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练习4　动物细胞工程
1.[2022湖北]某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能是（ 　）
A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织
B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封
C.血清经过高温处理后加入培养基
D.所使用的培养基呈弱酸性
2.[2021浙江1月改编]如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　）
A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D.步骤④培养过程中遗传物质不会发生改变
3.[2023海南]某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（　）
A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制
B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异
C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化
D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
4.[2023北京]甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（　）
A.需要使用动物细胞培养技术
B.需要制备用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
5.[2023天津]根据图分析，下列说法正确的是（　）
A.子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B.过程1需要MⅡ期去核卵母细胞
C.过程2可以大幅改良动物性状
D.过程2为过程3提供了量产方式，过程3为过程1、2提供了改良性状的方式
6.[2021辽宁]如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是（　）
A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B.过程①需要提供95％空气和5％CO2的混合气体
C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
7.[2024南京调研]世界上首个体细胞克隆猴“中中”在中国诞生。如图是克隆“中中”的相关示意图。下列叙述错误的是（　）
A.动物细胞核的全能性是通过体细胞核移植获得克隆动物成功的基础
B.去核卵子可以为重组细胞全能性的表达提供所需的物质条件
C.代孕猴对早期胚胎不发生免疫排斥，为胚胎收集提供了可能
D.克隆猴比鼠更适合作为人类疾病研究和药物实验的模型动物
8.根据体细胞核移植技术的特点进行推断，体细胞核移植技术可以用来（　）
①扩大濒危动物种群数量，有效提高生物多样性
②提高某些良种家畜自然繁殖率　③解决人体器官移植供体来源短缺的问题 　④为科学研究提供实验动物　⑤构建转基因克隆动物，作为生物反应器，大规模生产珍贵的医用蛋白
A.①②④⑤ B.①②③
C.②③④⑤ D.③④⑤
9.[2022江苏]航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是（　）
A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌
B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳
C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖
D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动
10.[2021山东]一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　）
A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗
D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
11.[2023辽宁]大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是（　）
A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制
B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清
C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖
D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量
12.[2024牡丹江一模]实验小鼠皮肤细胞进行贴壁生长培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　）
A.甲过程需要在无菌条件下进行
B.乙过程需要用机械的方法或用胰蛋白酶等处理皮肤组织
C.丙过程是原代培养，可能出现接触抑制现象
D.丁过程可以直接离心来进行传代培养
13.[2023湖南九校联考]使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”过程可选用如下技术路线。下列相关叙述错误的是（　）
A.“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及提供精子的男子
B.图中的精子在参与受精前需要进行获能处理
C.该项技术的细胞学原理是动物细胞核具有全能性
D.图中捐献者和母亲的卵母细胞取自卵巢或输卵管
14.[2024浙江联考]抗原决定簇是决定抗原特异性的特殊化学基团，大多存在于抗原物质的表面，一个天然抗原可以有多种和多个抗原决定簇。如图是某种RNA病毒的结构蛋白M表面的两种抗原决定簇及这两种抗原决定簇与相应抗体结合的示意图，将蛋白M注入小鼠体内一段时间后，提取该小鼠的血清和免疫细胞，并利用免疫细胞制备单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（　）
A.抗体与抗原的结合实质是抗体与抗原决定簇的结合
B.制备单克隆抗体时需要先将分离出的免疫细胞进行克隆化培养
C.利用该小鼠能制备不止一种抗蛋白M的单克隆抗体
D.该蛋白M可用于制备针对该RNA病毒的疫苗
15.[2024山西联考]我国科学家成功用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ 　）
A.推测组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B.①过程的小分子化合物可诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞
C.③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
D.图示流程未运用胚胎移植等技术
16.[2024安徽六校联考]研究人员利用CD14蛋白制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示，下列选项错误的是（　）
A.步骤②可直接将从小鼠脾脏中分离出的能分泌抗CD14抗体的浆细胞与骨髓瘤细胞诱导融合
B.步骤③中的特定培养基属于选择培养基
C.步骤⑤除图中所示途径外还可以将筛选出的杂交瘤细胞置于动物细胞培养液中培养
D.图中步骤⑥能从小鼠的腹水中提取与CD14蛋白特异性结合的抗CD14单克隆抗体
17.[2023宿迁检测]6－磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两条X染色体会有一条随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图所示。有关叙述错误的是（　）
A.动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础
B.用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C.原代培养的细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了不止一个细胞
D.单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
18.[2023西安检测]非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题：
（1）图中步骤①采用的技术手段是　 　，结构乙处于胚胎发育过程的　 　期。进行步骤③时，受体C猪子宫对外来胚胎基本上　 　，从而为来自供体的胚胎在受体内的存活提供了可能。
（2）B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒的之外，还必须定期　 　，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。培养到一定程度后，需要分瓶继续培养，分瓶后的培养过程称为　 　。
（3）若要将目的基因导入受体细胞，需要构建　 　，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是　 　。
（4）利用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体时，使用的抗原物质最好是　 　。该抗体也可以使用杂交瘤技术来制备，利用杂交瘤技术制备该抗体时，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和　 　细胞融合获得的。
解析版
1.[2022湖北]某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长缓慢，其原因不可能是（ A　）
A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织
B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封
C.血清经过高温处理后加入培养基
D.所使用的培养基呈弱酸性
解析　小鼠胚胎的脑组织中含有丰富的神经元，这些神经元增殖能力强，在体外培养的条件下一般不会生长缓慢，A符合题意；将培养瓶瓶口密封会使培养液中缺氧，影响细胞进行有氧呼吸，从而造成供能不足，可能会使原代神经元生长缓慢甚至死亡，B不符合题意；血清经过高温处理后，其活性成分会因变性而失去原有功能，因此，将血清经过高温处理后加入培养基，可能会使原代神经元生长缓慢，C不符合题意；小鼠内环境呈弱碱性，若使用呈弱酸性的培养基培养小鼠原代神经元，可能会导致原代神经元生长缓慢，D不符合题意。
2.[2021浙江1月改编]如图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（ C　）
A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行
B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离
C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理
D.步骤④培养过程中遗传物质不会发生改变
解析　为避免杂菌污染，步骤①的切取组织操作需要在无菌、无毒的环境条件下进行，A错误。步骤②需要用胰蛋白酶处理，使细胞分离，B错误。步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理贴壁细胞，使细胞分离，以便分瓶进行传代培养，C正确。步骤④为传代培养过程，该过程中部分细胞的遗传物质会发生改变，D错误。
3.[2023海南]某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（ A　）
A.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制
B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异
C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化
D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育
解析　营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞分裂生长到一定程度时会发生接触抑制，A错误；据题干“将小鼠胚胎干细胞……XO胚胎干细胞”可知，获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异，B正确；依据细胞分化的概念可知，XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，C正确；若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可以通过一系列处理获得有功能的卵母细胞，用于繁育，D正确。
4.[2023北京]甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程的叙述不正确的是（ D　）
A.需要使用动物细胞培养技术
B.需要制备用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D.筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
解析　在单克隆抗体制备过程中需要用到动物细胞培养技术，还需要制备用PTH 免疫的小鼠，A、B正确；若要筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，需要利用抗原—抗体结合的原理进行筛选，C正确；一般来说，单个杂交瘤细胞只能分泌一种抗体，D错误。
5.[2023天津]根据图分析，下列说法正确的是（ D　）
A.子代动物遗传性状和受体动物完全一致
B.过程1需要MⅡ期去核卵母细胞
C.过程2可以大幅改良动物性状
D.过程2为过程3提供了量产方式，过程3为过程1、2提供了改良性状的方式
解析　子代动物的遗传性状与受体动物（只提供子宫）基本无关，A错误。过程1是培育试管动物，该过程需要将获能的精子与培养至MⅡ期的卵母细胞（不去核）进行体外受精，B错误。通过过程2得到克隆动物的过程属于无性生殖，无性生殖不能大幅改良动物性状，C错误。通过过程2可得到大量同种个体，为过程3提供了量产方式；过程3运用了转基因技术，利用转基因技术可以改变动物性状，培育新品种，故过程3为过程1、2提供了改良性状的方式，D正确。
6.[2021辽宁]如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙述正确的是（ B　）
A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
B.过程①需要提供95％空气和5％CO2的混合气体
C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
解析　据图可知，后代丁的遗传物质来自甲牛和乙牛，丙牛只提供了胚胎发育的场所，并未提供遗传物质，故后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，A错误；进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或培养瓶，将其置于含有95％空气和5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养，B正确；过程②常使用显微操作去核法对处于MⅡ期的卵母细胞进行处理，C错误；通常情况下，过程③将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚阶段后移植，D错误。
7.[2024南京调研]世界上首个体细胞克隆猴“中中”在中国诞生。如图是克隆“中中”的相关示意图。下列叙述错误的是（ C　）
A.动物细胞核的全能性是通过体细胞核移植获得克隆动物成功的基础
B.去核卵子可以为重组细胞全能性的表达提供所需的物质条件
C.代孕猴对早期胚胎不发生免疫排斥，为胚胎收集提供了可能
D.克隆猴比鼠更适合作为人类疾病研究和药物实验的模型动物
解析　通过体细胞核移植技术得到克隆动物的原理是动物细胞核具有全能性，A正确；去核卵子含有丰富的营养物质，可以为重组细胞全能性的表达提供所需的物质条件，B正确；受体对外来胚胎不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能，C错误；猴与人在进化上亲缘关系比鼠与人近，因此，与鼠相比，克隆猴比鼠更适合作为人类疾病研究和药物实验的模型动物，D正确。
8.根据体细胞核移植技术的特点进行推断，体细胞核移植技术可以用来（ D　）
①扩大濒危动物种群数量，有效提高生物多样性
②提高某些良种家畜自然繁殖率　③解决人体器官移植供体来源短缺的问题 　④为科学研究提供实验动物　⑤构建转基因克隆动物，作为生物反应器，大规模生产珍贵的医用蛋白
A.①②④⑤ B.①②③
C.②③④⑤ D.③④⑤
解析　利用体细胞核移植技术，只能增加动物的个体数量，不能提高生物多样性，①错误；核移植技术不能提高良种家畜自然繁殖率，自然繁殖率主要是由生物的基因决定的，②错误。故选D。
9.[2022江苏]航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频。下列相关叙述正确的是（ B　）
A.培养心肌细胞的器具和试剂都要先进行高压蒸汽灭菌
B.培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳
C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖
D.心肌细胞在神经细胞发出的神经冲动的支配下跳动
解析　培养心肌细胞的器具需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，但是部分培养心肌细胞所用试剂（如动物血清）不能用高压蒸汽灭菌法灭菌，A错误；培养心肌细胞的时候既需要氧气（有助于心肌细胞进行有氧呼吸）也需要二氧化碳（有助于维持培养液的pH），B正确；在体外培养条件下，心肌细胞通过有丝分裂进行增殖，但细胞增殖一段时间后会出现接触抑制等现象，因此不会不断增殖，C错误；心肌细胞在神经细胞释放的神经递质的支配下跳动，D错误。
10.[2021山东]一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗，也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（ D　）
A.注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响大
B.单抗制备过程中通常将分离出的浆细胞与骨髓瘤细胞融合
C.利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗
D.p72部分结构改变后会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况
解析　由题中信息“一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体”可知，由同一抗原刺激机体可以产生多抗，说明多抗与一个抗原的多个不同的抗原决定簇有关，抗原纯度对多抗纯度的影响大，单抗理论上与抗原纯度无关，A错误；单抗制备过程中，通常将分离出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B错误；一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一抗原刺激可产生多种不同的抗体，因此利用该小鼠能制备出多种抗p72的单抗，C错误；p72部分结构改变会导致部分抗原决定簇改变，原单抗会失效，而多抗仍有效，D正确。
11.[2023辽宁]大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列叙述错误的是（ D　）
A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制
B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清
C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖
D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量
解析　悬浮培养单克隆细胞，可以保证足够的气体交换，通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散状态悬浮于培养液内，可有效避免接触抑制，A正确；由于细胞的生长是比较复杂的过程，血清中含有一些细胞生存的必要成分，用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清，B正确；病毒借助于细胞进行繁殖，利用了宿主细胞的物质、能量等，当病毒达到一定数量时细胞的生命活动会受到影响，进而影响细胞的增殖，C正确；细胞的正常生命活动需要适宜的pH，培养基的pH会影响细胞代谢，进而影响单克隆细胞的病毒产量，D错误。
12.[2024牡丹江一模]实验小鼠皮肤细胞进行贴壁生长培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是（ D　）
A.甲过程需要在无菌条件下进行
B.乙过程需要用机械的方法或用胰蛋白酶等处理皮肤组织
C.丙过程是原代培养，可能出现接触抑制现象
D.丁过程可以直接离心来进行传代培养
解析　甲过程表示取实验小鼠的组织细胞，离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，因此甲过程需要在无菌条件下进行，A正确；乙过程表示用机械的方法或用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使其分散成单个皮肤细胞，B正确；丙过程表示原代培养，会出现接触抑制现象，C正确；丁过程表示传代培养，该过程也需要用胰蛋白酶等处理细胞，使贴壁细胞分散成单个皮肤细胞，再进行离心，D错误。
13.[2023湖南九校联考]使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”过程可选用如下技术路线。下列相关叙述错误的是（ D　）
A.“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及提供精子的男子
B.图中的精子在参与受精前需要进行获能处理
C.该项技术的细胞学原理是动物细胞核具有全能性
D.图中捐献者和母亲的卵母细胞取自卵巢或输卵管
解析　由题图分析可知，“三亲婴儿”的遗传物质来自捐献者、母亲及提供精子的男子，A正确；图中的精子参与受精前需经过获能处理才具有受精能力，B正确；题图所示为动物细胞核移植技术，其细胞学原理是动物细胞核具有全能性，C正确；从题图可以看出，重组后的卵母细胞需要在体外培养至MⅡ期，说明卵母细胞不是来自输卵管，因为来自输卵管的卵母细胞已经进入了MⅡ期，D错误。
14.[2024浙江联考]抗原决定簇是决定抗原特异性的特殊化学基团，大多存在于抗原物质的表面，一个天然抗原可以有多种和多个抗原决定簇。如图是某种RNA病毒的结构蛋白M表面的两种抗原决定簇及这两种抗原决定簇与相应抗体结合的示意图，将蛋白M注入小鼠体内一段时间后，提取该小鼠的血清和免疫细胞，并利用免疫细胞制备单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（ B　）
A.抗体与抗原的结合实质是抗体与抗原决定簇的结合
B.制备单克隆抗体时需要先将分离出的免疫细胞进行克隆化培养
C.利用该小鼠能制备不止一种抗蛋白M的单克隆抗体
D.该蛋白M可用于制备针对该RNA病毒的疫苗
解析　单克隆抗体制备过程中需要先将分离出的免疫细胞与骨髓瘤细胞融合，不需要先将免疫细胞进行克隆化培养，B错误。
15.[2024山西联考]我国科学家成功用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（ A　）
A.推测组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B.①过程的小分子化合物可诱导小鼠成纤维细胞突变为iPS细胞
C.③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
D.图示流程未运用胚胎移植等技术
解析　结合题图可知，在重构胚中注入Kdm4d的mRNA，并用TSA处理后，重构胚发育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA的翻译产物为组蛋白去甲基化酶，可以使组蛋白去甲基化，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，可抑制组蛋白脱乙酰酶的作用，组蛋白可发生正常的乙酰化修饰，故推测组蛋白乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程，A正确；①过程的小分子化合物可诱导小鼠成纤维细胞形成iPS细胞，而不是突变为iPS细胞，B错误；③为动物细胞融合的过程，诱导动物细胞融合所用的病毒是灭活的病毒，C错误；图示流程运用了体细胞核移植、胚胎移植等技术，D错误。
16.[2024安徽六校联考]研究人员利用CD14蛋白制备抗CD14单克隆抗体的流程如图所示，下列选项错误的是（ A　）
A.步骤②可直接将从小鼠脾脏中分离出的能分泌抗CD14抗体的浆细胞与骨髓瘤细胞诱导融合
B.步骤③中的特定培养基属于选择培养基
C.步骤⑤除图中所示途径外还可以将筛选出的杂交瘤细胞置于动物细胞培养液中培养
D.图中步骤⑥能从小鼠的腹水中提取与CD14蛋白特异性结合的抗CD14单克隆抗体
解析　步骤②无法将能分泌抗CD14抗体的浆细胞与其他B淋巴细胞分离开，因此应先将从小鼠脾脏中分离出的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，之后再进行筛选，A错误；步骤③为用选择培养基进行培养，以筛选出杂交瘤细胞，步骤④为通过克隆化培养和专一抗体检测进行进一步筛选，以筛选出既能大量增殖，又能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；筛选出的杂交瘤细胞既可以注射到小鼠腹腔内增殖，也可以在动物细胞培养液中培养，其中注射到小鼠腹腔内增殖时，可从小鼠腹水中提取相应单克隆抗体，C、D正确。
17.[2023宿迁检测]6－磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有F和S两种类型，分别由一对等位基因XF和XS编码。基因型为XFXS的女性体细胞中的两条X染色体会有一条随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化。将基因型为XFXS的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行G-6PD蛋白电泳检测，结果如图所示。有关叙述错误的是（ D　）
A.动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础
B.用胰蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
C.原代培养的细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了不止一个细胞
D.单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因不同
解析　动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、单克隆抗体的制备等都需要用到动物细胞培养，故动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础，A正确；用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理皮肤组织，可使其分散成单个细胞，B正确；由题干信息可知，基因型为XFXS的女性体细胞中的两条X染色体会有一条随机失活，且这个细胞的后代相应的X染色体均会发生同样的变化，故对一个细胞进行G-6PD蛋白电泳检测后只显示1个条带，原代培养的细胞电泳图有2个条带是因为同时检测了不止一个细胞，C正确；单克隆培养的细胞，是通过有丝分裂增殖得到的细胞，故单克隆培养的细胞1、2、4、5、8、9与3、6、7所含基因相同，表达的基因不一定相同，D错误。
18.[2023西安检测]非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题：
（1）图中步骤①采用的技术手段是　细胞核移植　，结构乙处于胚胎发育过程的　囊胚　期。进行步骤③时，受体C猪子宫对外来胚胎基本上　不发生免疫排斥反应　，从而为来自供体的胚胎在受体内的存活提供了可能。
（2）B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒的之外，还必须定期　更换培养液　，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。培养到一定程度后，需要分瓶继续培养，分瓶后的培养过程称为　传代培养　。
（3）若要将目的基因导入受体细胞，需要构建　基因表达载体　，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是　保证目的基因和载体定向连接　。
（4）利用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体时，使用的抗原物质最好是　ASFV外壳蛋白　。该抗体也可以使用杂交瘤技术来制备，利用杂交瘤技术制备该抗体时，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和　经ASFV外壳蛋白免疫后的B淋巴　细胞融合获得的。
解析　（1）步骤③表示胚胎移植，进行胚胎移植时，要对受体进行同期发情处理，受体子宫对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为来自供体的胚胎在受体内的存活提供了可能。（2）进行动物细胞培养时，必须保证环境是无菌、无毒的，此外，还要定期更换培养液，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。培养到一定程度后，需要分瓶继续培养，分瓶后的培养过程称为传代培养。（3）将目的基因导入受体细胞需要构建基因表达载体。（4）ASFV抗体可以和ASFV外壳蛋白特异性结合，因此利用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体时，使用的抗原物质最好是ASFV外壳蛋白。若要使用杂交瘤技术制备ASFV抗体，需要将骨髓瘤细胞和经ASFV外壳蛋白免疫后的B淋巴细胞融合，以获得杂交瘤细胞。

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