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2024年6月12日高中生物作业
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．下列关于细胞工程的说法，正确的有（ ）
A．动物细胞培养的过程中，细胞中遗传物质始终不会发生改变
B．植物组织培养的过程中，脱分化、再分化都需要光照
C．植物原生质体融合和动物细胞融合常用的促融方法完全相同
D．用单克隆抗体制成“生物导弹”，将药物定向地带到癌细胞所在部位
2．下列关于干细胞的叙述，错误的是（ ）
A．干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中
B．胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一类细胞的潜能
C．成纤维细胞被诱导为iPS细胞过程中，其遗传物质和蛋白质种类都发生了变化
D．将干细胞应用于临床治疗可能导致肿瘤发生
3．生物是一门以实验为基础的学科，生物学的形成和发展离不开实验，下列有关实验的说法，正确的是（ ）
A．利用荧光标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术，可定位诊断肿瘤等疾病
B．某野果样液中加入斐林试剂后出现砖红色沉淀，表明该野果中含有葡萄糖
C．为了减小实验误差，在正式实验前一般都要先进行预实验
D．在探索生长素类调节剂促进插条生根的最适浓度的实验中，处理时间属于无关变量，不影响实验结果
4．科学家以SARS病毒的核衣壳蛋白为抗原，制备了单克隆抗体。下列叙述正确的是（ ）
A．体外培养单个B淋巴细胞也可以获得针对SARS病毒的单克隆抗体
B．将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合后，培养液中融合后的细胞即为杂交瘤细胞
C．利用选择培养基可筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞
D．利用该单克隆抗体可以快速诊断是否感染SARS病毒
5．A型塞内卡病毒（SVA）会导致猪患水疱传染病，症状与猪口蹄疫等传染病非常相似。已知SVA核衣壳上的主要蛋白质VP1可作为该病毒诊断蛋白。研究人员以小鼠为对象，利用单克隆抗体技术获得了与VP1结合位点不同的两种单克隆抗体2E10和3E4。为进一步快速精确检测出该病毒，研究人员利用以上两种单克隆抗体制作出快速检测试纸条，如下图所示。结合垫处含有过量胶体金标记的2E10，可向右扩散，当胶体金颗粒聚集时才会出现可见条带，检测线、质控线处包埋固定的抗体依次是3E4和山羊抗鼠IgG（可特异性结合各种鼠源抗体）。下列相关叙述正确的是（　　）

A．制备单克隆抗体过程中第二次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞
B．3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点相同
C．病毒检测阴性的结果为检测线和质控线均无条带出现
D．病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带
6．如图表示利用免疫印迹技术检测HIV抗体的示意图，利用电泳技术将病毒蛋白质分离开，转印到硝酸纤维膜上，将硝酸纤维膜浸于待检血清中，洗去未结合的抗体，加入另一种有酶标记的抗体（简称酶标二抗），洗去未结合的酶标二抗，最后加入酶作用的底物显色。下列说法错误的是（ ）
A．HIV和T2噬菌体在细胞中增殖过程不同
B．图中看出HIV会引起机体产生多种抗体
C．抗体检测可能存在“假阴性”结果，不能完全取代核酸检测
D．可用病毒抗原蛋白来制备单克隆抗体获得大量的酶标二抗
7．曲妥珠单抗是一种人源化单克隆抗体，主要用于治疗Her—2过度表达的转移性乳腺癌。该抗体可选择性地与乳腺癌细胞表面的Her—2结合，干扰了生长因子与肿瘤细胞的结合，从而抑制肿瘤细胞的生长。下列有关曲妥珠单抗的制备和应用，说法错误的是（ ）
A．需要向小鼠反复注射Her—2，以便在血清中获取曲妥珠单抗
B．利用Her—2对杂交瘤细胞进行抗体检测，以便筛选出呈阳性的细胞
C．曲妥珠单抗除了起到治疗作用，还可以与其他药物结合形成ADC
D．曲妥珠单抗与鼠源化抗体相比，可以降低人体免疫反应的强度
8．目前，世界上已对近千种植物进行了细胞培养研究，实现了如人参皂苷、黄连素、紫杉醇等药物的工厂化生产。下列有关细胞工程的叙述正确的是（ ）
A．细胞工程中植物组织培养和动物细胞培养的原理相同
B．利用单克隆抗体作为诊断试剂具有准确、高效、简易、快速等优点
C．植物体细胞杂交和动物细胞融合技术操作流程几乎一样
D．在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞均可直接用离心法收集
9．为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失的问题，研究者用EBV（一种病毒颗粒）感染已免疫的B淋巴细胞，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞，进而获得染色体稳定的杂交瘤细胞，基本实验流程如图。EBV转化细胞能在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下列分析正确的是（ ）

A．杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原和EBV
B．HAT培养基可去除骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞
C．灭活病毒诱导细胞融合的原理是促进骨髓瘤细胞核和B细胞核融合
D．图示筛选获得的杂交瘤细胞即可在小鼠腹腔内生产单克隆抗体
10．为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。以下相关说法正确的是（　　）
A．上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，目的是让小鼠体内产生更多的抗体
B．取小鼠甲脾脏组织制备单细胞悬液时只能采用机械的方法进行处理
C．图中“筛选2”一般只需1次筛选即可获得足够数量的杂交瘤细胞②
D．杂交瘤细胞②可在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖
11．科学家将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，制成了抗体-药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，其机理如图，下列叙述错误的是（ ）
A．制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行两次筛选
B．ADC中抗体的作用是与肿瘤细胞特异性结合
C．ADC进入细胞后，诱导肿瘤细胞坏死
D．除ADC外，单克隆抗体在临床上还可作为诊断试剂
12．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动物、植物细胞工程的有关内容，你认为错误的是（ ）
比较内容 植物细胞工程 动物细胞工程
A 理论基础 细胞的全能性 细胞增殖
B 融合方法 物理方法、化学方法、生物方法 化学方法、生物方法
C 典型应用 人工种子、种间杂种植物 单克隆抗体的制备
D 培养基区别 植物激素不可缺少 动物血清不可缺少
A．A B．B C．C D．D
二、多选题
13．一种浆细胞只能产生一种抗体，科研人员利用两种抗原m、n处理小鼠，获得杂交瘤细胞M和N，再通过融合技术将杂交瘤细胞M和N融合形成双杂交瘤细胞MN，双杂交瘤细胞在液体培养基中繁殖，并产生双特异性抗体MN，双特异性抗体MN能同时检测抗原m、n。下列相关叙述正确的是（ ）
A．可从抗原刺激后小鼠的淋巴结和脾脏等处获取B淋巴细胞
B．m、n分别处理得到的B淋巴细胞可直接融合成双杂交瘤细胞MN
C．筛选杂交瘤细胞的选择培养基能够促进骨髓瘤细胞的增殖
D．双杂交瘤细胞MN能够无限增殖且有两种抗体基因能同时表达
14．下列有关动物细胞工程操作的叙述，正确的是（ ）
A．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中除了加入细胞所需的各种营养物质外，还需要加入琼脂
B．动物细胞融合与植物体细胞杂交都能形成杂种个体
C．干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能
D．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
15．细胞具有全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成各种其他细胞的潜能。但是，在生物的生长发育过程中，并不是所有的细胞都表现出全能性，如芽原基的细胞只能发育为芽等。下列生物技术与工程中，不能体现细胞全能性的是（ ）
A．采用稀释涂布平板法接种、培养获得单菌落
B．诱导胚状体长芽、生根、发育成试管苗
C．体内培养杂交瘤细胞，生产单克隆抗体
D．对早期胚胎均等分割、移植获得同卵双胎
16．人表皮生长因子受体2（HER2）是一种在乳腺癌细胞内高度表达的跨膜蛋白，是抗体治疗的重要靶点。T-DM1是由抗HER2曲妥珠单抗与微管抑制剂美坦新通过硫醚连接子连接而成的新型抗体偶联物，具有“团灭”HER2阳性肿瘤细胞的特点。下列叙述正确的是（ ）
A．给小鼠多次注射HER2，从其血清中分离出来的抗体为单克隆抗体
B．体外培养单个的B淋巴细胞可获得大量抗HER2的单克隆抗体
C．T-DM1借助其含有的曲妥珠单抗实现了对乳腺癌细胞的特异性杀伤作用
D．利用同位素标记的单抗在特定组织中的成像技术，可定位乳腺肿瘤
三、非选择题
17．请回答下列有关动物细胞工程的问题
(1)克隆动物的培育运用了细胞工程中的 技术。获得重组细胞后，还需将其培养为早期胚胎，并进行 。
(2)单克隆抗体的制备运用了细胞工程中的 技术。其中一项技术突破了 的局限，使远缘杂交成为可能。
(3)由上述内容可知，动物细胞工程技术的基础是 技术。该技术往往需要将组织分散成单个细胞，可用 进行处理，不选用胃蛋白酶，原因是 。
18．EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。

(1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为 分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的 免疫，产生相应的抗体。
(2)多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体 （填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是 。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用 免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳。
(3)取相应免疫组小鼠的脾脏，剪碎并用 酶处理得到小鼠脾脏细胞，用灭活的病毒诱导，与 细胞融合，筛选获得不同的杂交瘤细胞株。
(4)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图：

固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 。
19．破伤风类毒素单克隆抗体可以用于破伤风的快速检测及治疗。下图是我国科学工作者制备破伤风类毒素单克隆抗体的过程示意图。回答下列问题：
(1)单克隆抗体制备过程运用了 和 等技术手段。
(2)已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基蝶呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需要在过程⑤向培养液中加入 ，理由是杂交瘤细胞可利用 途径合成DNA，从而能在该培养液中增殖。由此分析过程⑤所用的HAT培养基从功能上看属于 培养基，此次筛选是为了得到杂交瘤细胞，该类细胞的特点是 。
(3)过程⑥中将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上，尽量使每个孔只接种1个杂交瘤细胞以实现 ，然后通过ELISA法（又称酶联免疫吸附试验法）检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与 结合的培养孔为阳性孔。
20．HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，HER2过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。回答下列问题：
(1)在制备抗HER2-ADC的过程中，需要用 对小鼠多次进行免疫，以期获得相应的B淋巴细胞。过程②和③筛选出的细胞分别是 、 。
(2)抗HER2-ADC作为靶向药杀伤HER2过度表达的恶性肿瘤细胞的效果较为明显，其原因是 。
(3)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的乳腺癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新偶联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。
①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射 ，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明，抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有 （填“促进”或“抑制”）作用，且效果较其他药物更好。
③后续可通过研究抗HER2-ADC （答出1点）等情况，为抗HER2-ADC进入临床实验奠定数据基础。
21．癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出的地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。
(1)癌细胞由于 基因突变导致其表面物质发生改变，如某些种类癌细胞表面高表达膜蛋白PSMA和PD-L1，如图1所示：PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。临床上可利用PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗，据图1推测，其原因是 。
(2)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图2．制备过程为：先将 分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的 细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞，再诱导两种细胞融合。
(3)科研人员将癌细胞和T细胞共同培养，加入不同抗体，比较不同抗体对T细胞活化的作用。实验各组由活化T细胞产生的细胞因子IL-2的含量如图3所示，结果说明：①PSMA×CD28和PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞，且随 ② 。
第1页 共4页 ◎ 第2页 共4页
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参考答案：
1．D
【分析】植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。诱导原生质体融合的方法：物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）。
【详解】A、动物细胞培养的过程中，10代以后的细胞遗传物质可能发生改变，A错误；
B、植物组织培养的过程中，脱分化不需要光照，应避光培养，B错误；
C、植物原生质体融合和动物细胞融合常用的促融方法不完全相同，后者特有灭活病毒促融方法，C错误；
D、用单克隆抗体制成“生物导弹”，单克隆抗体可特异性和癌细胞结合，将药物定向地带到癌细胞所在部位，D正确。
故选D。
2．C
【分析】干细胞是一类具有自我复制能力及多向分化潜能的细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。
【详解】A、干细胞可存在于早期胚胎（胚胎干细胞）、脐带血和骨髓（成体干细胞）等多种组织、器官中，A正确；
B、胚胎干细胞具有发育的全能性，具有胚胎干细胞具有分化为成年动物体内的任何一类细胞的潜能，B正确；
C、成纤维细胞被诱导为iPS细胞过程中，其遗传物没有发生改变，但其中的蛋白质种类可能发生了变化，C错误；
D、干细胞具有较强的分裂能力，将干细胞应用于临床治疗可能导致肿瘤发生，D正确。
故选C。
3．A
【分析】该实验探究的问题是促进某种植物插条生根的生长素类似物的最适浓度，该实验的自变量是生长素类似物的浓度，因变量为生根的数目和生根的长度，无关变量（如枝条长度、生长素类似物处理的时间等）应控制为等量；实验开始前进行预实验是为进一步的实验摸索出较为可靠的探究范围，以避免由于设计不当，盲目开展实验。
【详解】A、利用荧光标记的单克隆抗体在特定组织中的成像技术，可定位诊断肿瘤等疾病，所依据的原理是抗原-抗体杂交，A正确；
B、某野果样液中加入斐林试剂后出现砖红色沉淀，表明该野果中含有还原糖，B错误；
C、进行预实验的目的是减少实验的盲目性，避免人力、物力和财力的浪费，而不是减小实验误差，C错误；
D、在探索生长素类调节剂促进插条生根的最适浓度的实验中，处理时间属于无关变量，会影响实验结果，所以需要保证处理时间相同，D错误。
故选A
4．D
【分析】1、效应B细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将效应B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。
2、杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体并且单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、可大量制备等特点。
【详解】A、单个效应B细胞有产生抗体的能力，但没有无限增殖的能力，因此在体外培养单个效应B细胞不可能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，A错误;
B、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞为杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞融合细胞，B淋巴细胞-B淋巴细胞融合细胞等，B错误；
C、利用抗原-抗体杂交技术可筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，C错误；
D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，D正确。
故选D。
5．D
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、制备单克隆抗体过程中第一次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞，A错误；
B、抗原具有多种抗原决定簇，3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点不相同，B错误；
C、病毒检测阴性的结果应为检测线无条带，质控线有条带，C错误；
D、如果样本中含有病毒抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体2E10结合，形成“病毒抗原—金标抗体”复合物，并继续向试纸末端流动。在检测线（T线）上又被能识别此抗原的另一种抗体3E4捕获，形成“金标抗体—病毒抗原—T线抗体”复合物”。推测试纸上发生待检测病毒的抗原与抗体结合的区域是结合垫、检测线（T线）。由于样品中VP1蛋白与金标2E10结合，向右扩散又与检测线处的3E4结合产生条带，过量的2E10与质控线处的山羊抗鼠IgG结合产生条带，因此病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带，D正确。
故选D。
6．D
【分析】中心法则的证内容：信息可以从DNA流向DNA，即DNA的自我复制；也可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即遗传信息的转录和翻译。 但是，遗传信息不能从蛋白质传递到蛋白质，也不能从蛋白质流向RNA或DNA。中心法则的后续补充有：遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA这两条途径。
【详解】A、HIV是含有逆转录酶的RNA病毒，T2噬菌体是DNA病毒，故二者在细胞中增殖方式不同，A正确；
B、从图中可看出血清中有多种抗体与硝酸纤维膜上不同的病毒蛋白结合，说明HIV引起机体产生多种抗体，B正确；
C、抗体检测无法取代核酸检测，如感染早期阶段或者自身免疫太低导致抗体较少，可能出现抗体检测的“假阴性”，不能完全取代核酸检测，C正确；
D、由图可看出酶标二抗是与人抗体结合的抗体，若与病毒结合，就无法检测出抗体的有无，用病毒抗原蛋白制备的单克隆抗体是与病毒蛋白特异性结合，D错误。
故选D。
7．A
【分析】人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，重新表达的抗体，其大部分氨基酸序列为人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利应用于人体。
【详解】A、需要向小鼠反复注射Her—2（抗原），使其发生免疫，使小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，A错误；
B、利用抗原-抗体杂交法筛选，能产生特定抗体的杂交瘤细胞，因此可用Her—2（抗原）对杂交瘤细胞进行抗体检测，以便筛选出呈阳性的细胞，B正确；
C、抗体偶联药物（ADC）由单克隆抗体、连接子和载药三部分构成，曲妥珠单抗除了起到治疗作用，还可以与其他药物结合形成ADC，C正确；
D、曲妥珠单抗是一种人源化单克隆抗体，与与鼠源化抗体相比，可以降低人体免疫反应的强度，D正确；
故选A。
8．B
【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。
2、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
【详解】A、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，两者原理不同，A错误；
B、利用单克隆抗体作为诊断试剂具有准确、高效、简易、快速等优点，B正确；
C、植物体细胞杂交和动物细胞融合技术操作流程不一样，C错误；
D、在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，D错误。
故选B。
9．B
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】A、杂交瘤细胞产生的抗体能针对相应抗原而不针对EBV（一种病毒颗粒），A错误；
B、据题意“EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感；骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感”可知，HAT培养基筛选去除的是未与EBV转化细胞融合的骨髓瘤细胞和自身融合的骨髓瘤细胞，B正确；
C、病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，即主要促进骨髓瘤细胞膜和B淋巴细胞膜的融合，C错误；
D、图示获得的杂交瘤细胞还要进行克隆培养和抗体检测，检测呈现阳性的杂交瘤细胞才能用于生产单克隆抗体，D错误。
故选B。
10．D
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。
【详解】A、上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，目的是让小鼠体内产生更多的能产生A抗体的B淋巴细胞，A错误；
B、取小鼠甲脾脏组织制备单细胞悬液时，应取小鼠甲脾脏剪碎，再用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液，B错误；
C、图中“筛选2”一般需要多次筛选才可获得足够数量的杂交瘤细胞②，C错误；
D、抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞②既能产生目标抗体，又能大量增殖，因而可在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，D正确。
故选D。
11．C
【分析】抗体偶联药物(ADC)是由靶向特异性抗原的单克隆抗体与小分子细胞毒性药物通过连接子链接而成,兼具传统小分子化疗的强大杀伤效应及抗体药物的肿瘤靶向性。ADC由三个主要部分组成：负责选择性识别癌细胞表面抗原的抗体，负责杀死癌细胞的药物有效载荷，以及连接抗体和有效载荷的连接子。
【详解】A、制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行两次筛选，一次是筛选能针对特定抗原抗体的杂交瘤细胞，第二次是筛选能针对特定抗原决定簇（抗原表位）的杂交瘤细胞，A正确；
B、ADC中抗体能与肿瘤细胞结合，利用抗体-药物偶联物（ADC），实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，B正确；
C、ADC中的抗体与肿瘤细胞表面的受体特异性结合后，使物质C进入细胞，诱导肿瘤细胞凋亡，C错误；
D、利用抗原-抗体杂交的特异性，单克隆抗体还可以作为诊断试剂，D正确。
故选C。
12．B
【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：
项目 原理 细胞融合方法 诱导手段 用途
植物体细胞杂交 细胞膜的流动性，植物细胞的全能性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导 克服远缘杂交不亲和，获得杂交植株
动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后，诱导细胞融合 离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导 制备单克隆抗体的技术之一
【详解】A、植物细胞工程的理论基础是植物细胞的全能性，动物细胞工程的原理是细胞增殖能力，A正确；
B、植物细胞工程中的融合方法为：物理方法、化学方法，诱导动物细胞融合的方法为物理方法、化学方法和生物方法，B错误；
C、植物细胞工程典型应用为：制备人工种子、种间杂种植物，动物细胞工程的应用为：单克隆抗体的制备，C正确；
D、植物细胞工程培养基中需要利用蔗糖，而动物细胞培养过程中必须利用动物血清，D正确。
故选B。
13．AD
【分析】单克隆抗体的作用：
①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。
【详解】A、淋巴细胞主要分布在淋巴结和脾脏，可从抗原刺激后小鼠的淋巴结和脾脏等处获取B淋巴细胞，A正确；
B、m和n分别处理得到的B淋巴细胞直接融合获得的杂交细胞，无法大量繁殖，B错误；
C、筛选杂交瘤细胞的选择培养基能够抑制骨髓瘤细胞的增殖，保证杂交瘤细胞的正常增殖，C错误；
D、双杂交瘤细胞MN能够无限增殖，且有两种抗体基因同时表达才能持续产生抗体M、N，D正确。
故选AD。
14．CD
【分析】体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，需加入血清、血浆等一些天然成分，通常为含动物血清的液体培养基。动物细胞融合也称细胞杂交，是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。植物体细胞杂交，又称原生质体融合，是指将植物不同种、属，通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。干细胞是一类具有无限的或者永生的自我更新能力的细胞、能够产生至少一种类型的、高度分化的子代细胞。可分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，包括骨髓中的造血干细胞、神经系统的神经干细胞和睾丸中的精原干细胞等。哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞的全能性高于体细胞。
【详解】A、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，在进行细胞培养时培养基中只加入细胞所需的各种营养物质；在制作微生物的培养基的过程中，可以通过添加琼脂作为凝固剂来将液体培养基转化为固体培养基或半固体培养基，A选项错误；
B、动物细胞融合不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B选项错误；
C、干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，有着自我更新能力及分化潜能，C选项正确；
D、哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞的全能性高于体细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植，D选项正确；
故选CD。
15．ABC
【分析】细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性。已分化的动物细胞的细胞核仍具有全能性；植物细胞具有全能性。
【详解】A、单菌落的获得依赖于细胞的增殖，不能体现细胞全能性，A正确；
B、胚状体已经分化，由胚状体长芽、生根、发育成试管苗，不能体现细胞的全能性，B正确；
C、培养杂交瘤细胞依赖细胞的增殖，，不能体现细胞全能性，C正确；
D、对早期胚胎均等分割、移植获得同卵双胎，说明该胚胎或其部分细胞具有发育的全能性，D错误。
故选ABC。
16．CD
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备；
单克隆抗体的作用，作为诊断试剂盒、用于治疗疾病和运载药物。
【详解】A、单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备，故给小鼠多次注射HER2，从其血清中分离出来的抗体不是单克隆抗体，A错误；
B、B淋巴细胞不能无限增殖，故体外培养单个的B淋巴细胞不可获得大量抗HER2的单克隆抗体，B错误；
C、T-DM1是由抗HER2曲妥珠单抗与微管抑制剂美坦新通过硫醚连接子连接而成的新型抗体偶联物，由于抗原抗体能特异性结合，故T-DM1借助其含有的曲妥珠单抗实现了对乳腺癌细胞的特异性杀伤作用，C正确；
D、同位素可用于追踪物质的运行和变化规律，故利用同位素标记的单抗在特定组织中的成像技术，可定位乳腺肿瘤，D正确。
故选CD。
17．(1) 体细胞核移植、动物细胞培养、细胞融合等 激活
(2) 动物细胞融合和动物细胞培养 有性杂交
(3) 动物细胞培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，胃蛋白酶在此环境中没有活性
【分析】利用体细胞核移植技术克隆动物的操作流程一般包括：体细胞核的提取，受体卵母细胞的获取和去核，细胞核的移植，重组细胞的激活（激活的方法主要有电激活法、钙离子激活法、乙醇激活法等），早期胚胎的体外培养和胚胎移植等。
单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】（1）利用体细胞核移植技术克隆动物的操作流程一般包括：体细胞核的提取，受体卵母细胞的获取和去核，细胞核的移植，重组细胞的激活（激活的方法主要有电激活法、钙离子激活法、乙醇激活法等），早期胚胎的体外培养和胚胎移植等，该过程涉及细胞工程中的体细胞核移植，动物细胞培养，细胞融合等技术。
（2）单克隆抗体的制备过程中，运用了细胞工程中的动物细胞融合（B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合）和动物细胞培养技术。其中动物细胞融合突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。
（3）结合（1）（2）可知，动物细胞工程技术的基础是动物细胞培养技术，将组织分散为单个细胞常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，由于多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，而胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，胃蛋白酶在此环境中没有活性。
18．(1) 抗原 体液
(2) 不是 EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原 VP1
(3) 胰蛋白 骨髓瘤
(4)与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量
【分析】能够引发机体发生特异性免疫反应的物质称为抗原，一般来说病毒的外壳蛋白就属于抗原，当抗原进入机体内环境，首先引发机体发生体液免疫。制备单克隆抗体抗体实际上利用的是动物细胞融合技术，从而获得既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
【详解】（1）EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2均可作为抗原，因为它们均能使小鼠发生特异性免疫反应，即能够引发小鼠机体发生体液免疫，从而产生产生相应的抗体。
（2）①分析柱形图可知，EV71免疫的小鼠血清可以与EV71、VP1和VP2多种抗原相结合，由此说明EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用VP1免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，因为第2组血清抗体可以结合EV71病毒（和VP1蛋白），第3组血清抗体无法特异性结合EV71病毒，仅能结合VP2。
（3）动物细胞培养过程中，首先需要用胰蛋白酶将组织细胞分散开来，再用灭活的病毒诱导动物细胞融合，这里诱导融合的对象是骨髓瘤细胞和小鼠脾脏细胞。
（4）双抗体夹心法是常用的定量检测抗原的方法，从图中可以发现固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，由此可见在该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，另外通过酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。
19．(1) 动物细胞培养 动物细胞融合
(2) 氨基蝶呤 S 选择 既能大量繁殖，又能产生专一抗体
(3) 克隆化培养 破伤风类毒素
【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠注射相应抗原，产生相应的浆细胞,然后将浆细胞与骨髓瘤细胞融合,经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。
【详解】（1）由图可看出，单克隆抗体制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合等技术手段。
（2）在培养液中加入氨基蝶呤,培养后收集增殖细胞，加入氨基蝶呤后，使D合成途径阻断,仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖，因此培养液中加入该物质后，不能生长的细胞有骨髓瘤细胞、融合的淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞、淋巴细胞，人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。由此分析，过程⑤所用的HAT培养基从功能上看属于选择培养基，此次筛选是为了得到杂交瘤细胞，该类细胞的特点是既能大量繁殖，又能产生专一抗体。
（3）过程⑥中将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔细胞培养板上,尽量使每个孔只接种l个杂交瘤细胞以实现克隆化培养,然后通过ELISA法(又称酶联免疫吸附试验法)检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，可与破伤风类毒素结合的培养孔为阳性孔。
【点睛】本题结合图解，考查单克隆抗体的制备过程,意在考查考生的识图能力和理解所学知识要点,把握知识间内在联系,形成知识网络结构的能力;能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。
20．(1) HER2 杂交瘤细胞 分泌抗HER2抗体的杂交瘤细胞
(2)HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的HER2多，与抗HER2-ADC结合的概率高
(3) 等剂量的磷酸缓冲液 促进 在动物体内的代谢，对正常细胞的毒性等
【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备；单克隆抗体的作用，作为诊断试剂盒、用于治疗疾病和运载药物。
【详解】（1） 结合题干，在制备抗 HER2-ADC的过程中，需要用 HER2 对小鼠多次进行免疫，获得分泌抗 HER2抗体的B淋巴细胞。过程②为特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞，过程③为抗体检测，目的是筛选产生特定抗体（分泌抗 HER2 抗体）的杂交瘤细胞。
（2）正常细胞和 HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞都能产生 HER2，但是 HER2过度表达的恶性肿瘤细胞表面的 HER2 多，与抗HER2-ADC 结合的概率高，因而抗 HER2-ADC可作为靶向药杀伤 HER2 过度表达的恶性肿瘤细胞。
（3） ①HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗—美坦新联药物都是治疗癌细胞的药物，空白对照组应注射等剂量的磷酸缓冲液。②根据实验结果可知，抗 HER2-ADC 组裸鼠的肿瘤体积最小，且比初始肿瘤体积小，说明抗 HER2-ADC 对 BT-474 细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好。③实验仅研究了抗 HER2-ADC 对肿瘤细胞代谢的影响，后续可通过研究抗 HER2-ADC在动物体内的代谢、对正常细胞的毒性等情况，为抗 HER2-ADC进入临床实验奠定数据基础。
21．(1) 原癌和抑癌 PD-1单抗与PD-1的结合，阻断了PD-1和PD-L1结合，避免抑制T细胞活化
(2) PSMA、CD28 骨髓瘤
(3) PSMA×CD28浓度增加激活作用增强 单独使用PSMA×CD28或PD-1单抗，都不能显著激活T细胞
【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
【详解】（1）癌细胞是由于原癌基因和抑癌基因发生突变导致遗传物质改变，使得其表面物质发生改变；分析题意，PD-L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸，据图分析，PD-1的单克隆抗体与PD-1特异性结合，阻断了PD-L1和PD-1的结合，避免抑制T细胞活化，从而发生细胞免疫，消灭癌细胞。
（2）抗原与抗体的结合具有特异性，分析题意，制备双特异性抗体PSMA×CD28，则抗原是CD28和PSMA，将两种物质分别注射到小鼠体内，刺激B细胞增殖分化出相应的浆细胞；将两类浆细胞分别和小鼠的骨髓瘤细胞融合，形成两种杂交瘤细胞，再诱导两种杂交瘤细胞融合。
（3）据图分析，自变量是抗体种类和浓度，因变量是IL-2含量，结合图示实验结果可知：PSMA×CD28和PD-1单抗联合使用能够显著激活T细胞（活化T细胞产生的细胞因子IL-2含量升高），且随PSMA×CD28浓度增加激活作用增强；单独使用PSMA×CD28或PD-1单抗，都不能显著激活T细胞。
答案第1页，共2页
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