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高二下学期生物学人教版（2019）期末达标测试卷A卷
题号 一 二 三 总分
分数
考试时间：75分钟 满分：100分
一、单项选择题：本题共13小题，每题3分，共39分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.许多传统美食的制作过程都蕴含了生物发酵技术。下列关于果酒、果醋、泡菜制作的相关叙述错误的是( )
A.发酵后形成的溶液都成酸性
B.乙醇既是果酒发酵的产物，也是果醋发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖
C.醋酸杆菌和乳酸菌发酵过程中控制通气的情况不同
D.只要取材得当，操作正确规范，最终泡菜坛内微生物只有乳酸菌
2.微生物的培养需要适宜的条件。下列相关叙述正确的是( )
A.培养基中必须添加水、碳源、氮源、无机盐和维生素等
B.果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
C.培养基制备过程中需要将 pH 调至中性，然后灭菌
D.为便于接种，培养基中都要添加琼脂或其他的凝固剂
3.地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解。研究人员按照下图所示流程从土壤中分离得到能高效分解纤维素的细菌。实验过程需要甲、乙两种培养基，乙培养基组分比甲多物质X。下列叙述错误的是( )
A.可从埋入土壤并已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌
B.甲培养基为选择培养基，乙培养基中的物质X为琼脂
C.盛有水或培养基的锥形瓶通常采用干热灭菌法进行灭菌
D.甲培养基培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到目的菌
4.微生物菌种的高通量筛选是微生物研究领域的一场技术革命，在微生物药物的筛选方面发挥了积极的作用，是筛选新型抗生素的有效手段。下列有关叙述，错误的是( )
A.筛选的对象可以是自然界分离、诱变产生和生物技术改造的菌株
B.高通量筛选获得的高产抗生素菌株可通过发酵工程来大规模生产抗生素
C.从某些微生物中分离出的抗生素，可以作为微生物农药用于防治作物疾病
D.抗生素的滥用会使致病菌产生耐药性变异从而降低治疗效果
5.青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量极其微小。下列关于利用植物组织培养生产青蒿素的叙述，错误的是( )
A.在黄花蒿组织培养过程中的一定阶段必须给予光照
B.可以对愈伤组织进行培养使其增殖，以便从中直接获得青蒿素
C.在植物组织培养过程中，由于细胞一直处于不断增殖的状态，因此容易突变
D.生长素对脱分化和再分化过程具有调节作用，但不能直接提高青蒿素的产量
6.下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项( )
①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞
②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象
③灭活的病毒可增加细胞膜的流动性，因而可用于诱导动物细胞融合
④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题
⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个
⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
⑦动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养
⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性
A.4项 B.5项 C.6项 D.7项
7.我国科研人员利用小鼠获得了单倍体胚胎干细胞，流程如下图所示。目前构建成功的单倍体胚胎干细胞的细胞核内包含的性染色体全部都是X染色体，而无包含Y染色体的细胞。已知小鼠Y染色体比X染色体短小，下列叙述错误的是( )
A.精子头部入卵后，透明带迅速发生生理反应拒绝其他精子进入透明带
B.为得到只含精子染色体的胚胎干细胞需在核融合前剔除卵子的雌原核
C.由图可知，单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞
D.Y染色体比X染色体短小，可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因
8.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当热稳定DNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列叙述错误的是( )
A.引物中G+C含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性就越高
B.用PCR方法扩增DNA目的基因时不必知道基因的全部序列
C.设计引物的目的是为了能够从其3′端开始连接脱氧核糖核苷酸
D.若某次PCR反应共产生52个等长DNA，则需加入6个荧光探针
9.琼脂糖凝胶电泳常用于基因工程中不同 DNA 片段的检测，研究人员用 EcoRⅠ和 SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，得到图2所示图谱，其中1号泳道是标准DNA 样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果；图 1 为 EcoRⅠ切割该 DNA 分子后的结果。下列说法错误的是( )

A.EcoRⅠ的识别序列为GAATTC，切割位点在G和A 之间
B.该DNA分子最可能是含1000碱基对的环状DNA
C.据图2可知，该DNA分子中EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点各有一个
D.EcoRⅠ和SmaⅠ共同处理后，形成2个游离的磷酸基团
10.如图是被农杆菌侵染的水稻植株的DNA片段，研究者将其连接成环，并以此环为模板进行PCR，扩增出T—DNA插入位置两侧的未知序列，据此来确定T—DNA插入的具体位置。有关说法正确的是( )
A.农杆菌在自然条件下主要侵染单子叶植物和裸子植物，T—DNA存在于其Ti质粒上
B.若扩增循环n次，需要2n-2个引物
C.利用图中的引物②③组合可扩增出两侧的未知序列
D.将扩增出的未知序列与水稻基因组序列比对可确定T—DNA的插入位置
11.葡萄糖异构酶能将葡萄糖转化为果糖，其最适温度约为60'C，生产上常用于高果糖浆的生产。科学家将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，结果它的最适温度提高了约10C。下列有关叙述正确的是( )
A.编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核苷酸序列会有相应的改变
B.蛋白质工程直接对蛋白质进行操作，从而改造或制造自然界没有的蛋白质
C.经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状不可遗传
D.改造后的葡萄糖异构酶在60'C时催化活性高于70C时
12.现代生物技术在造福人类的同时，也可能引起一系列的安全性和伦理问题。下列说法正确的是( )
A.整合到油菜叶绿体基因组中的除草剂基因，会通过花粉传入环境，造成基因污染
B.我国对“克隆人”这一技术总体上来说是禁止生殖性性克隆，监控和严格审查治疗性克隆
C.设计试管婴儿与普通试管婴儿的区别在于前者在植入前需要对胚胎进行性别鉴定
D.进行基因检测做成基因身份证会造成基因资讯泄露，因此没有必要进行基因检测
13.三白草和鱼腥草二者因疗效相近且具有叠加效应常被中医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到杂种细胞，并实现有效成分的工厂化生产，操作如图所示。下列有关叙述正确的是( )
A.①过程可利用盐酸和酒精混合液（1：1）配制的解离液来完成
B.②过程通常在低渗溶液中采用PEG融合法诱导原生质体融合
C.杂种细胞形成愈伤组织的过程中，其特有功能丧失，但结构不变
D.图中所示的生产流程体现了细胞膜的流动性，但未体现植物细胞的全能性
二、多项选择题：本题共5小题，每小题5分，共25分。在每小题给出的四个选项中，有不止一个选项是符合题目要求的。全部选对得5分，选对但选不全得3分，有选错得0分。
14.生物学是以实验为基础的自然科学。我校生物实验课同学们选用菜花进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验。下列说法错误的是( )
A.利用DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离
B.将菜花切碎放入研钵中，倒入10ml体积分数为95%的酒精进行充分研磨
C.向含DNA的溶液中加入一定量的二苯胺试剂混合均匀后，溶液会呈现蓝色
D.利用DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于2mol/L的NaCl溶液
15.泡菜是一类历史悠久、深受大众喜爱的发酵蔬菜制品，大肠杆菌、酵母菌和乳酸菌均参与泡菜的发酵过程。下列有关泡菜制作的叙述，正确的是( )
A.发酵初期，酵母菌等会产生CO2，水槽内常有气泡产生
B.发酵中期，乳酸菌替代大肠杆菌和酵母菌成为优势菌
C.腌制泡菜过程中经发酵会产生多种酸，其中含量最高的酸是亚硝酸
D.在泡菜腌制过程中乳酸和亚硝酸盐的含量都先增加后减少再趋于稳定
16.啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵而成的，主要工艺流程如图所示，其中糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质。下列叙述错误的是( )
A.利用大麦作原料时，淀粉是酵母菌直接利用的主要碳源
B.焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活
C.过程②中碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，缩短糖化过程的时间
D.过程③的发酵阶段需要始终保持厌氧环境，以便完成酒精的生成
17.科学家从某植物中提取乙烯受体基因(Ers1)，通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中，筛选出转入反义Ersl基因的该种植物，其果实的储藏期将延长，过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhoI、HpaI酶切序列
B.过程②可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C.过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选
D.可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因
18.下图是新冠病毒抗原（N蛋白）检测试剂盒的原理。试剂盒有两条指示线：反应线（T线）和质控线（C线），胶体金垫中有含有胶体金颗粒的抗体1和抗体4，反应线和质控线的位置分别固定抗体 2 和抗体3，胶体金颗粒大量聚集后会呈现红色，如下图所示。下列有关叙述正确的是( )
A.使用N蛋白作为检测标志物的原因是该蛋白在不同新冠病毒株系中高度保守且表达量高
B.抗体1和抗体4均可以和新冠病毒结合，抗体4是可以与抗体3特异性结合的质控抗体
C.抗原检测试剂盒所需要的多种抗体需要较高的纯度，通常使用单克隆抗体的方法制备
D.橙汁未经样本洗脱液处理直接滴加会改变试剂盒的pH，导致抗原抗体非特异性结合而产生“假阳性”
三、非选择题：本题共3小题，共36分。
19.小曲白酒以大米、大麦、小麦等为原料，以小曲为发酵剂酿造而成，其酿造工艺流程，如下图所示。小曲中主要含有好氧微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等细菌，酿酒的原理主要是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精。
回答下列问题。
（1）在摊晾好的粮食上“撒曲”相当于微生物培养技术中的_______，小曲中4种微生物在结构上最主要的区别是________________________________。
（2）装坛发酵阶段若发酵坛内密封不严，可能导致酒变酸，判定是小曲中_______（填“醋酸菌”或“乳酸菌”）发酵所致，写出相应的反应简式：_______________________。
（3）啤酒的发酵过程与小曲白酒基本相似，流程如下图所示，比较二者的生产流程，可发现“糖化”这一过程的目的相同，都是_______________，不同之处在于__________________。倒啤酒时有大量气泡产生，气体的来源是_______________。
20.为了将某纳米抗体和绿色荧光蛋白基因融合表达，运用重组酶技术构建质粒，如图1所示。请回答下列问题：
（1）分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有______，扩增程序中最主要的不同是______。
（2）有关基因序列如图2。引物F2-F、F1-R应在下列选项中选用______。
A. ATGGTG------CAACCA
B. TGGTTG------CACCAT
C. GACGAG------CTGCAG
D. CTGCAG------CTCGTC’
（3）将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在重组酶作用下可形成环化质粒，直接用于转化细菌。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶主要有_______。
（4）转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，下列叙述错误的有_______。
A. 稀释涂布平板需控制每个平板30~300个菌落
B. 抗性平板上未长出菌落的原因一般是培养基温度太高
C. 抗性平板上常常会出现大量杂菌形成的菌落
D. 抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化
（5）为了验证平板上菌落中的质粒是否符合设计，用不同菌落的质粒为模板，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，质粒P1~P4的扩增产物电泳结果如图3．根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有______。
（6）对于PCR产物电泳结果符合预期的质粒，通常需进一步通过基因测序确认，原因是______。
21.佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施。熔喷布是口罩生产的重要原料，其主要成分是聚丙烯，其易降解程度是评价口罩合格性的重要指标之一，如图1表示从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌的接种实验中的一些步骤。回答下列问题：
（1）图1中接种工具的名称是_____，接种方法是_____。
（2）图中所用的培养基应以聚丙烯为唯一碳源，其目的是_____。这样的培养基按功能划分，属于_____培养基。
（3）在扩大培养时，若持续增加培养基中营养物质的浓度，将不利于提高菌种的种群密度，原因是_____。
（4）步骤②中，将接种工具冷却的目的是_____。
（5）称取10g某土壤样品，转入适量无菌水中，制备成100mL菌液，经_____后，获得细胞密度不同的菌液，从5号试管取0.1mL菌液涂布在固体培养基上，结果如下图所示。结果表明每克土壤样品约含高效降解聚丙烯的细菌_____个。
（6）分别取三个平板用稀释涂布平板法培养三种细菌（甲.乙.丙），然后在培养基上打出直径为3mm的孔，并在孔中加入一定浓度的M抗生素，经过一定时间培养后，可以在孔的周围观察到一圈清晰区，这是M抗生素抑制细菌生长所致的。测量清晰区的直径（如图2所示），数据如表所示。
①三种细菌中对低浓度M抗生素最敏感的是_____。
②有人因感染了丙细菌而患病，使用M抗生素给予治疗，医生建议不能使用浓度大于25μg/mL的M抗生素，理由是_____（答出两点）。
不同浓度M抗生素条件下清晰区直径（mm）
细菌 5μg/mL 7.5μg/mL 10μg/mL 15μg/mL 20μg/mL
甲 7 10 14 16 16
乙 — 5 8 13 17
丙 5 7 9 14 19
22.CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。研究发现，多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，回答下列问题。
（1）步骤①，运用CD47对实验小鼠进行多次免疫，目的是___________________________。步骤②，运用特定的___________对细胞进行第一次筛选，只有__________才能生长，此类细胞的特点是_____________________。
（2）进行③之前还要进行第二次筛选才能获得产生抗CD47的单克隆抗体的杂交瘤细胞，筛选的方法是___________________________，原理是_____________________。
（3）对照组应设置为_______________________________。能验证“CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用”这一推论的实验结果是_________________________。
23.2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。在培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10S之内对卵母细胞进行去核操作，在15S之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。培育克隆猴的流程如下图所示，请结合图回答问题。
（1）为获得数量较多的卵母细胞，采集前应先用_____激素处理母猴，从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行“去核”处理，这里的“核”是指_____。在对卵母细胞去核时，还应同时去除透明带内的_____（细胞）。
（2）研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前，用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中，灭活的仙台病毒所起的作用是_____。
（3）重组细胞进行体外培养时，需要提供适宜的营养条件和环境条件，其中培养液通常需要加入的天然成分是_____。动物细胞培养的气体主要有O2和CO2。CO2的主要作用是_____，激活后，将胚胎移植到经过_____处理的代孕母猴体内，最终产出克隆猴。
（4）在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是_____。
A.卵母细胞大，便于操作
B.卵母细胞含有的营养物质多
C.卵母细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达
D.重组细胞才具有全能性
答案以及解析
1.答案：D
解析：A、果酒发酵的产物CO2、果醋发酵的产物醋酸、泡菜制作中产生的乳酸都会使得发酵液呈酸性，A正确；
B、乙醇既是果酒发酵的产物，也是果醋发酵的底物，而且还可以抑制杂菌繁殖，B正确；
C、醋酸杆菌其新陈代谢类型是异养需氧型，乳酸菌是厌氧异养型，所以醋酸杆菌和乳酸菌发酵过程中控制通气的情况不同，C正确；
D、泡菜制作中利用的菌种主要是乳酸菌，如果操作正确，最终坛中的主要菌群是乳酸菌，此外还含有其他微生物，D错误。
故选D。
2.答案：B
解析：A、培养固氮微生物时，培养基中可以不添加氨源，培养自养微生物时培养基中可以不加碳源，A错误;
B、以酒精为底物进行醋酸发酵，酒精与氧气发生反应产生醋酸和水，几乎没有气泡产生，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时，B正确;
C、大多数细菌的最适生长pH值为6.5~7.5，因此在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，但培养霉菌时需要将pH调至酸性，C错误;
D、需要将菌种接种到固体培养基时才要在培养基中添加琼脂或其他的凝固剂，D错误。
3.答案：C
解析：A、可从埋入土壤并已腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌，A正确;
B、甲培养基为选择培养基，乙为固体培养基，所以物质X为琼脂，B正确;
C、盛有水或培养基的锥形瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，C错误;
D、甲培养基培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到目的菌，D正确。
4.答案：D
解析：A、性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，如生产柠檬酸就需要筛选产酸量高的黑曲霉，A正确；
B、发酵工程能使人们能够在严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品，B正确；
C、微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，C正确；
D、抗生素的滥用可以使具有耐药性变异致病菌被筛选出来从而降低治疗效果，不能定向变异，D错误。
故选D。
5.答案：B
解析：A、诱导愈伤组织应该避光培养，原因是在有光时往往形成维管组织，而不形成愈伤组织：愈伤组织再分化成胚状体时需要光照，原因是叶绿素的合成需要光照以及试管苗需要光进行光合作用制造有机物，A正确；B、青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量极其微小，因此通过大量培养愈伤组织不能直接获得青蒿素，B错误；C、在植物的组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断增殖的状态，因此它们容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等）的影响而产生突变，C正确；D、植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，对于脱分化和再分化等过程具有调节作用，但是不能直接提高青蒿素的产量，D正确。
6.答案：D
解析：①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞融合为一个细胞，但没有涉及相互识别，①错误；
②动物的癌细胞不会发生接触抑制现象，②错误；
③灭活病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，使细胞发生融合，③错误；
④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题，④正确；
⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞的核DNA分子数为80个，此外在细胞质中还有少量的DNA分子，⑤错误；
⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，先用酶解法去除细胞壁，再用聚乙二醇诱导植物的原生质体融合，⑥错误；
⑦动物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养，植物组织培养时不需要用酶处理，⑦错误；
⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞的分裂能力旺盛，⑧错误。
7.答案：A
解析：在精子触及卵细胞膜的瞬间，卵细胞膜外的透明带会迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带；精子入卵后，卵细胞膜也会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，A错误。精子入卵后，尾部脱离，原有的核膜破裂并形成一个新的核膜，最后形成一个比原来精子的核还大的核，叫作雄原核；与此同时，精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核。为得到只含精子染色体的胚胎干细胞需在核融合前剔除卵子的雌原核，B正确。单倍体胚胎干细胞来自小鼠囊胚期的内细胞团细胞，C正确；由题意可知，目前构建成功的单倍体胚胎干细胞无包含Y染色体的细胞，且Y染色体比X染色体短小，所以推测Y染色体上的基因相对较少，可能缺少支持单倍体胚胎干细胞存活的基因，D正确。
8.答案：D
解析：A、C和G之间由三个氢键连接，引物中G+C的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性就越高，A正确;B、如果引物1和引物2互补或引物自身发生碱基互补配对，那这两个引物或引物自身就会结合到一起，无法再和模板结合，不能做到有效检测，所以必须避免两个引物之间互补以及引物自身发生碱基互补配对，B正确;C、引物为一段核苷酸序列，引物与DNA模板链结合后，能够从其3 端开始连接脱氧核糖核苷酸，开始子链的合成，C正确;D.若某次PCR反应共产生52个等长的DNA，则至少扩增六次，其余为不等长的DNA，根据扩增过程可知，每利用一对引物延伸一次，就水解探针一个，则至少需加入26-1=63个荧光探针，D错误。
9.答案：D
解析：A、由图可知，EcoRI的识别序列为GAATTC,切割位点在G和A之间，A正确;B、2号、3号、分别是EcoRI单独处理、SmaI单独处理后的电泳结果，两个泳道均只出现一个DNA片段，且分子量是1000，说明该DNA分子最可能是含1000个碱基对的环状DNA，B正确;C、图2中4号是EcoRl和SmaI两种酶共同处理后的电泳结果，显示800bp和200bp两个条带，说明在该DNA分子中。两种限制酶的酶切位点各有一个，C正确;D、图2中4号是EcoRI和SmaI两种酶共同处理后的电泳结果，显示800bp和200bp两个条带，每个DNA分子有2个游离的磷酸基团，故共有4个游离的磷酸基团，D错误。
10.答案：D
解析：农杆菌在自然条件下能感染双子叶植物和裸子植物,A错误;进行 PCR扩增需要热稳定 DNA聚合酶(Taq DNA聚合酶),但不需要解旋酶,B错误;DNA的两条链反向平行,子链从引物的3 端开始延伸,则利用图中的引物①④组合可扩增出两侧的未知序列,C错误;通过与受体细胞的基因组序列比对,即可确定T-DNA的插入位置,D正确。
11.答案：B
解析：A、蛋白质工程直接对基因进行操作，通过基因修饰或基因合成来实现对蛋白质的改造，A错误;B、蛋白质工程通过基因修饰或基因合成来实现对蛋白质的改造，因此要将葡萄糖异构酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，则编码葡萄糖异构酶的基因的脱氧核苷酸序列会有相应的改变，B正确;C、由于改造的是基因，因此经改造后的葡萄糖异构酶热稳定性提高这一性状可遗传，C错误;D、葡萄糖异构酶的最适温度约为60*C，改造后它的最适温度提高了约10°C，因此改造后的葡萄糖异构酶在60°C时催化活性低于70°C时的，D错误。故选:B。
12.答案：B
解析：A、花粉(精子)中不含叶绿体，故整合到油菜叶绿体基因组中的除草剂基因，不会通过花粉传入环境，不造成基因污染，A错误;B、生殖性克隆是指通过克隆技术产生独立生存的新个体。治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。两者有着本质的区别。我国对克隆人这一技术总体上来说是禁止生殖性性克隆，监控和严格审查治疗性克隆，B正确;C、设计试管婴儿的目的是对已患有疾病的孩子进行治疗，设计试管婴儿与普通试管婴儿的区别在于前者在植入前得要对胚胎进行遗传学诊断，C错误;D、进行基因检测做成基因身份证会造成基因资讯泄露，但是也能了解其患病情况，应该辩证地看待，D错误。故选B.
13.答案：D
解析：D、图中所示的生产流程培养到愈伤组织即可,没有体现植物细胞的全能性,D正确。
14.答案：BC
解析：A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A正确;
B、95%的酒精作用是分离DNA和蛋白质，将菜花切碎放入研钵中，倒入10ml体积分数为研磨液进行充分研磨，B错误;
C、向含DNA的溶液中加入一定量的二苯胺试剂混合均匀后，水浴加热后溶液会呈现蓝色，C错误;
D、利用DNA能溶于2molL的NaCl溶液，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于2molL的NaCl溶液，D正确。
15.答案：AB
解析：发酵初期，蔬菜刚入坛时，乳酸含量较少，其表面带入的微生物中大肠杆菌和酵母菌等较为活跃，酵母菌进行细胞呼吸会产生CO2，A项正确；发酵中期，由于发酵初期乳酸菌的发酵作用，乳酸不断积累，pH下降，大肠杆菌、酵母菌等的活动受到抑制，乳酸菌替代大肠杆菌和酵母菌成为优势菌，B项正确；腌制泡菜过程中发酵会产生多种酸，其中含量最高的是乳酸，C项错误；在泡菜腌制过程中亚硝酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定，乳酸的含量会一直增加，最后稳定，D项错误。
16.答案：AD
解析：A、利用大麦作原料时，淀粉需要分解成葡萄糖才能被酵母菌的利用，A错误;
B、利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚但不使淀粉酶失活为后续的糖化过程做准备，B正确;
C、据题意~糖化的目的是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子物质”，故过程②破碎有利于淀粉与淀粉酶的充分接触，缩短糖化过程所用的时间，C正确;
D、为了提高菌种数量、缩短发酵时间，过程③的主发酵初期应提供氧气，酵母菌在有氧条件下能快速繁殖，错误。故选AD。
17.答案：CD
解析：A、根据题意，ErsI基因的转录方向由左向右，据图可知，质粒中限制酶Hpal靠近启动子，限制酶Xhol靠近终止子，若要将ErsI基因反向连接到质粒中，则需在Ers1基因左右两端分别添加Xhol、Hpal酶切序列，A正确;B、图中过程②是将构建的基因表达载体导入农杆菌，方法是感受态细胞法，因此需要用氨化钙处理农杆菌，使其处于感受态，有助于促进重组T质粒转化到农杆菌细胞中，B正确;C、过程③利用农杆菌侵染植物细胞的过程，利用了农杆菌T质粒上的T-DNA的特点，T-DNA携带目的基因插入到植物细胞染色体的DNA上，根据图中T-DNA的左右边界可知，携带目的基因的T-DNA上带有潮霉素抗性基因，因此过程③后可在培养基中添加潮霉素对转化的植物细胞进行筛选，C错误;D、利用DNA分子杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因，D错误。故选CD。
18.答案：ACD
解析：胶体金垫中有含有胶体金颗粒的抗体1和抗体4,抗体1和抗体2均能与新冠病毒表面抗原结合,抗体3和抗体4之间能够特异性结合。
19.答案：（1）接种；酵母菌和霉菌有以核膜为界限的细胞核，乳酸菌和醋酸菌没有
（2）醋酸菌；C6H12O6+2O22CH3COOH+2H2O+2CO2+能量
（3）分解淀粉形成糖浆；所需的酶来源不同（所需酶的来源分别是微生物和发芽的大麦）；酵母菌无氧呼吸产生的CO2
解析：（1）略。
（2）坛内密封不严，会导致空气进入坛内，乳酸菌为厌氧型生物，空气不利于其生存，醋酸菌为好氧型生物，会在有氧条件下讲坛内的酒精转化为乙醛，进一步转化为醋酸。
（3）糖化的目的都是利用酶将淀粉分解形成糖浆，但小曲白酒制作过程所需酶的来源是微生物，啤酒生产过程中酶的来源是发芽的大麦中的淀粉酶。啤酒发酵过程中酵母菌发酵产生酒精的同时会释放二氧化碳，导致倒啤酒时产生丰富的泡沫。
20.答案：（1）模板（片段F1、片段F2）、引物；引物
（2）CD
（3）限制性核酸内切酶（限制酶）
（4）ABC
（5）P3、P4
（6）琼脂糖凝胶电泳技术仅能用于分析待检测DNA分子的大小，无法确定待检测DNA分子的碱基序列
解析：（1）PCR反应进行的条件：引物、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。分别进行PCR扩增片段F1与片段F2时，配制的两个反应体系中不同的有模板（片段F1、片段F2）、引物。PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合。引物设计是决定PCR反应成败的最重要因素，因此扩增程序中最主要的不同是引物的设计。
（2）由图1可知，引物F2-F用于扩增F2片段，引物F1-R用于扩增F1片段，C选项中5'GACGAG-3'能与AnBl中左侧部分碱基进行碱基互补配对，因此引物F2-F选用C.D选项中5'CTGCAG-3'能与EGFP中的右侧部分序列进行碱基互补配对，因此引物F1-R选用D。
故选、CD。
（3）传统重组质粒构建需要使用限制性核酸内切酶（限制酶）切割质粒使其具有与目的基因相同的黏性末端，之后再用DNA连接酶将目的基因和质粒连接成重组质粒。将PCR产物片段与线性质粒载体混合后，在DNA连接酶的作用下可形成环化质粒，不需要使用限制性核酸内切酶（限制酶）。
（4）A、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，用稀释涂布平板法筛选时，菌落数可能低于30，A错误； B、培养基冷却后才能接种，抗性平板上未长出菌落，一般不是培养基温度太高所致，B错误;C、转化后的大肠杆菌需采用含有抗生素的培养基筛选，一般含有重组质粒的大肠杆菌才能发育为菌落，故不会出现大量杂菌形成的菌落，C错误；D、稀释涂布平板和平板划线法均为分离纯化细菌的方法，用稀释涂布平板法在抗性平板上长出的单菌落无需进一步划线纯化，D正确。
故选ABC。
（5）EGFP为720bp,AnBl为390bp，二者的总大小为720bp+390bp=1100bp，用引物F1-F和F2-R进行了PCR扩增，其大小接近于P1、P2，根据图中结果判断，可以舍弃的质粒有P3、P4。
21.答案：（1）接种环；平板划线法
（2） 分离出目的菌株（或分离出能高效降解聚丙烯的菌株）；选择
（3） 随着培养液浓度升高，细菌将渗透失水，影响其生长繁殖
（4）避免温度过高，杀死菌种
（5）梯度稀释；1.7×109
（6）甲；高浓度的抗生素可能有严重的副作用；滥用抗生素可能会使细菌对抗生素的抗性增强；表中数据不能证明25μg/mLM抗生素的作用效果比20μg/mLM抗生素的好
解析：（1）图1中接种工具的名称是接种环,微生物常见的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,而接种环介导的是平板划线法。
（2）若想从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌,可选用以聚丙烯为唯一碳源的培养基,这样只有能够讲解聚丙烯的细菌才能在此培养基上生长。
（3）在扩大培养时,若持续增加培养基中营养物质的浓度,将不利于提高菌种的种群密度,原因是随着培养液浓度升高,培养液的渗透压也随之升高,细菌将渗透失水,影响其生长繁殖。
（4）由于接种之前需要对接种工具进行灼烧灭菌,故步骤②中,将接种工具冷却的目的是避免接种工具温度过高,杀死菌种,无法获得活菌。
22.答案：（1）获得足够多的能产生抗CD47抗体的B淋巴细胞；选择培养基；杂交瘤细胞；既能迅速增殖，又能产生抗体
（2）克隆化培养和抗体检测；抗原-抗体的特异性结合
（3）巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系，不加单克隆抗体
对照组中吞噬细胞的吞噬指数明显低于实验组
解析：（1）CD47对于小鼠是抗原，可引发小鼠特异性免疫反应，产生抗CD47的B淋巴细胞。步骤②可能产生未融合的骨髓瘤细胞、未融合的B淋巴细胞、融合后具有同种核的细胞、杂交瘤细胞，用特定的选择培养基培养后只有杂交瘤细胞能存活，这类杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖，又能产生抗体。
（2）对步骤②获得的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的抗体，因此需对这部分杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，选择抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，利用了抗原-抗体特异性结合的原理。
（3）本实验的目的是证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，实验组设置为“巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系+单克隆抗体”，遵循实验的对照原则和单一变量原则，对照组应设置为“巨噬细胞+肿瘤细胞共培养体系”，但不加入单克隆抗体，检测并比较两组巨噬细胞的吞噬指数，若出现“对照组中吞噬细胞的吞噬指数明显低于实验组”，则证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用。
23.答案：（1）①.（外源）促性腺（激素）②.纺锤体—染色体复合物③.第一极体
（2）诱导细胞融合
（3）①.血清②.维持培养液的pH③.同期发情
（4）C
解析：（1）用（外源）促性腺（激素）处理母猴，可获得数量较多的卵母细胞。从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行“去核”处理，这里的“核”是指纺锤体——染色体复合物，同时去除透明带内的第一极体。
（2）灭活的仙台病毒所起的作用是可以诱导细胞融合。
（3）重组细胞进行体外培养时，需要提供适宜的营养条件和环境条件，其中培养液通常需要加入的天然成分是血清，动物细胞培养的气体主要有O2和CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，激活后，将胚胎移植到经过同期发情处理的代孕母猴体内，最终产出克隆猴。
（4）在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能发育成新个体，原因最可能是卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达，C正确，BCD错误。
故选C。

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