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哈尔滨市第九中学2023—2024学年度高二下学期4月份考试生物学科试卷
（考试时间：90分钟 满分：100分 共9页）
I卷 选择题（50小题，共60分）
一、单项选择题（共45小题，1-40小题，每小题1分，41-45小题，每小题2分，共50分）
1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ）
A. 传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵
B. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种
C. 传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得
D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题
【答案】B
【解析】
【分析】
发酵是利用微生物，在适宜的条件下，将原料经过特定的代谢途径转化为人类所需要的产物的过程。
【详解】A、发酵前需对菌种扩大培养，传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵，A正确；
B、现代发酵工程所用大多为单一菌种，有杂菌污染影响产量，培养基和设备需严格灭菌；而传统发酵技术很难实现单一菌种的利用，B错误；
C、传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得，如果醋、泡菜制作可分别利用的醋酸菌和乳酸菌发酵获得，C正确；
D、发酵工程产物无论是代谢物还是菌体本身，都需要进行质量检查，合格后才能成为正式产品，而传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题，D正确。
故选B。
2. 某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是（　　）
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A. ①③ B. ②④ C. ②③ D. ①④
【答案】B
【解析】
【分析】泡菜制作的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
【详解】参与泡菜制作的乳酸菌是厌氧型微生物，因此泡菜腐烂的原因可能是②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖，但④促进了其他好氧微生物的生长繁殖。
故选B。
3. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有纤维素作碳源的固体培养基（含刚果红）上培养，刚果红能与纤维素反应产生红色复合物，而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。看到如图2所示情况，下列有关叙述正确的是（　　）
A. 甲试管中的液体是液体培养基，作用是富集培养，②过程是为了筛选单菌落
B. I号培养基属于选择培养基，除需加入纤维素外，还需加入硝酸铵为其提供氮源
C. 同一稀释度下只需设置1个平板进行计数即可
D. 可挑取图2中周围不出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化
【答案】B
【解析】
【分析】 选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
【详解】A、甲中的液体是无菌水，不是液体培养基，目的是对样品进行稀释，A错误；
B、培养基应含有碳源、氮源、水和无机盐等，I号培养基属于选择培养基，要筛选纤维素分解菌，应该以纤维素为唯一碳源，还需加入硝酸铵为其提供氮源，B正确；
C、为减小实验误差，同一稀释度下通常需要设置3个平板，C错误；
D、刚果红能与纤维素形成红色复合物，若菌落周围出现透明圈，说明纤维素分解菌将纤维素进行了分解，可挑取该菌落用平板划线法继续纯化该菌体，D错误。
故选B。
4. 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（　　）
A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B. 接种环、接种针等金属用具，不可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌
C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
【答案】B
【解析】
【分析】微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，无菌操作分为消毒合灭菌，其中消毒只是杀死物体表面的微生物，而杀菌是杀死所有微生物，常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌。
【详解】A、常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法和紫外线消毒等，实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒，A正确；
B、接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层即外焰部位灼烧灭菌，B错误；
C、在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染，C正确；
D、使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境或感染操作者，D正确。
故选B。
5. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（　　）
A. 3号试管中样品液的稀释倍数为104倍
B. 对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍
C. 5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为1．7×108
D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
【答案】C
【解析】
【分析】从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。统计菌落数在30~300的平板，取其平均值，进行计数。计数公式为（C÷V）×M（C为平均菌落数，V为涂布液体积，M为稀释倍数）。
【详解】A、据图可知，3号试管的稀释倍数为104倍，A正确；
B、4号试管中稀释液进行平板培养，由于4号稀释倍数比5号的低10倍，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是5号的10倍，B正确；
C、5号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×106=1.7×109个，C错误；
D、稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低，D正确。
故选C。
6. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养，下列说法错误的是（　　）
A. 蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供碳源、氮源和维生素等营养成分
B. 在牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程中，需先调节pH后灭菌
C. 倒平板操作中，待平板温度下降到50℃左右时将平板倒过来放置
D. 大肠杆菌纯化培养的关键是要防止杂菌的污染
【答案】C
【解析】
【分析】1、将接种于培养基内，在合适条件下形成的含有特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。
2、微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
【详解】A、蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供碳源、氮源和维生素等营养，因为其组成元素中含有碳元素和氮元素，且其中含有维生素，A正确；
B、牛肉膏蛋白胨培养基应先调pH再经高压蒸汽灭菌，因为pH调节过程中也可引起杂菌污染，B正确；
C、倒平板操作中，待平板冷却凝固后将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止水蒸气倒流，而50℃左右时平板中的培养基可能呈流动状态，C错误；
D、大肠杆菌纯化培养可以采用平板划线法或稀释涂布平板法，获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，D正确。
故选C。
7. 如图是倒平板的操作，下列相关叙述错误的是（　　）
A. 正确的操作顺序是丙→乙→甲→丁
B. 甲应在酒精灯火焰附近进行
C. 此培养基不可能为液体培养基
D. 完成甲后应快速进行丁操作
【答案】D
【解析】
【分析】图中所示操作分别为：
甲：分装，乙：灼烧锥形瓶瓶口，丙：晃匀培养液，丁：倒置存放。
平板冷凝后培养皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面湿度较高，倒置平板既便于培养基表面水分蒸发，又能防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
【详解】A、倒平板的操作中，需要在无菌环境下操作，首先轻轻振荡灭菌后的锥形瓶，待冷却至50℃左右之后，然后在酒精灯附近灼烧锥形瓶瓶口灭菌，再在酒精灯附近进行倒平板操作，最后待培养基凝固后倒置存放，故正确的操作顺序为丙→乙→甲→丁，A正确；
B、培养基分装时，需要使锥形瓶的瓶口通过火焰，防止瓶口的微生物污染培养基，B正确；
C、图示操作为配置固体培养基的操作，C正确；
D、培养皿应冷却到50℃倒平板，此温度下不烫手，等到所到的平板凝固后，再进行丁的操作，D错误。
故选D。
8. 下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（ ）
A. ①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基
B. ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C. ③到④的过程中，接种环共灼烧了5次
D. ④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连
【答案】C
【解析】
【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。
【详解】A、①步骤表示倒平板，在倒平板之前，培养基已经调节过pH并灭过菌，A正确；
B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌污染，B正确；
C、接种环在每次划线前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以③到④的过程中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，③到④的过程中共需灼烧接种环6次，C错误；
D、④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连，否则就达不到稀释的目的，不能得到由单个细菌繁殖而来的菌落，D正确。
故选C。
9. 将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同温度的环境中，培养24小时后，所得结果如表：
编号 a b c d e f
处理方法 接种大肠杆菌 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X的圆纸片 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素Y的圆纸片 接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖 接种大肠杆菌 无接种菌
温度 40℃ 40℃ 40℃ 40℃ 0℃ 40℃
观察结果 全表面呈浑浊 纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊 全表面呈浑浊 全表面清晰 全表面清晰 全表面清晰
根据上述实验结果所作出的判断，错误的是（　　）
A. 编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊
B. 根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强
C. 将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长
D. 若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊
【答案】B
【解析】
【分析】表格分析：表中表示将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同的温度环境中，培养24小时后，观察所得的结果。比较a和f可知有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊；比较b和c可知抗生素X比抗生素Y的杀菌能力强；比较e和a可知0℃不适合大肠杆菌生长。
【详解】A、根据对照原则，a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌，比较a、f的观察结果，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊，同时说明所用培养基合格，A正确；
B、根据编号b和c的观察结果，含有X抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上，可观察到纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊，说明抗生素X能起到消灭大肠杆菌的作用，而含有抗生素Y的c组结果为全表面浑浊，说明抗生素Y基本不起抑制大肠杆菌的作用，即抗生素X比抗生素Y的杀菌能力强，B错误；
C、e、a形成对照，其自变量是温度，根据实验结果可知0℃不适合大肠杆菌生长，C正确；
D、f暴露在空气中后，会自然接种菌种，形成菌落，即24小时后培养基表面会出现浑浊，D正确。
故选B。
10. 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B. 与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多
C. c点时，可对堆肥取样并用角蛋白氮源培养基对微生物群进行培养和筛选
D. 若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线
【答案】D
【解析】
【分析】 微生物常见的接种的方法：
（1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、在堆肥过程中，微生物呼吸作用产生的热量积累，会导致其堆肥内部逐渐升高，A正确；
B、a点温度较低且微生物的分解作用刚刚开始，此时堆肥材料中的微生物的数量相对较少，b点时经过一段时间的代谢和增殖，b点处微生物的数量比a点多，b点到c点过程中，堆肥温度逐渐升高，并达到80℃左右，该温度条件下不耐热的微生物大量死亡，所以c点时微生物的种类数少于b点，B正确；
C、筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效降解角蛋白，所以在c点取样，并且用角蛋白氮源培养基进行选择培养，C正确；
D、采用平板划线法分离微生物，不需要对取样原液进行适当稀释，通过连续多次划线即可达到分离微生物的目的，D错误。
故选D。
11. 发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是（　　）
A. 首先要对发酵设备和培养基严格灭菌
B. 要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵过程
C. 在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分
D. 要严格控制温度、pH，溶解氧等发酵条件
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。
【详解】A、为防止杂菌污染，发酵时首先要对发酵设备和培养基严格灭菌，A正确；
B、为了解发酵过程，要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，B正确；
C、在发酵过程中需要向装置中再添加必需的营养组分，C错误；
D、为保证发酵过程的顺利正常进行，要严格控制温度、pH、溶解氧等发酵条件，D正确。
故选C。
12. 下列有关发酵工程及其应用的叙述，正确的是（　　）
A. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
B. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来
C. 酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
D. 啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成
【答案】C
【解析】
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
【详解】A、用单细胞蛋白制成的微生物饲料，其中的单细胞蛋白是微生物菌体，并不是通过发酵工程从微生物细胞中提取获得，A错误；
B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；
C、酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，C正确；
D、啤酒发酵过程中糖分解和代谢物的生成主要在主发酵阶段完成，D错误。
故选C。
13. 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌
B. 筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
C. 图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D. 经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常用的接种方法：稀释涂布平板法和平板划线法。
【详解】A、土壤中才含有能降解该除草剂的细菌，是基因突变的结果，不是长期使用除草剂的结果，A错误；
B、筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源，B正确；
C、平板划线法不能用于细菌计数，稀释涂布平板法可以，C错误；
D、经过一段时间的培养，培养皿中也会存在无透明圈的菌落，D错误。
故选B。
14. 品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（ ）
A. 过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗
B. 过程B中常用PEG诱导原生质体融合
C. 过程C中只有融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长
D. 杂种植株的抗除草剂基因遵循孟德尔遗传定律
【答案】D
【解析】
【分析】题图分析：该图为体细胞杂交过程，其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的抗性基因和甲品种的控制多种优良性状的核基因。
【详解】A、顶端分生组织几乎不带毒，因此，过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；
B、流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，B处理可使用聚乙二醇促融，B正确；
C、过程C中只有融合细胞活性部位互补，具有完整的细胞结构，才正常生长，然后将获得的杂种细胞进行组织培养获得杂种植株，C正确；
D、抗除草剂基因不一定插入到细胞核内的染色体上，所以杂种植株的抗除草剂基因不一定遵循孟德尔遗传定律，D错误。
故选D。
15. 下面是有关啤酒的工业化生产的流程。下列有关叙述不正确的是（ ）
发芽→焙烤→碾磨→糖化→蒸煮→发酵→消毒→终止
A. 啤酒的发酵过程包括主发酵和后发酵两个阶段
B. 发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵
C. 发酵的过程就是酵母菌进行有氧呼吸的过程
D. 消毒的目的是杀死啤酒中的大多数微生物，以延长它的保存期
【答案】C
【解析】
【分析】啤酒发酵过程充分地利用了酵母的特性，在发酵开始时，让酵母在溶氧麦汁中大量繁殖，并积累能量，保证了在无氧条件下产生乙醇所需要的菌体数量和能量需要，接入酵母的麦汁进入前发酵后，酵母经过数小时生长带缓期后，才能开始进入生长繁殖，当细胞浓度达到2×107个/ml。麦汁表面开始气泡，这个阶段被称为前发酵，后发酵又称贮酒，其目的是完成残糖的最后发酵，增加啤酒的稳定性，饱充CO2，充分沉淀蛋白质，澄清酒液。
【详解】A、根据分析，啤酒的生产包括主发酵和后发酵两个阶段，A正确；
B、发芽过程产生淀粉酶将淀粉分解成葡萄糖，作为无氧呼吸的底物用于产生酒精，B正确；
C、发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程，C错误；
D、生产啤酒时，为了抑制其他微生物的生长提高啤酒的品质，需要对原料和设备进行消毒和灭菌，以延迟保存期，D正确。
故选C。
16. 植物组织培养依据的原理、培养基本过程的顺序及诱导的植物激素分别包括（　　）
①植物细胞的全能性②离体的植物器官、组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分裂素⑤生长素和乙烯⑥愈伤组织⑦再分化⑧脱分化⑨完整植株
A. ①、②⑦⑥⑧③⑨、④ B. ①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C. ①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ D. ①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
【答案】B
【解析】
【分析】植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性，即已经分化的细胞仍然具有发育成完整植株的潜能；培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化形成根、芽等器官进而形成新的植物体。
【详解】植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，即①；
植物组织培养的过程是将离体的植物器官、组织或细胞经脱分化过程形成愈伤组织，之后经再分化过程形成根、芽，最终发育成完整的植物体，即②⑧⑥⑦③⑨；
决定植物细胞脱分化和再分化的关键因素是生长素和细胞分裂素的浓度和比例，即④。
综上分析可知，B正确。
故选B。
17. 如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术体现了植物细胞膜的功能特点
B. 愈伤组织的代谢类型是自养需氧型
C. 上述培育过程中包含有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程
D. “白菜一甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术；
2、植物组织培养：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
【详解】A、植物体细胞杂交技术体现了植物细胞膜的结构特点，即细胞膜具有一定的流动性，A错误；
B、愈伤组织不含叶绿体，不能进行光合作用制造有机物，因此其代谢类型是异养需氧型，B错误；
C、题述过程中包含有丝分裂，细胞分化，没有减数分裂，C错误；
D、“白菜—甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体数目变异，D正确。
故选D。
18. 试管苗、试管婴儿和克隆羊均属于生物工程的杰出成果，下面叙述正确的是
A. 都属于无性生殖，完全保持母本性状
B. 都充分体现了体细胞的全能性
C. 均需在细胞水平进行操作
D. 都不会发生基因重组
【答案】C
【解析】
【详解】A、培育试管苗利用的是植物组织培养技术，属于无性生殖，能保持亲本的性状；试管婴儿利用的是体外受精植、体外胚胎培养和胚胎移植技术，属于有性生殖，不一定能保持亲本的优良性状；克隆羊是利用体细胞核移植、体外胚胎培养和胚胎移植技术，属于无性生殖，其子代性状受提供细胞核的亲本与提供细胞质的亲本共同控制，A错误；
B、试管苗的培育体现了植物细胞的全能性，克隆动物培育体现了动物细胞核具有全能性，试管婴儿是有性生殖过程，没有体现细胞的全能性，B错误；
C、试管苗、试管婴儿和克隆羊均需在细胞水平进行操作，C正确；
D、试管婴儿是有性生殖过程，会发生基因重组，D错误。
故选C。
19. 如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（ ）
A. 乳腺细胞的 B. 卵细胞的
C. 胃腺细胞的 D. 囊胚时期的胚胎细胞的
【答案】B
【解析】
【分析】动物核移植的概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。
【详解】1、乳腺细胞、胃腺细胞和囊胚时期的胚胎细胞都含有2个染色体组，经过核移植获得克隆动物。
2、卵细胞只含有1个染色体组，核移植后获得单倍体，对于绝大多数二倍体动物而言，单倍体不能存活。
故选B。
点睛】
20. 下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）
①核移植中细胞核和细胞质来源　
②动物细胞融合中的两个细胞　
③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体　
④植物体细胞杂交中两个体细胞
A. ①②③④ B. ③ C. ①②③ D. ②③
【答案】B
【解析】
【详解】核移植中细胞核和细胞质的来源可以是不同物种，如我国科学家童第周做的金鱼细胞核移植实验是将金鱼的细胞核移植到去核的角皮鱼卵内，①错误；动物细胞融合中的两个细胞可以来自不同物种，如人鼠细胞融合，②错误；牛胚胎移植中胚胎的供体与受体必须来自同一个物种，这样才不产生排斥反应，移植才成功，③正确；植物体细胞杂交中两个体细胞可来自不同物种，如番茄可与马铃薯杂交获得杂种植株，④错误。综上所述，B项正确，A、C、D三项均错误。
【点睛】解答此题的关键是围绕“一定要来自同一个物种”这一信息作为解题的切入点进行思考，结合所学的有关核移植、动物细胞融合、胚胎移植的生理学基础、植物体细胞杂交技术的知识分析各选项，不难得出正确的答案。本题的易错点在于：误认为动物细胞核移植技术中细胞核和细胞质需来自同一物种，解答此题的关键在于课堂上教师是否进行相应的拓展。
21. 下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是
A. 图中②将发育为胎膜和胎盘等结构
B. 图中③可发育成胎儿的各种组织
C. 高等哺乳动物细胞分化开始于桑椹期，终止于生命结束
D. 胚胎从①中伸展出来的过程发生于囊胚期
【答案】C
【解析】
【分析】本题以“囊胚结构的示意图”为情境，考查学生对早期胚胎发育的过程等相关知识的识记和理解能力。
【详解】图示为胚胎发育过程中的囊胚阶段，其中②所示的滋养层细胞将发育为胎膜和胎盘等结构，A正确；③所示的内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织，B正确；高等哺乳动物细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，C错误；胚胎从①所示的透明带中伸展出来的过程发生于囊胚期，D正确。
【点睛】识记和理解动物胚胎发育的具体过程，据此明辨图示胚胎所处的发育时期及数字所示的结构名称，进而分析判断各选项。
22. 双特异性抗体（BsAb）是一种能够同时结合两种抗原的抗体。CD19和CD47是淋巴瘤细胞广泛表达的表面标记物，CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在。研究人员将两种产生不同抗体的杂交瘤细胞融合成双杂交瘤细胞，最终得到了能同时结合CD19和CD47的BsAb，它可以结合同一靶细胞上两种不同的抗原，通过这种“双靶向”模式增强对肿瘤细胞的选择性，在体内体外实验中均可显著杀伤淋巴瘤细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 获得BsAb的过程中，筛选双杂交瘤细胞的依据是抗原抗体的特异性结合
B. 同时注射两种抗原后提取B细胞，获得大量同时分泌两种抗体的单个浆细胞
C. 若BsAb的部分结构发生改变，可能会导致治疗效果降低
D. 使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗
【答案】B
【解析】
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、获得BsAb的过程中，筛选双杂交瘤细胞的依据是其产生的抗体与相应抗原发生特异性结合，A正确；
B、浆细胞不能大量增殖，因此不可能获得大量同时分泌两种抗体的单个浆细胞，B错误；
C、若BsAb的部分结构发生改变，对癌细胞识别能力减弱，可能会出现治疗效果降低的情况，C正确；
D、CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在，使用BsAb可识别同时具有CD19和CD47的淋巴瘤细胞，而联合使用CD19单抗和CD47单抗，能杀伤淋巴瘤细胞的同时也可杀伤B淋巴细胞和正常细胞，因此使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗，D正确。
故选B。
23. 下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是
A. 动物细胞培养过程中，可用胃蛋白酶处理使细胞分散开
B. 通过动物细胞培养获得大量细胞，可体现动物细胞的全能性
C. 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
D. 动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵
【答案】C
【解析】
【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养的条件：
（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。
（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。
（3）温度和PH。
（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的PH）。
【详解】动物细胞培养的适宜PH是7.2-7.4，该pH下胃蛋白酶会失活，所以动物细胞培养过程中，应用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散并获得单个细胞，A错误；通过动物细胞培养获得大量细胞，应用了细胞增殖的原理，但不能证明动物细胞具有全能性，B错误；动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础，C正确；动物细胞培养选用的培养材料大多是动物早期胚胎组织或幼龄动物的组织器官，D错误。
故选C。
【点睛】本题考查动物细胞培养的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的具体过程，能结合所学的知识准确判断各选项。尤其是对全能性的理解是解题的关键。
24. 下列有关胚胎早期发育的说法，不正确的是（　　）
A. 胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化
B. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔
D. 原肠胚时期，胚胎进一步发育产生三个胚层
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎发育过程：
（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；
（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]；
（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；
（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。
【详解】A、孵化是指胚胎从透明带内伸展出来的过程，A正确；
B、受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目增多，但是有机物总量在不断减少，B错误；
C、胚胎发育到囊胚期时，胚胎内部逐渐出现囊胚腔，C正确；
D、原肠胚时期进一步分化产生三个胚层，包括外胚层、中胚层和内胚层，D正确。
故选B。
25. 下列关于胚胎分割技术的说法，错误的是（ ）
A. 被分割的胚胎应该是发育良好的早期胚胎
B. 要将内细胞团均等分割的原因是防止由分割而来的两个体遗传物质差异过大
C. 来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质
D. 胚胎分割是进行动物克隆的方法之一
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎分割：
1、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，经移植获得同卵双胚或多胚的技术；
2、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一，目前以二分胚的分割和移植效率最高；
3、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚；
4、对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育；
5、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低.
【详解】A、被分割的胚胎应该是发育良好的桑椹胚或囊胚，A正确；
B、因为内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，因此在分割时一定要注意将其均等分割。否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，B错误；
C、胚胎内的细胞由同一受精卵发育而来，因此来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，C正确；
D、胚胎分割技术是最常见的动物克隆方法之一，D正确。
故选B。
26. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
【答案】C
【解析】
【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃+0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2 （维持培养液的pH）。
【详解】A、动物细胞培养时，为防止培养过程发生污染要加入抗生素，A正确；
B、每隔一段时间更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害（补充细胞所需营养物质），B正确；
C、据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，与浓度和作用时间都呈正相关，C错误；
D、图乙的结果进一步表明，随着华蟾素浓度的增加，处于间期的细胞增多，则华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞进入分裂期，可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制 ，D正确。
故选C。
27. 科学家将人体皮肤细胞改造成了多能干细胞——“iPS细胞”，人类“iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS细胞”说法正确的是 （　　）
A. iPS细胞分化为神经细胞的过程体现了细胞的全能性
B. iPS细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具细胞周期
C. iPS细胞可分化形成多种组织细胞，说明“iPS细胞”在分裂时很容易发生突变
D. iPS细胞分化成人体多种组织细胞，是因为它具有不同于其他细胞的特定基因
【答案】B
【解析】
【详解】A 、“iPS细胞”是一种多能干细胞，而多能干细胞既能分裂又能进行细胞分化。细胞的全能性应该体现在由该细胞形成新个体的过程中。A错误；
B、高度分化的细胞如神经细胞等是不能再进行细胞分裂的，不能进行有丝分裂的细胞是不具有细胞周期的。B正确；
C、“iPS细胞”分化成多种组织是基因选择性表达的结果，不是基因突变，C错误；
D、多细胞生物的各个体细胞由于源自一个受精卵，具有相同的遗传信息。D错误
故选B。
28. 下列有关哺乳动物的受精卵形成过程的叙述正确的是（ ）
①精子必须获能后才能完成受精
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解透明带、卵细胞膜
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅱ
④精子和卵子的细胞核经过相关生理过程，分别形成雄原核和雌原核
⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带迅速发生生理反应阻止后来的精子进入透明带
A. ①②⑤ B. ②③④ C. ①④⑤ D. ②④⑤
【答案】C
【解析】
【分析】受精作用过程：
a、顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠；
b、透明带反应：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应（它是防止多精子入卵受精的第一道屏障）；
c、卵细胞膜反应：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程（它是防止多精子入卵受精的第二道屏障）；
d、精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核；e、雌、雄原核融合形成合子。
【详解】①精子必须获能后才能与卵子完成受精，①正确；
②精子与卵子接触，释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构（如透明带），②错误；
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅰ，还没有完成减数分裂Ⅱ，③错误；
④受精过程中，精子和卵子的细胞核经过相关生理过程，精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核，④正确；
⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，卵子发出指令，透明带迅速发生生理反应阻止后来的精子进入透明带，⑤正确。
综上所述，叙述正确的是①④⑤，ABD错误，C正确。
故选C。
29. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
B. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
C. 为避免代孕丙牛对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂
D. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
【答案】A
【解析】
【分析】分析图解：图示过程为体细胞克隆过程，取乙牛体细胞，对处于减数第二次分裂中期的卵母细胞去核，然后进行细胞核移植；融合后的细胞激活后培养到早期胚胎，再进行胚胎移植，最终得到克隆牛。
【详解】A、动物细胞培养中需要提供95%空气（保证细胞的有氧呼吸）和5%CO2（维持培养液的pH）的混合气体，A正确；
B、过程②（去核）常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，B错误；
C、受体子宫一般不会对植入胚胎产生排斥反应，因此不需要给代孕牛注射免疫抑制剂，C错误；
D、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，D错误。
故选A。
30. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（ ）
A. 制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁
B. 聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合
C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中
D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号”
【答案】C
【解析】
【分析】植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，甚至科间的原生质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。植物细胞具有细胞壁，未脱壁的两个细胞是很难融合的，植物细胞只有在脱去细胞壁成为原生质体后才能融合，所以植物的细胞融合也称为原生质体融合。
【详解】A、制备原生质体时需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，A错误；
B、灭活的病毒不能用于植物原生质体的诱导，B错误；
C、雄性不育的胞质杂种华柚2号的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C正确；
D、GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中，而融合后的华柚2号不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。
故选C。
31. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（　　）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
【答案】B
【解析】
【分析】胚胎移植的基本程序：①对供、受体的选择和处理（用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。
【详解】A、胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵，A错误；
B、A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才具有受精能力，C的精子获能后才能发生受精，B正确；
C、D受体雌性接受来自动物园亚洲黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和动物园亚洲黑熊♀A同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率，而野生亚洲黑熊♀B只需要提供体细胞，所以不需要同期发情处理，C错误；
D、E后代遗传物质来源于A和C，F后代遗传物质状来源于A和B，D错误。
故选B。
32. 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线，下列叙述错误的是（ ）
A. 捐赠者的卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
C. 该技术可以有效避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
【答案】B
【解析】
【分析】1、分析题图：图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了动物细胞核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。
2、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。原理是动物细胞核具有全能性，克隆动物的遗传物质来自双亲，其核遗传物质来自供核生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物。
【详解】A、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，A正确；
B、献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，B错误；
C、母亲为“三亲婴儿“提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，C正确；
D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自卵母细胞捐献者，所以“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，D正确。
故选B。
33. 下列关于动物细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是（ ）
A. 目前在实验中，科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体
B. 核移植得到的克隆动物一般不存在健康问题
C. 利用动物细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的动物个体
D. 核移植过程中的受体细胞最好是受精卵
【答案】C
【解析】
【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。
【详解】A、由于动物细胞的全能性受限制，目前在实验中，科学家还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，A错误；
B、克隆技术并没有完全成熟，大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题，B错误；
C、生物的性别由为与细胞核内的性染色体上的基因决定的，利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜，C正确；
D、体细胞核移植过程中通常用去核的卵细胞作为受体细胞，D错误。
故选C。
34. 下图表示利用植物体细胞杂交技术获得杂种植物白菜—甘蓝的过程，以下说法错误的是
A. ①过程表示利用酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程
B. ②过程常用聚乙二醇诱导原生质体融合
C. ③过程中高尔基体活动旺盛
D. 最终获得的杂种植物体细胞内含19条染色体
【答案】D
【解析】
【分析】①表示利用酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程；②表示诱导原生质体融合的过程，常用聚乙二醇进行诱导；③表示再生出新的细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织的过程；⑤表示再分化过程。
【详解】A、①表示利用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁获得原生质体的过程，故A正确；
B、②表示诱导原生质体融合的过程，常用聚乙二醇进行诱导，故B正确；
C、③表示再生出新细胞壁的过程，而植物细胞中的高尔基体与细胞壁的形成相关，所以该过程中高尔基体活动旺盛，故C正确；
D、最终获得的杂种植物体细胞内含有白菜-甘蓝的全部遗传物质，即含有38条染色体，故D错误。
故选D。
【点睛】
35. 下图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性
B. 过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层
C. 过程②中可利用聚乙二醇诱导卵裂球细胞发生融合
D. 过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，将白鼠的早期胚胎的卵裂球和黑鼠的早期胚胎的卵裂球放在一起培养，将形成嵌合胚胎，将嵌合胚胎发育至囊胚后移植到代孕母体内发育，可形成嵌合鼠。
【详解】A、嵌合鼠的培育依据的原理是细胞全能性，并没有进行基因重组，A错误；
B、过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的透明带，而滋养层属于早期胚胎的一部分，B错误；
C、过程②不需要诱导卵裂球细胞发生融合，C错误；
D、过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理，以保证受体与供体的生殖器官的生理变化是相同的，D正确。
故选D。
36. 我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述错误的是（ ）
A. 单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵母细胞经体外诱导培养获得
B. 体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C. 该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D. AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
【答案】D
【解析】
【分析】分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs)。
【详解】A、由单倍体囊胚1可获得孤雌单倍体胚胎干细胞，因此单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得，A正确；
B、血清等天然成分与细胞在体内需要的成分接近，含丰富的营养物质及各种生长因子等，因此体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分，B正确；
C、由于物种间存在生殖隔离，因此自然情况下，哺乳动物远亲物种间的配子往往无法完成受精作用，或者即便能完成也不能继续发育成个体，该项技术突破了生殖隔离，获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞，C正确；
D、该AdESCs是杂合二倍体胚胎干细胞，故含有2个染色体组，但小鼠-大鼠杂种细胞由体细胞融合产生，通常含有4个染色体组，因此两者染色体组数不同，D错误。
故选D。
37. 下列关于基因工程中载体的叙述，正确的是（　　）
A. 载体是基因工程所需的三种工具酶之一
B. 载体质粒中必须有抗生素抗性基因
C. 必须具有自我复制能力
D. 具有一个至多个限制酶切割位点，以便目的基因的插入
【答案】D
【解析】
【分析】作为基因工程中的载体应具备的条件： ①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组DNA的筛选； ③能在宿主细胞中稳定存在并复制； ④是安全的，对受体细胞无害。
【详解】A、载体是基因工程所需的三种工具之一，但载体不属于酶，A错误；
B、载体质粒中必须有标记基因，但不一定是抗生素抗性基因，B错误；
C、运载体应具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制，C错误；
D、载体具有一个至多个限制酶切割位点，以便插入目的基因，D正确。
故选D。
38. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（　　）
A. 获得外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA聚合酶
B. 导入外源基因的精子能与从卵巢中获取的卵细胞直接完成②过程
C. ②采用体外受精技术，受精的标志是观察到3个极体
D. ④过程是胚胎移植，需移植到同种生理状态相同的代孕雌鼠子宫中
【答案】D
【解析】
【分析】分析图示可知，图示为转基因鼠的制备过程，①过程是将标记的外源基因导入成熟的精子中，②过程是体外受精，③过程为早期胚胎培养，④过程为胚胎移植。
【详解】A、获得外源基因一般需要用到限制酶，构建基因表达载体用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶，A错误；
B、导入外源基因的精子需获能培养后才能与从卵巢中获取的卵细胞完成②过程，B错误；
C、多数哺乳动物的第一极体不会进行减数第一次分裂，因为不会形成两个第二极体，在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体作为受精标志，C错误；
D、④过程是胚胎移植，早期胚胎需移植到与供体有相同的生理基础的代孕雌鼠子宫内，以进行后续的胚胎发育过程，D正确。
故选D。
39. 关于下图所示黏性末端的叙述，正确的是（ ）
A. ①与③是由相同的限制酶切割产生的
B. DNA连接酶可催化①与③的连接
C. 经酶切形成④需要脱去2分子水
D. DNA连接酶与DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端
【答案】B
【解析】
【分析】1、限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。DNA连接酶把目的基因与运载体黏性末端连接起来，形成磷酸二酯键。
2、分析题图：①与③的黏性末端相同，有可能是由同种限制酶切割形成的。
【详解】A、不同限制酶切割生成的黏性末端也会相同，因此①与③不一定是由相同限制酶切割产生的，A错误；
B、由于①与③的黏性末端相同，所以DNA连接酶可催化①与③的拼接，B正确；
C、形成④需要断裂两个磷酸二酯键，因此需要消耗2分子的水，C错误；
D、DNA聚合酶作用于单个游离的脱氧核苷酸，D错误。
故选B。
【点睛】
40. 下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是（　　）
A. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开
B. 限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C. 序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同
D. T4 DNA连接酶和E.coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接
【答案】B
【解析】
【分析】1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：
（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。
（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。
（3）结果：形成黏性末端或平末端。注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。
2、DNA连接酶：
（1）根据酶的来源不同分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
（2）DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
【详解】A、用限制酶剪切获得一个目的基因时得到两个切口，有4个磷酸二酯键被水解，A错误；
B、限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，B正确；
C、-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同，都是4个，C错误；
D、T4DNA连接酶和E．coli DNA连接酶都能催化黏性末端的连接，只有T4DNA连接酶还可以连接平末端，D错误。
故选B。
41. 以下对于胚胎分割的描述，正确的有
①胚胎分割移植可产生基因型完全相同的新个体
②内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时最好将其均等分割，移植成功率才高
③只能对囊胚期细胞进行分割
④不仅内细胞团要均等分割，滋养层也要均等分割，否则不易成功
⑤胚胎分割移植属于有性生殖
⑥胚胎分割次数越多，产生的新个体也越多
A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项
【答案】B
【解析】
【详解】胎分割移植由于不改变细胞内的遗传物质，所以可产生基因型完全相同的新个体，①正确；内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时最好将其均等分割，移植成功率才高，②正确；对桑葚期和囊胚期细胞都可以进行胚胎分割，③错误；不仅内细胞团要均等分割，滋养层不发育成个体的组织器官，所以不要求均等分割，④错误；胚胎分割移植属于无性生殖，⑤错误；胚胎分割次数越多，得到的胚胎发育成功率越低，⑥错误；综上分析，正确选项有两项，选B。
42. 生物技术应用广泛，下列表述正确的是（ ）
A. 提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生根
B. 利用愈伤组织提取紫草宁等次生代谢物，该过程体现植物细胞的全能性
C. 杂交瘤细胞的培养过程中，会出现细胞贴壁和接触抑制现象
D. 单克隆抗体制备利用原理有：细胞膜流动性、细胞增殖、染色体数目变异
【答案】D
【解析】
【分析】单克隆抗体的制备过程：对小动物注射特定抗原，从该动物的脾脏中获取B淋巴细胞，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞(体内培养和体外培养)，最后获取单克隆抗体。
【详解】A、提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生芽，A错误；
B、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，从愈伤组织提取紫草宁等次生代谢物，没有体现细胞的全能性，B错误；
C、杂交瘤细胞具有癌细胞的特点，能无限增殖，不会发生接触抑制现象，C错误；
D、单克隆抗体制备过程中，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合原理是细胞膜的流动性，融合的细胞也进行了增殖，细胞融合后染色体数目加倍，所以也利用了染色体数目变异的原理，D正确。
故选D。
43. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　）
A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞
C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
【答案】A
【解析】
【分析】1、单克隆抗体制备的两次筛选：①利用选择培养基筛选得到杂交瘤细胞(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞) ：②进行抗体检测，筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
2、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，此时胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段。
【详解】A、单倍体育种时，F1的花药不需要筛选直接进行组织培养，之后用秋水仙素处理单倍体幼苗使染色体加倍后，再进行筛选，A错误；
B、制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞，B正确；
C、胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选，挑取质量好，活性强的胚胎进行培养或保存，可以提高胚胎移植成功的概率，C正确；
D、制备单克隆抗体时，在筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。上述筛选过程中涉及的抗体检测属于分子水平的筛选，所以，制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞，D正确。
故选A。
44. 甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关如图所示的黏性末端的说法，错误的是（　　）
A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的
B. 甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能
C. DNA连接酶的作用位点是b处
D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段
【答案】C
【解析】
【分析】据图可知，切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割)。
【详解】A、据图可知，切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割)，即甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产生的，A正确；
B、甲、乙的黏性末端互补，所以甲、乙可以形成重组DNA分子；甲、丙的黏性末端不互补，所以甲、丙无法形成重组DNA分子，B正确；
C、DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，而b处是氢键，C错误；
D、甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段为 ，其中没有切割产生甲的限制酶的识别序列及酶切位点，所以切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段，D正确。
故选C
45. “DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A. 裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B. 分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C. 沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度
D. 鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
【答案】D
【解析】
【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同（DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解度最低）；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。
3、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、裂解是加蒸馏水让细胞吸水涨破，释放出DNA等物质，A正确；
B、DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，能溶于2mol/L的NaCl溶液， 将溶液过滤，即可将混合物中的多糖、蛋白质等与DNA分离，B正确；
C、DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精，可以反复多次用酒精沉淀出DNA，提高DNA纯度，C正确；
D、将DNA溶解于NaCl，加入二苯胺试剂，沸水浴五分钟，待冷却后，能呈现蓝色，D错误。
故选D。
二、不定项选择题（5小题，每题至少有一个正确选项，每题2分，共10分）
46. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（ ）
A. ①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
B. 图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
D. 图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍
【答案】ABD
【解析】
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。这种技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面具有独特的优势。
【详解】A、①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合，PEG不具有诱导细胞壁再生的作用，A错误；
B、去除细菌细胞壁和植物细胞的细胞壁都可以用酶解法，但所用酶的种类不同；图中为细菌细胞的杂交过程，与植物体细胞杂交过程相比，诱导融合的方法不完全相同；图中过程与植物体细胞杂交所依据的原理均有细胞膜具有一定的流动性，但植物体细胞杂交还利用了植物细胞具有全能性的原理，将杂种细胞培育为杂种植物，B错误；
C、溶菌酶可以溶解细菌的细胞壁。离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体，C正确；
D、筛选到的融合株，还要从个体生物学水平检测其是否具有杀灭玉米螟和杀灭蚊子的能力，所以图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株既有苏云金杆菌的基因，又有灭蚊球孢菌的基因，但这两种生物是原核生物，不含染色体，D错误。
故选ABD。
47. 已知限制性内切核酸酶XmaI和SmaI的识别序列分别为C↓CCGGG和CCC↓GGG。下列有关这两种限制酶及应用的叙述，正确的是（　　）
A. 这两种限制酶作用的底物都是双链DNA，切开磷酸二酯键
B. 这两种限制酶切割后形成的末端不同
C. SmaI切割DNA后形成的末端可用E.coli DNA连接酶连接
D. 使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等
【答案】ABD
【解析】
【分析】DNA连接酶分为E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。DNA连接酶连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。
【详解】A、限制酶的作用是能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，所以限制酶作用的底物是双链DNA分子，A正确；
B、由题干可知，这两种限制酶识别的核苷酸序列相同，但切割的位点不同，XmaⅠ切割形成的是黏性末端，而SmaⅠ切割形成的是平末端，B正确；
C、SmaⅠ切割DNA后形成的是平末端，只能用T4DNA连接酶连接，E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，C错误；
D、温度能影响酶的活性，所以使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等，D正确。
故选ABD。
48. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（　　）
A. 动物细胞培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染
B. 可用机械的方法或酶处理动物组织，使其分散成单个细胞
C. 动物细胞生存的适宜的pH为7.3-7.5
D. 进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集
【答案】ABD
【解析】
【分析】1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
2、动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。
【详解】A、动物细胞培养液中应添加一定量的抗生素，以防培养过程中杂菌的污染，A正确；
B、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞，也可采用机械方法获得单个细胞，B正确；
C、动物细胞生存的适宜的PH为7.2-7.4，C错误；
D、进行传代培养时，悬浮培养的细胞处于游离状态，因而可直接用离心法收集，D正确。
故选ABD。
49. 关于胚胎早期发育，正确的是（ ）
A. 孵化前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段
C. 卵裂是有丝分裂和减数分裂
D. 进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，因为此时细胞还未分化
【答案】AB
【解析】
【分析】胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。（2）桑葚胚：32个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞]。（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]。（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度]。
【详解】A、孵化前，形成的受精卵在输卵管内开始进行卵裂，卵裂过程中胚胎的总体积基本不变或略有缩小，因此每个细胞的体积不断缩小，胚胎所含的有机物总量不断降低，A正确；
B、桑葚胚和囊胚的发育过程都是在透明带内完成的，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段，B正确；
C、卵裂进行的是有丝分裂，C错误；
D、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，囊胚时细胞已经发生分化，D错误。
故选AB。
50. 花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季柑桔（2N=18）花粉植株的过程示意图，有关叙述正确的是（　　）
A. 花粉植株培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养
B. 过程③是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达
C. 四种培养基均属于固体培养基，其中所含植物激素的浓度和比例有差异
D. 观察处于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体
【答案】AB
【解析】
【分析】花药离体培养是指将发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花药内花粉粒的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成胚状体，形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化成植株。而花粉离体培养是指将花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。由于花粉已是单倍体细胞，诱发它经愈伤组织或胚状体发育而成的植株都是单倍体，且不受花药的药隔、药壁、花丝等体细胞的干扰。可见花药离体培养与花粉离体培养是存在差异的，花药离体培养属器官培养，而花粉离体培养属细胞培养。不过两者的培养目的是一致的，都需要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成单倍体植株。
【详解】A、花粉细胞培育成单倍体植株，培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养，A正确；
B、由愈伤组织到从芽的过程是再分化，即过程③是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达，B正确；
C、图中四种培养基均为固体培养基，其差异主要表现在植物激素的种类和比例上，C错误；
D、观察处于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖细胞，其中染色体的数目为9条，因为花粉细胞是经过减数分裂产生的，其中染色体数目是正常体细胞染色体数目的一半，D错误。
故选AB。
Ⅱ卷 非选择题（4小题，共40分）
51. 经过不断努力，在2021年（牛年）春节期间，牦牛产业帮扶项目初见成效，甘南藏族自治州夏河县陆续迎来首批近10头特殊的贺岁“牛宝宝”——通过胚胎移植技术诞生的优质黑安格斯种牛。
（1）胚胎工程中任何一项技术获得的胚胎，最后还需通过________技术才能发育成后代个体。此技术对代孕受体的要求是______。因此要对安格斯牛和牦牛进行______处理。在项目实施过程中，促使安格斯牛多排卵的激素一般是______。
（2）当胚胎发育到_____阶段时，可植入牦牛体内，胚胎在此代孕母体内能存活的生理学基础是______。
（3）若需要获得多个此优良性状的胚胎，要将______均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
【答案】（1） ①. 胚胎移植 ②. 同种的、健康的、生理状态相同的其他雌性动物 ③. 同期发情 ④. 促性腺激素
（2） ①. 桑葚胚或囊胚 ②. 受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应
（3）内细胞团
【解析】
【分析】胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术．经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。
【小问1详解】
胚胎工程中获得的胚胎，都需要通过胚胎移植才能发育成后代个体。代孕受体一般要求是同种、健康的、生理状态相同的其他雌性动物。胚胎移植时，要对受体动物和供体动物进行同期发情处理，为胚胎移植入受体提供相同的生理状态，因此要对安格斯牛和牦牛进行同期发情处理。给优良母畜注射促性腺激素可促使其多排卵。
【小问2详解】
牛、羊一般要培养到桑葚胚阶段或囊胚阶段才能进行移植。受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，故外来胚胎可以在代孕母体内存活。
【小问3详解】
在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意将内细胞团均等分割，以保证分割后胚胎的恢复和进一步发育。
52. 据下面植物体细胞杂交技术流程图回答相关问题：
（1）若运用传统有性杂交（即用番茄、马铃薯杂交）能否得到杂种植株？为什么？_______。
（2）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是_________，依据的原理是______，其中过程②称为_______技术，该过程的原理是____。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为______，过程④相当于_________。
【答案】（1）不能，不同种的植物存在生殖隔离
（2） ①. 植物组织培养 ②. 细胞的全能性 ③. 原生质体融合 ④. 细胞膜的流动性 ⑤. 高尔基体 ⑥. 脱分化
【解析】
【分析】题图分析，图中①为酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程，②为促进原生质体融合的过程，③为再生细胞壁，意味着植物体细胞杂交成功，④为脱分化形成愈伤组织的过程，⑤再分化形成杂种幼苗的过程。
【小问1详解】
番茄和马铃薯属于两种植物，存在生殖隔离，不能通过有性杂交产生后代。
【小问2详解】
在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段为植物组织培养技术，依据的原理是植物细胞的全能性。过程②是把a、b两个原生质体融合在一起，所以称为原生质体融合，依据的原理是细胞膜的流动性。过程③是在融合的原生质体外再生一层细胞壁，而细胞壁的形成与高尔基体有关。过程④的结果是形成了愈伤组织，所以④为脱分化。
53. 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题。
（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的_________及时对培养基进行分装，并进行__________灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约______ （在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
（3）挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有_____。
a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和______供应。
【答案】 ①. pH ②. 高压蒸汽 ③. 50℃ ④. a、b、d ⑤. O2
【解析】
【分析】由图分析可知，①表示称量土样，土样中含有需要分离的酵母菌；②表示梯度稀释，目的是尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在；③表示倒平板，需要冷却到50℃左右，培养基才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基；④表示平板划线法，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落，目的是纯化培养；⑤表示扩大培养，获得更多的酵母菌。
【详解】（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基分装，并进行高压蒸气灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，步骤③是倒平板，故在步骤③中将温度约50℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
（3）a、为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌，以防止杂菌污染，a正确；
b、划线时应避免划破培养基表面，若划破培养基表面，会导致酵母菌大量聚集繁殖，从而不能形成正常菌落，b正确；
c、挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定培养液中甲醇的含量，c错误；
d、可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株，d正确。
故选abd。
（4）步骤⑤是酵母的扩大培养，目的是使酵母数量迅速增加，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，此过程中需保证充足的营养和氧气供应。
【点睛】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的制作和接种方法等知识，意在考查学生的识记能力和图形分析能力，运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。
54. 新型冠状病毒是一种RNA病毒，其表面的棘突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的黏附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图，请回答下列问题：
（1）步骤①必须给小鼠注射______，目的是______，取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。
（2）步骤④为诱导B淋巴细胞核骨髓瘤细胞融合，与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______诱导融合。融合操作后，体系中出现多种类型细胞的原因是______。
（3）步骤⑤选出的杂交瘤细胞______（填“有”或“无”接触抑制现象）。杂交瘤细胞在培养的过程中，要控制好气体环境，其中CO2的作用是______。
（4）进行步骤⑥的原因是______。步骤⑥含多次筛选，筛选依据的基本原理是______，步骤⑦是指从______获取大量的单克隆抗体，这种抗体的优点是______。
【答案】（1） ①. S蛋白##新冠病毒的S蛋白 ②. 诱导小鼠产生能够分泌S蛋白抗体的淋巴细胞
（2） ①. 灭活病毒 ②. 细胞融合是随机的，且融合率不到100%
（3） ①. 无 ②. 维持培养液的pH
（4） ①. 与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞有多种，杂交瘤细胞不一定能产生抗S蛋白的抗体 ②. 抗原与抗体的结合具有特异性 ③. 小鼠腹腔 ④. 特异性强、灵敏度高和可大量制备
【解析】
【分析】制备单克隆抗体的具体过程：用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生经过免疫的B淋巴细胞→诱导各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞→在选择性培养基中，未融合的骨髓瘤细胞、未融合的淋巴细胞死亡，只有融合的杂交瘤细胞存活和增殖→筛选和克隆化→单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
【小问1详解】
①过程是给小鼠注射新型冠状病毒的S蛋白，目的是诱导小鼠产生能够分泌抗S蛋白抗体的B淋巴细胞。
小问2详解】
由于细胞融合是随机的，且融合率达不到100%，故融合完成后，体系中出现多种类型细胞。
【小问3详解】
杂交瘤性细胞具有骨髓瘤细胞无限繁殖的特点，所以步骤⑤选出的杂交瘤细胞无接触抑制现象。杂交瘤细胞在培养的过程中，要控制好气体环境，气体环境主要是提供细胞所需的O2和CO2，其中CO2的作用是维持培养液的pH。
【小问4详解】
经过第一次筛选后，得到的是杂交瘤细胞，即和骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞有多种，杂交瘤细胞不一定能产生抗S蛋白的抗体，故获得的杂交瘤细胞还需要进行克隆化培养和抗体检测，以筛选得出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。步骤⑦是指从小鼠腹腔获取大量的单克隆抗体，从杂交瘤细胞中获得的抗体具有特异性强、灵敏度高和可大量制备的特点。哈尔滨市第九中学2023—2024学年度高二下学期4月份考试生物学科试卷
（考试时间：90分钟 满分：100分 共9页）
I卷 选择题（50小题，共60分）
一、单项选择题（共45小题，1-40小题，每小题1分，41-45小题，每小题2分，共50分）
1. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（ ）
A. 传统发酵常常是固体发酵或者是半固体发酵
B. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种
C. 传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得
D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题
2. 某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是（　　）
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A. ①③ B. ②④ C. ②③ D. ①④
3. 地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维素酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有纤维素作碳源的固体培养基（含刚果红）上培养，刚果红能与纤维素反应产生红色复合物，而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。看到如图2所示情况，下列有关叙述正确的是（　　）
A. 甲试管中的液体是液体培养基，作用是富集培养，②过程是为了筛选单菌落
B. I号培养基属于选择培养基，除需加入纤维素外，还需加入硝酸铵为其提供氮源
C. 同一稀释度下只需设置1个平板进行计数即可
D. 可挑取图2中周围不出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化
4. 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。下列叙述错误的是（　　）
A. 实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒
B. 接种环、接种针等金属用具，不可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌
C. 在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染
D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境
5. 如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是（　　）
A. 3号试管中样品液的稀释倍数为104倍
B. 对4号试管中的稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍
C. 5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为1．7×108
D. 该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低
6. 某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养，下列说法错误的是（　　）
A. 蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供碳源、氮源和维生素等营养成分
B. 在牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程中，需先调节pH后灭菌
C. 倒平板操作中，待平板温度下降到50℃左右时将平板倒过来放置
D. 大肠杆菌纯化培养的关键是要防止杂菌的污染
7. 如图是倒平板的操作，下列相关叙述错误的是（　　）
A. 正确的操作顺序是丙→乙→甲→丁
B. 甲应在酒精灯火焰附近进行
C. 此培养基不可能为液体培养基
D. 完成甲后应快速进行丁操作
8. 下图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（ ）
A. ①步骤使用的培养基是已经调节过pH并灭菌的培养基
B. ①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行
C. ③到④的过程中，接种环共灼烧了5次
D. ④步骤操作时，不能将第1区和第5区的划线相连
9. 将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同温度的环境中，培养24小时后，所得结果如表：
编号 a b c d e f
处理方法 接种大肠杆菌 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X的圆纸片 接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素Y的圆纸片 接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖 接种大肠杆菌 无接种菌
温度 40℃ 40℃ 40℃ 40℃ 0℃ 40℃
观察结果 全表面呈浑浊 纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊 全表面呈浑浊 全表面清晰 全表面清晰 全表面清晰
根据上述实验结果所作出的判断，错误的是（　　）
A. 编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊
B. 根据编号b和c观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强
C. 将编号e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长
D. 若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊
10. 堆肥指利用自然界广泛存在的微生物，有控制地促进固体废物中可降解有机物转化为稳定的腐殖质的生物化学过程。下图为堆肥处理时材料内部温度的变化曲线。若要从堆肥材料中筛选出能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 微生物呼吸作用释放的热量积累，导致堆肥内部温度逐渐升高
B. 与a点相比b点时微生物的数量较多，与c点相比b点时微生物种类较多
C. c点时，可对堆肥取样并用角蛋白氮源培养基对微生物群进行培养和筛选
D. 若采用平板划线法分离微生物，需对取样获得的原液进行适当稀释后再划线
11. 发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是（　　）
A. 首先要对发酵设备和培养基严格灭菌
B. 要随时取样，检测培养液的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵过程
C. 在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分
D. 要严格控制温度、pH，溶解氧等发酵条件
12. 下列有关发酵工程及其应用的叙述，正确的是（　　）
A. 用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
B. 菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来
C. 酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
D. 啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成
13. 在某地的农业生产中，研究人员发现了一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，且长期使用会导致土壤被污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下图程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂是一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 只有长期使用该除草剂的土壤中才含有能降解该除草剂的细菌
B. 筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
C. 图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D. 经过一段时间的培养，培养皿中应该只存在有透明圈的菌落
14. 品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。相关叙述错误的是（ ）
A. 过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗
B. 过程B中常用PEG诱导原生质体融合
C. 过程C中只有融合细胞具有完整的细胞结构，可以正常生长
D. 杂种植株的抗除草剂基因遵循孟德尔遗传定律
15. 下面是有关啤酒的工业化生产的流程。下列有关叙述不正确的是（ ）
发芽→焙烤→碾磨→糖化→蒸煮→发酵→消毒→终止
A. 啤酒的发酵过程包括主发酵和后发酵两个阶段
B. 发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵
C. 发酵的过程就是酵母菌进行有氧呼吸的过程
D. 消毒的目的是杀死啤酒中的大多数微生物，以延长它的保存期
16. 植物组织培养依据的原理、培养基本过程的顺序及诱导的植物激素分别包括（　　）
①植物细胞的全能性②离体的植物器官、组织或细胞③根、芽④生长素和细胞分裂素⑤生长素和乙烯⑥愈伤组织⑦再分化⑧脱分化⑨完整植株
A. ①、②⑦⑥⑧③⑨、④ B. ①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C. ①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤ D. ①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
17. 如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（ ）
A. 植物体细胞杂交技术体现了植物细胞膜的功能特点
B. 愈伤组织的代谢类型是自养需氧型
C. 上述培育过程中包含有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程
D. “白菜一甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异
18. 试管苗、试管婴儿和克隆羊均属于生物工程的杰出成果，下面叙述正确的是
A. 都属于无性生殖，完全保持母本性状
B. 都充分体现了体细胞的全能性
C. 均需在细胞水平进行操作
D. 都不会发生基因重组
19. 如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（ ）
A. 乳腺细胞的 B. 卵细胞的
C. 胃腺细胞的 D. 囊胚时期的胚胎细胞的
20. 下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ）
①核移植中细胞核和细胞质来源　
②动物细胞融合中的两个细胞　
③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体　
④植物体细胞杂交中两个体细胞
A. ①②③④ B. ③ C. ①②③ D. ②③
21. 下图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是
A. 图中②将发育为胎膜和胎盘等结构
B. 图中③可发育成胎儿的各种组织
C. 高等哺乳动物细胞分化开始于桑椹期，终止于生命结束
D. 胚胎从①中伸展出来的过程发生于囊胚期
22. 双特异性抗体（BsAb）是一种能够同时结合两种抗原的抗体。CD19和CD47是淋巴瘤细胞广泛表达的表面标记物，CD19在B细胞表面普遍存在，CD47在正常组织细胞上普遍存在。研究人员将两种产生不同抗体的杂交瘤细胞融合成双杂交瘤细胞，最终得到了能同时结合CD19和CD47的BsAb，它可以结合同一靶细胞上两种不同的抗原，通过这种“双靶向”模式增强对肿瘤细胞的选择性，在体内体外实验中均可显著杀伤淋巴瘤细胞。下列叙述错误的是（ ）
A. 获得BsAb的过程中，筛选双杂交瘤细胞的依据是抗原抗体的特异性结合
B. 同时注射两种抗原后提取B细胞，获得大量同时分泌两种抗体的单个浆细胞
C. 若BsAb的部分结构发生改变，可能会导致治疗效果降低
D. 使用BsAb治疗对正常细胞的损伤小于联合使用CD19单抗和CD47单抗
23. 下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是
A. 动物细胞培养过程中，可用胃蛋白酶处理使细胞分散开
B. 通过动物细胞培养获得大量细胞，可体现动物细胞的全能性
C. 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
D. 动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵
24. 下列有关胚胎早期发育的说法，不正确的是（　　）
A. 胚胎从透明带内伸展出来的过程称为孵化
B. 受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加
C. 胚胎发育到囊胚期时出现囊胚腔
D. 原肠胚时期，胚胎进一步发育产生三个胚层
25. 下列关于胚胎分割技术的说法，错误的是（ ）
A. 被分割的胚胎应该是发育良好的早期胚胎
B. 要将内细胞团均等分割原因是防止由分割而来的两个体遗传物质差异过大
C. 来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质
D. 胚胎分割是进行动物克隆的方法之一
26. 华蟾素注射液是我国经典抗肿瘤药物，研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌HepG-2细胞的作用机理，用华蟾素注射液和肝癌HepG-2细胞进行了一系列实验，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A. 为防止细胞培养过程发生污染，培养液中要加入抗生素
B. 每隔一段时间需更换1次培养液，目的是防止代谢物积累对细胞自身造成危害
C. 据图甲可知，华蟾素能有效地抑制肝癌HepG-2细胞增殖，且只与浓度呈正相关
D. 图乙的结果进一步表明，华蟾素的作用机理可能是抑制肝癌HepG-2细胞的DNA分子复制
27. 科学家将人体皮肤细胞改造成了多能干细胞——“iPS细胞”，人类“iPS细胞”可以形成神经元等人体多种组织细胞。以下有关“iPS细胞”说法正确的是 （　　）
A. iPS细胞分化为神经细胞的过程体现了细胞的全能性
B. iPS细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具细胞周期
C. iPS细胞可分化形成多种组织细胞，说明“iPS细胞”在分裂时很容易发生突变
D. iPS细胞分化成人体多种组织细胞，是因为它具有不同于其他细胞的特定基因
28. 下列有关哺乳动物的受精卵形成过程的叙述正确的是（ ）
①精子必须获能后才能完成受精
②获能精子与卵子相遇时释放的酶可溶解透明带、卵细胞膜
③卵子与精子结合前已完成减数分裂Ⅱ
④精子和卵子的细胞核经过相关生理过程，分别形成雄原核和雌原核
⑤精子触及卵细胞膜的瞬间，透明带迅速发生生理反应阻止后来的精子进入透明带
A. ①②⑤ B. ②③④ C. ①④⑤ D. ②④⑤
29. 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是（ ）
A. 过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体
B. 过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
C. 为避免代孕丙牛对植入胚胎产生排斥反应，应注射免疫抑制剂
D. 后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
30. 胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（ ）
A. 制备原生质体时需用胰蛋白酶或纤维素酶去除细胞壁
B. 聚乙二醇或灭活的病毒可用于诱导原生质体A和B的融合
C. “华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中
D. 应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号”
31. 近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体内授精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。以下说法正确的是（　　）
A. 胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵
B. A超数排卵排出的细胞必须生长到MII期才能与C的获能后的精子发生受精
C. D受体雌性必须和动物园亚洲黑熊♀A、野生亚洲黑熊♀B同期发情处理
D. E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B一致
32. 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线，下列叙述错误的是（ ）
A. 捐赠者的卵子去核实质是指去除细胞中的纺锤体—染色体复合物
B. 卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
C. 该技术可以有效避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
D. “三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
33. 下列关于动物细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是（ ）
A. 目前在实验中，科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体
B. 核移植得到的克隆动物一般不存在健康问题
C. 利用动物细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的动物个体
D. 核移植过程中的受体细胞最好是受精卵
34. 下图表示利用植物体细胞杂交技术获得杂种植物白菜—甘蓝的过程，以下说法错误的是
A. ①过程表示利用酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程
B. ②过程常用聚乙二醇诱导原生质体融合
C. ③过程中高尔基体活动旺盛
D. 最终获得的杂种植物体细胞内含19条染色体
35. 下图为科研人员利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的简要过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 嵌合鼠的培育依据的原理是基因重组和细胞全能性
B. 过程①中需利用相关技术去除早期胚胎外的滋养层
C. 过程②中可利用聚乙二醇诱导卵裂球细胞发生融合
D. 过程③操作前需对多只代孕母鼠进行同期发情处理
36. 我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述错误的是（ ）
A. 单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵母细胞经体外诱导培养获得
B. 体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C. 该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D. AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
37. 下列关于基因工程中载体的叙述，正确的是（　　）
A. 载体是基因工程所需的三种工具酶之一
B. 载体质粒中必须有抗生素抗性基因
C. 必须具有自我复制能力
D. 具有一个至多个限制酶切割位点，以便目的基因的插入
38. 目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法正确的是（　　）
A. 获得外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA聚合酶
B. 导入外源基因精子能与从卵巢中获取的卵细胞直接完成②过程
C. ②采用体外受精技术，受精的标志是观察到3个极体
D. ④过程是胚胎移植，需移植到同种生理状态相同的代孕雌鼠子宫中
39. 关于下图所示黏性末端的叙述，正确的是（ ）
A. ①与③是由相同的限制酶切割产生的
B. DNA连接酶可催化①与③的连接
C. 经酶切形成④需要脱去2分子水
D. DNA连接酶与DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端
40. 下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是（　　）
A. 用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开
B. 限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大
C. 序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同
D. T4 DNA连接酶和E.coli DNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接
41. 以下对于胚胎分割的描述，正确的有
①胚胎分割移植可产生基因型完全相同的新个体
②内细胞团一般到囊胚才出现，胚胎分割时最好将其均等分割，移植成功率才高
③只能对囊胚期细胞进行分割
④不仅内细胞团要均等分割，滋养层也要均等分割，否则不易成功
⑤胚胎分割移植属于有性生殖
⑥胚胎分割次数越多，产生的新个体也越多
A. 一项 B. 两项 C. 三项 D. 四项
42. 生物技术应用广泛，下列表述正确的是（ ）
A. 提高培养基中细胞分裂素和生长素的比值，有利于诱导生根
B. 利用愈伤组织提取紫草宁等次生代谢物，该过程体现植物细胞的全能性
C. 杂交瘤细胞的培养过程中，会出现细胞贴壁和接触抑制现象
D. 单克隆抗体制备利用原理有：细胞膜流动性、细胞增殖、染色体数目变异
43. “筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是（　　）
A. 单倍体育种时，需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养
B. 制备单克隆抗体时，需要用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞
C. 胚胎移植前，需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选
D. 制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
44. 甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关如图所示的黏性末端的说法，错误的是（　　）
A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的
B. 甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能
C. DNA连接酶的作用位点是b处
D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段
45. “DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。下列叙述错误的是（ ）
A. 裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质
B. 分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等
C. 沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度
D. 鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
二、不定项选择题（5小题，每题至少有一个正确选项，每题2分，共10分）
46. 苏云金杆菌是杀灭玉米螟的重要生物，灭蚊球孢菌具有杀灭蚊子的效能，某人将这两种菌的原生质体融合获得既能杀蚊又能杀螟的新菌株，过程见下图。微生物原生质体的获得等过程和植物的类似。下列叙述错误的是（ ）
A. ①试管中加入PEG的目的是诱导A、B原生质体融合及细胞壁再生
B. 图中过程与植物体细胞杂交过程相比，去壁方法、诱导融合的方法、所依据的原理均完全相同
C. 离心洗涤后向培养液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解细菌的细胞壁以获得原生质体
D. 图中的甲实验和乙实验是指灭蚊实验和杀灭玉米螟实验，获得的融合株染色体数目加倍
47. 已知限制性内切核酸酶XmaI和SmaI的识别序列分别为C↓CCGGG和CCC↓GGG。下列有关这两种限制酶及应用的叙述，正确的是（　　）
A. 这两种限制酶作用的底物都是双链DNA，切开磷酸二酯键
B. 这两种限制酶切割后形成的末端不同
C. SmaI切割DNA后形成的末端可用E.coli DNA连接酶连接
D. 使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等
48. 下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（　　）
A. 动物细胞培养液中添加一定量抗生素，以防培养过程中的污染
B. 可用机械的方法或酶处理动物组织，使其分散成单个细胞
C. 动物细胞生存的适宜的pH为7.3-7.5
D. 进行传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集
49. 关于胚胎早期发育，正确的是（ ）
A. 孵化前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低
B. 受精卵发育为桑葚胚的过程是在透明带内完成的，囊胚后期孵化后进入原肠胚阶段
C. 卵裂是有丝分裂和减数分裂
D. 进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，因为此时细胞还未分化
50. 花粉植株是体细胞遗传研究和突变育种的理想材料。下面是培育四季柑桔（2N=18）花粉植株的过程示意图，有关叙述正确的是（　　）
A. 花粉植株培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养
B. 过程③是细胞再分化，其根本原因是基因选择性表达
C. 四种培养基均属于固体培养基，其中所含植物激素的浓度和比例有差异
D. 观察处于分裂中期的四季柑桔花粉植株根尖细胞，可观察到18条染色体
Ⅱ卷 非选择题（4小题，共40分）
51. 经过不断努力，在2021年（牛年）春节期间，牦牛产业帮扶项目初见成效，甘南藏族自治州夏河县陆续迎来首批近10头特殊的贺岁“牛宝宝”——通过胚胎移植技术诞生的优质黑安格斯种牛。
（1）胚胎工程中任何一项技术获得的胚胎，最后还需通过________技术才能发育成后代个体。此技术对代孕受体的要求是______。因此要对安格斯牛和牦牛进行______处理。在项目实施过程中，促使安格斯牛多排卵的激素一般是______。
（2）当胚胎发育到_____阶段时，可植入牦牛体内，胚胎在此代孕母体内能存活的生理学基础是______。
（3）若需要获得多个此优良性状的胚胎，要将______均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
52. 据下面植物体细胞杂交技术流程图回答相关问题：
（1）若运用传统有性杂交（即用番茄、马铃薯杂交）能否得到杂种植株？为什么？_______。
（2）在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是_________，依据的原理是______，其中过程②称为_______技术，该过程的原理是____。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为______，过程④相当于_________。
53. 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题。
（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的_________及时对培养基进行分装，并进行__________灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约______ （在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
（3）挑取分离平板中长出单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有_____。
a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和______供应。
54. 新型冠状病毒是一种RNA病毒，其表面的棘突蛋白（简称S蛋白）是主要的病毒抗原。单克隆抗体既可作为诊断试剂，又可阻断病毒的黏附和入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。制备抗S蛋白单克隆抗体的流程如下图，请回答下列问题：
（1）步骤①必须给小鼠注射______，目的是______，取小鼠的脾脏剪碎后用酶处理一段时间，再加入培养液可制成单细胞悬液。
（2）步骤④为诱导B淋巴细胞核骨髓瘤细胞融合，与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______诱导融合。融合操作后，体系中出现多种类型细胞的原因是______。
（3）步骤⑤选出的杂交瘤细胞______（填“有”或“无”接触抑制现象）。杂交瘤细胞在培养的过程中，要控制好气体环境，其中CO2的作用是______。
（4）进行步骤⑥的原因是______。步骤⑥含多次筛选，筛选依据的基本原理是______，步骤⑦是指从______获取大量的单克隆抗体，这种抗体的优点是______。

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