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能力单元五 5-4 新城疫
概 述
新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟，是由病毒引起的鸡和火鸡急性高度接触性传染病，常呈败血症经过。主要特征是呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血。
本病1926年首次发现于印尼，同年发现于英国新城，根据发现地名而命名为新城疫。本病分布于世界各地，1928年我国已有本病的记载，是严重危害养鸡业的重要疾病之一。
OIE规定为必须报告的传染病；我国农业部规定为一类动物疫病。
病 原
新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）属于副黏病毒科、腮腺炎病毒属。
NDV完整病毒粒子近圆形，直径为100 ~ 500nm，但也可呈不同长度的细丝状，有囊膜，在囊膜的外层有呈放射状排列的纤突，能刺激宿王广生抑制病毒凝集红细胞的抗体和病毒中和抗体。
病毒核酸类型为单股负链不分节段的RNA,基因组由15186、15192或15 198个核苷酸组成。
病 原
禽副黏病毒（APMV)有10个血清型，即：APMV-1~10。NDV 是 APMV-1，而从火鸡和其他鸟类分离的APMV-3与APMV-1有交叉反应。
本病毒存在于病鸡所有器官、体液、分泌物和排泄物中，以脑、脾和肺含毒量最高，骨髓含毒时间最长。
从不同地区和离类分离到的NDV对鸡的致病性有明显差异。根据不同毒力毒株感染鸡后表现的不同，可将NDV分为几种致病型：①速发型或强毒型毒株，在各种年龄易感鸡引起急性致死性感染；②中发型或中毒型毒株，仅在易感的幼龄鸡造成致死性感染；③缓发型，即低毒型或无毒型毒株，表现为轻微的呼吸道感染或无临床症状肠道感染。
NDV的毒毒株间差异的区别标准是依据鸡胚平均死亡时间（MDT），1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）和6周龄鸡静脉注射致病指数（IVPI）来区别。根据致病性试验将NDV毒株分为强毒力、中等毒力和低毒力三个型。
试验方法 强毒株 中等毒力株 弱毒株
最小致死量病毒致死鸡胚的平均时间（MDT） ≤60h 61~90h ＞90h
1日龄雏鸡脑内注射的致病指数（ICPI） 1.6~2.5 0.6~1.5 0.0~0.5
6周龄鸡静脉注射的致病指数（IVPI） 2.0~3.0 0.0~0.5 0.0
病毒凝集红细胞后解脱速率 慢 快 快
病毒血凝素对热的稳定性（56℃，min） 15~20 5 5
病 原
根据 NDV毒株F基因的序列、特定的酶切图谱和F蛋白可变区氨基酸残基变化，可收它们分为两类（Class I)和（ClassII)：其中I类病毒为弱毒，基因组全长为15198bp；Ⅱ类病毒又可分为9个基因型，基因I~IV型为早期基因型，其基因组全长为15 186 bp，基因V~Ⅸ型为晚期基因型，其基因组全长为15192bp。
自1990年代中期以来，我国ND流行的大致情况是：在一些地区有基因Ⅷ型和Ⅸ型引起的散发流行；基因VIb亚型病毒主要在鸽群中流行；引起爆发流行的优势基因型是Ⅶ型，包括引起大多数鸡群和鹅群爆发ND的基因Ⅶ d亚型。
病 原
NDV能在鸡胚中生长繁殖，以尿囊腔接种于9～10日龄鸡胚，强毒株在30～60 h死亡，弱毒株3～6 d死亡。
死亡的鸡胚，以尿囊液含毒量最高，胚胎全身出血，以头部、足趾、翅膀出血最为明显。
当鸡胚含有母源抗体时，弱毒株不能全部致死鸡胚，胚液的血凝滴度低，所以分离NDV的鸡胚，应来自SPF鸡群或未接种ND疫苗的鸡群。
病 原
血凝性：NDV一个很重要的生物学特性就是能吸附于鸡、火鸡、鸭、鹅及某些哺乳动物（人、豚鼠）的红细胞表面，并引起红细胞凝集（HA），这种特性与病毒囊膜上纤突所含血凝素和神经氨酸酶有关。这种血凝现象能被抗NDV的抗体所抑制（HI），因此可用HA和HI来鉴定病毒和进行流行病学调查。
细胞来源 人 马 驴 骡 绵羊 山羊 猪 兔 豚鼠 小鼠 鸽 麻雀
NDV + - - - - - - ± + + + +
AIV + + + + + + - ± + + + +
NDV对乙醚、氯仿敏感。病毒在60 C 30min失去活力，真空冻干病毒在30 C，可保存30d，在直射阳光下，病毒经30min死亡。
病毒在冷冻的尸体可存活6个月以上。
常用的消毒药如2％氢氧化钠、5％漂白粉、70％酒精，20min即可将NDV杀死。
对pH稳定，pH3～10不被破坏。
病 原
鸡、火鸡、珠鸡及野鸭对本病都有易感性，鸡最易感。幼雏和中雏易感性最高，两年以上鸡较低。在我国一些地区出现对鹅也有致病力的NDV，鸭群也有发生ND报道。孔雀、鹦鹉、鸽、鸵鸟、麻雀、猫头鹰、燕八哥、乌鸦等鸟类中也分离到NDV。哺乳动物对本病有很强的抵抗力，但人可感染，表现为结膜炎或类似流感症状。
传染源
易感动物
传播途径
流行病学
主要传染源是病鸡以及在流行间歇期的带毒鸡，但鸟类的作用也不可忽视。受感染的鸡在出现症状前24h就能排出病毒。而痊愈鸡带毒排毒的情况则不一致，多数在症状消失后5～7d就停止排毒。
主要是呼吸道和消化道，鸡蛋也可带毒而传播本病。创伤及交配也可引起传染，非易感的野禽、外寄生虫、人畜均可机械地传播病原。
本病一年四季均可发生，但以春秋两季较多，这取决于不同季节中新鸡的数量、鸡只流动情况和适于病毒存活及传播的外界条件。
购入貌似健康的带毒鸡，并将其合群饲养或宰杀，可使病毒散播。
污染的环境和带毒的鸡群，是造成本病流行的常见原因。易感鸡群一旦被速发性嗜内脏型鸡新城疫病毒所传染，可迅速传播呈毁灭性流行，发病率和病死率可达90%以上。
疫苗免疫的家禽群体虽然可得到临床保护，但不能阻止强毒感染及在体内复制和排毒。
由于在我国引起的ND的优势流行株是基Ⅶd亚型，而使用最广泛的疫苗株是基因I型和II型，流行株与疫苗株之间遗传发生和抗原性有较大的差异，高免疫抗体时流行株感染虽不引起死亡和临床症状，但抗体滴度下降或参差不齐时，就会出现一定比例的死亡和明显的临床症状（如产蛋下降等），这就是所谓的非典型ND。
近年来，由于免疫程序不当，或有其他疾病存在抑制ND抗体的产生，免疫鸡群发生非典型新城疫很常见。对免疫鸡群中NDV强毒感染的流行病学研究表明，NDV一旦在鸡群建立感染，通过疫苗免疫的方法无法将其从群中清除，当鸡群的免疫力下降时，就可表现出临床症状。
流行特点
临床症状
自然感染的潜伏期一般为3～5d，根据临诊表现和病程的长短，可分为最急性、急性、亚急性或慢性三型。
突然发病，常无特征症状而迅速死亡。多见于流行初期和雏鸡。
最急性型
病初体温升高达43～44 C，食欲减退或废绝，有渴感，精神萎靡，不愿走动，垂头缩颈或翅膀下垂，眼半开或全闭，状似昏睡，鸡冠及髯渐变暗红色或暗紫色。
母鸡产蛋停止或产软壳蛋。
随着病程的发展，出现比较典型的症状，病鸡咳嗽，呼吸困难，张口呼吸。
嗉囊内充满液体内容物，倒提时常有大量酸臭液体从口内流出。
粪便稀薄，呈黄绿色或黄白色，有时混有少量血液，后期排出蛋清样的排泄物。
有的病鸡还出现神经症状，如翅、腿麻痹等，最后体温下降，不久在昏迷中死亡。病程约2～5d。1月龄内的小鸡病程较短，症状不明显，病死率高。
急性型
临床症状
亚急性或慢性
初期症状与急性相似，不久后渐见减轻，但同时出现神经症状，患鸡翅腿麻痹，跛行或站立不稳，头颈向后或向一侧扭转，常伏地旋转，动作失调，反复发作，最终瘫痪或半瘫痪，一般经10～20d死亡。此型多发生于流行后期的成年鸡，病死率较低。
免疫鸡群中发生新城疫，是由于雏鸡的母源抗体高，接种新城疫疫苗后，不能获得坚强免疫力或因免疫后时间较长，保护力下降到临界水平，当鸡群内本身存在NDV强毒循环传播，或有强毒侵入时，仍可发生新城疫，症状不很典型，仅表现呼吸道和神经症状，其发病率和病死率较低，有时在产蛋鸡群仅表现产蛋下降。
临床症状
呼吸困难，张口呼吸，咳嗽，发出呼噜声
病鸡冠发紫，精神委顿
鸡冠和肉垂呈暗红或青紫色
病鸡嗉囊内充满酸臭液体，倒提时从口腔流出
病鸡精神沉郁，翅膀下垂
病鸡产白壳蛋薄壳蛋 、畸形蛋比例升高
病鸡产软壳蛋及沙壳蛋
病鸡口腔内流出酸臭的粘液
病鸡有神经症状，头颈向一侧扭转
观星症状
鸽子出现神经症状
鹩哥新城疫，头颈扭曲
食欲减少或废绝，排出绿色粪便
病理变化
本病的主要病变是全身黏膜和浆膜出血，淋巴系统肿胀、出血和坏死，尤其以消化道和呼吸道为明显。
嗉囊充满酸臭味的稀薄液体和气体。
腺胃黏膜水肿，其乳头或乳头间有鲜明的出血点，或有溃疡和坏死，这是比较特征的病变。肌胃角质层下也常见有出血点。
由小肠到盲肠和直肠黏膜有大小不等的出血点，肠黏膜上有纤维素性坏死性病变，有的形成假膜，假膜脱落后即成溃疡。
盲肠扁桃体常见肿大、出血和坏死。
气管出血或坏死，周围组织水肿。
肺有时可见瘀血或水肿。
心冠脂肪有细小如针尖大的出血点。
产蛋母鸡的卵泡和输卵管显著充血，卵泡膜极易破裂以致卵黄流入腹腔引起卵黄性腹膜炎。
脾、肝、肾无特殊病变；脑膜充血或出血。
免疫鸡群发生新城疫时，仅见黏膜卡他性炎症、喉头和气管黏膜充血，腺胃乳头出血少见，但多剖检数只，可见有的病鸡腺胃乳头有少数出血点，直肠黏膜和盲肠扁桃体多见出血。
病理变化
病鸡腺胃乳头出血
病鸡肠道广泛性出血，可见紫红色枣核样肿大的肠道淋巴集结
肠道淋巴集结出血、坏死
慢性病例十二指肠黏膜岛屿状坏死
病鸡直肠黏膜出血
病鸡卵泡出血，变形，破裂
诊 断
根据本病的流行病学、症状和病变进行综合分析，可作出初步诊断。
实验室检查有助于对ND的确诊。病毒分离和鉴定是诊断ND最可靠的方法，常用的是鸡胚接种、HA和HI试验、中和试验及荧光抗体。
应注意，从鸡分离出NDV不一定是强毒，还不能证明该鸡群流行ND。有的鸡群存在强毒和中等毒力的NDV，必需针对分离的毒株作毒力测定后，才能作出确诊。
还可以应用免疫组化和ELISA来诊断本病。
病料接种鸡胚，死亡的胚胎全身出血
HA试验
HI试验
病毒初步鉴定 1. HA、HI试验
2. 电镜观察
3. 毒力鉴定：鸡胚平均死亡时间，1日龄鸡胚接种指数，6日龄静脉接种指数。
新城疫病毒的形态，呈近圆形，有囊膜和纤突
脑、脾
冰冻切片
丙酮固定
ND荧抗染色
荧光显微镜观察
特异的荧光
荧光抗体检查新城疫病毒抗原
OIE对报告ND暴发做了下述定义：ND是由禽副黏病毒血清1型（APMV-1)引起的禽类感染，APMV-1在毒力上符合下列两个标准中的一个：①该病毒在1日龄雏鸡的脑内接种致病指数（ICPI)大于或等于0.7;②该病毒F1蛋白的N端即117位残基为苯内氨酸（F)，而F2蛋白的C端有多个碱性氨基酸。所谓多个碱性氨基酸是指在113位和116位之间至少有3个精氨酸或赖氨酸残基。不能显示上述氨基酸残基的特征结构则需要对分离的病毒作ICPI试验。
根据OIE对ND的这一定义，目前OIE确诊ND有两种方法：一种是分离鉴定NDV并进行生物学试验，测定分离NDV的MDT、ICPI和IVPI以确定其毒力；另一种是采用基于RT-PCR的分子生物学方法，确定病原为NDV并确定其毒力。
因常规的病毒分离鉴定和用生物学试验确定费时、费力、费钱，又要使用动物，已越来越不被人们接受。日趋成熟的分子确诊方法，可以用来取代常规的确诊方法。目前核苷酸测序已可目动化并且快速，在对NDV.毒力进行分子评价时不失为首选的技术。
诊 断
部分疑似ND病料检测结果
M.DL2000 DNA Marker； 1~13.部分病料检测，4和10为中强毒株阳性，1、2、6、9、12和13为弱毒株阳性
中国动物传染病学报，2017,25(5): 21-25
防 控
OIE 要求各成员政府将在其国境内的每次ND暴发，必须在确诊后24h内上报。国际贸易中对ND有严格的限制。
在发达国家，都是采用防止ND感染易感禽群的方法控制本病，一旦发生即采取隔离封锁、扑杀销毁感染群和受威胁群，以消灭感染，重新达到无NDV强毒感染的状态。
在这些国家，有的不允许使用ND疫苗，有的只允许使用ND灭活疫苗，有的仅允许使用低毒力或无毒活疫苗，认为凡是由ICPI≥0.7的NDV引起的感染，都应报告为发生了 ND，采取相应的扑灭措施。
防 控
对于呈地方流行性的国家和地区，防控ND是一项十分艰巨和复杂的任务，措施有两个方面：一是采取严格的生物安全措施，防止NDV强毒进入禽群；二是免疫接种，提高禽群的特异免疫力。
很多禽场对第一项措施的认识不足，而过分依赖疫苗接种。
近年来的研究表明，只要NDV强毒侵入禽群，就能长期传播维持，不论采用何种免疫措施都不能将其从群内清除。在这个意义上，防止NDV强毒进入禽群是头等重要的。
防 控
防止NDV强毒进入禽群，必须采取严格的生物安全措施：日常的隔离、卫生、消毒制度；
防止一切带毒动物（特别是鸟类、鼠类和昆虫）和污染物进人离群；
进出的人员和不及用具消毒处理；饲料和饮水来源安全；
不从疫区引进种蛋和苗鸡，新购进的鸡必须隔资爽察两周以上证明健康者，方可合群；
科学的饲养制度，如全进全出等；
离场的选址、生产规模等均考虑有利于防止病原体的侵入。
接种疫苗是防控ND的重要措施之一，可以提高群的特异免疫力，减少NDV强毒的传播，降低ND造成的损失。ND免疫计划中疫苗的洗择和合理免疫程序的制定受母源抗体高低、强毒感染风险大小、饲养制度和其他感染存在楼况等多种因素影响，必须根据具体鸡群确立，不能一概而论。
防 控
ND疫苗分为活疫苗和灭活疫苗两大类。活疫苗接种后疫苗毒在体内增殖，刺激产生体液免疫、细胞免疫和局部黏膜免疫。灭活疫苗接种后无病毒增殖，在体内靠接受的既定 抗原量刺激产生体液免疫，对细胞免疫和局部免疫无大作用。
国内使用的活疫苗有5种：I 系苗（Mukteswar株）、I系苗（B1株）、III系苗（F株）、IV系苗（La Sota株）和V4弱毒苗。其中I系苗是中毒疫苗，ICPI为1.4，世界上绝大多数国家已禁止使用，我国也应禁止使用。虽然它提供的免疫力比其他疫苗强，但根据OIE对ND的定义，I系疫苗毒必须禁止使用。而且近年来的研究已证明，这种疫苗毒已在鸡群中进化出ICPI和IVPI都很高的强毒，造成很大的危害。
II、II、IV系苗都是弱毒疫苗，大小鸡均可使用，多采用滴鼻、点眼、饮水方法，气雾免疫在鸡群存在支原体、大肠杆菌和其他呼吸道病毒感染时易诱发呼吸道疾病，使用时应注意。
V4弱毒苗具有耐热和嗜肠道的特点，适用于热带、亚热带地区的散养鸡群。
灭活疫苗的质量取决于所含的抗原量和佐剂，市场上的产品差异很大。
ND免疫应注意的问题一
防 控
母源抗体对 ND免疫应答有很大的影响。母鸡经过鸡新城疫疫苗接种后，可将其抗体通过卵黄传递给雏鸡，雏鸡在3日龄抗体滴度最高，以后逐渐下降，每日大约下降13%。
具有母源抗体的雏鸡既有一定的免疫力，又对疫苗接种有干扰作用，因此最好在母源抗体HI效价下降到25以下时进行第一次疫苗接种，在30~35日龄时进行第二次接种。
但在有本病流行的地区是不安全的，因为母源抗体不足以抵抗强毒的感染，所以有人主张对带有母源抗体的1日龄雏鸡采用灭活苗，据称灭活苗受循环抗体的影响较小；或者死苗和活苗同时接种，据称活苗能促进对死苗的免疫反应。不过这是一种完全依赖疫苗的做法，在大规模饲养的条件下很不可取。
在有条件的鸡场，一般根据对鸡群HI抗体免疫监测的结果确定初次免疫和再次免疫的时间，这是最科学的方法。对鸡群抽样采血作HI试验，如果HI效价高于25时，进行首免几乎不产生免疫应答，可以选在HI效价降至25以下时接种。
免疫监测可以了解免疫接种的效果，也为制定或修改免疫程序提供可靠依据。ND免疫程序在很大栓度上应取决于生物安全水平，生物安全水平很高的规模化养禽场，可以降低ND疫苗使用的频率，把疫苗免疫作为ND防控中的最后一道防线。
ND免疫应注意的问题二
防 控
ND疫苗免疫后产生免疫应答还受到鸡群健康状况，特别是是否存在免疫抑制性感染的影响。马立克病、传染性法氏囊病、鸡传染性贫血、网状内皮组织增生症，甚至使用中等偏强毒力的传染性法氏囊病疫苗和饲料中的霉菌毒素，都可使ND的免疫应答受到严重抑制，HI抗体滴度比正常显著降低。
ND免疫应注意的问题三
ND免疫应注意的问题四
由于ND的免疫失败在现场屡屡发生，因此有些人怀疑可能是由于出现新的基因型或抗原型病毒，使现在常用的疫苗株保护力下降引起的。根据近年来国内外多个实验室证实，现有疫苗病毒对流行株已不能提供理想的保护力。
NDV虽然只有一个血清型，在免疫抗体高时对流行毒虽有较好的死亡保护力，但流行毒可以感染部分免疫禽，在呼吸道和肠追复制开排出病毒，造成污染；而免疫抗体下降时，则流行毒可感染大部分免疫离，复制开排出大量病毒，造成严重污染，出现临床症状，部分发生死亡。
我国ND强毒古绝对优勢的是基因Ⅶ d亚型，与常用的疫苗株相比，不仅遗传距离较远，而且抗原上有相当大的差异。国内外研究结果显：当疫苗株与流行株基因型一致时，不仅能提供理想的临床保护，而且能显者降低免疫禽群的强毒感染率和排毒量，保护免疫禽群的生产性能（产蛋、增重等），在临床上可有效控制免疫禽群非典型ND的发生。用保护力更高的基因Ⅶ型疫苗来替代现有疫苗，已是摆在我们面前的迫切任务。
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