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2024-2025学年度南昌市高三第一轮复习训练卷
生物学（十）
一、单项选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．下列有关基因工程的理论基础和技术发展的叙述，错误的是（ ）
A．不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据
B．基因载体的发现为基因跨物种转移找到了运载工具
C．限制酶和DNA连接酶的发现为DNA的切割和连接创造了条件
D．PCR技术扩增目的基因的前提是已知目的基因的碱基序列
2．培育转基因抗虫棉过程需要的步骤顺序是（ ）
A．目的基因的筛选与获取→将目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测与鉴定
B．目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定
C．目的基因的检测和鉴定→目的基因的筛选与获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞
D．基因表达载体的构建→目的基因的筛选与获取→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定
3．基因芯片主要用于基因检测工作，将待测DNA分子用放射性同位素或荧光物质标记，假如能与芯片上的单链DNA探针配对，它们就会结合起来，并出现“反应信号”。以下说法中错误的选项是（ ）
A．基因芯片的工作原理是碱基互补配对
B．待测的DNA分子首先要解旋变为单链，才可用基因芯片测序
C．“反应信号”是由待测DNA分子与基因芯片上的放射性探针结合产生的
D．由于基因芯片技术能够检测待测DNA分子，因而具有广泛的应用前景
4．如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，下列相关叙述中，正确的是（ ）

A．该实验的正确操作顺序是③→①→②→④→⑤
B．用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的DNA量相近
C．⑤表示要鉴定步骤①中所得到的白色丝状物主要成分为DNA，可使用二苯胺试剂来鉴定，沸水浴冷却后，出现蓝色的试管组别是对照组
D．步骤①的目的是初步分离DNA与蛋白质，析出并获得DNA；步骤④中在2mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度较大
5．《诗经》中有“投我以木瓜，报之以琼瑶”的诗句。番木瓜易感染番木瓜环斑病毒（英文缩写为PRSV）而获病。我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌转化法，成功培育出转基因番木瓜“华农一号”，大致流程如图所示。下列分析错误的是（ ）
A．过程②用限制酶BamHⅠ在Ti 质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团
B．过程③将重组质粒转入农杆菌之前，需先用Ca2+载体处理农杆菌
C．过程⑤产生的木瓜植株即使有抗PRSV 基因也不一定具有抗PRSV 的性状
D．农杆菌能在自然条件下能够侵染双子叶植物
6． MseⅠ、PstⅠ、EcoRⅠ三种限制酶的识别序列及切割位点分别是-GAAT↓TAATTC-、
-C↓TGCAG-、-G↓AATTC-，下图中图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。若要用上图质粒和外源DNA构建重组质粒，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶酶切位点。在构建新的限制酶酶切位点的过程中需要使用的酶是（ ）
A．限制酶PstⅠ、DNA连接酶、DNA聚合酶
B．限制酶EcoRⅠ、DNA连接酶、DNA聚合酶
C．限制酶EcoRⅠ、限制酶PstⅠ、DNA聚合酶
D．限制酶PstⅠ、限制酶EcoRI、DNA连接酶
7．如图表示利用基因工程技术生产人血清白蛋白的两条途径。下列相关叙述正确的是（ ）
A．将目的基因与乳腺细胞中特异表达基因的启动子重组在一起
B．导入人血清白蛋白基因的绵羊受体细胞是乳腺细胞
C．扩增目的基因时，利用耐高温的DNA 连接酶从引物a、b的3'-端进行子链合成
D．利用显微注射法可将含有目的基因的重组质粒整合到植物受体细胞的染色体DNA上
8．下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是（ ）
A．将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌，筛选获得基因工程菌
B．将花青素代谢基因导入植物体细胞，经组培获得花色变异植株
C．将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D．将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者，进行基因治疗
9．人们利用生物技术对生物体进行不同层次的设计、控制、改造或模拟，产生巨大生产力的同时，也带来了多种涉及安全和伦理的问题。下列相关叙述，合理的是（ ）
A．如果有证据表明某种转基因食品有害，就应该禁止转基因技术的应用
B．试管婴儿技术已经成熟，移植前可对胚胎进行遗传学诊断和基因改造
C．利用转基因技术制造的新型致病菌具有极大的危害性，原因是人体不会对它们产生免疫反应
D．转基因马铃薯培育中，除目的基因外还导入了能使花粉失去活性的基因，从而减少基因污染的发生
10．制备荧光标记的DNA探针时，需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸（dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP）的反应管①~④中，分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则，且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有（ ）
反应管 加入的单链DNA
① 5'-GCCGATCTTTATA-3' 3'-GACCGGCTAGAAA-5'
② 5'-AGAGCCAATTGGC-3'
③ 5'-ATTTCCCGATCCG-3' 3'-AGGGCTAGGCATA-5'
④ 5'-TTCACTGGCCAGT-3'
A．①② B．②③ C．①④ D．③④
11．已知红、绿色荧光蛋白基因可以在人体内正常表达，且表达产物可以通过粪便进行定量检测；炎症性肠病（IBD）是一种易导致结肠癌的慢性疾病，患者肠道内会产生硫代硫酸盐，且产生量与该病的进展呈正相关。基于此，科研人员开发了智能工程菌，用于疾病诊断和了解疾病进程，以便精确用药。下图是三种智能工程菌体内重组质粒的部分结构。下列有关分析错误的是（ ）
注：启动子1为硫代硫酸盐特异性诱导激活启动子；启动子2为持续表达启动子。
A．通常会使用Ca2+处理工程菌，以便于转入构建好的表达载体
B．完整的重组质粒1除图中所示结构外还应有标记基因
C．重组质粒1用于特异性治疗，重组质粒2、3用于特异性检测
D．与重组质粒3相比，重组质粒2的检测结果更加准确
12．植物生物反应器主要以整株植物、植物组织或植物悬浮细胞为加工场所，生产药物蛋白。叶绿体遗传转化体系是近年发展起来的一种新的植物生物反应器，是以叶绿体为外源DNA受体的安全性极高的一种转化方式。下列叙述错误的是（ ）
A．构建叶绿体遗传转化体系时，需要的工具酶是限制性内切核酸酶和 DNA连接酶
B．构建的基因表达载体中含有叶绿体特异启动子，使得目的基因只能在叶绿体中表达
C．植物叶绿体表达体系可以防止转基因作物的目的基因通过花粉在自然界中扩散
D．把目的基因导人叶绿体DNA中，将来产生的配子中一定含有此目的基因
二、多项选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，至少有两个选项符合题目要求。全部选对得4分，选对但选不全得2分，有选错得0 。
13．下列有关生物技术的安全性和伦理问题的叙述，正确的是（ ）
A．转基因食物潜在的安全隐患是转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原
B．设计试管婴儿必须得到政府的审批而试管婴儿则不需要，这是因为前者技术复杂有一定的危险性，而后者技术上已经很成熟
C．我国对生殖性克隆人的原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
D．治疗性克隆是无性生殖，生殖性克隆是有性生殖
14. 用A和B两种限制酶同时或分别处理某DNA分子，酶切位点及酶切产物的电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（ ）
A．图甲中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点
B．图乙中①代表酶A，②代表酶B
C．图中DNA片段经酶A和酶B同时处理后，得到4个末端
D．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着与它所带电荷相反的电极移动的原理
15．乙肝病毒基因工程疫苗的生产和使用流程如图，质粒中LacZ基因可使细菌能够利用物质X-gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①中目的基因和载体重组的效率与载体和目的基因的浓度及比例等有关
B．过程②需要在培养基中加青霉素和X-gal以获得呈蓝色的大肠杆菌菌落
C．大肠杆菌是否成功表达出乙肝病毒外壳，可用抗原—抗体杂交法进行检测
D．该基因工程疫苗不会出现乙肝病毒感染和增殖的情况，安全性高
16．基因表达载体的构建是基因工程的核心。图甲为限制酶EcoRI的识别序列，图乙表示目的基因及限制酶切点，A、B、C、D为四种引物。图丙表示目的基因上的DNA片段，图丁表示质粒。下列相关叙述正确的是（ ）
A．选引物A、D进行该目的基因的扩增
B．不能同时用PstⅠ和HindⅢ切割目的基因和质粒
C．限制酶的作用部位是图丙中的②
D．从图丁中可以看出，质粒是一种环状的DNA分子
三、非选择题：此题共 5 个小题，共60分。
17．（12分）抗凝血酶Ⅲ（AT—Ⅲ）为一种含有432个氨基酸的单链糖蛋白，是血浆中抗凝血系统最重要的成分，它主要由肝脏合成后进入血液，AT—Ⅲ水平降低可发生血栓或DIC（弥散性血管内凝血）。研究人员利用转基因奶山羊乳腺生物反应器生产人抗凝血酶Ⅲ。
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因：从人肝细胞获取相应的mRNA，经 形成人抗凝血酶ⅢcDNA，PCR扩增。根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列，设计2种特异性引物，在PCR过程中，两个引物是 的结合位点，也是子链延伸的起点。PCR反应体系中加入dNTP的作用是： 。设计引物时需注意 ，以防止自身折叠成发夹结构或形成二聚体。
(2)构建基因表达载体：重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子等结构组成，其中 决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵，常用方法是： 。
18．（11分）某同学采用基因工程技术在大肠杆菌中表达蛋白E。回答下列问题。
(1)该同学利用PCR扩增目的基因。PCR的每次循环包括变性、复性、延伸3个阶段，其中DNA双链打开成为单链的阶段是 ，引物与模板DNA链碱基之间的化学键是 。
(2)质粒载体上有限制酶a、b、c的酶切位点，限制酶的切割位点如图所示。构建重组质粒时，与用酶a单酶切相比，用酶a和酶b双酶切的优点体现在
（答出两点即可）；使用酶c单酶切构建重组质粒时宜选用的连接酶是 。
(3)启动子的功能是： 。
(4)若要验证转化的大肠杆菌中含有重组质粒，简要的实验思路和预期结果是
。
19．（12分）基因工程是新品种花卉培育中的一种重要技术手段。研究发现普通矮牵牛花因缺乏蓝色色素合成所需的转座酶而不能开蓝色花，研究人员尝试将从蔷薇花瓣细胞中分离提取的转座酶F35H基因转入普通矮牵牛中，以期获得蓝色矮牵牛新品种，该过程所用质粒与含转座酶F35H基因的DNA片段上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制酶BamHI、Sau3AI、HindIII识别的碱基序列和酶切位点分别为--、--、--。请回答下列问题：
(1)质粒是独立于 之外，具有自我复制能力的环状双链DNA分子，图1质粒中没有显示的结构是 ，四环素抗性基因的作用是：
。
(2)在用图1和图2中质粒和转座酶F35H基因构建基因表达载体时，最好选用
限制酶来切割质粒和含目的基因的DNA片段。
(3)将构建好的重组质粒转入土壤农杆菌，最终成功导入蓝色素基因的农杆菌，在含氨苄青霉素培养基、含四环素培养基、同时含氨苄青霉素和四环素的培养基上的生存状况应该是
。
(4)检测转座酶F35H基因是否在普通矮牵牛细胞中成功表达，常采用的检测技术是
。
20．（12分）将天然Ti质粒改造成含有Vir基因的辅助质粒（辅助T-DNA转移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。
注：F1-F3，R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。
(1)从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是
。提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是
。
(2)本操作中获取目的基因的方法是 和 。
(3)插入两个p35s启动子，其目的可能是 。
(4)根据图中穿梭质粒上的KanR和HygBR两个标记基因的位置，用 基因对应的抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。
(5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体DNA作模板，进行PCR，应选用的引物是 和 。
21．（13分）重组PCR技术是一项新的PCR技术，可将原来两个不相关的DNA连接起来，组成一个新的分子。实验小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB基因和ST1基因片段，用重组PCR技术构建了LTB-STl融合基因。融合基因的制备过程如图所示。回答下列问题：
(1)PCR实验中，为防止外源DNA等因素的污染，使用的微量离心管、缓冲液、蒸馏水等在使用前必须进行 。PCR过程中，子链延伸需要在 进行，在 的催化作用下，该酶需要被 （填离子）激活后才能发挥作用。
(2)设计引物时，引物P1与引物P2的碱基序列 （填“能”或“不能”）互补；引物P2与引物P3的碱基序列 （填“能”或“不能”）部分互补，原因是
。
(3)DNA子链是从5′端向3′端延伸。为了使杂交链顺利延伸子链，至少需要经过2次循环能得到用于杂交的目的链L、S，则第2次循环的目的是
。
(4)杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因的过程中， （填“需要”或“不需要”）加入引物。在图中标出杂交链两条母链的3′端和5′端：
2024-2025学年度南昌市高三第一轮复习训练卷参考答案
生物（十）
一、单项选择题（24分）
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
答案 D B C D B B A D D D D D
二、多项选择题（16分）
题号 13 14 15 16
答案 AC ABD ACD BCD
三、非选择题（60分）
17．（12分）
(1) 逆转录（2分），耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）（2分），为DNA的合成提供原料和能量（2分），引物自身以及引物之间不能有连续较多碱基的互补（2分）
(2)山羊β-酪蛋白基因启动子（2分）
(3)显微注射法（2分）
18．（11分）
(1) 变性（1分），氢键（1分）
(2) 避免目的基因和质粒的任意连接、防止目的基因和质粒的自身环化（2分），T4DNA连接酶（1分）
(3) RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录（2分）
(4) 利用DNA分子杂交技术，将大肠杆菌的基因组DNA提取出来，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作标记，以此作为探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，表明大肠杆菌中含有重组质粒（4分）
19．（12分）
(1) 真核细胞的细胞核或原核细胞拟核DNA（2分），复制原点（2分），鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来（2分）
(2) HindⅢ和Sau3AⅠ（2分）
(3)能在含氨苄青霉素的培养基上生存，但是不能在含四环素培养基和同时含两种抗生素的培养基上生存（2分）
(4) 抗原—抗体杂交（2分）
20．（12分）
(1) 水解DNA酶，防止DNA被分解（2分），溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA（2分）
(2) PCR技术扩增（1分），人工合成（1分）
(3) 增强目的基因的表达（2分）
(4) HygBR（2分）
(5) F3（1分），R2（1分）
21．（13分）
(1) 高压蒸汽灭菌（1分），72℃（1分），耐高温的DNA聚合酶（1分），Mg2+（1分）
(2) 不能（1分），能（1分），使LTB基因与ST1基因的单链融合在一起（2分）
(3) 为杂交链延伸子链起始部位提供3＇端（2分）
(4) 不需要（1分）
（2分）

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