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淮安市淮安区2023-2024学年高二下学期期中考试
生 物
考试时间：75分钟 总分：100分
一、单项选择题:本部分包括 14 题，每题 2 分，共计 28 分。每题只有一个选项最符合题意。
1．在微生物培养过程中，关于灭菌和消毒的理解，错误的是（ ）
A．实验中使用后的培养基丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境
B．灭菌是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
C．消毒是指杀死物体表面或内部部分微生物
D．吸管和培养皿可以采用干热灭菌法
2．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（ ）
A．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
B．培养微生物用到的接种环、培养皿、培养基等都用干热灭菌法灭菌
C．培养乳酸菌时，除了基本的碳源、氮源、水和无机盐，还需要添加抗生素
D．用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际数据偏小
3．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如下图所示），实验结果见下表。
菌种 菌落直径（C）/mm 透明圈直径（H）/mm H/C
细菌Ⅰ 5.1 11.2 2.2
细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6

下列有关本实验的叙述，正确的是（ ）
A．除淀粉外，培养基中还含有氮源、琼脂等其他营养物质
B．图中菌种接种后应倒置培养24-48小时
C．以上两种细菌均能将核仁中合成的淀粉酶分泌至细胞外
D．H/C值反映了细菌I的耐药能力大于细菌Ⅱ
4．有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程：
有关叙述正确的是（ ）
A．在称取土壤、稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
B．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行消毒即可
C．步骤③中，将温度约80℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养
D．步骤④中，划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
5．白萝卜、红萝卜、小黄瓜等均可作为泡菜的原料，经发酵后在口感上比新鲜蔬菜更爽脆，既好吃，又助消化。下列关于泡菜制作的叙述，错误的是（ ）
A．热水短时处理原料可抑制果胶酶的活性，使成品泡菜口感较脆
B．腌制方法、时间长短和温度高低均会影响泡菜中亚硝酸盐的含量
C．利用水密封泡菜坛的目的是给泡菜坛内创造无氧环境
D．坛盖边沿的水槽“泡”中的气体由乳酸菌细胞呼吸产生
6．特色小吃“甜酒浮子”的主要制作流程：用温开水把甜酒曲化开→加入白米饭中拌匀压实，在中间挖个坑，盖上盖子→置于温度适宜的地方1～2天。下列有关叙述错误的是（ ）
A．制作“甜酒浮子”所用酵母菌来自空气中
B．白米饭可为酵母菌提供碳源、氮源、无机盐等营养
C．“中间挖个坑”有利于酵母菌快速生长繁殖
D．将温度维持在18-25℃有利于“甜酒浮子”制作
7．下列是关于发酵工程及其应用的叙述，错误的是（ ）
A．发酵工程利用了微生物繁殖快、适应性强、吸收多、转化快等特定功能
B．在分批发酵过程中，及时补充营养物质或分离代谢产物能延长稳定期
C．发酵罐制作酸奶时，可先通氧气促进乳酸菌增殖，再密闭发酵
D．发酵工程培养微生物细胞可选择对数期细胞作为生产的“种子”
8．下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ）
A．容易进行无性繁殖的植物也容易进行植物组织培养
B．试管苗移栽入土前先用蛭石栽培的原因是蛭石营养丰富
C．用自然生长的茎进行组织培养须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
D．培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换
9．黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重，黑芥能抗黑胫病，两者不能直接杂交。为解决该问题，科研人员通过下图所示过程获得抗病品系。据图分析，下列相关叙述不正确的是( )
A．最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和黑芥的遗传信息
B．过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②可利用PEG进行诱导
C．过程③发生脱分化，过程④体现出植物细胞具有全能性
D．黑芥与甘蓝型油菜存在生殖隔离
10．下列有关植物体细胞杂交的说法，正确的是（ ）
A．获得原生质体的过程中需要纤维素酶和淀粉酶
B．通常用聚乙二醇和灭活病毒诱导融合原生质体
C．利用植物体细胞杂交可以获得某种单倍体植株
D．可据细胞内染色体的数目、形态来鉴定杂种细胞
11．下图是利用体外受精技术培育某种哺乳动物的大致过程示意图。下列叙述错误的是（ ）
A．刚刚排出的精子能够立即与发育到一定时期的卵母细胞结合完成受精
B．精子在触及卵细胞膜的瞬间，透明带会发生反应阻止后来的精子进入
C．早期胚胎一般要经历桑葚胚、囊胚等阶段
D．在胚胎移植中，供体的主要职能变为产生具有优良遗传特性的胚胎，繁重而漫长的妊娠和育仔任务由受体取代
12．破译生物基因组DNA的遗传信息或进行基因操作，首先要提取细胞核DNA。下列叙述错误的是（ ）
A．哺乳动物成熟的红细胞不适合用作DNA提取的材料
B．研磨液中应含有蛋白质变性剂和DNA酶抑制剂
C．利用DNA不溶于95%冷酒精的性质析出DNA
D．粗提取的DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝
13．下表为常用的限制酶及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（ ）
限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点
BamH I G↓GATCC KpnI GGTAC↓C
EcoRI G↓AATTC Sau3A I ↓GATC
Hind II GTY↓RAC Sma I CCC↓GGG
（注：Y＝C或T，R＝A或G）
A．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B．若两种限制酶的识别序列相同，则形成的末端一定能通过DNA连接酶相互连接
C．不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端
D．限制酶EcoRI进行一次切割，会切断2个磷酸二酯键，形成1个游离的5’末端
14．新冠病毒（SARS-CoV-2）S蛋白的受体结合结构域（RBD）是引导病毒进入宿主细胞的关键结构。我国科研人员将GP67基因（指导合成一段信号肽，引导新合成的蛋白分泌到细胞外）与RBD基因融合，构建融合基因，大量生产RBD蛋白，用于制备疫苗，流程见下图。下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程①的理论基础是DNA具有相同的结构
B．过程②必须将融合基因与载体连接形成基因表达载体才能注射到受精卵内
C．过程③需用DNA分子杂交技术检测融合基因是否成功表达
D．过程④可直接从培养液获得RBD，无需裂解细胞
二、多选题:本部分包括 4 题，每题 3 分，共计 12 分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选 对者得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。
15．胃炎、胃溃疡等疾病与幽门螺杆菌（HP）感染有关。人体的胃液呈强酸性（pH约为0.9~1.8），但胃黏膜层中的黏液细胞可以分泌出一种黏液，从而保证胃不被腐蚀。幽门螺杆菌可以钻透黏液，附着并生活在靠近胃黏膜层pH呈中性的环境中，以下分离纯化HP的步骤中正确的是（ ）
A．配制固体培养基并将培养基的pH调至0.9~1.8
B．待灭菌的培养基完全冷却后在酒精灯火焰附近倒平板
C．可采用平板划线法或稀释涂布平板法接种HP
D．将接种后的培养基密封并于37℃恒温培养箱中倒置培养
16．小鼠胚胎干细胞经定向诱导可获得多种功能细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．为获得更多的囊胚，采用激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B．细胞a和细胞b内含有的核基因相同，但全能性高低不同
C．用胰蛋白酶将细胞a的膜蛋白消化后可获得分散的胚胎干细胞
D． qpupuyq :fId: qpupuyq 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
17．下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，错误的是（ ）
A．限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键
B．DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键，将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来
C．在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶
D．限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布
18．用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱。其中1号为DNA标准样液(Marker)，10号为蒸馏水，PCR时加入的模板DNA如图所示。据此作出的分析，合理的是（ ）
A. PCR产物的分子大小在250～500 bp之间
B. 3号样品为不含目的基因的载体DNA
C. 9号样品对应植株不是所需的转基因植株
D. 10号确定反应体系等对结果没有干扰
三、填空题：本部分包括 5 题，共计 60 分。
19.（11 分）“不对称体细胞杂交 ”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。疣粒野生稻（2n=24）对白叶枯病有较高抗性，由于不同类型间的有性杂交后代高度不育，限制了野生稻的有利基因向栽培稻（2n=24）的转移，为此研究人员利用“不对称体细胞杂交”技术，将疣粒野生稻的抗白叶枯病特性转移到栽培稻中，过程如下图。请回答下列问题。
注：大剂量的 X 射线能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。
（1）利用“不对称体细胞杂交 ”技术培育抗病栽培稻植株的理论基础有 ▲ 、
▲ 和染色体变异。
（2）从物理性质上看，研究过程中所用的培养基为 ▲ , 培养基中应添加一定浓度的蔗糖，其目的是 ▲ 。
（3）过程②需用 ▲ 酶处理愈伤组织，与过程③相比，过程④需在 ▲ 条件下进行。过程④中若诱导未分化的细胞群分化生根，需要提高 ▲ （激素）的比例。
（4）诱导融合后，仅异源融合的原生质体可分裂形成再生细胞团，原因是 ▲ 。（2 分）
（5）研究人员利用致病性强的两种水稻白叶枯病菌株对 72 株再生杂种植株进行试验，结果发现共有 40 株表现出抗性，其中 17 株对两种菌株均具抗性。综合染色体数目及抗性检测，应优先选择 ▲ 的杂种植株进行繁育。（2 分）
20．(11分)为降低宫颈癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物(ADC)，以便精准治疗。过程如图1所示。
(1)本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自 ▲ 。
(2)步骤①常用的诱导细胞融合的化学试剂是 ▲ 。
(3)步骤②的细胞必须经过步骤③ ▲ 才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，该杂交瘤细胞的特点是 ▲ 。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠 ▲ 内培养或在体外培养液中培养的方式进行扩大培养。
(4)步骤④是将获得的a ▲ 和b ▲ 这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC。
(5)研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。
① OWPIPQ :fId: OWPIPQ DC能降低宫颈癌治疗药物的副作用，是因为 ▲ 能精确地定位宫颈癌细胞，该过程的原理是 ▲ 。
②根据图2024-04-08T16:39:45.7675022，尝试解释ADC的作用机理：ADC进入宫颈癌细胞后，细胞中的 ▲ 释放水解酶可将其水解，释放出的药物最终作用于 ▲ ，可导致癌细胞凋亡
21．（13分）我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中细菌总数不超过100个(37°C培养24h)，1000mL自来水中大肠杆菌菌落数不能超过3个(37°C培养48h)。水中大肠杆菌的含量常采用伊红-亚甲蓝琼脂培养基进行检测，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且带有金属光泽。某校生物兴趣小组开展校园桶装纯净水微生物含量检测活动，请回答问题：
(1)为了检测饮用水中细菌的数量，该兴趣小组按下表配方配制伊红—亚甲基蓝琼脂培养基：
蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾 琼脂 蒸馏水 2%伊红水溶液 0.5%亚甲蓝水溶液
10g 10g 2g 20～30g 1000ml 20mL 13mL
从物理状态和用途两个角度分析，该培养基分别属于 ▲ 和 ▲ 培养基，其中蛋白胨可以为细菌生长提供 ▲ (至少写出两点)等营养物质。培养基灭菌 ▲ （前/后）需要调节培养基的pH值。
(2)某同学分别向3个培养基中各加入1mL未经稀释的待测水样，涂布均匀后置于37°C的恒温培养箱中培养24h，结果如图1所示。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是 ▲ （2分）。
(3)图2为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，请完成下表。
实验步骤的目的 简要操作过程
① ▲ 将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次
过滤细菌 装置安装好后，向漏斗内加入1000mL水样，加盖抽滤。
冲洗漏斗壁 再向漏斗内加等量② ▲ 继续抽滤。
培养大肠杆菌 用无菌镊子取滤膜，将其紧贴在伊红-亚甲蓝琼脂平板上，然后将平板③ ▲ ，37℃培养48小时
统计大肠杆菌菌落数 选取④ ▲ 的菌落进行计数，统计结果为2个
(4)综合（2）（3）测定结果，你认为所测桶装纯净水的微生物含量 ▲ (填“能”/“不能”)达到饮用水卫生标准，理由是 ▲ 。（2 分）
22．(13分)图1为胰岛素基因结构与引物位置示意图，图2为pBR322质粒的结构示意图，图中EcoR I、Sma I、BamH I和HindIII为限制酶，箭头或线段所指位点为对应酶切位点。研究人员欲用此质粒构建胰岛素基因的表达载体，培养能产生人胰岛素的大肠杆菌。请回答下列相关问题：
(1)在构建基因表达载体时，选择 ▲ 和 ▲ 分别切割质粒和目的基因，使用两种限制酶切割产生不同的黏性末端，可以防止 ▲ 。
(2)若要进行图1中胰岛素基因的扩增常采用 ▲ 技术，DNA新链的合成方向是 ▲ ，扩增过程中若选择引物3和6，则导致扩增所得的DNA片段 ▲ ，故应该选择的引物为 ▲ 。
(3)成功构建的基因表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是 ▲ ，若利用酵母菌作受体细胞生产胰岛素等分泌蛋白，与大肠杆菌相比，酵母菌的优势有 ▲ 。若要检测导入酵母菌的胰岛素基因是否成功表达，常用 ▲ 技术。
(4)为筛选出含有重组质粒的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表(“＋”代表生长，“－”代表不生长)。根据表中结果判断，应选择的菌落是 ▲ (填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是 ▲ 、 ▲ 。
平板类型 菌落类型 A B C
无抗生素 ＋ ＋ ＋
氨苄青霉素 ＋ ＋ －
四环素 ＋ － －
氨苄青霉素＋四环素 ＋ － －
23．（12分）PCR技术不仅可以扩增目的基因，还可用于定点诱变目的基因等。大引物PCR就是一种定点突变技术。大引物PCR 需要用到引物进行两次 PCR，其操作步骤为：
①根据目的基因序列设计引物，得到两个常规引物，分别为常规上游引物和常规下游引物；②根据突变碱基所处序列位置设计突变上游引物，突变位点位于突变引物序列的中间位置③由突变上游引物与常规下游引物进行第一次PCR反应得到下游大引物；④用得到的下游大引物中和另一个常规上游引物进行第二次PCR扩增，得到突变目的基因序列。回答下列问题∶
(1)PCR扩增的第一步是使双链模板 DNA变性。DNA 中G+C的含量与变性要求的温度有关，DNA中G+C的含量越多，要求的变性温度越高。其原因是 ▲ （2分）。该PCR扩增技术所需的基本条件是 ▲ 种引物、原料、模板、 ▲ 。
(2)在第一次PCR反应中，形成图示双链 DNA 至少要经过 ▲ 次复制。第一次 PCR产物 DNA的 ▲ 条链作为第二次PCR所用的引物。与X射线诱变相比，该突变技术的优点是 ▲ 。
(3)如果要利用微生物进一步克隆 PCR定点诱变产物，其步骤包括∶ ▲ 、 ▲ 、微生物的筛选和培养、从菌群中获取更多目的基因。将获取目的基因和质粒进行连接后，需先用 ▲ 处理农杆菌以便将基因表达载体导入马铃薯细胞，将马铃薯细胞培养成幼苗时经过的两个过程是 ▲ 。检测目的基因是否在马铃薯细胞中转录出了mRNA，所采用的方法是 ▲ 。高 二 生 物 答 案
1-5.AABDD 6-10.ACAAD 11-14.ADCC 15.CD 16.BD 17.BCD 18.ACD
19.（11分）
(1)细胞膜的流动性 （植物）细胞的全能性 (没有顺序要求)
(2)固体培养基 维持渗透压，提供能量 1069807:fId:1069807 （任意答出一点）
(3)纤维素酶和果胶 光照 生长素
(4)杂种细胞由于融合，补充了细胞质（核）中失活的酶（缺失的染色体），细胞正常分裂（2分）
(5)染色体数与栽培稻相同（或者染色体数为24）且均表现出抗性（2分）
20.（11分）
(1)人的宫颈癌细胞
(2)PEG（聚乙二醇）
(3)克隆化培养、抗体检测 既能大量增殖又能产生特定（或所需或特异性）的抗体 腹腔
(4)单克隆抗体 治疗宫颈癌的药物
(5)①单克隆抗体 抗体与抗原的特异性结合 ②溶酶体 细胞核2024-04-08T16:39:46.085725 OWPUUU :fId: OWPUUU
21.（13分）
(1)固体 鉴别 碳源、氮源、无机盐、维生素（选填2个） 前
(2)0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个（2分）
(3)滤膜消毒 无菌水 倒置 呈深紫色且带有金属光泽
(4)能 1mL水样中细菌总数约为98个，没有超过100个；1000mL水样中大肠杆菌为2个，没有超过3个（两点写全）（2分）
22.（13分）
(1) BamHⅠ HindⅢ（第一第二空答案不分顺序） 质粒和目的基因自身环化及反向连接
(2) PCR 5′→3′ 没有BamHⅠ和HindⅢ的切割位点（或识别序列） 引物4、引物5
(3)提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因的转录 酵母菌为真核细胞，含有内质网和高尔基体，可对核糖体合成的蛋白质进行加工 抗原-抗体杂交
(4) B A类菌落导入pBR322质粒 C类菌落未导入质粒
23．（12分）
(1)DNA中G和C之间有三个氢键，A和T之间只有两个氢键（1分），G+C含量越多，其氢键越多，变性时所需温度越高（1分） 3 耐高温的DNA聚合酶
(2)2 一 目的性强、突变概率高
(3)目的基因与载体结合 将重组 DNA 导入受体细胞 Ca2+ 脱分化和再分化
PCR/核酸分子杂交技术

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