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血液样品的采集、保存与运送
01
采血方法
02
血液采集注意事项
03
血液样品的保存与运送
血液样品的采集、保存与运送
血液样品的采集是常见的样品采集方法，在做样品采集前要首先观察动物的健康状况。发病动物，应据动物症状，首先排除炭疽等烈性传染病，再决定采血与否。
血液样品的采集方法较多，现介绍部分常用的方法。
（一）耳静脉采血
1．适合对象 猪、兔等，适于样品要求量比较小的检验项目。
2．操作步骤
（1）将猪、兔站立或横卧保定，或用保定器具保定。
一、采血方法
（一）耳静脉采血
（2）耳静脉局部按常规消毒处理。
（3）1人用手指捏压耳根部静脉血管处，使静脉充盈、怒张（或用酒精棉反复局部涂擦以引起其充血）。
（4）术者用左手把持耳朵，将其托平并使采血部位稍高。
（5）右手持连接针头的采血器，沿静脉管使针头与皮肤呈30°～45°角，刺人皮肤及血管内，轻轻回抽针芯，如见回血即证明已刺入血管，再将针管放平并沿血管稍向前伸人，抽取血液。
（二）颈静脉采血
1．适合对象 马、牛、羊等大家畜。能满足常见的检测项目的要求。
2．操作步骤
（1）保定好动物，使其头部稍前伸并稍偏向对侧。
（2）对颈静脉局部进行剪毛、
消毒。
（二）颈静脉采血
（3）看清颈静脉后，术者用左手拇指（或食指与中指）在采血部位稍下方（近心端）压迫静脉血管，使之充盈、怒张。
（4）右手持采血针头，沿颈静脉沟与皮肤呈45°角，迅速刺入皮肤及血管内，如见回血，即证明已刺入；使针头后端靠近皮肤，以减小其间的角度，近似平行地将针头再伸入血管内1～2厘米。
（5）撤开压迫脉管的左手，让血液流入采血容器。采完后，以酒精棉球压迫局部并拔出针头，再以5％碘酊进行局部消毒。
（二）颈静脉采血
3．注意事项
（1）采血完毕，做好止血工作，即用酒精棉球压迫采血部位止血，防止血流过多。酒精棉球压迫前要挤净酒精，防止酒精刺激引起流血过多。
（2）牛、水牛的皮肤较厚，颈静脉采血刺入时应用力并瞬时刺入，见有血液流出后，将针头送入采血管中，即可流出血液。
（三）前腔静脉采血法
1．适合对象 多用于猪只的采血，适合于大量采血用。
2．操作步骤
（1）仰卧保定，把前肢向后方拉直。
（2）选取胸骨端与耳基部的连线上胸骨端旁2厘米的凹陷处，消毒。
（3）用装有20号针头的注射器刺入消毒部位，针刺方向为向后内方与地面呈60°角刺入2～3厘米，当进入约2厘米时可一边刺入一边回抽针管内芯；刺入血管时即可见血进入管内，采血完毕，局部消毒。
（四）心脏采血
1．适合对象 禽类、家兔、鼠等个体比较小的动物的采血。
2．家兔和鼠心脏采血的操作步骤 以家兔为例：
（1）确定心脏的生理部位。家兔和豚鼠的心脏部位约在胸前由下向上数第三与第四肋骨间。
（2）选择用手触摸心脏搏动最强的部位，去毛消毒。
（3）将稍微后拉栓塞的注射器针头由剑状软骨左侧呈30°～45°刺入心脏，当家兔略有颤动时，表明针头已穿入心脏，然后轻轻地抽取，如有回血，表明已插入心腔内，即可抽血；如无回血，可将针头退回一些，重新插入心腔内，若有回血，则顺心脏压力缓慢抽取所需血量。
小鼠采血，可以先麻醉，采血方法与兔子相似。
鼠心脏采血示意图 兔心脏采血示意图
（四）心脏采血
3．禽类心脏采血操作步骤 雏鸡和成年禽类的心脏采血步骤略有差异。
（1）雏鸡心脏采血 左手抓鸡，右手手持采血针，平行颈椎从胸腔前口插入，回抽见有回血时，即把针芯向外拉使血液流入采血针。
（四）心脏采血
（2）成年禽类心脏采血 成年禽类采血可取侧卧或仰卧保定。
①侧卧保定采血 助手抓住禽两翅及两腿，右侧卧保定，在触及心搏动明显处，或胸骨脊前端至背部下凹处连线的1／2处消毒，垂直或稍向前方刺入2～3厘米，回抽见有回血时，即把针芯向外拉，使血液流入采血针。
②仰卧保定采血 胸骨朝上，用手指压离嗉囊，露出胸前口，用装有长针头的注射器，将针头沿其锁骨俯角刺入，顺着体中线方向水平穿行，直到刺入心脏。
（四）心脏采血
4．注意事项
（1）确定心脏部位，切忌将针头刺入肺脏。
（2）顺着心脏的跳动频率抽取血液，切忌抽血过快。
（五）翅静脉采血
1．适合对象 禽类等有翅膀类的动物，多用于家禽、水禽、鹌鹑等的采血。采血量少时多采用该法。
2．操作步骤
（1）侧卧保定禽只，展开翅膀，露出腋窝部，拔掉羽毛，在翅下静脉处消毒。
（2）拇指压迫近心端，待血管怒张后，用装有细针头的注射器，由翼根向翅方向平行刺入静脉，放松对近心端的按压，缓慢抽取血液。或者，从无血管处向翅静脉丛刺入，见有血液回流，即把针芯向外拉使血液流入采血针。
3．注意事项 采血完毕及时压迫采血处止血，避免形成淤血块。
（六）后肢外侧面小隐静脉采血法
和前肢内侧头静脉采血法
1．适合对象 狗等被毛比较薄的动物
2．后肢外侧面小隐静脉采血操作步骤
（1）将狗侧卧，保定好。
（2）确定后肢外侧面小隐静脉：在后肢胫部下1/3的外侧浅表皮下的，用胶皮带绑在狗股部，或由助手用手紧握股部，即可明显见到此静脉。
（3）局部剪毛、消毒。
（4）右手持连有5号半针头的采血器，将针头向血管
旁的皮下先刺入，而后与血管平行刺入静脉，回抽针芯，如有回血，放松对静脉近心端的压迫，并将针头顺血管再送入少许，然后便可采出血液。
（六）后肢外侧面小隐静脉采血法
和前肢内侧头静脉采血法
3．前肢内侧头静脉采血操作步骤 此静脉在前肢内侧皮面皮下，靠前肢内侧外缘，采血方法同前述的后肢小隐静脉采血法。
（六）后肢外侧面小隐静脉采血法
和前肢内侧头静脉采血法
4．注意事项
（1）采集少量血液时，在针孔插入血管后，接住滴下的血液即可，如做血常规检验等。
（2）采集多量血液时，先解除静脉上端加压的手或胶皮管，用采血器缓慢抽取，若抽吸速度过快，易使针口吸着血管内壁，血液不能进入采血器。
（3）采完血后注意及时、正确的止血。
（七）后肢内侧面大隐静脉采血法
1．适合对象 猫等被个体比较小的动物动物。猫也常用前肢内侧头静脉采血方法。
2．操作步骤
（1）将猫背卧后固定，伸展后肢向外拉直，暴露腹股沟三角区。
（2）后肢内侧面大隐静脉在后肢膝部内侧浅表的皮下。用左手中指、食指探摸股动脉跳动部位，在其下方剪毛消毒。
（3）右手取连有5号半针头的采血器，针头由跳动的股动脉下方直接刺入大隐静脉管内，即可采血。
（七）后肢内侧面大隐静脉采血法
3．注意事项
（1）确定采血部位，确定股动脉，切忌将针刺入股动脉。
（2）采集完血液后注意止血。
（八）眼睛采血法
分为摘眼球法和眼眶后静脉丛采血法。
1．适合对象 多用于鼠类的采血。
2．操作步骤
（1）摘眼球法 可以先麻醉动物，一手抓住鼠，拇指和食指尽量将鼠头部皮肤捏紧，使眼球突出，另一手用镊子从鼠眼球根部将眼球摘出，倒置鼠血液从眼眶内流出。
（八）眼睛采血法
（2）眼眶后静脉丛采血法
①采血时，左手拇指及食指抓住鼠两耳之间的皮肤使鼠固定，并轻轻压迫颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突。
②右手持取血管（细端内径为1.0～1.5毫米），将其尖端插入内眼角与眼球之间，轻轻向眼底方向刺入，当感到有阻力时即停止刺入，旋转取血管以切开静脉丛，血液即流入取血管中。
③采血结束后，拔出取血管，放松左手，出血即停止。将取血管浸入1％肝素溶液，干燥后使用。
血液采集注意事项
1．采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在25～28℃，冬季15～20℃为宜。
2．应严格遵守无菌操作规程，对所有采血用具、采血部位，均应认真进行消毒。
3．采血针头、注射器必须洁净、干燥，如有水气可引起溶血。
4．怀疑传染病时，采血过程应防止血液流散，检验后的残余血液及所用器皿亦应进行消毒处理。
5．采血完毕，局部消毒并及时止血。
二、血液采集注意事项
（一）血清样品的要求
制备血清的样品不能添加抗凝剂，要求无菌操作。
制备好的血清样品应是澄清、透明、略带微黄色。
猪血清可能会有轻微的红色，是红细胞破碎所致。
三、血液样品的保存与运送
（二）分离血清的操作步骤
（1）装有待分离血液的容器必须留有一定的未占用空间，即血液液面上方有一定量的空气层。
（2）在室温（25℃左右）下倾斜放置2～4小时（防止暴晒），待血液凝固自然析出血清。或用无菌剥离针剥离血凝块，将样品放在装有25～37℃温水的杯内或37℃温箱内1小时，或置4℃冰箱过夜，待大部分血清析出后取出血清。
在血清析出比较慢或急需用血清时，可用离心机离心，选择1500～2000转／分钟离心5分钟，分离血清。
（3）将血清移到另外的洁净容器中，密封，贴标签。通常是4℃冷藏。须长期保存时，应置于-20℃冷冻，注意避免反复冻融。
（三）血清分离的注意事项
（1）用于分离血清的血液不能加抗凝剂。
（2）采集的血液在凝集之前尽量避免振动，以防溶血。
（3）采集的血清根据需要进行保存，冷冻保存的血清应进行分装，尽量避免反复冻融。

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