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第1章 第2节
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
——酵母菌
实验材料
①兼性厌氧型生物（单细胞真核生物）；
②生长周期短，繁殖速度快，易于研究种群数量的变化
酵母菌在生产生活中应用广泛，如酿酒、做馒头等，具有哪些优点，哪种呼吸类型呢？
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
1. 实验原理
酵母菌是兼性厌氧型生物、单细胞真核生物；
酵母菌生长周期短，增殖速度快；
可用含糖的液体培养基(培养液) 培养；
采用抽样检测法，利用血细胞计数板可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化；
2. 提出问题
培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？
(1)变量分析：自变量为　　 ；因变量为　　　　　 ；
无关变量为　　　　　　等。
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
3. 作出假设
①培养液中的酵母菌数量一开始呈“J”形增长；
②随着时间推移，由于营养物质的消耗、有害代谢产物的积累、
pH的改变，酵母菌数量呈“S”形增长。
4. 实验设计
时间
酵母菌数量
培养液的体积
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
(2)材料用具：
酵母菌，无菌马铃薯培养液或者肉汤培养液，试管、
血细胞计数板，滴管、显微镜等。
酵母菌菌种
培养液
血细胞计数板
（3） 实验步骤
配制酵母菌培养液
接种酵母菌到培养液中
培养
计数
统计分析
得出结论
如何计数？
如何统计？
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
4. 实验设计
(4)怎样对酵母菌进行计数？
①方法：　　　　　法
②用具：　　　　　　　　　　　　　、显微镜等
抽样检测
试管、滴管、血细胞计数板
培养液
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
资料1. 血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。
计数时，常采用抽样检测法。
任务一：如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
导流凹槽
两个计数室
所在区域
血细胞计数板正面观
血细胞计数板侧面观
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
任务一：如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
计数室
计数室
边长为1mm
深度为0.1mm
①血细胞计数板
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供计数用。
②中方格
③小方格
（双线分割）
①大方格
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
任务一：如何利用血细胞计数板对酵母菌进行计数
16×25型
计数公式：
A1
A2
A3
A4
A1、A2、A3和A4分别为四个中方格中的酵母菌数。
1mL样品中酵母菌数
25×16型
A1
A2
A3
A4
A5
计数公式：
1mL样品中酵母菌数
A1、A2、A3 、A4和A5分别为五个中方格中的酵母菌数。
＝中方格中酵母菌数量的平均值×16×104 ×稀释倍数
＝中方格中酵母菌数量的平均值×25×104 ×稀释倍数
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
（1）盖盖玻片和滴加培养液哪个步骤在前？
先盖盖玻片，再滴加培养液于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，用滤纸吸去多余的培养液。
如果先加培养液再盖盖玻片，那么盖玻片可能由于已加入液滴的表面张力而不能严密地盖到计数板表面，使计数室内部液体增多，导致计数结果偏高。
先盖盖玻片再滴加培养液，还能避免因直接滴加培养液时，在计数室内产生气泡，导致计数室相对体积减小而造成误差。
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
（2）从试管中吸出培养液进行计数之前，建议将试管轻轻振荡几次。这是为什么？
使培养液中的酵母菌分布均匀，以减少误差。
（3）滴加培养液后要稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部再计数。请分析原因。
如果酵母菌未能全部沉降到计数室底部，通过显微镜观察时，就可能出现以下现象：要么能看清酵母菌但看不清格线，要么能看清格线但看不清酵母菌。
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
（4）如果一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清，应当采取什么措施？
第 1 天
第 4 天
第 6 天
第 7 天
死亡
当小方格中的酵母菌过多时，可以增大稀释倍数然后再计数，即计数前应摇匀→取样→稀释→计数。
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
（5）计数的酵母菌都是活的吗？怎样分辨是否为活菌？
不都是，计数的酵母菌包括活菌和死菌。
可以用台盼蓝染液对菌体进行染色，被染成蓝色的是死菌，没有染色的是活菌。
（6）对于压在计数方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？
对于压在计数方格界线上的酵母菌，应只计数相邻两边及其夹角(一般是左上边界及其夹角)的酵母菌。



——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
（7）本探究需要设置对照吗？如果需要，请讨论对照组怎样设计和操作？ 如果不需要，请说明理由。
不需要单独设置对照, 在时间上形成前后自身对照。
（8）要做重复实验吗？为什么？
需要重复实验,对每个样品可计数三次，再取平均值，以提高实验数据的准确性;
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
练习1. 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16＝400个小格组成，容纳液体的总体积为0.1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个／mL。
5n×105
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
2. 将样液稀释100倍，采用血球计数板(规格为1 mm×1 mm×0.1 mm)计数，观察到的计数室中细胞分布见图3，则培养液中藻细胞的密度是________个/ mL。
1×108
——计数
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
——记录
1. 怎么记录结果？记录表怎样设计？
第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天
1
2
3
平均
时间/天
次数
注意：每天计数酵母菌量的时间要固定，计数间隔要固定。
重复组
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
——绘制曲线图
如图为探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验相关曲线，据图回答下列问题：
1.相当一段时间内，酵母菌的
增长符合哪种模型？
　符合“S”形曲线增长。
2.后期酵母菌数量下降的原因可能有哪些？
营养物质随着消耗逐渐减少，有害产物逐渐积累，培养液的pH等理化性质发生改变等。
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
——绘制曲线图
如图为探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验相关曲线，据图回答下列问题：
3.试着在下面坐标系中画出该酵母菌的增长速率的曲线。
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
——实验结论
实验结果
分析：
在有限的环境条件下，酵母菌种群数量的增长曲线呈“S”形。在恒定培养液中，当酵母菌种群数量达到K值后，还会转而下降直至全部死亡。
影响酵母菌种群数量增长的因素:
受培养液的成分、空间、pH、温度、
代谢产物等因素的影响。
探究·实践：培养液中酵母菌种群数量的变化
进一步探究：其他因素对酵母菌种群数量的影响。
①温度对酵母菌生长的影响
②营养物质对酵母菌生长的影响
试管 编号 培养液/mL 无菌水/mL 酵母菌母液/mL 温度
(℃)
1 10 — 0.1 28
2 10 — 0.1 5
3 — 10 0.1 28
酵母菌数
时间
习题巩固
A. 实验过程中酵母菌种群的年龄组成先是增长型,后是稳定型,最后变为衰退型
B. 种群数量在不同时间的增长速率可能相同
C. 本实验中不存在对照
D. 每次取样前应将培养瓶振荡摇匀
1.某学生在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，根据实验结果绘制出下图所示的曲线。有关分析错误的是(　　)
习题巩固
2.在进行酵母菌计数时，先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室上，然后用吸管吸取摇匀的培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余的培养液用滤纸吸去。稍待片刻，将计数板放在显微镜的载物台中央进行观察。下列相关叙述错误的是（）
A.稍等片刻再观察，是为了使酵母菌全部沉降到计数室底部便于观察计数
B.对培养液中的酵母菌逐个计数非常困难，可用抽样检测的方法进行估算
C.计数时，小方格内酵母菌过多难以计数，可将培养液适当稀释后再计数
D.实验中没有对酵母菌细胞进行染色，会导致活菌计数值小于活菌实际值
习题巩固
3.在放有5 mL培养液的培养瓶中放入少量酵母菌菌种，然后每隔一天统计一次酵母菌的数量。经过反复实验，得出如图所示的结果。下列有关这一结果的分析，不正确的是
A.酵母菌增长呈现出“S”形的原因可能与营养液浓度
　有关
B.酵母菌种群数量达到200时，种内竞争达到最大
C.在第4天至第6天中，种群的出生率与死亡率相当
D.该培养瓶内酵母菌种群的环境容纳量约为400

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