资源简介

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子项目一 目视比色技术
子项目二 紫外-可见分光光度技术
项目八 吸光光度分析技术
本章学习目标
知识目标
1．了解光的本质与光吸收曲线。
2．理解光的吸收定律。
能力目标
1．学会分光光度计的使用方法。
2．学会用目视比色法和分光光度法进行杂质限量检查或含量测定的方法。
吸光光度分析技术是通过测定物质在特定波长处或一定波长范围内的吸光度，对该物质进行定性、定量的分析方法。
这类分析方法是基于物质对光的选择性吸收，其理论依据是光的吸收定律。具有灵敏度高、准确度高、操作简便、测定快速、应用范围广等优点。
☆ 能力标准 ☆
任务1 葡萄糖中铁盐的检查
要 求 学会用目视比色法对葡萄糖中铁盐杂质进行限量检查，判断所含铁盐是否超过规定限量
任务2 碳酸氢钠中氯化物的检查
要 求 学会用比浊法对碳酸氢钠中的氯化物杂质进行限量检查，判断所含氯化物是否超过规定限量
子项目一 目视比色技术
一、光的本质与溶液颜色的关系
光是一种电磁波，具有波动性和微粒性。通常，把肉眼能感觉到的光称为可见光，波长约为400～760 nm。如果让一束白光通过三棱镜，白光就色散为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等七种不同颜色的光。
具有一种颜色的光，称为单色光；这七种颜色的光混合成的白光称为复合光。
子项目一 目视比色技术
一、光的本质与溶液颜色的关系
不仅七种单色光可以混合成白光，如果把适当颜色的两种单色光按一定的强度比例混合，也可以成为白光。这两种单色光，称为互补色光。
溶液的颜色就是它所吸收光的互补色，如KMnO4溶液因吸收白光中的绿色而呈现紫色。
子项目一 目视比色技术
二、吸收光谱
以波长λ为横坐标，以吸光度A为纵坐标，绘制出的曲线，称为吸收光谱曲线。
在吸收光谱曲线上，光吸收程度最大处的波长称为最大吸收波长，用λmax表示。
溶液浓度不同，吸光度A也不同，但吸收曲线的形状相同，最大吸收波长也不变。
子项目一 目视比色技术
三、光的吸收定律
当一束平行的单色光I0 透过均匀、无散射的溶液时，一部分被吸收Ia，另一部分透过溶液It ，即
子项目一 目视比色技术
1．透光率（T）和吸光度（A）
通常，用It /I0 表示光线透过溶液的能力，又称透光率，用T 表示。
三、光的吸收定律
朗伯-比尔定律是光吸收的基本定律，是吸光光度分析定量计算的理论基础。朗伯-比尔定律的数学表达式：
A＝EcL
子项目一 目视比色技术
2．朗伯-比尔定律
式中 E—吸光系数
c—吸光物质的浓度
L—吸收层厚度
波长一定时，溶液浓度1%（g·mL-1），液层厚度1cm的吸光度，E又称百分吸光系数。
四、目视比色法
（1）将一系列不同体积的标准溶液依次加入纳氏比色管中，然后分别加入等量的显色剂及其他试剂，再稀释至相同体积，这样就形成了一套颜色逐渐加深的标准色阶。
子项目一 目视比色技术
直接用眼睛观察，比较溶液颜色深浅以确定物质含量的方法，称为目视比色法。常用的是标准系列法。
四、目视比色法
（2）将一定量的待测试液置于另一比色管中，在同样条件下显色，并稀释至相同体积。
子项目一 目视比色技术
四、目视比色法
（3）如果待测溶液与标准色阶中某一标准溶液颜色深度相同，则待测溶液的浓度就与该比色管中标准溶液的浓度相等；
如果试液颜色深度介于相邻两个标准溶液之间，则待测溶液的浓度也就介于这两个标准溶液的浓度之间。
子项目一 目视比色技术
☆ 能力标准 ☆
任务1 土霉素的鉴别
要 求 学会用分光光度计测定最大吸收波长，根据最大吸收波长对土霉素进行定性鉴别
任务2 维生素B2的含量测定
要 求 学会用分光光度计测定吸光度，并根据吸光系数对测定结果进行计算
任务3 磷的含量测定
要 求 学会工作曲线的绘制和用分光光度技术测定物质含量的方法
子项目二 紫外-可见分光光度技术
一、紫外-可见分光光度计
子项目二 紫外-可见分光光度技术
各种型号的紫外-可见分光光度计，基本结构都是由光源、单色器、吸收池、检测器及信号处理系统等主要部件组成。
二、定性与定量分析方法
子项目二 紫外-可见分光光度技术
（1）取与被测组分相同的标准品，配制一系列浓度不同的标准溶液，相同条件下，测吸光度。
（2）绘制标准曲线（A- c曲线）。
（3）样品溶液相同条件下测吸光度。
（4）从标准曲线上查出与此吸光度对应的样品溶液的浓度。
1．标准曲线法
Ax
cx
二、定性与定量分析方法
子项目二 紫外-可见分光光度技术
相同条件下，分别测定样品溶液和标准溶液的吸光度。根据朗伯-比尔定律，则
2．对照法
由于是同一种物质，用同台仪器、相同厚度的吸收池在同一波长处测定，因此
二、定性与定量分析方法
子项目二 紫外-可见分光光度技术
吸光系数是物质的特性常数之一。中国兽药典均采用百分吸光系数法。
3．吸光系数法
☆ 行业规范 ☆
吸收度的准确度常用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取干燥至恒重的基准重铬酸钾，用硫酸溶液溶解并稀释，在规定波长处测定并计算其吸收系数，并与规定的吸收系数比较，相对偏差应在±1%以内。
子项目二 紫外-可见分光光度技术
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