资源简介

(共22张PPT)
饲料中总磷含量测定
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目 录
Contents
目录
6
检测分析依据
检测分析原理
检测试剂材料
检测仪器设备
检测分析步骤
检测数据处理
7
检测清场工作
GB/T 6437-2018
适用范围
规定了饲料中总磷测定的分光光度法
适用于饲料原料及饲料产品中磷的测定
取样量5g，定容至100mL时，方法的
检出限为20mg/kg，定量限为60mg/kg
试样中的总磷经消解，在酸性条件下与钒钼酸铵生成黄色的钒钼黄[(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3] 络合物。钒钼黄的吸光度值与总磷的浓度成正比。在波长400nm下测定试样溶液中钒钼黄的吸光度值，与标准系列比较定量。
H3PO4+16(NH4)3MoO4+HNO3+NH4VO3
(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3+NH4NO3+44NH3 +16H2O+8H2
分析纯试剂
优级纯试剂
水：符合GB/T6682中规定的三级水
1:1盐酸溶液
用50ml的量筒先量取50ml的水，
将50ml的水倒入100ml烧杯中，
再用50ml量筒量取50ml浓盐酸，
将盐酸倒入烧杯即得。
注意：1.试剂和水贴壁倒入
2.酸入水，玻棒搅拌
3.通风橱进行，废液处理
磷标准储备液（50μg/ml）
取105℃干燥至恒重的磷酸二氢钾，
置干燥器中，冷却后，精密称取
0.2195g，溶解于水，定量转移至
1000mL容量瓶中，加硝酸3mL，
加水稀释至刻度，摇匀，即得。
注意： 1.干燥样品称取
2.天平使用
3.定容操作
4.废液处理
钒钼酸铵显色剂
称取偏钒酸铵1.25g，加水200mL加热溶解，
冷却后，再加入250mL硝酸；另称取钼酸铵25g，
加水400mL加热溶解，在冷却的条件下，将两种
溶液混合，用水稀释定容至1000mL，避光保存。
注意：1.药品称取；2.硝酸溶解
3.定容操作；4.废液处理
溶 液 配 制
粉碎机
0.42mm孔径分析筛
分析天平（感量0.1mg）
紫外-可见分光光度计
高温电炉
电热鼓风干燥箱
可调电炉
吸 量 管
移 液 管
1ml 3支 2ml 1支
5ml 2支 10ml 1支20ml 1支
10ml 大肚移液管 1支
容 量 瓶
50ml 8个 100ml 2个
1000ml 2个 （透明棕色各一）
烧 杯
50ml 1个 100ml 2个
500ml 4个 1000ml 1个
2000ml 1个
量 筒
50ml 1个 250ml 1个
500ml 1个
瓷 坩 埚
瓷坩埚 3个
洗 耳 球
洗耳球 2个
另需准备：
洗瓶2个、玻璃棒5个、镊子，橡胶手套，白线手套，称量手套，药匙，称量纸，天平刷，铅笔橡皮尺子，标准计算纸，方托盘，标签纸，滤纸，记号笔，擦镜纸，抹布、蒸馏水若干。
抽 样
取 样
A
B
（1）总 磷 消 解
试
样
制
备
按GB/T 14699.1 抽取有代表性的饲料样品，可用四分法缩减取样约200g。
按GB/T 20195-2006 制备试样，粉碎，通过0.42mm孔径的分析筛，混匀装入磨口瓶中，贴上标签，备用。
称 样
灰 化
称取试样2g，精确到1mg，置于坩埚中。
（1）总 磷 消 解
干
法
灰
化
碳 化
调温电炉上
小心炭化至无烟
将化炭后的坩埚放入高温炉中，温度达550℃时开始计时，在550℃灼烧3h，坩埚钳取出坩埚夹至托盘，冷却至室温。
加 酸
沸 煮
定 容
在已灰化好的试样坩埚中，用20ml移液管定量移取1:1盐酸溶液
10ml和硝酸数滴。
移至可调温电炉，
小心煮沸约10min。
冷却后定量转移至100ml容量瓶中，用洗瓶加水稀释，后用胶头滴管定容至刻度，摇匀，得试样分解液。
（1）总 磷 消 解
制备试样分解液
A
取6只50ml容量瓶，编号1-6。使用1ml、2ml、5ml、10ml、20ml的移液管分别准确移取磷标准贮备液0ml、1ml、2ml、5ml、10ml、15ml，依次于50ml容量瓶。每只容量瓶中含磷量依次为0μg、50μg、100μg、250μg、
500μg、750μg。
于各容量瓶中分别加入钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置十分钟以上。
B
（2） 显色与比较定量
磷标准工作液的制备与测定
磷标准贮备液
移 取
显色、定容
D
预热
核对分光光度计的型号后，打开比色池，取出
干燥剂，开机。
调节波长至400nm，预热30分钟。
润洗比色皿
C
分光光度计
准 备
磷标准工作液的制备与测定
（2） 显色与比较定量
比色皿的润洗：1cm比色皿，用试样溶液润洗
三次。
比色皿装液：润洗三次后，使用该比色皿装取
试样溶液。
比色皿拭干：用滤纸擦净比色皿的毛玻璃面，
用擦镜纸擦净比色皿的光面和底部。得到六个
装有试样溶液的比色皿。
E
F
（2） 显色与比较定量
磷标准工作液的制备与测定
比 色
绘 制
磷标准曲线
放入比色皿：将装有“0ml磷标准溶液”的比色皿放入比色池的第一格内，其余溶液依次按序号放入比色池的格中。
分光光度计校正：盖上样品室盖，用“黑体”校正透光率为0%。用装有“0ml磷标准溶液”的比色皿，校正吸光度为0。
吸光度测定与记录：同时，以“0ml磷标准溶液”为参比，用1cm比色皿，在400nm波长下用分光光度计测各溶液的吸光度（A）。记录每份试样溶液的吸光度值。
标准溶液磷含量：0、50、100、250、500、750（μg），在400nm波长下的吸光度值为A0、A1、A2、A3、A4、A5。
以含磷量m1为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制磷标准曲线。
在磷标准曲线上取两点带入，得到线性方程式。
①
②
③
④
（2） 显色与比较定量
试
样
的
测
定
准确移取试样分解液
取3只50ml容量瓶，编号样1、样2和空白。
准确移取试样分解液1ml于样1、样2容量瓶中，准确移取三级水1ml于空白容量瓶中。
显色、定容、比色、吸光度测定与记步骤，均与磷标准工作液的测定步骤相同。
定量试样溶液含磷量
将试样分解液吸光度值代入磷标准曲线的线性方程，计算试样溶液的磷含量。
分光光度计的关机、清洁和填写记录
检测操作完成，检查比色池内有无液体溅出，用擦镜纸擦拭比色池和样品室盖，样品室内放入干燥剂，盖上样品室盖，关闭电源开关并断电，盖上遮尘布再进行收纳。分光光度计仪器必须放在干燥通风处存放，方便下次使用。
使用完毕后应填写“使用记录”。
比色皿洗净后，用蒸馏水冲洗，再用擦镜纸擦干。
式中：
w ——试样中磷的含量；
m1——通过工作曲线计算出试样溶液中磷的含
量，单位为微克（μg）；
V ——试样溶液的总体积，单位为毫升（mL）。
m ——试样质量，单位为克（g）；
V1 ——试样测定时移取试样溶液的体积，单位
为毫升（mL）；
106——换算系数。
（1）结果计算
试样中磷的含量w计，以质量分数计，数值以%表示，结果按公式计算：
（2）结果表示
每个试样称取两个平行样进行测定，以其算术平均值为测定结果，所得到的结果表示至小数点后二位。
（3）精密度
废 液 废 渣
处 理
废液：由于样液中含有“强酸”，所以严禁直接倒入下水道。对于高浓度废酸废碱液体，应中和至中性后排放，应在指定地点对化学废液进行处理。
废纸：实验室垃圾不得丢弃于楼 廊中，必须 垃圾袋或桶存放于各个实验室。当达到 定量时，须丢弃到指定的地 ，统 组织处理。
玻璃渣：实验中破碎的器皿等玻璃制品，应佩戴手套后收集到一起，用纸包好，在表面标注，存放于实验室定期集中处理，不可直接扔进垃圾箱。
一次性用品：如塑料滴管、橡胶手套等用后统一打包，统一处理。
玻 璃 仪 器
处 理
移液管、容量瓶和量筒等带有精密刻度的仪器，不宜使用刷洗的方式，以免摩擦刻度线。常用铬酸洗液浸泡15min左右,再用自来水冲净残留在器皿上的洗液,然后用蒸馏水润洗2-3次。冲洗后可自然凉干或冷风吹干。干燥后检查器皿上是否有残留的水渍和污渍，确保干净后戴手套放入托盘中，进行
“入柜、分类、定位”存放。
比色皿不可长时间浸泡，不可采用刷洗，应在实验结束后立刻清洁。清洁时采用合成洗涤剂或盐酸-乙醇溶液，冲洗干净后用蒸馏水冲洗，烘干后装入比
色皿盒中存放。
烧杯、玻璃棒等一般玻璃器皿：在流动的水龙头下，用毛刷蘸去污粉或合成洗涤剂刷洗；然后转移实验室专用的超声波清洗机中，加入自来水和洗涤剂，盖上机盖，打开开关定时30分钟以上，清洗结束后用自来水冲掉洗涤剂,再用蒸馏水冲洗三次,去掉自来水中带来的钙、镁、铁、氯等离子，放入电热干燥箱高温烘干。烘干后检查器皿上是否有残留的水渍和污渍，确保干净后戴手套与其它玻璃器皿一同存放。
仪器设备 处 理
分析天平：使用后用关机拔掉电源，盖上防尘罩后，避潮、防腐、避光、防雷保存。
分光光度计：关闭电源开关后将电源插头拔出，盖上遮尘布再进行收纳。分光光度计仪器必须放在干燥通风处存放。
电热干燥箱和超声波清洗机：确保箱内无水干燥，断电后盖上箱盖，以便下次使用。
可调温电炉和高温炉：确保仪器的温度为室温后，断电存放。
谢
谢
聆
听

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