4.步骤：②接种到诱导生芽培养基，一定光照诱导生芽制备外植体
接种培养
试管苗移栽
探究-实践：菊花的组织培养
4.步骤：
③接种到诱导生根培养基，一定光照
诱导生根
思考：整个过程中使用的培养基中，生长素/细胞分裂素的比值大小是如何变化的？
比值适中→比值低→比值高
制备外植体
接种培养
试管苗移栽
探究-实践：菊花的组织培养
4.步骤：
移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱内生长几日。用流水清洗掉根部的培养基后，将 幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土。每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花。
5.结果分析与评价用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。导致外植体被污染的原因可能有：培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；操作过程不符合无菌操作要求等。探究-实践：菊花的组织培养（1）接种3～4d后，检查外植体的生长情况，统计有多少外植体被污染，有多少能正常生长，试分析它们被污染的原因。5.结果分析与评价观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织，记录多长时间长出了愈伤组织。从刚接种的外植体到长出愈伤组织一般需要2周左右的时间。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成芽和根的比例和时间。探究-实践：菊花的组织培养（2）你培养出愈伤组织了吗？如果培养出来了，从刚接种的外植体到长出愈伤组织经历了多少天？这些愈伤组织进一步分化出芽和根了吗？5.结果分析与评价生根苗移栽技术的关键是既要充分清洗根系表面的培养基，又不能伤及根系。一般使用无土栽培的办法。培养基质要提前消毒，可以向培养基质喷酒质量分数为5%的高锰酸钾，并用塑料薄膜覆盖12h。掀开塑料薄膜24h后才能移栽。新移栽的组培苗要在温室过渡几天，待其长壮后再移植到大田或盆中。可以在课后统计移栽的成活率，看看移栽是否合格。探究-实践：菊花的组织培养（3）你培育的幼苗移栽到露地后，能够正常生长吗？进一步分化出芽和根了吗？

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