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哈师大附中 2023-2024 学年度高二下学期联合期末考试
大庆铁人中学 生物试卷
一、单选题：本题共 40小题，每题1分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1.关于果酒、果醋和泡菜这三种传统发酵产物的制作，下列叙述正确的是
A.发酵所利用的微生物都属于原核生物
B、发酵过程都在无氧条件下进行
C.发酵过程都在同一温度下进行
D.发酵后形成的溶液都呈酸性
2.下列有关微生物分离、纯化、计数及培养的叙述，不正确的是
A.不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间.
B..菌落的大小、颜色、隆起程度等特征都可作为菌种鉴定的依据
C.用血细胞计数板计数微生物时，实验结果比实际的活菌数量往往偏小
D.稀释涂布平板法和平板划线法都可以用来分离、纯化微生物
3.有关微生物培养的说法不正确的是
A.在牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏只提供碳源、蛋白胨只提供氮源
B.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，并提供无氧条件
C.培养微生物除提供合适的营养和环境条件外，还需保证无菌条件
D.菌落是微生物在固体培养基表面或内部生长形成的，肉眼可见的子细胞群体
4.下列有关发酵工程及其相关应用的说法，正确的是
A.发酵产品如果是代谢物，可采用过滤、沉淀等措施获得产品
B.在青贮饲料中添加乳酸菌，可以使饲料保鲜，动物食用后可增强免疫力
C.啤酒的工业化生产流程中焙烤时加热杀死种子胚且使淀粉酶失活
D.用纤维素的水解液为原料，通过发酵工程从微生物菌体中提取单细胞蛋白
5.发酵工程在工业生产上得到广泛应用，如图表示谷氨酸的生产流程，下列说法错误的是
A.①为诱变育种，②为扩大培养，目的是增加菌种数量
B.发酵过程需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等
C.发酵罐中pH的改变，会影响菌种的生长繁殖以及谷氨酸的形成
D.发酵工程的中心环节是培养基配制后的灭菌过程，灭菌要彻底
6.人乳头瘤病毒(HPV)感染是诱发宫颈癌的重要因素。HPV 具有多种类型，其中的HPV16 和HPV
D.无论是原代培养还是传代培养，都需将培养瓶放在CO 培养箱中培养
7.草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产
低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法错误的是
A.因为甲是分生区，细胞的分生能力强，所以被选作组织培养材料
B.需要用体积分数70%的酒精和质量分数5%次氯酸钠溶液对甲进行消毒
C.植物组织培养过程中，更容易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变
D.需要用不同的方法对两种选育方式的效果进行鉴定
8.植物体细胞杂交技术能够打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，从而培育出植物新品种。下图是植物体细胞杂交流程图，有关说法正确的是
A.①过程应使用胰蛋白酶去除A、B 细胞的细胞壁
B.②利用了细胞膜的流动性，诱导方法有电融合法、灭活病毒诱导法等
C.④需要光照，且培养基中生长素与细胞分裂素比例适中
D.④⑤体现了植物细胞的全能性，两过程均涉及基因的表达
9.阿霉素是一种抗肿瘤抗生素，可抑制RNA 和DNA 的合成。阿霉素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时，还会对机体其它细胞造成伤害。科研人员将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合制成本-药物偶联物(ADC)，ADC 通常由抗体、接头和药物三部分组成，作用机制如下图所示。下列有关，错误的是
A.ADC 中抗体的作用是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并结合
B.将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内，小鼠的浆细胞产生的抗体为单克隆抗体
C，ADC 通过胞吞进入肿瘤细胞，药物在肿瘤细胞内释放并起作用，加速了肿瘤细胞的凋亡
D.利用同位素或荧光标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术，可定位诊断肿瘤
18属于高危型，可引起宫颈上皮内高度病变。现对某就诊者的取样细胞进行培养，来进行诊断。下列说法错误的是
A.培养取样细胞时，需要为这些细胞提供充足的营养条件、稳定的外部环境等
B.分散取样细胞时可采用胰蛋白酶、胶原蛋白酶或胃蛋白酶等处理
C.让取样细胞进行贴壁生长，若产生了接触抑制现象，则宫颈细胞未癌变
10.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和免疫排斥等问题。下图表示治疗性克隆的过程，下列说法错误以的是
A.细胞A常采用去核卵母细胞作为移植的受体细胞
B.动物细胞的培养需提供95%空气和5%CO 的混合气体
C.胚胎干细胞分化为多种体细胞是基因选择性表达的结果
D.该治疗性过程应用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等技术
11.PD-L1 是一种免疫抑制因子，可以防止T细胞过度活化导致的炎症反应，肿瘤细胞通过高效表达PD-L1来逃避免疫攻击。抗 PD-L1 单克隆抗体能与肿瘤细胞膜表面的PD-L1 特异性结合，因而具有治疗某些癌症的作用。如图表示制备PD-L1单克隆抗体的流程。下列叙述不正确的是
A.从脾脏分离B 淋巴细胞前，需要对小鼠注射PD-L1
B.用特定的选择培养基筛选得到的是融合的杂交瘤细胞
C.图中细胞群a-d 既能大量增殖又能产生同一种抗体
D.图中细胞群a可用于进一步培养来生产所需抗体
12.如图为受精作用及早期胚胎发育示意图，下列叙述不正确的是
A.过程①的完成需要依赖细胞表面特异性蛋白的识别，精子会释放出特殊的水解酶
B.从动物体内排出的精子和卵细胞，在体外可以直接进行受精作用形成受精卵
C.过程②通过有丝分裂增殖，细胞的细胞核与细胞质两者的体积之比逐渐变大
D.囊胚在过程④中需发生孵化，否则将无法继续发育
13.2018年3月，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩下两头雌性。在此之前，研究人员设法保存了北方白犀牛的精子。可以利用现代生物技术人工繁育北方白犀牛。人工繁育北方白犀牛的过程不涉及的操作是
A.人工授精 B.动物体细胞融合 C.胚胎移植 D.体细胞核移植
14.梅花鹿胚胎移植实验的主要流程：①供体超数排卵→②配种→③胚胎收集→④对胚胎进行质量检查→⑤胚胎移植→⑥子代梅花鹿。下列相关叙述正确的是
A.①过程需要注射有关激素，目的是获得更多的卵原细胞并完成减数分裂
B.胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理条件下空间位置的转移
C.④中选择发育正常、形态良好的原肠胚以进行后续的胚胎移植过程
D.为提高胚胎利用效率，可将收集到的囊胚随机分成两部分后进行胚胎移植
15.下列关于基因工程中基本工具的叙述，正确的是
A.所有 DNA 经限制酶切割后都形成黏性末端
B.载体可以在受体细胞内复制或整合到受体细胞的染色体DNA上，随受体复制
C.限制酶的作用部位是 DNA 分子中特定的两个核苷酸之间的氢键
D.DNA 聚合酶能催化磷酸二酯键的形成，可代替 DNA 连接酶
16.下列有关 PCR 的叙述错误的是
A. PCR 用的 DNA 聚合酶是一种耐高温酶
B.变性过程中双链DNA 的解开不需要解旋酶
C.复性过程中引物与模板链的结合遵循碱基互补配对原则
D. 延伸过程中需要DNA 聚合酶、ATP 和4种核糖核苷酸
17.如图为利用基因工程培育抗虫植株的示意图。以下相关叙述不正确的是
A.②的构建需要限制性内切核酸酶和DNA 连接酶参与
B. ③侵染植物细胞后，重组Ti 质粒的T-DNA 整合到④的染色体DNA 上
C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状
D.此方法得到的抗虫植株，通过有性生殖抗虫性状不一定能稳定遗传给后代
18.蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的 DNA 片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是
A.若用PCR 技术获取蛛丝蛋白基因，则设计的引物应分别结合在1、4 部位
B.若从该DNA 片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏2个磷酸二酯键
C.若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，则共消耗引物32个
D.在PCR 仪中根据选定的引物至少需经过3次循环才可以获得等长的蛛丝蛋白基因
19.研究人员从肺部感染病人的支气管肺泡灌洗液诊断标本中提取出DNA，其扩增产物a、b 的琼脂糖凝胶电泳结果如图所示，Maker 为指示分子大小的标准参照物。下列叙述错误的是
A.在一定的pH下，带负电的DNA 会通过琼脂糖凝胶孔隙向带电性质相反的一端迁移
B.图中样品a、b的迁移速率与DNA 分子的大小等有关，a样品中DNA 的迁移速率快
C.待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时应停止电泳，以防止样品流失到缓冲液中
D.若电泳鉴定结果不止一条条带，可能是因复性温度过高导致出现了非特异性扩增条带
20.基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生等领域得到广泛的应用。下列关于基因工程应用的叙述，错误的是
A.可利用转基因动物做乳腺生物反应器，从乳汁中获取所需药物
B.肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，可提高乳汁中乳糖含量
C.利用转基因动物做器官移植需要“敲除”引起人免疫系统反应的抗原基因或抑制其表达
D.将胰岛素基因导入酵母菌中，通过发酵工程可批量生产胰岛素
21.HAMA 效应是指人体针对鼠源单克隆抗体所产生的反应，该反应可使鼠源抗体加速被清除，有时可引起过敏性反应，科学家通过基因改造完成了下图的改造，下列有关说法错误的是
A.生产鼠一人嵌合抗体的过程属于蛋白质工程
B.改造过程涉及到鼠的基因和人的基因的拼接
C.把来自不同抗体的可变区和恒定区直接拼接
D.嵌合抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多
22.下列关于蛋白质工程的说法，正确的是
A.蛋白质工程仅以蛋白质结构为基础逆中心法则进行，就可以改造或制造新的蛋白质
B.在蛋白质工程中，由推测出的氨基酸序列只能找到一种对应的脱氧核苷酸序列
C.蛋白质工程最终目的是研究蛋白质的氨基酸组成，获取编码蛋白质的基因序列
D.蛋白质工程需构建基因表达载体，改造后的蛋白质体现的性状可遗传给子代
23.如图为限制酶BamHI和BgIII 的识别序列及切割位点，实验中用BamHI 切割DNA 获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并将它们拼接得到重组质粒。下列相关叙述错误的是
A.在酶切过程中，要控制好酶的浓度、温度和反应时间等因素
B.拼接后得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
C. 质粒经 BgIII切割后形成的黏性末端大二TCTAG
D.分别用这两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒
24.纤维素酶是一种复合酶，包括C 酶、C 酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。科研人员从某菌株中获得了 C 酶基因，将其与 HT 质粒进行连接，构建基因表达载体生产高效C 酶。过程如图所示，已知C 酶基因以B 链为转录模板链，转录时从模板链的3'端到5'端进行，下列说法错误的是
A.若含有纤维素的固体培养基中加入刚果红，能形成红色复合物，则滴加适量 酶和 酶后周围会出现透明圈
B. 酶切位点 1加上 SmaI 的识别序列，酶切位点2 加上 BamHI的识别序列
C.启动子是一段有特殊序列的DNA 片段，是RNA 聚合酶识别和结合的位点
D.基因工程的载体除了质粒外，还可以是噬菌体或动植物病毒
25.生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是
A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质
B.我国持有的观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆
C 转基因植物进入自然生态系统后可能因具有较强的“选择优势”而影响生物多样性
D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
26.下列关于原核生物和真核生物的叙述，正确的是
A.原核生物细胞没有线粒体，只进行无氧呼吸，
B.原核生物细胞无叶绿体，但有可能进行光合作用
C.真核生物基因转录一定发生在细胞核中
D. 真核生物以DNA 为遗传物质，原核生物以DNA 或RNA 为遗传物质
27.科学家在美国黄石公园发现一种嗜热好氧杆菌，长有许多触角(又叫集光绿色体)，内含大量叶绿素，能在菌苔上同其他细菌争夺阳光。下列相关叙述正确的是
A.该菌细胞内无细胞器，但能进行有氧呼吸
B.除去该菌的细胞壁需要利用纤维素酶和果胶酶
C.培养该菌的培养基可以不含碳源，但必须给予光照
D.该菌细胞质高度区室化、功能专一化
28.下列事实或证据不支持细胞是生命活动基本单位这一观点的是
A.植物和动物都是由细胞构成的 B.变形虫是单细胞生物，能进行运动和分裂
C.心脏跳动需要多种细胞协调配合才能完成D.离体的叶绿体在适宜条件下能进行光合作用
29.下列各项组合中，能体现生命系统层次由简单到复杂的是
①一个大西瓜 ②血液 ③白细胞 ④一棵柳树 -⑤血红蛋白 ⑤SARS病毒
⑦同一片草原上的所有绵羊 ⑧一片森林中的所有鸟 ⑨一片桃园⑩一个池塘中的所有生物
A.⑤⑥③②①④⑦⑩⑤ B. ③②①④⑦⑩⑨
C. ③②①④⑦⑧⑩⑨ D. ⑤②①④⑦⑩⑨
30.用含 P 的磷酸盐培养液培养动物细胞，一段时间后，细胞的结构以及化合物中均具有放射性的是
①脱氧核糖 ②核膜 ③ATP ④脂肪 ⑤转运 RNA
A. ①③ B. ①③⑤ C. ②③⑤ D. ②③④⑤
31.下列关于细胞中化合物的叙述，不正确的是
A.水是生化反应的介质，也为细胞提供生存的液体环境，所以没有水就没有生命
B/蛋白质是生命活动的主要承担者，细胞中蛋白质的合成离不开氨基酸、蛋白质和RNA
C.核酸能储存遗传信息，但在最基本的生命系统中，DNA 是遗传物质，RNA 不是
D.糖类是细胞中主要的能源物质，主要原因是糖类在活细胞中的含量比脂质高
32.有些作物的种子入库前需要经过风干处理，与风干前相比，下列说法错误的是
A.风干种子中有机物的消耗减慢 B.风干种子上微生物不易生长繁殖
C.风干种子中细胞呼吸作用的强度高 D.风干种子中结合水与自由水的比值大
33.糖类是生物体的重要构成物质和能源物质，下列有关糖类的叙述正确的是
A. 在ATP、RNA、质粒和叶绿体中均含有核糖
B.所有糖类都是生物体的主要能源物质
C、在细胞膜上糖类均与蛋白质结合形成糖蛋白
D.葡萄糖是构成纤维素、淀粉和糖原的基本单位
34.下列关于脂质的叙述中正确的是
A.磷脂是构成细胞膜的重要成分，在动物的脑、卵细胞、肝脏及大豆种子中含量丰富
B.脂肪组成元素只有℃、H、O，且与糖类物质相比，C、H比例低，O比例较高
C.胆固醇能够有效促进人和动物肠道对钙、磷的吸收，饮食中不能过多摄入
D.性激素可由性腺产生并分泌，可以促进生殖器官的发育，也是重要的储能物质
35.二硫键“—S—S——”是蛋白质中连接两条肽链之间的一种化学键。如图是由 280 个氨基酸组成的某蛋白质的结构图，对其叙述正确的是
A.该蛋白质至少有280个氨基
B.形成该蛋白质的过程中脱去了277个水分子 大s-s- —s—s (
C.该蛋白质至少有2个游离的羧基
D.该蛋白质的功能由氨基酸的数量、种类、排列顺序三方面决定
36.汉堡包是现代西式快餐中的主要食物，已经成为畅销世界方便食物之一。制作的原料有鸡胸肉、面包、鸡蛋、生菜等。下列说法正确的是
A.面包中含有的淀粉不能作为植物细胞的储能物质
B.生菜中含有的纤维素能够被人体吸收利用
C.鸡胸肉中含有的糖原是动物细胞的储能物质
D.鸡蛋中含有的蛋白质可直接承担人体的生命活动
37.细胞膜上有功能各异的蛋白质，下列所述功能是膜蛋白才具备的是
A.能催化丙酮酸氧化分解的蛋白质 B.能调节血糖降低或升高的蛋白质
C.能运输葡萄糖进入细胞的蛋白质 D.能与性激素特异性结合的受体蛋白
38.关于脱氧核糖核酸(DNA)的分布，正确的是
A.蛙的成熟红细胞中不含 DNA分子 B.人体细胞的细胞质中也有DNA 分子
C. 含 DNA 的原核细胞不会同时含 RNA D.细菌细胞中的DNA都分布在拟核中
.39. 下列关于 DNA 的叙述, 正确的是
A. DNA 的基本骨架由C、H、O、N、P等元素组成
B.连接磷酸与五碳糖的化学键可在解旋酶的作用下断裂
C.DNA 的片段都有遗传效应，可控制生物的性状
D.DNA 的复制和转录可在细胞质中进行
40.某生物学兴趣小组在野外发现一种颜色为白色的不知名野果，该小组把这些野果带回实验室欲检测其是否含有还原糖、脂肪和蛋白质，下列叙述正确的是( )
A.对该野果的切片进行脂肪检测时需要使用显微镜
B.若向该野果的组织样液中加入斐林试剂并水浴加热出现砖红色沉淀，说明该野果中含有葡萄糖
C..进行蛋白质的检测时，双缩脲试剂A液和B 液先混合再使用
B.还原糖检测实验结束后，将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以备长期使用
二、不定项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求。全选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
41.下列关于传统发酵技术的说法中，错误的是
A.图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率 的影响
B.图2 能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率 的影响
C.图3能表示在利用乳酸菌制泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸的变化趋势.
D.图4能表示在一普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化
42.运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法错误的是
A.利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株
B.细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量
C.单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种
B.利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料
43.《诗经》中有“投我以木瓜，报之以琼瑶”的诗句。番木瓜易感染番木瓜环斑病毒(英文缩写为PRSV)而获病。我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌转化法，成功培育出转基因番木瓜“华农一号”，大致流程如图所示。下列分析正确的是
A.过程②用限制酶BamHI在 Ti 质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团
B.过程③将重组质粒转入农杆菌之前，需先用Ca 载体处理农杆菌
C.过程⑤产生的木瓜植株即使有抗PRSV 基因也不一定具有抗PRSV 的性状
D.农杆菌能在自然条件下能够侵染双子叶植物
44.下列有关显微镜操作的叙述，错误的是
A.标本染色较深，观察时可选用凹面反光镜和大光圈
B.显微镜的放大倍数是指物像的面积或体积的放大倍数
8.若要换用高倍物镜观察，需先升镜筒，以免镜头破坏装片
B.若在视野中看到细胞质顺时针流动，则实际上细胞质是逆时针流动
45.下列关于组成细胞化合物的叙述，错误的是
A.蛋白质肽链的盘曲和折叠被解开时，其特定功能不一定发生改变
B.RNA 与DNA 的分子结构相同，由四种核苷酸组成，可以储存遗传信息
C.DNA分子磷酸和脱氧核糖交替排列，构成了 DNA 分子的特异性
D、胆固醇是构成细胞膜的重要成分，在人体内还参与血液中脂质的运输
三、非选择题：本题共4小题，共45分。
46.(共11分)自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N 的细菌，将玉米种子用自生固氨菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：
(1)步骤①土样应取自当地 (填“表层”或“深层”)土壤；步骤②需充分振荡5min，主要目的是 。
(2)步骤③将土壤悬浮液稀释了 倍，步骤④所用的接种工具是 。
(3)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的 培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，罔的是 。
培养基类型 培养基成分
Ashby培养基 甘露醇(C H O ) 10g, KH PO 0.2g, MgSO ·7H O0.2g, NaCl 0.2g, K SO 0.3g, CaCO 5g, 蒸馏水1000mL。
LB培养基 蛋白胨1g, 酵母提取物5g, NaCl5g, 蒸馏水1000mL, pH7.0-7.2
(4)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12，为进一步鉴定其固氮能力，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。
组别 处理
对照组 (CK)
尿素处理组 (N) 每盆土壤浇50ml完全培养液 (成分为无氮植物营养液加入一定量的尿素)
自生固氮菌处理组(CM12) 每盆土壤浇50mL接种自生固氮菌的无氮植物营养液
①对照组(CK) 的处理为 。
②实验结果表明：施用尿素处理和接种固氮菌CM12 处理均能显著增加土壤微生物有机氮含量。与尿素处理组相比，CM12 处理组土壤微生物有机氮含量增加了约 %。(小数点后保留一位有效数字)③自生固氨菌较共生固氮菌(如根瘤菌)的应用范围更广，原因是 。
47. (共 11分)如图所示，为细胞工程和胚胎工程部分技术涉及的相关流程，其中a 为精子，b为卵细胞，c 和d均为体细胞。请回答下列问题：
(1)方法一为试管动物的培育过程，其中精子a在受精前要进行 处理，卵细胞b要培养至 。体内受精时， 和 发生生理变化，可防止多精入卵。
(2)方法二的理论基础是 ，通过方法二获得的动物个体乙的遗传物质主要来自 (填“b”或“c”)。
(3)方法三获得杂种细胞，该技术的突出优点是 。诱导动物细胞融合，有别于植物细胞融合的诱导方法为用 诱导细胞融合。
(4)若细胞a、b、c、d的染色体条数分别是 n、n、2n、2n，则得到的动物甲、动物乙、杂种细胞丙染色体条数分别是 、 、
48. (共 14 分)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有 PstI、SmaI、HindⅢ、AluI 四种限制性内切核酸酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(amp'为抗氨苄青霉素基因)，其中①-④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。请据图作答：
(1)基因工程中常用质粒作为载体，将基因送入受体细胞中。作为运载体的质粒除了必须有复制原点、标记基因之外，通常还需要有 (写出三点)，图中的标记基因是 ，其主要作用是 。
(2)基因工程中核心步骤是 (用图中数字表示)，在此过程中，为使目的基因定向插入运载体中，本实验中应该选用限制酶 对鱼抗冻蛋白基因和质粒进行切割。
(3)培育出的番茄植株是否具有抗冻性状，可采用鉴定方法是 。
(4)研究人员采用了如下图巢式PCR技术获取抗冻蛋白基因，巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对PCR 引物扩增完整的片段。第一对PCR 引物(也称外引物)扩增片段和普通PCR 相似。第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部，也称内引物)结合在第一次 PCR 产物内部，使得第二次PCR 扩增片段短于第一次扩增。
① 相比于常规PCR，巢式PCR获得错误目标产物概率 ，分析其原因是 。
② PCR 技术是获取目的基因的主要手段。PCR扩增抗冻蛋白基因时设计引物序列的主要依据是 。如图，若一个中间产物使用内引物进行第二次PCR 扩增，经过4次循环，产物中共有 个等长的目标产物，PCR 产物通常采用 法来鉴定。
49. (共9分)回答下列与构成细胞的化合物相关的问题：
(1)生物体中组成蛋白质的基本单位是 ，在细胞中合成蛋白质时，肽键是在 这一细胞器上形成的。合成的蛋白质中有些是分泌蛋白，如 (填“胃蛋白酶”“逆转录酶”或“酪氨酸酶”)。
(2)通常细胞内具有正常生物学功能的蛋白质需要有正确的氨基酸序列和 结构，某些物理或化学因素可以导致蛋白质变性。通常，变性的蛋白质易被蛋白酶水解，原因是 。
是叶绿素分子必需的成分； 是血红蛋白的重要成分。这表明无机盐的功能是 。
(4)人体某些组织的含水量近似，但形态却不同。如：心肌含水量约为79%而呈坚韧的形态，血液含水量约为82%，却川流不息。你对此的解释是 。

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