资源简介

(共18张PPT)
资料：治疗癌症常用的手段化疗---（化学疗法）
从社会中来
任务一：自主思考
结合所学，提供一种让该药物只作用于癌细胞而不伤及无辜的方案？
抗体
细胞毒素类药物
制备？
优点：高效杀伤肿瘤细胞
缺点：没有特异性，杀伤肿瘤的同时也损害健康细胞，
这限制了它在临床上的应用
细胞毒素类药物：
（ 提示：癌细胞对于机体而言，充当的是什么角色？
体内什么物质可与它特异性识别并结合呢？）
1、阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程
2、认同单克隆抗体在临床上有重要应用价值
学习目标
第2章 细胞工程
动物细胞融合技术与单克隆抗体
一.传统的抗体制备
向动物体内反复
注射某种抗原
刺激动物
产生抗体
从动物血清中分离所需抗体
产量低、
1、方法
2、缺点
制备特异性强的抗体思路：
1个B淋巴细胞
B淋巴细胞群
大量单一抗体
产生
克隆
(单克隆抗体）
做不到无限增殖
一种B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体
纯度低、特异性差
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
杂交细胞
融合
二：单克隆抗体制备过程
任务二：自主阅读P48-49图2-16，合作探究
阶段一：动物细胞融合
阶段二：分离出产生所需抗体的杂交细胞
阶段三：得到大量单克隆抗体
① 该过程中给小鼠注射抗原的目的？
② 诱导融合后的细胞类型？若仅考虑两两细胞融合呢？
④ 哪两条途径？
③ 具体做法？
培养骨髓瘤细胞
从脾中提取
多种B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
诱导融合
注射特定的抗原
阶段一：动物细胞融合
阶段二：得能产生所需抗体的杂交细胞
杂交瘤细胞
筛选
(多种)
---特定的选择培养基
(未融合、融合的具
有同种核的细胞死亡)
(既能迅速大量增殖，又能产生抗体)
克隆化培养和
抗体检测进行筛选
杂交瘤细胞
阶段二：得能产生所需抗体的杂交细胞
克隆化培养
抗体检测呈阳性
抗体检测
肿瘤抗原
阶段二：得能产生所需抗体的杂交细胞
杂交瘤细胞
筛选
(多种)
---特定的选择培养基
(未融合、融合的具
有同种核的细胞死亡)
抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（即为所需）
克隆化培养和
抗体检测进行筛选
杂交瘤细胞
(既能迅速大量增殖，又能产生抗体)
阶段三：得到大量单克隆抗体
体外培养
注射到小鼠腹腔内
细胞培养液提取
小鼠腹水中提取
抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞
单克隆抗体
单克隆抗体
杂交细胞
杂交瘤细胞
体外或体内培养
第一次筛选
骨髓瘤细胞
诱导融合
产生所需抗体的杂交瘤细胞
培养液、小鼠腹水
提取
B淋巴细胞
注射特定抗原
第二次筛选
任务三：构建单克隆抗体制备过程的流程图（文字+箭头）
细胞凋亡
①
ADC被细胞吞噬
②
⑤
ADC
抗体
药物
接头
到社会中去
抗体-药物偶联物(ADC)，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤
靶向运输药物,即通过特异性结合靶细胞表面的抗原，
将连接的药物输送到靶细胞。
思考：ADC的抗体所发挥的作用？
2015年，全球销售额排前十位的药物中，单克隆抗体药物就有5种。我国的单克隆抗体药物市场规模已达72亿元
1. 科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备出单克隆抗体。相关叙述正确的（ ）
A. 利用该单克隆抗体可以诊断是否感染 SARS病毒
B. 体外培养单个B淋巴细胞可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
D. 将纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，从小鼠血清中分离出的抗体为单克隆抗体
A
当堂检测
2.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”,能够用于杀死人体某些癌细胞,其过程如下图所示。“生物导弹”主要由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”。下列叙述错误的是(　　)
A.“脾脏中的细胞”是从经免疫处理的实验动物中获取的B淋巴细胞
B.杂交瘤细胞在培养瓶中培养时不会出现接触抑制的现象
C.“瞄准装置”是指能够特异性识别癌细胞的单克隆抗体
D.构成“弹头”的抗癌药物具有选择性杀伤癌细胞的功能
D
三：单克隆抗体的应用
四：单克隆抗体的优点：
能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备
诊断疾病
运载药物
作为药物治疗疾病
单克隆抗体的制备小结
（1）该过程中应用到的技术_______________________________________
（2）原理_______________________________________
（3）注射特定抗原的目的______________________________________________
（4）诱导融合的方法______________________________________
动物细胞融合、动物细胞培养
细胞膜的流动性、细胞增殖
对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到产生特定抗体的B淋巴细胞
PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法
（5）第一次筛选的目的______________________,如何筛选___________________________
筛选原理____________________________________________________
_____________________________
得杂交瘤细胞
用特定的选择培养基筛选
在选择培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长
单克隆抗体的制备小结
（6）杂交瘤细胞的特点__________________________________
（7）第二次筛选的目的________________________________________________
如何筛选__________________________________________________
选择抗体检测呈___性的杂交瘤细胞，即_____________ _____________
（8）抗体检测原理_______________________________________
获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
克隆化培养和抗体检测（进行多次筛选）
分泌的抗体能与特定的抗原结合
抗原和抗体能够特异性结合(分子水平的鉴定）
既能迅速大量增殖，又能产生抗体
（9）如何获取大量所需杂交瘤细胞__________________________________________
（10）如何获取单克隆抗体
①体外培养___________________________
②小鼠腹腔内培养_________________________
（11）单克隆抗体的优点_____________________________
_________________________________________________
（12）单克隆抗体的应用：_____________________________________________________
在体外条件下大规模培养（接种于培养液中）或注射到小鼠腹腔内增殖
从细胞培养液中获取
从小鼠腹水中获取
能准确地识别抗原的细微差异，
与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备
阳
运载药物、疾病诊断和病原体鉴定、作为药物治疗疾病
课堂小结

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