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(共23张PPT)
溶血性贫血相关检测
诊断学
学
习
目
标
知识目标：掌握溶血性贫血筛查检测的项目及临床意义。
能力目标：能分析溶血性贫血化验单。
素质目标：具有敬佑生命，关爱患者的良好职业素养。
学
习
内
容
一、溶血性贫血的筛查检测
二、红细胞膜缺陷的检测
三、红细胞酶缺陷的检测
四、珠蛋白生成异常的检测
五、自身免疫性溶血性贫血检测
一、溶血性贫血的筛查检测
1.参考值 <50mg/L（1～ 5mg/dl）
2.临床意义
（1） 血管内溶血时血浆游离血红蛋白明显增高；
（2） 血管外溶血时血浆游离血红蛋白不增高；
（3） 自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻度增高。
（一）血浆游离血红蛋白测定
一、溶血性贫血的筛查检测
1.参考值 0.7～ 1.5g/L（70～ 150mg/dl）
2.临床意义
（1）各种溶血时血清结合珠蛋白均有减低，血管内溶血时减低显著；
（2）肝脏病、传染性单个核细胞增多症、先天性无血清结合珠蛋白血症等可减低或消失；
（3）感染、创伤、恶性肿瘤、系统性红斑狼疮、糖皮质激素治疗等可有结合珠蛋白增高。
（二）血清结合珠蛋白测定
一、溶血性贫血的筛查检测
1.检测方法 生化法、电泳法
2.正常值 阴性
3.临床意义 阳性表示为严重血管内溶血
（三）血浆高铁血红素清蛋白测定
一、溶血性贫血的筛查检测
1.原理 铁离子在酸化的亚铁氰化钾溶液中生成蓝色的亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应。
2.正常值 阴性
3.临床意义
（1）慢性血管内溶血可呈现阳性，并持续数周；
（2）常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症，在溶血初期可阴性。
（四）含铁血黄素尿试验（Rous试验）
一、溶血性贫血的筛查检测
1.原理 用51Cr标记红细胞检测红细胞半衰期。
2.正常值 正常红细胞半衰期为25～ 32天。
3.临床意义 溶血性贫血时常小于15天，这是确定溶血性贫血的可靠方法。
（五）红细胞寿命测定
二、红细胞膜缺陷的检测
1.原理 红细胞在低渗氯化钠溶液中细胞逐渐膨胀甚至破裂而溶血。2.参考值
开始溶血： 0.42%～ 0.46%（4.2～ 4.6g/L） NaCl溶液
完全溶血： 0.28%～ 0.34%（2.8～ 3.4g/L） NaCl溶液
3.临床意义
（1）脆性增高： 遗传性球形细胞增多症、 温抗体型自身免疫性溶血性贫血等；
（2）脆性减低： 海洋性贫血、缺铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄疸等。
（一）红细胞渗透脆性试验
二、红细胞膜缺陷的检测
1.原理 红细胞孵育过程中，葡萄糖的消耗增加，贮备的ATP减少，导致红细胞膜对阳离子的主动传递受阻，钠离子在红细胞内集聚，细胞膨胀，渗透脆性增加。
2.参考值
未孵育： 50%溶血为4.00～ 4.45g/L NaCl
37℃孵育24h： 50%溶血为4.65～ 5.9g/L NaCl
3.临床意义
（1） 脆性增加：遗传性球形细胞增多症、遗传性椭圆形细胞增多症、遗传性非球形
细胞溶血性贫血等；
（2）脆性减低：珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞贫血等
（二）红细胞孵育渗透脆性试验
二、红细胞膜缺陷的检测
1.原理 红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，以维持红细胞内的
钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48小时，使ATP储备减少，钠泵
作用减弱，导致溶血增强。在孵育过程中，分别加入葡萄糖和ATP作为纠正物，并以
氯化钠溶液为对照，观察溶血是否能被纠正。
2.参考值
正常人红细胞经孵育48小时后，仅轻微溶血、溶血度<3.5%
加葡萄糖和加ATP孵育，溶血明显纠正，溶血度均<1%
（三）自身溶血试验及纠正试验
二、红细胞膜缺陷的检测
1.原理 红细胞内酶缺陷，葡萄糖酵解障碍，不能提供足量ATP，以维持红细胞内的
钠泵作用。病人红细胞无菌条件下在自身血浆中温育48小时，使ATP储备减少，钠泵
作用减弱，导致溶血增强。在孵育过程中，分别加入葡萄糖和ATP作为纠正物，并以
氯化钠溶液为对照，观察溶血是否能被纠正。
2.参考值
正常人红细胞经孵育48小时后，仅轻微溶血、溶血度<3.5%
加葡萄糖和加ATP孵育，溶血明显纠正，溶血度均<1%
（三）自身溶血试验及纠正试验
三、红细胞酶缺陷的检测
1.原理 在被检血液中加入亚硝酸钠使血红蛋白变成棕色的高铁血红蛋白，当血液中有足
量还原型辅酶Ⅱ（NADPH）时，棕色的高铁血红蛋白又被还原成亚铁型的血红蛋白。
2.参考值 高铁血红蛋白还原率>75%；高铁血红蛋白0.3～ 1.3g/L。
3.临床意义 减低：蚕豆病和伯氨喹型药物溶血性贫血病人由于G6PD缺陷，高铁血红蛋
白还原率明显下降。
（一）高铁血红蛋白还原试验
三、红细胞酶缺陷的检测
1.原理
抗坏血酸钠与HbO2反应产生H2O2，氰化钠能抑制过氧化氢酶使H2O2不被分解，于是H2O2与还原型谷胱甘肽（GSH）发生反应，产生氧化型谷胱甘肽（GSSG）,NADPH使GSSG再还原为GSH。如红细胞中催化NADPH形成的G6PD酶缺陷，则GSH产生减少，蓄积的H2O2会把亚铁型的HbO2氧化成棕色的高铁血红蛋白。
2.参考值
（1） 正常人血液要在4小时以上才变成棕色；
（2） 纯合子G6PD缺陷的血液变成棕色，在2小时内即变色，杂合子者要3～ 4小时变色。
（二）氰化物-抗坏血酸试验
三、红细胞酶缺陷的检测
1.原理
G6PD缺陷可致红细胞内的还原型谷胱甘肽（GSSG）含量减少，高铁血红蛋白增高，最后形成变性珠蛋白小体（Heinz bodies）。取G6PD缺陷者血液，然后加乙酰苯肼于被检血样及对照标本中， 37℃温育2～ 4小时，推薄血片，用1%煌焦油蓝染色。计算含5个或更多珠蛋白小体的红细胞百分率。
2.参考值 <30%
3.临床意义 G6PD缺陷病、不稳定Hb、 HbH病等Heinz bodies常高于45%
（三）变性珠蛋白小体生成试验
四、珠蛋白生成异常的检测
1.原理
在一定的PH缓冲液中，缓冲液的PH大于Hb等电点，其带负电，在电场中向阳极移动；反之向阴极移动。
2.参考值 正常人的电泳图谱显示4条区带，最靠阳极端的为量多的HbA，其后为量少的HbA2，再后为两条量更少的红细胞内的非血红蛋白成分（NH1和NH2）。
3.临床意义
（1） HbA2增高 是诊断β轻型地中海贫血的重要依据
（2） HbA2减低 缺铁性贫血及铁粒幼细胞贫血HbA2减低
（一）血红蛋白电泳
四、珠蛋白生成异常的检测
1.原理
在碱性溶液中， HbF不易变性沉淀，其他Hb在碱性溶液中可变性被沉淀。测定其滤液中Hb含量，即HbF含量。
2.参考值 成人<2%。新生儿55%～ 85%， 1岁左右同成人。
3.临床意义
增高： β地中海贫血明显增高，重型者高达80%～ 90%。 急性白血病、再生障碍性贫血、纯红白血病、淋巴瘤等也可轻度增高。
（二） 胎儿血红蛋白测定或HbF碱变性试验
五、自身免疫性溶血性贫血检测
1.原理
抗球蛋白抗体可与多个不完全抗体的Fc段相结合起链接或桥接作用，导致红细胞凝集可被观察到，称为抗球蛋白试验（Coombs test）阳性。
直接Coombs试验阳性说明红细胞表面已结合有不完全抗体。
间接Coombs试验阳性则说明病人血清中存在着不完全抗体。
2.参考值 直接、间接抗球蛋白均呈阴性反应。
（一）抗球蛋白试验
五、自身免疫性溶血性贫血检测
3.临床意义
（1） 阳性： 新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血、 SLE、类风湿关节炎等。
（2） 温抗体与冷抗体： AIHA大多属于温抗体型
（3） 抗体亚型： AIHA大多为IgG型抗体
（4） 间接Coombs试验： 主要用于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血病、母体血清中不完全抗体的检测。
（一）抗球蛋白试验
五、自身免疫性溶血性贫血检测
1.原理
冷凝集素是一种可逆性抗体，在低温时可与自身红细胞、 “O” 型红细胞或与病人同型红细胞发生凝集，当温度增高时，凝集现象又消失。
2.参考值 效价<1∶40，反应最适温度为4℃。
3.临床意义 某些AIHA病人的冷凝集素效价很高，有的效价可达64000或更高。
（二）冷凝集素试验
思
政
启
迪
生命是珍贵的，也是脆弱的，像我们的红细胞一样遇到一些内外因素会碎裂，敬佑生命，关爱患者，我们该怎么做？
1.溶血性贫血常用的筛选试验是
A. 蔗糖溶血试验
B. 红细胞渗透脆性试验
C. 骨髓细胞学检查
D. 网织红细胞计数
E. 血红蛋白含量
答案：A
医
考
链
接
2.血管内溶血时． 下述检查指标中哪一项最敏感
A. 血清结合珠蛋白减少
B. 血浆高铁血红素白蛋白血症
C. 尿游离血红蛋白阳性
D. 血浆凝乳素降低
E. 尿含铁血黄素阳性
答案：A
医
考
链
接

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