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2024年6月12日高中生物作业
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．下列关于细胞培养的叙述，正确的是（ ）
A．利用植物细胞培养技术获得初生代谢物时，需要在培养基中添加琼脂
B．体外增养杂交瘤细胞时，培养基加入血清后需湿热灭菌以确保无菌
C．培养液中加入适量抗生素可防止杂菌污染
D．分离并纯化固氮菌时，培养基中无需添加碳源但需要添加氮源
2．下图为某植物原生质体的培养过程示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①通常用盐酸解离细胞壁
B．过程②可使原生质体再生出细胞壁
C．过程③培养基中细胞分裂素浓度相对较低
D．过程④表示为提高适应外部环境能力的炼苗过程
3．研究者通过植物体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。下列相关叙述正确的是（ ）
A．融合后的原生质体再生出细胞壁后经植物组培得到完整植株
B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
C．诱导原生质体融合的方法有电融合法、灭活病毒诱导法等
D．从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁
4．樱桃中的槲皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品种，满足人们食用和药用需要。相关叙述正确的是（ ）
A．应用微型繁殖技术可获得大量樱桃抗毒苗
B．可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体
C．植物组织培养时需加入植物激素赤霉素和细胞分裂素
D．应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物槲皮素
5．培育甘蔗脱毒苗有两条途径，经②过程获得的脱毒苗效果更好。下列相关叙述错误的是（ ）
A．②过程能使组织中的病毒减少或减弱其侵染增殖能力
B．不经过流程②能明显缩短育种年限且获得的脱毒苗都是纯合子
C．图中脱毒苗的培育过程体现了植物细胞的全能性
D．从过程③到④需要调整所用培养基中某些成分的含量和比例
6．研究人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对苗的成苗率和脱毒率的影响，实验结果如图所示，下列叙述正确的是（　　）
A．马铃薯的茎尖经过灭菌后才能用于脱毒苗培育
B．利用组织培养技术获得的脱毒苗，是具有抗病毒的新品种
C．茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类相同
D．兼顾成苗率和脱毒率，马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm
7．下列属于植物细胞工程实际应用的是（ ）
①兰花试管苗的生产　②培育抗盐碱的烟草③培育单育1号烟草　④生产四倍体草莓⑤从野生人参细胞内提取人参皂苷干粉⑥培育无子西瓜　⑦生产脱毒马铃薯⑧工厂化生产紫杉醇
A．①②④⑦⑧ B．①②⑤⑦⑧ C．①②③⑦⑧ D．①②⑥⑦⑧
8．紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物、具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。科研小组利用植物细胞工程来生产紫草宁的主要过程如下图。下列叙述错误的是（ ）
A．选择幼嫩茎作为外植体更容易诱导形成愈伤组织
B．培养前需用酒精、次氯酸钠溶液和无菌水处理紫草幼嫩茎
C．①过程表示脱分化，需在一定的营养和激素等条件下实现
D．②过程表示再分化，需要每日给予适当时间和强度的光照
9．如图所示为学校生物社成员使用植物细胞工程技术培养多倍体。下列叙述错误的是（ ）

A．用PEG代替秋水仙素处理幼苗甲，也可获得四倍体幼苗乙
B．植物组织培养常用植物的顶端分生区组织培养获得脱毒作物
C．从幼苗乙到幼苗丙的培育过程中涉及基因的选择性表达
D．植物组织培养时，生长素和细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向
10．下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．植物组织培养过程可以微型化和精密化，可节约人力、物力
B．在紫杉醇的工厂化生产的过程中使用的是液体培养基
C．对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种
D．利用植物组织培养技术培育人工种子容易受环境、气候限制
11．香蕉、马铃薯等通常用无性繁殖的方式进行繁殖，它们感染的病毒很容易传给后代。病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。生产中培育香蕉脱毒苗常用的方法是（ ）
A．人工诱导基因突变
B．选择优良品种进行杂交
C．进行远缘植物体细胞杂交
D．取尖端分生组织进行组织培养
12．植物细胞工程在农业、医药工业等方面有着广泛的应用。下图列举了几项成果。
下列叙述错误的是（ ）
A．三种成果的获得过程中，都发生了基因的选择性表达
B．①过程获得脱毒苗是因为该过程发生了基因突变产生了抗病毒基因
C．②过程可以提高隐性性状的出现概率
D．③主要利用了细胞增殖的原理
二、多选题
13．下图是利用植物体细胞杂交技术获得“番茄一马铃薯”杂种植株的过程，相关说法正确的是（ ）
A．番茄、马铃薯原生质体的融合体现了细胞膜的结构特点
B．②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程
C．①②过程必须在高渗溶液或等渗溶液中进行，可避免原生质体在酶解过程中受到损伤
D．③表示脱分化过程；④表示再分化过程，③④过程中都需要光照条件
14．利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可以得到品质高、抗逆性强的杂种植株。下图是7组杂种植株核DNA和线粒体DNA来源鉴定的结果。下列分析正确的是（　　）

A．获得的融合原生质体需放在无菌水中以防止杂菌污染
B．用灭活病毒诱导两种细胞原生质体的融合依赖于细胞膜的流动性
C．可通过观察融合后细胞的颜色对杂种细胞进行初步筛选
D．杂种植株是二倍体，其核基因来自早花柠檬，线粒体基因来自山金柑
15．人参皂苷是人参的代谢产物，具有增强免疫力、改善心血管功能、抗氧化、抗肿瘤等功能。如图为利用植物细胞培养技术工业化生产人参皂苷的流程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．过程①进行的是脱分化，过程②、③进行的是再分化
B．对老山参切片进行消毒时可先用酒精、再用次氯酸钠进行消毒
C．人参皂苷属于次级代谢产物，为人参生命活动所必需
D．过程②、③与过程①所用培养基除植物激素种类和比例不同外，物理状态也不同
16．研究人员将萤火虫荧光素酶基因导入草莓细胞原生质体，培育出了荧光草莓。下列有关叙述错误的是（　　）
A．荧光草莓的制备需要用到植物组织培养和植物体细胞杂交技术
B．较高渗透压的培养液有利于该草莓细胞原生质体再生细胞壁
C．荧光草莓的培育主要利用了基因突变的生物学原理
D．草莓细胞全能性的表达能力与细胞的分化程度有关
三、非选择题
17．野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，流程如下图。据图回答：
(1)该过程用到的细胞工程技术有 、 。
(2)过程①所需的酶是 ，过程②中PEG的作用是 ，经过②操作后，需筛选出融合的杂种细胞，显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的 （填写细胞器名称）存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的 以维持原生质体的形态和活性。原生质体经过 再生，进而脱分化形成 ，该过程中生长素/细胞分裂素比值 1（<，=，>），（需要/不需要） 光照条件。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的形态和 。对杂种植株进行 的接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
18．下图是通过植物体细胞杂交技术获得“番茄一马铃薯”植株的技术流程图。回答下列问题：
(1)过程①需用到的酶是 过程②中常用的试剂是 。
(2)植物细胞融合完成的标志是 与此过程密切相关的单层膜细胞器是 。
(3)完成②过程的理论基础是 融合后的细胞要进行筛选，原因是 。
(4)已知番茄有四个染色体组，马铃薯有两个染色体组，则“番茄一马铃薯”有 个染色体组。
(5)植物体细胞杂交技术在育种上的优点是 。
19．同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）
(1)据图可知，本研究主要利用的生物技术原理是 。在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是 。
(2)步骤①可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有 法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 。融合后的原生质体经过 再生，形成杂种细胞，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
(3)步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入的两类植物激素是 。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。得到的杂种植株，理论上是否可育？并简要阐述理由： 。
20．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏染色质的供体细胞，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。科研人员用大剂量的X射线处理拟南芥（2n=10）的原生质体，然后诱导其与柴胡（2n=12）的原生质体融合，最终获得不对称杂种植株。回答下列问题：
(1)为获得拟南芥和柴胡的原生质体，可将流水冲洗后的外植体进行消毒，消毒后的外植体用小刀切碎，放入含有 酶的缓冲液中，以获得原生质体。植物体细胞杂交成功的标志是 。
(2)可采用二乙酸荧光素（FAD）法测定原生质体活力，已知FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择 （“发出荧光”“不发荧光”）的原生质体用于融合。
(3)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，统计结果如下表所示：
后代植株类型 染色体数目形态 DNA分子标记鉴定
甲 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段
乙 12，与柴胡染色体相似 无拟南芥DNA片段
丙 12，与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段
由表可知，后代植株中 类型一定不是杂种植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是 。
21．三白草和鱼腥草是不同属的两种药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。科研人员欲将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。进一步研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。
(1)图1中过程①通常采用 酶去除细胞壁。过程②可体现细胞膜具有 特点，该过程除了可利用聚乙二醇诱导融合外，还可采用的化学法有 等，杂种原生质体融合完成的标志是 。
(2)用红色、绿色荧光分别标记三白草、鱼腥草原生质体后，诱导融合（带荧光的原生质体仍能融合和再生），在荧光显微镜下会看到 种颜色的融合细胞（仅考虑两两融合情况）。
(3)图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是 （填“植物组织培养”或“植物细胞培养”）。
(4)由图2可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度约为 个/mL。
(5)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。
组别 A组 B组 C组
实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 蒸馏水
每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的__________
表格中实验处理后，应检测各组小鼠的 ，若实验结果为 ，则支持利用原生质体融合技术可将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
第1页 共4页 ◎ 第2页 共4页
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参考答案：
1．C
【分析】植物细胞培养是指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。动物细胞培养需要保证培养基的营养（通常要加动物血清）、无菌和无毒的环境、适宜的温度和PH（多数中性）和渗透压、气体条件（95%空气和5%CO2）。
【详解】A、利用植物细胞培养技术获得初生代谢物时需悬浮培养愈伤组织，因此培养基中不能添加琼脂，A错误；
B、血清经过湿热灭菌后活性成分会失活，血清可进行射线除菌或过滤除菌，B错误；
C、动物细胞培养时为防止杂菌污染，可在培养液中加入适量抗生素，C正确；
D、固氮菌能利用氮气转化为氨，为其提供氮源，因此不需要加入氮源，固氮菌一般为异氧型，需要在培养基中加入有机碳源，D错误。
故选C。
2．B
【分析】1、离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。
2、植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。
【详解】A、①为去壁过程，根据酶的专一性原理，需用纤维素酶和果胶酶溶液处理，A错误；
B、悬浮的原生质体经过②可再生出细胞壁，B正确；
C、过程③表示诱导生芽的过程，需要提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化，C错误；
D、过程④为植物个体发育的过程，将试管苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生长，为炼苗过程，D错误。
故选B。
3．A
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种新培育成新植物体的技术。
【详解】A、融合后的原生质体再生出细胞壁得到杂种细胞，后经植物组培得到完整植株，A正确；
B、获得的原生质体若处在低渗溶液中，会吸水涨破，B错误；
C、诱导原生质体融合的方法有电融合法、PEG诱导法等，而灭活病毒用于动物细胞融合的促融剂，C错误；
D、从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，不能用于去除细胞壁，因为紫菜细胞的细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，需要用纤维素酶和果胶酶处理，D错误。
故选A。
4．B
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、应用微型繁殖技术采用茎尖作为外植体可获得大量樱桃脱毒苗，A错误；
B、由于芽原基和叶原基分裂能力旺盛，因而可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体，B正确；
C、植物组织培养过程中需要添加的植物激素是生长素和细胞分裂素，C错误；
D、应用樱桃细胞培养可工厂化生产次生代谢产物槲皮素，D错误。
故选B。
5．B
【分析】 植物组织培养技术：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的营养条件，诱导其形成完整植株的技术。
【详解】A、制备脱毒苗可以通过热水处理使组织中的病毒减少或减弱其侵染增殖能力，A正确；
B、②过程是脱毒过程，对育种年限和细胞基因型没有影响，B错误；
C、图中脱毒苗的培育过程利用芽细胞得到整个植株，体现了植物细胞的全能性，C正确；
D、诱导生根和诱导芽分化的植物激素等成分不同，所以需要调整所用培养基中某些成分的含量和比例，D正确。
故选B。
6．D
【分析】分析题图：图示表示茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响，实验的自变量是茎尖大小，因变量是成苗率和脱毒率。
【详解】A、马铃薯茎尖经过灭菌后会死亡，用于脱毒苗培育之前需要经过消毒处理，A错误；
B、利用组织培养技术获得的脱毒苗，是脱毒苗，而非能抗病毒，B错误；
C、核酸包括DNA和RNA，由于基因的选择性表达，茎尖和脱分化形成的愈伤组织细胞中核酸种类不完全相同，C错误；
D、据图可知，实验范围内，在茎尖外植体为0.27mm时成苗率和脱毒率均相对较高，是马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小，D正确。
故选D。
7．C
【分析】1、植物繁殖的新途径：
（1）快速繁殖；
（2）作物脱毒。
2、作物新品种的培育：
（1）单倍体育种；
（2）突变体的利用。
3、细胞产物的工厂化生产。
【详解】①兰花试管苗的生产利用了植物组织培养技术，①正确；
②植物组织培养过程中容易发生基因突变，通过筛选可获得抗盐碱的烟草，属于细胞工程，②正确；
③培育单育1号烟草过程中，利用花粉离体培养技术培育单倍体幼苗，③正确；
④生产四倍体草莓是用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，④错误；
⑤从野生人参细胞内提取人参皂甙干粉不属于植物细胞工程实际应用，将人参细胞培养到愈伤组织阶段，从愈伤组织中提取人参皂苷属于植物细胞工程的实际应用，⑤错误；
⑥培育无子西瓜的原理是染色体变异，不属于植物细胞工程实际应用，⑥错误；
⑦利用马铃薯分生区（如茎尖）细胞进行植物组织培养，形成脱毒苗，⑦正确；
⑧工厂化生产抗癌物质-紫杉醇，采用的是植物细胞工程技术，⑧正确。
故选C。
8．D
【分析】由题意可知，紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物，即通过组织培养获得细胞悬液即可提取紫草宁。
【详解】A、幼嫩茎分化程度低，更容易脱分化诱导形成愈伤组织，A正确；
B、紫草素虽具有抗菌作用，但其产生的过程涉及植物组织培养技术，植物组织培养的过程中仍需进行无菌操作，培养前需用酒精、次氯酸钠溶液和无菌水处理紫草幼嫩茎，B正确；
C、取外植体通过①脱分化获得愈伤组织，愈伤组织为异氧型细胞，通常需要营养并需要一定比例的生长素和细胞分裂素来调节，C正确；
D、愈伤组织后用纤维素酶处理后使细胞分散为细胞悬液，经②细胞培养增殖后即可提取紫草宁，不需要再分化和光照，D错误。
故选D。
9．A
【分析】分析题图：基因型为Aa的某植物幼苗甲经秋水仙素处理后得到的四倍体幼苗乙的基因型为AAaa，四倍体幼苗经植物组织培养得到大量幼苗丙的过程为无性繁殖，故丙的基因型为AAaa。
【详解】A、PEG可诱导植物细胞融合，但需要先去除植物细胞的细胞壁，幼苗甲的细胞含有细胞壁，不能融合形成四倍体，A错误；
B、植物组织培养常用植物的顶端分生区组织培养获得脱毒作物，B正确；
C、从幼苗乙到幼苗丙的培育过程中存在细胞分化，涉及基因的选择性表达，C正确；
D、植物组织培养时，生长素和细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向，生长素和细胞分裂素的比例为1，促进愈伤组织的形成，比例大于1时，愈伤组织分化成根，比例小于1时，愈伤组织分化成芽，D正确。
故选A。
10．D
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】A、植物组织培养技术可以快速繁殖优良品种，也叫做微型繁殖技术，植物组织培养过程可通过精密化的调控，以获得人们所需要的产品，因此植物组织培养过程可以微型化和精密化，可节约人力、物力，A正确；
B、在紫杉醇的工厂化生产的过程中要扩大培养细胞，因此使用的是液体培养基，B正确；
C、愈伤组织属于分生状态，容易发生变异，因此对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出新品种，C正确；
D、人工种子是指以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。利用植物组织培养技术培育人工种子不受季节限制，可以大量、快速繁殖优良品种，D错误。
故选D。
11．D
【分析】植物组织培养：
1、过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，最后发育成植株（新植体）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。
2、原理：植物细胞的全能性。
3、应用：植物繁殖的新途径（快速繁殖优良品种、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种和突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。
【详解】植物的根尖、茎尖、芽尖部位几乎不含病毒，因此采取根尖、茎尖、芽尖进行植物组织培养，可以获得脱毒植株。
综上所述，ABC错误，D正确。
故选D。
12．B
【分析】1、细胞分化的实质：基因选择性表达。
2、作物脱毒的原理：植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植株就有可能不带病毒,从而获得脱毒苗。
3、单倍体育种优点：极大地缩短了育种的年限，是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，若单倍体植株只含有一个染色体组，染色体加倍后隐性性状容易出现。
4、植物细胞培养：指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。
【详解】A、愈伤组织以后发生了再分化，细胞分化的实质是基因选择性表达，A正确；
B、切取一定大小的茎尖进行组织培养,再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B错误；
C、若单倍体植株只含有一个染色体组，染色体加倍后隐性性状容易出现，C正确；
D、植物细胞培养：指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术，原理为细胞增殖，D正确。
故选B。
13．ABC
【分析】题图分析：图示为番茄一马铃薯杂种植株的培育过程，①表示去壁过程，常用酶解法；②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程；③表示脱分化过程；④表示再分化过程。
【详解】A、番茄、马铃薯原生质体的融合依赖膜的流动性，既该过程体现了细胞膜的结构特点，A正确；
B、②表示融合的原生质体再生出细胞壁的过程，这是植物体细胞杂交获得成功的标志，B正确；
C、为避免原生质体在酶解过程中受到损伤，①②过程必须在高渗溶液或等渗溶液中进行，C正确；
D、③为脱分化过程，而④过程为再分化过程，在该过程中诱导生芽时需要光照条件，因为色素的形成需要光照，D错误。
故选ABC。
14．CD
【分析】题图分析：根据左侧两图可知，杂种植株的核基因只来自早花柠檬；根据右侧两图可知，杂种植株的线粒体基因只来自山金柑。
【详解】A、获得的融合原生质体不可放置在无菌水中否则会导致吸水涨破，A错误；
B、病毒可诱导动物细胞融合，但不能诱导原生质体融合，B错误；
C、由于愈伤组织细胞不含叶绿体，而叶肉细胞含有叶绿体，因此可通过观察融合后细胞的颜色进行初步筛选，C正确；
D、由图可知，杂种植株的线粒体基因只来自山金柑，核基因只来自早花柠檬，因此仍是二倍体，D正确。
故选CD。
15．AC
【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态的薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。
【详解】A、过程①进行的是脱分化，过程②、③是细胞培养阶段，该阶段不进行再分化，A错误；
B、植物组织培养时外植体用流水充分清洗后用体积分数为70%的酒精消毒30s，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30分钟，立即用无菌水清洗2-3次，因此对老山参切片进行消毒时可先用酒精、再用次氯酸钠进行消毒，B正确；
C、人参皂苷属于次级代谢产物，一般不是植物基本的生命活动所必需的，C错误；
D、过程①所用培养基为固体培养基，过程②、③所用培养基为液体培养基，且使用的植物激素种类和比例也不同，D正确。
故选AC。
16．ABC
【分析】1、影响植物组织培养的因素：①培养基配制；②外植体选取；③激素的运用；④消毒；⑤温度、pH、光照。
2、植物组织培养中植物激素使用：植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化。
【详解】A、荧光草莓的制备需要用到植物组织培养和转基因技术，A错误；
B、较高渗透压的怕培养液不利于草莓细胞原生质体再生细胞壁，这是因为培养液浓度过高会使原生质体过度失水，从而活性降低，B错误；
C、荧光草莓的培育主要利用了基因重组的生物学原理，C错误；
D、一般分化程度越高，其全能性越低，细胞的基因型、传代次数都影响细胞全能性的表达能力，D正确。
故选ABC。
17．(1) 植物组织培养 植物体细胞杂交
(2) 纤维素酶和果胶酶 促进（或诱导）原生质体的融合 叶绿体
(3) 渗透压 细胞壁 愈伤组织 = 不需要
(4) 数目 黑腐病菌
【分析】由图可知，①用纤维素酶、果胶酶进行去壁处理，②表示用物理或化学方法诱导原生质体融合。
（1）
图中培育抗黑腐病杂种黑芥一花椰菜植株的过程中，经过了植物原生质体的融合，经过了脱分化、再分化等过程，故用到了植物体细胞杂交和植物组织培养。
（2）
植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性可知，过程①去壁用纤维素酶和果胶酶；过程②中PEG可以诱导原生质体融合；经过②原生质体融合后，需要筛选出融合的杂种细胞，可以通过观察杂种细胞是否含有黑芥叶肉细胞的绿色的叶绿体来进行判断。
（3）
原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压以维持原生质体的形态和活性，以避免原生质体的失水或吸水；原生质体再生细胞壁后，经过脱分化形成愈伤组织，再经过再分化杂种植株；脱分化过程形成愈伤组织的中，生长素和细胞分裂素的比值=1；脱分化过程中，不需要光照，应避光处理。
（4）
若分析再生植株的染色体变异类型（包括结构变异和数目变异），应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，在显微镜下观察并比较染色体的形态和数目；将杂种植株栽培在含有黑腐病菌的环境中，只有具有抗性的植株才能够存活。
18．(1) 纤维素酶和果胶酶 聚乙二醇（或PEG）
(2) 细胞壁的形成 高尔基体
(3) 细胞膜具有流动性 融合率不到100%，融合对象是随机的
(4)六
(5)克服远缘杂交不亲和的障碍
【分析】据图分析：图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。
【详解】（1）过程①表示去壁获取原生质体的过程，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，故去壁需用到纤维素酶、果胶酶，过程②表示人工诱导原生质体融合，常用的试剂是聚乙二醇 （或PEG）。
（2）植物体细胞融合完成的标志是形成新的细胞壁。与细胞壁形成有关想细胞器是高尔基体。
（3）②表示人工诱导原生质体融合，完成②过程的理论基础是细胞膜具有流动性。由于细胞融合率不到100%，融合对象是随机的，可能出现未融合的细胞核同种细胞融合的杂种细胞，故融合后的细胞需要筛选。。
（4）已知番茄有四个染色体组，马铃薯有两个染色体组，两种细胞融合后形成的植物会有六个染色体组。
（5）植物体细胞杂交技术在育种上的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍
19．(1) 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况
(2) 高Ca2+-高pH融合 保持原生质体完整性 细胞壁
(3) 生长素和细胞分裂素 可育，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体
【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。
【详解】（1）由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。
（2）步骤①可采用化学法进行诱导，其中化学方法除了聚乙二醇（PEG）融合法，还有高Ca2+—高pH融合法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，保持原生质体完整性，防止原生质体吸水涨破。融合后的原生质体再生出新的细胞壁说明形成杂种细胞，即杂种细胞形成的标志是再生出细胞壁，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
（3）步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，分别是生长素和细胞分裂素，其中起主要作用的是细胞分裂素。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。紫花苜蓿是同源四倍体，体细胞含有4个染色体组，百脉根是二倍体，体细胞含有2个染色体组，融合后得到的杂种细胞含有4+2=6个染色体组，可见，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，因而能进行正常的减数分裂过程，因而表现为可育。
20．(1) 纤维素酶和果胶酶 再生出杂种植株
(2)发出荧光
(3) 乙 甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段
【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生质体。杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，这必须要借助一定的技术手段才能实现。人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类—物理法和 化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。
【详解】（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此消毒后的外植体用小刀切碎，加入含有纤维素酶和果胶酶的酶溶液，水浴加热一段时间后，过滤、离心即可获得原生质体。植物体细胞杂交的目的是获得杂种植株，因此杂交成功的标志是再生出杂种植株。
（2）绿色荧光的强度与原生质体的活力呈正相关，因此应选择发荧光的原生质体用于融合。
（3）根据表格信息可知，植株后代乙无拟南芥DNA片段，说明其不是杂种植株。甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，拟南芥亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组。
21．(1) 纤维素酶、果胶酶 一定的流动性 高 Ca2+ -高 pH 融合法 再生出细胞壁
(2)3
(3)植物细胞培养
(4)1×10 6
(5) 免疫器官的重量 A、B 两组小鼠的免疫器官的重量基本相同且都大于C 组
【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个·mL-1时， 比例最高。
【详解】（1）植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，所用酶是纤维素酶和果胶酶。过程②为原生质体融合，原生质体融合体现了细胞膜具有流动性的特点。诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（（聚乙二醇））诱导融合，还可以用高 Ca2+ -高 pH 融合法诱导融合。杂种原生质体融合完成的标志是杂种细胞再生出细胞壁形成杂种细胞。
（2）三白草原生质体被红色荧光标记，鱼腥草原生质体被绿色荧光标记，诱导融合后，在荧光显微镜下可观察到3种颜色的融合细胞：红色和绿色荧光的融合细胞（一个三白草原生质体与一个鱼腥草原生质体融合合）、只有红色荧光的融合细胞（两个三白草原生质体融合）、只有绿色荧光的融合细胞（两个鱼腥草原生质体融合）。
（3）图1获得代谢产物的过程属于细胞产物的工厂化生产，主要应用的技术是植物细胞培养。这种技术涉及在离体条件下，将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中进行震荡培养，从而得到分散成游离的悬浮细胞。通过继代培养，这些细胞能够增殖，进而获得大量的细胞群体。这种技术使得我们可以在体外有效地生产所需的代谢产物，实现工厂化、规模化的生产目标。
（4） 由图2柱形图可知，在密度为1×106个·mL-1时， 双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个·mL-1。
（5）据题意和表格可知，通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用，因此本实验的因变量可以检测各组小鼠的免疫器官的重量。C组为对照组，根据对A、B两组的处理（两者利用了原生质体融合技术），若利用原生质体融合技术可将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产，实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组。
答案第1页，共2页
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