资源简介

(共25张PPT)
模块七 饲料检测技术
单元二 饲料中粗蛋白质的测定
一、适用范围
凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。
二、测定原理
三、所需试剂
1、硫酸（GB 625）
2、混合催化剂
3、氢氧化钠（GB 629）
4、硼酸（GB 628）
5、混合指示剂
6、0.02mol/l盐酸标准溶液
7、蔗糖（HG 3—1001）
8、硫酸铵（GB 1396）
9、硼酸吸收液
混合催化剂
混合指示剂
盐酸标准液
加混合指示剂的硼酸
氢氧化钠溶液
蒸馏水
四、仪器设备
牧医工程学院精品在线课程
电子天平
滴定筒
通风橱内电炉及消煮架
锥形瓶
容量瓶
凯氏烧瓶
洗瓶
刻度吸管
移液管
量杯
半微量凯氏蒸馏装置
五、试样的选取制备
选取具有代表性的试样用四分法缩减至 200g ，粉碎后全部通过 40目筛，装于密封容器中，防止试样成分的变化。
六、分析步骤
（1）试样的消毒： 称取试样0.5~1g(含氮量5~80 mg)准确至0. 0002 g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力(360~410℃ )直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。
（2）氨的蒸馏—半微量蒸馏法
将试样消煮液冷却，加入20 mL蒸馏水，转入100 mL容量瓶中，冷却后用水稀释至刻度，摇匀，做为试样分解液。将半微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有20 mL硼酸吸收液和 2滴混合指示剂的锥形瓶内。蒸汽发生器的水中应加入甲基红指示剂数滴，硫酸数滴，在蒸馏过程中保持此液为橙红色，否则需补加硫酸。准确移取试样分解液10-20 mL注入蒸馏装置 的反应室中，用少量蒸馏水冲洗进样入口，塞好入口玻璃塞，再加10 mL氢氧化钠溶液，小心提起玻璃塞使之流入反应室，将玻璃塞塞好，且在入口处加水密封，防止漏气。蒸馏4 min降下锥形瓶使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏 1 min，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均流入锥形瓶内，然后停止蒸馏。
蒸馏步骤的检验
精确称取0.2g硫酸铵，代替试样，按上述两种步骤进行操作，测得硫酸铵含氮量为21.19%±0.2%，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。
滴定
用半微量蒸馏法蒸馏后的吸收液立即用0.1 mol/L或 0.02 mol/L盐酸标 准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。
（二）空白测定
取蔗糖 0.5g，代替试样，按以上步骤进行空白测定，消耗 0.02mol/L的盐酸标准溶液体积不得超过 0.3ml。
（三）分析结果的表述
1、计算结果如下式
2、重复性
每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。
当粗蛋白质含量在25%以上时，允许相对偏差为 1%。
当粗蛋白质含量在10%-25%之间时，允许相对偏差为2%。
当粗蛋白质含量在10%以下时，允许相对偏差为3%。

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