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(共17张PPT)
PCR扩增DNA的原理和操作
1923 年，班廷以动物胰脏为原料制得了高纯度牛胰岛素。
1982 年，第一例基因工程产品——重组人胰岛素正式上市。
1965 年，我国在国际上首次人工合成牛胰岛素结晶。
资料
胰岛素的研制历程
DNA的提取与鉴定
限制性内切核酸酶
聚合酶链式反应
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
口腔细胞
人胰岛素基因
DNA
如何获取人胰岛素基因？
DNA半保留复制
原理
体外
操作环境
对目的基因进行大量复制
目的
特异、高效、准确
优点
PCR
简称
聚合酶
链式反应
美国科学家穆里斯等发明
1993获诺贝尔奖
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
15-30个碱基长度的单链核酸分子
子链延伸
子链延伸
-5’
3’-
引物
5’-
-3’
引物
目的基因
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
引物
与目的基因两条链的上下游进行碱基互补配对
问题1：PCR过程是如何精准控制只复制目的基因的呢？
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
问题2：PCR过程中，是如何解旋和合成子链的呢？
阅读教材78-79页，自主学习PCR过程，
并把PCR关键过程整理在学案上。
耐高温的DNA聚合酶(Taq酶）
4种 dNTP
引物
待扩增的DNA片段（模板）
5’
5’
变性
退火
聚合
温度上升到约95℃，双链DNA解旋为单链。
温度下降到约55~68℃，两个引物通过与两条单链DNA结合。
温度上升到75℃左右，合成新的DNA链。
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
5’
3’
5’
5’
第一次循环
第二次循环
3’
5’
第三次循环
3’
3’
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
DNA复制 PCR
相同点 原则 条件 不同点 条件
解旋方式
结果
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
归纳、整理PCR与DNA复制的异同点
任务一：认识PCR扩增DNA的原理
归纳、整理PCR与DNA复制的异同点
NCBI数据库
网址：https://www.ncbi.nlm.nih.gov/
查询基因序列
上游引物：5‘-GCCATCAAGCAGGTCTGTTCC-3’
下游引物：5‘-GGTTCAAGGGCTTTATTCCATCTC-3’
任务二：进行PCR扩增DNA的实验操作
设计引物的一般程序：
Prime Ptemier 5.0软件
设计引物
任务二：进行PCR扩增DNA的实验操作
DNA测序仪
凝胶电泳
人胰岛素基因PCR扩增电泳结果
A 人胰岛素基因PCR产物
M DNA marker
测序
检测PCR结果的方法
基因序列比对（NCBI数据库）
PCR技术的应用
基因克隆
古生物学研究
亲子关系鉴定、
刑侦破案
病原体的检测
(核酸检测)
遗传病诊断
癌基因的
检测和诊断
任务三：归纳PCR技术在生产生活中的应用。
阅读资料，归纳PCR技术可用于哪些方面。
小结
PCR扩增DNA的原理
PCR扩增DNA的实验操作
PCR技术在生产生活中的应用
自我评价
评价内容 达成情况
(A.非常满意 B.满意 C.还需努力 ）
实验原理 积极思考并回答问题
自主阅读并整理归纳PCR过程
比较、归纳DNA复制和PCR的异同点
实验操作 按顺序添加PCR体系的各种成分
规范使用移液器加样
正确设定PCR扩增仪相关参数
实验心得 本实验中，你认为实验成功的关键点是什么？你有哪些收获，还有哪些疑问？ 根据以下评价量表进行自我评价。

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