资源简介

(共32张PPT)
监测、诊断样品的采集、保存与运送
01
动物活体样品的采集
02
样品的保存
03
样品的运送
（一）家禽活体的样品采集
1．家禽喉拭子和泄殖腔拭子采集
（1）器材准备 无菌棉签，含有1毫升含青霉素、链霉素各3000国际单位的pH为7.2的PBS的1.5毫升离心管。
（2）采样 取无菌棉签，插入鸡喉头内或泄殖腔转动3圈，取出，插入上述离心管钟。剪去露出部分，盖紧瓶盖，作好标记。
（3）样品保存 24小时内能及时检测的样品可冷藏保存，不能及时检测的样品应-20度保存。
一、动物活体样品的采集
（一）家禽活体的样品采集
2．羽毛采集
（1）器材准备 灭菌滴管，灭菌的小试管或1.5毫升离心管，蒸馏水，记号笔、灭菌剪刀。
（2）采样 拔取受检鸡含羽髓丰满的翅羽或身上其他部位大羽；将含有羽髓的羽根部分按编号分别剪下收集于小试管内，于每管内滴加蒸馏水2～3滴（羽髓丰满时也可不加），用玻璃棒将羽根挤压于试管底，使羽髓浸出液流至管口，用滴管将其吸出。
（二）猪活体的样品采集
1．扁桃体采取
（1）器材准备 洁净的扁桃体采集器（包括开口器、保定器、采样枪、手电筒）、灭菌离心管（1.5毫升）、记号笔。
（2）采样 固定猪只，用开口器开口，可以看到突起的扁桃体，把采样枪枪头钩在扁桃体上，快速扣动扳机取出扁桃体置于灭菌离心管中，冷藏送检。
（二）猪活体的样品采集
2．鼻腔拭子、咽拭子采集
（1）器材准备 灭菌离心管（1.5毫升），记号笔，灭菌剪刀，灭菌棉拭子，样品保存液。
常用的样品保存液有含抗生素的PBS保存液（pH7.4）、灭菌肉汤（pH7.2～7.4）或30％甘油盐水缓冲液。若准备将待检标本接种组织培养，则应保存于含0.5％乳蛋白水解液中。
（二）猪活体的样品采集
（2）采样
①每个灭菌离心管中加入1毫升样品保存液。
②用灭菌的棉拭子在鼻腔或咽喉转动至少3圈，采集鼻腔、咽喉的分泌物。
③蘸取分泌物后，立即将拭子浸入保存液中，剪去露出部分，盖紧离心管盖，作好标记。密封低温保存。
3．肛拭子采集 采集方法同鼻腔拭子、咽拭子采集方法，只是采集部位是肛门或泄殖腔内容物和分泌物。
（三）牛羊活体的样品采集
1．牛、羊O-P液（咽食道分泌物）的采集方法
（1）器材准备 灭菌广口瓶（20～30ml），记号笔，样品保存液，探杯。探杯消毒液：0.2％柠檬酸或1％～2％氢氧化钠溶液。灭菌塑料桶2个（100～200毫升）。细胞培养液：0.5％水解乳蛋白-Earle液或磷酸缓冲液（0.04摩尔／升、pH7.4）。
（三）牛羊活体的样品采集
（2）采样
①被检动物在采样前禁食（可饮少量水）12小时。将采样探杯在使用前放入装有0.2％柠檬酸或1％～2％氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5分钟。
②观察被检动物的吞咽动作。将消毒过的采样探杯用与动物体温一致的清水冲洗。
③站立保定被检动物，将探杯随吞咽动作送入食道上部10～15cm处，轻轻来回抽动2～3次，然后将探杯拉出。取出8～10mlO-P液，倒入含有等量细胞培养液（0.5％水解乳蛋白-Earle液）或磷酸缓冲液（0.04摩尔／升、pH7.4）的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封
口、标记，放冷藏箱及时送检，未能及时送检应置于-30℃冷冻保存。
（三）牛羊活体的样品采集
（2）采样
①被检动物在采样前禁食（可饮少量水）12小时。将采样探杯在使用前放入装有0.2％柠檬酸或1％～2％氢氧化钠溶液的塑料桶中浸泡5分钟。
②观察被检动物的吞咽动作。将消毒过的采样探杯用与动物体温一致的清水冲洗。
③站立保定被检动物，将探杯随吞咽动作送入食道上部10～15cm处，轻轻来回抽动2～3次，然后将探杯拉出。取出8～10mlO-P液，倒入含有等量细胞培养液（0.5％水解乳蛋白-Earle液）或磷酸缓冲液（0.04摩尔／升、pH7.4）的灭菌广口瓶中，充分摇匀加盖封
口、标记，放冷藏箱及时送检，未能及时送检应置于-30℃冷冻保存。
（三）牛羊活体的样品采集
（3）注意事项
①采集多头动物样品时，每采完一头动物，探杯要重复进行消毒并充分清洗。
②放入动物体内的探杯要与动物的体温一致。
（四）粪便样品的采集
1．用于病毒检验的样品
（1）器材准备 灭菌棉拭子、灭菌试管、pH7.4的样品保护液、记号笔、乳胶手套压舌板、新鲜粪便。
（2）采样方法
①少量采集时，以灭菌的棉拭子从直肠深处或泄殖腔黏膜上蘸取粪便，并立即投入灭菌的试管内密封，或在试管内加入少量pH7.4的保护液再密封。
②采集较多量的粪便时，可将动物肛门周围消毒后，用器械或用带上胶手套的手伸入直肠内取粪便，也可用压舌板插入直肠，轻轻用力下压，刺激排粪，收集粪便。所收集的粪便装入灭菌的容器内，经密封并贴上标签。
（3）样品保存 立即冷藏或冷冻送实验室。
（四）粪便样品的采集
2．用于细菌检验的粪便样品采集 采样方法与供病毒检验的方法相同。但采集的样品最好是在动物使用抗菌药物之前的，从直肠或泄殖腔内采集新鲜粪便。
粪便样品较少时，可投入无菌缓冲盐水或肉汤试管内；较多量的粪便则可装入灭菌容器内，贴上标签后冷藏送实验室。
（四）粪便样品的采集
3．用于寄生虫检验的粪便样品采集 采样方法与供病毒检验的方法相同。
应选自新排出的粪便或直接从直肠内采得，以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态。
一般寄生虫检验所用粪便量较多，需采取5～19克新鲜粪便，大家畜一般不少于60克，并应从粪便的内外各层采取。
粪便样品以冷藏不冻结状态保存。
（五）生殖道样品采集
生殖道样品主要包括动物流产排出的胎儿、死胎、胎盘、阴道分泌物、阴道冲洗液、阴茎包皮冲洗液、精液、受精卵等。
1．流产胎儿及胎盘 可按采集组织样品的方法，无菌采集有病变组织。也可按检验目的采集血液或其他组织。或将流产后的整个胎儿，用塑料薄膜、油布或数层不透水的油纸包紧，装入冷藏箱，放入冰袋，即送实验室。
（五）生殖道样品采集
2．精液 用人工方法采集，并避免加入防腐剂
（五）生殖道样品采集
3．阴道、阴茎包皮分泌物 可用灭菌棉拭子从深部取样，采取后立即放入盛有灭菌肉汤等保存液的试管内，冷藏送检。亦可将阴茎包皮外周、阴户周围消毒后，以灭菌缓冲液或汉克氏液冲洗阴道、阴茎包皮，收集冲洗液。
（六）皮肤样品采集
1．器材准备 消毒的凸刃小刀、消毒的剪刀、洁净平皿、洁净玻片、记号笔。
2．采样方法 活动物的病变皮肤，如有新鲜的水疱皮、结节、痂皮等可直接剪取3～5克。
活动物的寄生虫病，如疥螨、痒螨等，在患病皮肤与健康皮肤交界处，用凸刃小刀，刀刃与皮肤表面垂直，刮取皮屑，直到皮肤轻度出血，接取皮屑供检验。
（七）脓汁
1．器材准备 灭菌棉拭子、灭菌注射器、记号笔、灭菌离心管、灭菌剪刀。
2．样品要求 做病原菌检验的，应在未用药物治疗前采取。
采集已破口脓灶脓汁，宜用灭菌棉拭子蘸取，置入灭菌离心管中，剪去露出部分，盖紧离心管盖，作好标记。密封低温保存，及时送检。
未破口脓灶，用灭菌注射器抽取脓汁，密封低温保存，及时送检。
（八）尿液样品
动物排尿时，用洁净容器直接接取。也可使用塑料袋，固定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液。采取尿液，宜早晨进行。也可以用导管导尿或膀胱穿刺采集。
（九）关节及胸腹腔积液的采集
1．皮下水肿液和关节囊（腔）渗出液 用灭菌注射器从积液处抽取。
2．胸腔渗出液 在牛右侧第五肋间或左侧第六肋间用灭菌注射器刺入抽取，马在右侧第六肋间或左侧第七肋间刺入抽取
3．腹腔积液 采集牛腹腔积液，在最后肋骨的后缘右侧腹壁作垂线，再由膝盖骨向前引一水平线，两线交点至膝盖骨的中点为穿刺部位，用灭菌注射器抽取；马的腹腔积液穿刺抽取部位只能在马左腹侧。
（十）乳汁
乳房先用消毒药水洗净（取乳者的手亦应事先消毒），并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的3～4把乳汁弃去，然后再采集10毫升左右乳汁于灭菌试管中。进行血清学检验的乳汁不应冻结、加热或强烈震动。
（十一）脊髓液采集方法
使用特制的专用穿刺针，或用长的封闭针头（将针头稍磨钝，并配以合适的针芯）；采样前，术部及用具均按常规消毒。
1．颈椎穿刺法 穿刺点为环枢孔。动物应站立或横卧保定，使其头部向前下方屈曲，术部经剪毛消毒，穿刺针与皮肤面呈垂直缓慢刺入。将针体刺入蛛网膜下腔，立即拔出针芯，脑脊髓液自动流出或点滴状流出，盛入消毒容器内。大型动物颈部穿刺一次采集量35～70毫升。
2．腰椎穿刺法 穿刺部位为腰荐孔。动物应站立保定，术部剪毛消毒后，用专用的穿刺针刺入，当刺入蛛网膜下腔时，即有脑脊髓液呈滴状滴出或用消毒注射器抽取，盛入消毒容器内。大型动物腰椎穿刺一次采集量15～30毫升。
样品的保存
病料正确的保存方法，是病料保持新鲜或接近新鲜状态的根本保证，是保证检测结果准确无误的重要条件。
二、样品的保存
（一）血清学检验材料的保存
一般情况下，病料采取后应尽快送检，如远距离送检，可在血清中加入青、链霉素防腐败。除了做细胞培养和试验用的血清外，其他血清还可加0.08％叠氮钠、0.5％石炭酸生理盐水等防腐剂。另外，还应避免使样品接触高温和阳光，同时严防容器破损。
（二）微生物检验材料的保存
1．液体病料 黏液、渗出物、胆汁、血液等，最好收集在灭菌的小试管或青霉素瓶中，密封后用纸或棉花包裹，装入较大的容器中，再装瓶（或盒）送检。
用棉拭子蘸取的鼻液、浓汁、粪便等病料，应将每支棉拭剪断或烧断，投入灭菌试管内，立即密封管口，包装送检。
2．实质脏器 在短时间内（夏季不超过20小时，冬季不超过2天）能送到检验单位的，可将病料的容器放在装有冰块的保温瓶内送检。短时间不能送到的，供细菌检查的，放于灭菌流动石蜡或灭菌的30％甘油生理盐水中保存；供病毒检查的，放于灭菌的50％甘油生理盐水中保存。
（三）病理组织检验材料的保存
采取的病料通常使用10％福尔马林固定保存。冬季为防止冰冻可用90％酒精，固定液用量要以浸没固定材料为宜。如用10％福尔马林溶液固定组织时，经24小时应重新换液一次。神经系统组织（脑、脊髓）需固定于10％中性福尔马林溶液中，其配制方法是在福尔马林液的总容积中加5％～10％碳酸镁。在寒冷季节，为了避免病料冻结，在运送前，可将预先用福尔马林固定过的病料置于含有30％～50％甘油的10％福尔马林溶液中。
（四）毒物中毒检验材料的保存
检样采取后，内脏、肌肉、血液可合装一清洁容器内，胃内容物与呕吐物合装合装一容器内，粪、尿、水、饲料等应分别装瓶，瓶上要贴有标签，注明病料名称及保存方法等。然后严密包装，在短时间内应尽快送实验室检验或派专人送指定单位检验。
（一）样品包装要求
装载样品的容器可选择玻璃的或塑料的，可以是瓶式、试管式或袋式。容器必须完整无损，密封不漏出液体。装供病原学检验样品的容器，用前彻底清洁干净，必要时经清洁液浸泡，冲洗干净后以干热或高压灭菌并烘干。如选用塑料容器，能耐高压的经高压灭菌，不能耐高压的经环氧乙烷熏蒸消毒或紫外线距离20厘米直射2小时灭菌后使用。根据检验样品性状及检验目的选择不同的容器，一个容器装量不可过多，尤其液态样品不可超过容量的80％，以防冻结时容器破裂。
三、样品的运送
（一）样品包装要求
装入样品后必须加盖，然后用胶布或封箱胶带固封，如是液态样品，在胶布或封箱胶带外还须用熔化的石蜡加封，以防止外泄。如果选用塑料袋，则应用两层袋，分别用线结扎袋口，防止液体漏出或入水污染样品。
每个样品应单独包装，在样品袋或平皿外粘贴标签，标签应注明样品名、样品编号、采样日期等。装拭子样品的小塑料离心管应放在特定塑料盒内。血清样品装于小瓶时应用铝盒盛放，盒内加填塞物避免小瓶晃动，若装于小塑料离心管中，则应置于塑料盒内。包装袋、塑料盒及铝盒应贴封条，封条上应有采样人签章，并注明贴封日期，标注放置方向。
（二）样品的运送
所采集的样品以最快最直接的途径送往实验室。如果样品能在采集后24小时内送抵实验室，则可放在4℃左右的容器中运送。只有在24小时内不能将样品送往实验室并不致影响检验结果的情况下，才可把样品冷冻，并以此状态运送。根据试验需要决定送往实验室的样品是否放在保存液中运送。
（二）样品的运送
要避免样品泄漏。装在试管或广口瓶中的病料密封后装在冰瓶中运送，防止试管和容器倾倒。如需寄送，则用带螺口的瓶子装样品，并用胶带或石蜡封口。将装样品的并有识别标志的瓶子放到更大的具有坚实外壳的容器内，并垫上足够的缓冲材料。空运时，将其放到飞机的加压舱内。
（二）样品的运送
制成的涂片、触片、玻片上注名号码，并另附说明。玻片两端用细木条分隔开，层层叠加，底层和最上一片，涂面向内，用细线包扎，再用纸包好，在保证不被压碎的条件下运送。
所有样品都要贴上详细标签。各种样品送实验室后，应按有关规定冷藏或冷冻保存。须长期保存的样品应置超低温冷冻（以-70℃或以下为宜）保存，避免反复冻融。

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