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（7）动物细胞培养
——高二生物学人教版（2019）选择性必修三课堂速测
基础检测
动物细胞培养的条件
1.概念：动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织，将它分散成 ，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和 的技术。
2.营养条件
（1）合成培养基：将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成。
（2）天然成分： 等。
（3）一般使用液体培养基，即培养液。
3.无菌、无毒的环境
（1）培养液和培养用具 处理。
（2） 环境下操作。
（3）培养液定期更换的目的：清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
4.温度、pH和渗透压
（1）适宜的温度：哺乳动物多以 ℃为宜。
（2）适宜的pH：多数细胞生存的适宜pH为 。
（3）适宜的渗透压。
动物细胞培养的过程
1.悬浮生长：细胞悬浮在培养液中生长增殖。密度过大时，由于 积累和培养液中营养物质 ，细胞分裂受阻。
2.细胞贴壁：多数细胞贴附在瓶壁上生长。
3.接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面 时，细胞停止分裂生长的现象称为细胞的接触抑制。
4.原代培养：指动物组织经处理后的 。
5.传代培养：分瓶后的细胞培养。传代培养时，悬浮生长的细胞直接用 法收集；贴壁生长的细胞要先用 等处理，再用 法收集。
干细胞培养及其应用
1.干细胞分布：早期胚胎、骨髓和脐带等。
2.种类：胚胎干细胞和 等。
小试牛刀
1.动物细胞培养是动物细胞工程的基础技术。下列不属于动物细胞培养的必要条件是( )
A.生长素 B.抗生素 C.血清 D.无机盐
2.动物细胞培养的顺序是( )
① 原代培养
② 传代培养
③ 胰蛋白酶处理组织，形成分散的悬浮细胞．
A. ③ ① ② B. ① ② ③ C. ② ① ③ D. ① ③ ②
3.下列关于体外动物细胞培养所需培养条件的叙述中，不正确的是( )
A.无毒、无菌的环境 B.温度与动物体温相近
C.合成培养基中通常需加动物血清 D.CO2能调节培养液pH，不需要O2
4.体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，培养方式可分为悬浮培养和贴壁培养。下列叙述正确的是( )
A.悬浮培养一般使用液体培养基 B.贴壁培养一般使用固体培养基
C.悬浮培养会发生接触抑制现象 D.血液中淋巴细胞适合贴壁培养
5.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A.动物细胞培养液中可添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染
B.用胰蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞
C.传代培养的细胞一般可传50代以上
D.动物细胞培养的原理是细胞增殖
6.下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，正确的是( )
A.都需要无菌操作 B.都需要使用血清等天然成分
C.都需要脱分化 D.都需要固体培养基
7.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件( )
①无毒的环境
②无菌的环境
③只使用合成培养基
④温度与动物的体温相近
⑤因在CO2培养箱中培养，故不需要O2
⑥多数动物细胞培养在7.2～7.4的pH环境
A.①②④⑤⑥ B.①②③④ C.①②④⑤⑥ D.①②④⑥
8.有关动物细胞培养，以下说法正确的是( )
A.用胃蛋白酶处理以获得单细胞悬液 B.不用定期更换培养液
C.不需要加入血清以提供营养 D.充入5%CO2维持培养液的pH
答案以及解析
1.答案：A
解析：动物细胞培养条件:(1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物。(2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质。(3)适宜的温度和PH。(4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2,综上,BCD正确,A错误。故选A。
2.答案：A
解析：动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。
3.答案：D
解析：动物细胞培养需要定期更换培养液，添加抗生素，以创造无菌、无毒的环境，A正确；温度应该与动物的体温相近，B正确；培养液中要加入动物血清，以补充正常的营养，C正确；动物细胞培养需要一定的气体环境，O2可以维持细胞的代谢，故需要O2，D错误。
4.答案：A
解析：动物细胞培养均采用液体培养基，A正确，B错误；贴壁培养会发生接触抑制现象，悬浮培养不会发生接触抑制现象，C错误。体外培养动物细胞时常需要提供一个类似该细胞在生物体内的环境条件，因此血液中淋巴细胞适合悬浮培养，D错误。
5.答案：C
解析：A、动物细胞培养液中应添加一定量的抗生素，以防培养过程中杂菌的污染，A正确；
B、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞，B正确；
C、传代培养的细胞10代以内可以保持正常的核型，一般选用10代以内的细胞，C错误；
D、动物细胞培养的目的是获得细胞和细胞产物，原理是细胞增殖，D正确。
故选C。
6.答案：A
解析：A、动物细胞培养和植物组织培养都需要无菌操作，A正确；
B、植物组织培养不需要添加血清，B错误；
C、动物细胞培养不需要脱分化，C错误；
D、动物细胞培养一般是液体培养基，D错误。
故选A。
7.答案：D
解析：①动物细胞培养需要无毒环境，①正确；②动物细胞培养需要无菌环境，②正确；③用于动物细胞培养的合成培养基中还需加入血清、血浆等天然物质，③错误；④动物细胞培养需要适宜的温度和pH，其中温度要与动物体温相近，④正确；⑤动物细胞培养需要一定的气体环境，95%空气和5%的CO2，⑤错误；⑥动物细胞培养需要适宜的温度和pH值，多数动物细胞培养在7.2~7.4的pH环境，⑥正确综上所述，D正确，ABC错误。故选D。
8.答案：D
解析：A、获得单细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；
B、需要定期更换培养液，可以清除代谢产物，保证细胞的正常生长，B错误；
C、动物细胞培养的培养液通常需加入血清，为细胞提供相应的营养，C错误；
D、充入5%CO2的目的是维持培养液pH，D正确。
故选D。

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