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2023—2024学年第二学期高二年段期末六校联考
生 物 试 卷
（满分：100分，完卷时间：75分钟）
命题校：福清第三中学　　　　命题人： 　　　审核人
班级 姓名 准考证号 座号
单项选择题（共20小题，每小题2.5分，共50分）
1．下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的有（　　）
①泡菜腌制过程中，随着发酵时间的延长，亚硝酸盐含量越来越高
②缺乏糖源时，醋酸菌可将乙醇还原成乙醛，再将乙醛还原成乙酸
③利用乳酸菌制作酸奶时，为了防止杂菌污染，可在牛奶中加入少量抗生素
④谷氨酸发酵生产时，在中性和弱碱性条件下易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺
⑤啤酒发酵的工业化生产流程中，焙烤的目的是杀死种子的胚以及使淀粉酶失活
⑥若发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥
⑦制备微生物饲料的单细胞蛋白可以通过发酵工程从微生物的细胞中提取
⑧微生物肥料利用了微生物在代谢过程中产生的有机酸等物质来增进土壤肥力
A．2项 B．3项 C．4项 D．5项
2.“垃圾分类，人人有责。”对生活垃圾进行分类处理，是提高垃圾的资源价值和改善生活环境的重要措施。某科研小组欲分离及培养若干种微生物用于处理湿垃圾，如剩菜剩饭，骨头、菜根菜叶、果皮等食品类废物。获得产脂肪酶的菌株后，在处理含油垃圾的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。现获得可产脂肪酶的A、B两种菌株，并进行了培养研究，结果如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A．科研小组从土壤中筛选产脂肪酶的菌株时，配制的培养基需要以脂肪为唯一氮源
B．厨余垃圾可作为有机肥施在农田，以减少农田中化肥的使用，减轻环境污染
C．据图中曲线分析可知B菌株比A菌株更适合进行后续相关研究
D．稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，其稀释度会影响结果的准确性
3.寄生于人体胃中的幽门螺杆菌（Hp）可引起胃黏膜慢性发炎，导致胃溃疡及十二指肠溃疡甚至胃癌。临床上常用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，原理是Hp产生的脲酶能将尿素分解成CO2和NH3，受检者口服14C标记的尿素胶囊一段时间后，若从受检者呼出的气体中检测出14CO2，则可确定受检者被Hp感染。下列叙述正确的是（ ）
A．在分离培养Hp的培养基中，尿素只能提供碳源
B．脲酶的作用原理是为Hp分解尿素提供活化能
C．感染者呼出的CO2和14CO2，产生的场所相同
D．Hp分解尿素产生NH3可能有利于其适应胃部酸环境
4．如图为通过DNA分子杂交鉴定含有某特定基因的细菌克隆示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．根据培养皿中菌落数可以准确计算样品中含有的活菌实际数目
B．外源基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制
C．重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接
D．放射自显影结果可以显示原培养皿中含有特定基因的细菌菌落位置
5．某高校采用如图所示的发酵罐进行葡萄酒主发酵过程的研究，下列叙述错误的是（ ）
A．夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理
B．正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压
C．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大
D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
6．图为玉米组织培养的相关研究，亲本植物的基因型为Aa，A、B、C、D表示以亲本植物为材料进行的四种人工繁殖过程，图中融合细胞只考虑两两融合。下列叙述正确的是（ ）
A．图中的部分叶片进行植物组织培养时，需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，再用次氯酸钠处理30min后，最后用无菌水清洗2～3次
B．图中①表示脱分化过程，B过程得到的子代植株基因型为Aa
C．2，4-D常用于玉米组织培养，与形成薄壁细胞不同，在配制分化芽培养基时需降低2，4-D的浓度
D．若让D过程获得的植株和亲本植株杂交，其后代中基因纯合的类型所占比例为1/3
7．CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为证明抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如下流程进行了实验，下列叙述正确的是（　　）
A．对照组应设置为：巨噬细胞+正常细胞共培养体系+单克隆抗体
B．肺癌肿瘤细胞有发达的内质网和高尔基体，参与细胞膜上糖蛋白的形成
C．过程②和过程③筛选得到的杂交瘤细胞都能够产生抗CD47的单克隆抗体
D．若实验组的吞噬指数高于对照组，则单克隆抗体有解除CD47对巨噬细胞的抑制作用
8．研究发现三特异性抗体可实现对小鼠多发性骨髓瘤细胞（MM）的选择性杀伤，作用机理如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．用单克隆抗体技术制备的三种抗体融合可得到三特异性抗体
B．三特异性抗体可实现对MM细胞选择性杀伤的关键在于CD38能与三特异性抗体结合
C．三特异性抗体通过T细胞的活化并释放细胞因子提高对MM的杀伤力
D．三特异性抗体与CD28结合抑制T细胞的死亡从而使T细胞维持一定数量
9．膀胱癌是泌尿系统最常见的肿瘤，研究者以膀胱癌细胞特异性表达的UBC蛋白作为靶蛋白，设计出多种基因，将其分别转入不同噬菌体DNA上，并在子代噬菌体表面表达出可与UBC特异性结合的多肽，再根据图1、2的操作进行筛选，其中第二次洗脱时加入含UBC单抗的洗脱液，以便获取能与膀胱癌细胞特异性结合的小分子多肽。下列叙述正确的是（ ）
A．噬菌体与膀胱细胞共有的结构是核糖体
B．第一次洗脱的目的是除去多余的噬菌体
C．两次洗脱时均需进行搅拌以使噬菌体与UBC分离
D．所获得的小分子多肽也能与膀胱细胞特异性结合
10．小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。科学家分别测量H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是（ ）
A．克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因
B．克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大
C．H3K27me3印记基因过度表达促进胎盘的发育
D．由图可知，H3K27me3印记基因的表达产物影响早期胚胎内细胞团细胞的发育
11．转录因子Ghl和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　）
A．将愈伤组织细胞在脱分化培养基上继续培养可得到幼苗
B．Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖
C．促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官
D．Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达
12．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（ ）
A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解
B．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂进行鉴定
C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
D．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点
13．T4溶菌酶（A0）在温度较高时易失去活性。研究人员通过蛋白质工程对T4溶菌酶第3位上的异亮氨酸改成半胱氨酸，该处半胱氨酸可与第97位半胱氨酸之间形成一个二硫键，获得了热稳定性高的T4溶菌酶（A1）。下列说法正确的是（ ）
A．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B．A0和A1空间结构的差异是二者热稳定性不同的直接原因
C．检测A1活性时可先将A1与底物混合，再置于高温环境中
D．热稳定性高的T4溶菌酶（A1）是一种直接制造出的新蛋白质，需要进行功能的鉴定
14．新冠疫情的快速控制，离不开政府的科学决策和我国对新冠病毒（RNA病毒）的快速检测能力。荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，其原理是：在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当TaqDNA聚合酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法不正确的是（　　）
A．该反应循环5次，消耗引物62个
B．PCR每个循环包括变性、复性、延伸3个阶段
C．Ct值越大表示被检测样本中病毒数目越多，患者危险性越高
D．若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性
15．医学和农业生产上经常应用胚胎工程技术，相关叙述正确的是（ ）
A．为使雌性动物超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B．可以使用雄性动物新鲜的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用
C．我国政府允许在医学上应用生殖性克隆人胚胎解决不育不孕
D．为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割等繁殖技术
16．水中物质污染会导致鱼类雌性化异常。将绿色荧光蛋白（GFP）基因、Ga14蛋白基因等转入斑马鱼，可用于监测水体物质，下图中ERE和UAS是两种诱导型启动子，分别被物质-受体复合物和蛋白特异性激活，启动下游基因表达。下列叙述错误的是（ ）
A．根据题意可知斑马鱼的某些细胞存在物质的受体
B．用ERE直接驱动GFP基因表达可提高监测的灵敏度
C．用于监测物质污染的转基因斑马鱼最好是不育的
D．基因表达载体最好以显微注射法导入斑马鱼受精卵
17.自然界中很少出现蓝色的花，天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）构建基因表达载体（如下图，PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ为不同限制酶），通过农杆菌转化法导入白玫瑰中，在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列说法正确的是（ ）
A．上述获得蓝色玫瑰的方案中需转入能调控液泡pH的基因
B．将sfp基因插入Ti质粒时使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ
C．sfp和idgS基因表达时各以T-DNA的一条链为模板进行转录
D．可用抗原一抗体杂交法检测idgS基因是否成功表达出了蓝色翠雀花素
18．dNTP（包括dATP、dTTP、dGTP、dCTP）的结构与ATP类似，除碱基不同外，dNTP含有脱氧核糖。与dNTP相比，ddNTP的五碳糖为双脱氧核糖，其3'碳位为-H且不能与磷酸形成化学键。现有甲～丁四个PCR反应体系，甲体系中含有放射性磷标记的ddATP（记作ddATP+）和DNA模板链。PCR完成后，经电泳（分子量小的DNA在电场中移动快）将甲体系中一组长度不等的DNA单链分离。丙、乙、丁三个PCR体系与甲相似，分别用于检测T、C、G的碱基序列，检测结果如图。下列说法正确的是（ ）
A．ddATP+中的放射性磷酸基团应位于ddATP的末端
B．甲体系中除含ddATP+外，还应含有dTTP、dGTP、dCTP
C．新掺入脱氧核苷酸通过磷酸二酯键连接在子链的5'端
D．模板DNA的碱基序列为3'CTGGACTGACAT5'
19.蚜虫危害农业生产，而蚜虫体内的寄生蜂是其天敌。棉花、蚜虫与不同寄生蜂间存在如下的食物链：棉花→蚜虫→初级寄生蜂→重寄生蜂。为构建棉田中蚜虫与不同寄生蜂之间具体的营养结构模型，从僵蚜（初级寄生蜂将卵产于蚜虫体内，导致蚜虫死亡形成僵蚜）中提取DNA样本，利用 PCR技术对僵蚜和各类寄生蜂进行了检测，结果如下图所示，下列说法正确的是（　　）
A．PCR1、PCR2 和PCR3的关键是根据不同蚜虫的 DNA 序列设计引物
B．通过增加初级寄生蜂F的数量可以防治蚜虫B 和蚜虫C
C．PCR 前需从僵蚜DNA分离蚜虫、初级寄生蜂和重寄生蜂DNA
D．通过增加重寄生蜂的数量有利于提高棉田产量
20．人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段(Fn与R)，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A．为将扩增后的产物定向插入载体，指导荧光蛋白基因表达，需用Munl和Xhol处理载体
B．从产物扩增到载体构建完成的整个过程需构建7种载体
C．将构建的载体导入去除BCL11A基因的受体细胞，可能出现含F1与R扩增产物的受体细胞无荧光，而含F2-F7与R扩增产物的受体细胞有荧光
D．向培养液中添加适量的雌激素，可导致部分受体细胞不再有荧光
非选择题（共4小题，共50分）
21．（12分）人工瘤胃模仿了牛、羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：
(1)平板划线法 （填“能”或“不能”）用于实验室中分离纯化微生物。
(2)在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 （填序号）。
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水 ⑤接种针
(3)若在倒平板过程中不小心在皿盖和皿底之间部位溅上培养基，则该培养皿不能再使用的原因是 。
(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛选到了几株有透明降解圈的菌落（见图1）。图1中降解圈大小与纤维素酶的 有关。图1中降解纤维素能力最强的菌株是①，依据是 。
(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果如图2，推测菌株 更适合用于人工瘤胃发酵，理由是 。
22．（12分）水稻种子中直链淀粉的含量过多会影响品质和口感。研究人员欲将一段DNA片段A插入淀粉合成酶基因（基因D）中，使之失活（失活的淀粉合成酶基因标记为基因d），从而降低稻米中直链淀粉的含量。回答下列问题：
(1)基因型为DD的水稻种子经 后形成愈伤组织，将愈伤组织细胞放入 酶溶液中处理后获得原生质体，与片段A进行一系列处理后的原生质体需 后形成完整细胞，再进一步培育成新植株。
(2)通过PCR检测新植株中是否导入了片段A时，发现某些植株检测结果呈阳性，但种子中直链淀粉含量未显著下降，可能的原因有：①引物序列长度 ，导致PCR产物特异性不强；②插入的片段A 导致基因 D未失活。
(3)为检测转基因水稻中的片段A是否会扩散到其他物种导致基因污染，取基因型为dd的水稻植株（N）与杂草A、B一起种植。取各种植物细胞的DNA经酶切、PCR后进行电泳，结果如图所示：
电泳时，点样孔位于 （填“甲侧”或“乙侧”），结果表明：转基因水稻中的片段A通过基因交流转移到了杂草 （填“A”“A1”“B”或“B1”）中。
注:A1、Bl为对应植株的子一代。
将抗除草剂基因导入水稻可获得抗除草剂水稻，在培育过程中可采取多种方法避免基因污染：①将目的基因转入到水稻细胞的 （填细胞结构）中；②外源α-淀粉酶基因可使含有该基因的花粉失去活性，请利用α-淀粉酶基因提出一条转基因措施： 。
23．（12分）油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高达51.71%。回答下列问题：
(1)从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用 的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是 。
(2)对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是 。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a～d 表示 FAD2－1基因的4个位点。
将FAD2－1基因的 （填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是 。
(3)重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过 的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测 ，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。
24．（14分）酵母细胞基因转录需要转录因子，转录因子包括DNA结合功能域（DNA—BD）和转录激活结构域（DNA—AD），两结构域分开时不能激活转录。如果将待测蛋白质X与DNA—BD融合，蛋白质Y与DNA—AD融合，蛋白质X和Y有相互作用时，两结构域能重新呈现完整转录因子活性，并可激活报告基因的转录，过程如图1所示。已知报告基因LacZ表达的酶可以将无色化合物X—gal水解成蓝色产物。研究人员为了验证蛋白质X和Y是否具有相互作用，分别构建不同的酵母表达载体（如图2和图3所示），其中Ampr为氨苄青霉素抗性基因，HIS3和TRPI分别为控制组氨酸和色氨酸合成的基因。分析回答下列有关问题：
(1)获得BD—X蛋白和AD—Y蛋白的关键是将相应基因序列连接形成 。X与Y的结合能使转录因子的BD和AD同时结合到报告基因的上游，进而招募 催化LacZ基因的转录。
(2)为将目的基因定向插入相应位点，扩增蛋白质X编码区序列时需在两个引物的5’端分别添加序列 ；为验证目的基因在PCR扩增时是否发生了基因突变，可对PCR产物进行 （填“电泳”“测序”或“电泳或测序”）。
(3)pLexA—JL和pB42AD载体的构建时用特定限制酶切割目的基因和载体并连接，连接产物导入大肠杆菌后扩增；为确定质粒构建是否成功，需要抽提两种质粒并酶切，并 。
(4)将成功构建的pLexA—JL和pB42AD载体导入 （填“同一个”或“不同的”）营养缺陷型的酵母菌中，与普通酵母菌相比，该营养缺陷型的酵母菌的特点是 。
(5)请预测实验结果并写出相应的实验结论： 。2023—2024学年第二学期高二年段期末六校联考
生物参考答案（评分建议）
单项选择题（共20小题，每小题2.5分，共50分）
1-5 B A D D C 6-10 C D A B D 11-15 B D B C D 16-20 B C D B C
非选择题（共4小题，共50分）
21.（12分）
(1)能（1分）
(2)③⑤（2分，顺序不做要求）
(3)空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要使用该培养皿培养微生物（2分，答出皿盖和皿底之间的培养基被污染即可）
(4) 多少和活性（或数量和活性，2分）
菌落①直径与降解圈的直径比值最小（或菌落①直径/降解圈直径最小或降解圈直径/菌落①直径最大，2分）
J4（1分）
发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高（或J4菌株更适合在高温和酸性条件下生存，2分）
22.（12分）
(1) 脱分化（1分） 果胶酶和纤维素（或纤维素酶和果胶，1分）
再生细胞壁（1分）
(2) 过短（2分） 不位于基因D中（2分）
(3) 甲侧（1分） B1（1分）
(4) 线粒体或叶绿体（1分，答全给分） 将α-淀粉酶基因与抗除草剂基因导入细胞核的同一DNA分子中（2分）
23．（12分）
(1) 人工合成（2分） DNA的半保留复制（1分）
(2) 磷酸二酯键（1分） b（2分） 重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的 mRNA进行翻译（2分）
(3) 喷施草铵磷（2分） 大豆的油酸含量（2分）
24．（14分）
(1) 融合基因（1分） RNA聚合酶（1分）
(2) GAATTC和GGATCC（2分） 测序（2分）
(3)电泳后观察是否出现预期大小的目标条带（2分）
(4) 同一个（1分） 自身不能合成组氨酸和色氨酸（1分）
(5)若实验结果中菌落出现蓝色，则说明蛋白质X和Y具有相互作用；若实验结果菌落全部为白色（不出现蓝色），则说明蛋白质X和Y无相互作用（4分，每点2分，结果与结论匹配才能得分，只写明结果不得分）

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