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周测8　第3～4章滚动练习
一、选择题(本题包括20小题，每小题3分，共60分，每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．下列有关基因工程的叙述，不正确的是(　　)
A．基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组
B．不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据
C．不同生物的DNA结构大致相同是重组DNA形成的保障
D．基因工程工具酶的发现为目的基因导入受体细胞创造了条件
2．(2024·潮州高二月考)已知限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别位点分别是－G↓GATCC－、－A↓GATCT－。下列有关说法错误的是(　　)
A．限制酶的识别序列可能由4个、6个、8个或其他数量的核苷酸组成
B．上述两种限制酶切割出的末端只能用E.coli DNA连接酶进行“缝合”
C．上述两种限制酶切割出的末端之间相互连接后不会再被这两种限制酶识别
D．若用两种限制酶同时切割目的基因和质粒，可提高重组质粒构建的成功率
3．某研究所的研究人员拟将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌的细胞内，已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，目的基因要插入基因B中，且大肠杆菌本身不带有任何抗性基因。下列相关叙述正确的是(　　)
A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B．抗生素抗性基因是目的基因表达的必要条件
C．成功导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基上生长
D．能在含链霉素的培养基中生长的大肠杆菌不一定符合生产要求
4．(2024·徐州高二月考)在利用香蕉进行DNA粗提取与鉴定实验中，下列相关叙述错误的是(　　)
A．研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放
B．香蕉研磨后离心取上清液，加入体积分数为95%的冷酒精，有利于DNA析出
C．将出现白色丝状物的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀物
D．向DNA丝状物中加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色
5．利用PCR技术将某小段DNA分子扩增n次，下列有关该过程的说法正确的是(　　)
A．测定DNA分子两端的核苷酸序列，以便设计引物
B．共有(2n－2)对引物参与子代DNA分子的合成
C．向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶等
D．保持反应体系温度恒定，确保扩增的正常进行
6.如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是(　　)
A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶
B．终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来
C．构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代
D．抗生素抗性基因作为标记基因
7．(2024·丽江高二月考)大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述，错误的是(　　)
A．将提取的DNA溶于2 mol/L NaCl溶液，可用二苯胺试剂在沸水浴加热条件下鉴定DNA
B．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
C．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点
D．用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果
8．科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是(　　)
A．将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠
B．通过PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物
C．构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
D．通过PCR检测目的基因是否完成表达
9．(2024·营口高二月考)为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，如图为重组Ti质粒上T－DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因
B．RNA聚合酶与启动子1识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录
C．可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织
D．用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两个条带
10．(2024·大同高二月考)人血白蛋白在临床上被广泛应用。我国科学家通过生物工程技术在水稻胚乳中提取到人血白蛋白，其流程如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A．PCR扩增时需要DNA模板、引物、耐高温的RNA聚合酶等
B．过程①须用农杆菌转化法将人血白蛋白基因导入水稻胚乳细胞中
C．过程①需将目的基因与胚乳中特异性表达基因的启动子等调控元件重组
D．过程②改变生长素和细胞分裂素的浓度及比例不影响细胞的脱分化过程
11．(2024·绍兴高二月考)将苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白基因(Bt基因)导入棉花细胞培育得到抗虫棉，但一段时间种植后发现其抗虫效果减弱。为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，以下采取的措施不正确的是(　　)
A．转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因的突变率
B．转入多种抗虫基因能提高抗虫持久性，因为棉铃虫基因突变频率低且不定向
C．为棉铃虫提供庇护所，可使敏感型棉铃虫在种群中维持一定比例
D．提高Bt基因的表达量，可降低抗虫棉种植区棉铃虫的种群密度
12．科学家运用蛋白质工程对绿色荧光蛋白进行改造获得黄色荧光蛋白，荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究领域有着重要的作用。下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是(　　)
A．蛋白质工程能够生产自然界中不存在的蛋白质
B．蛋白质工程最终还是要通过改造或合成基因来完成
C．蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质结构出发最终推测出脱氧核苷酸序列
D．基因定点突变技术可帮助改造生产新的蛋白质
13．(2024·重庆江北区高二月考)下列关于转基因产品及其安全性的叙述，正确的是(　　)
A．转基因食品生产的都是自然界中存在的物质，安全检测是不必要的
B．转基因玉米在环境保护上的重要作用是减少了农药使用对环境造成的污染
C．种植转基因植物不会因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性
D．我国通过减少农业转基因技术的研发来保证转基因产品的安全
14．(2024·泰州高二月考)我国政府禁止生殖性克隆人，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题。下列说法错误的是(　　)
A．生殖性克隆与治疗性克隆的目的是不同的
B．在治疗性克隆中干细胞的研究前景广阔
C．干细胞的研究是不受任何限制的
D．治疗性克隆是为了获得治疗所需的细胞，也需要严格的监管
15．如同发明炸药时没有想把炸药用于人类互相残杀的战争中一样，科学家在创造重组DNA技术时，也不是为了用于战争，但无法抵挡新技术在军事方面的运用，生物武器就这样出现了。下列关于生物武器的说法，错误的是(　　)
A．生物武器难以检测，用其进行杀伤时可能并不会被马上察觉
B．生物武器没有明确的标识，潜在危害大
C．依靠科学力量和人类的文明合作，生物武器也可被适当发展
D．生物武器适应能力强，具有强大的感染力和致病力
16．(2024·宝鸡高二月考)如图1为某种质粒的简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，箭头所指分别为限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述不正确的是(　　)
A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ的酶切位点有1个
C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D．一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
17．(2024·大同高二月考)如图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图，下列说法正确的是(　　)
A．若利用图示流程构建工程菌批量生产胰岛素，应先从垂体细胞中获取总RNA
B．利用PCR扩增目的基因时，可在特异性引物3′端添加NcoⅠ和NheⅠ的切割位点
C．制备能分泌人胰岛素的工程菌时，酵母菌比大肠杆菌更适合作为受体细胞
D．图中m为启动子，n为终止子，m是解旋酶识别和结合的位点
18．(2024·吉安高二期中)草甘膦是一种可以杀灭多种植物(包括农作物)的除草剂，其杀灭植物的原理是能够破坏植物叶绿体中的EPSPS合成酶。通过转基因的方法，让农作物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不被草甘膦杀死。下列有关叙述正确的是(　　)
A．将EPSPS酶基因导入农作物的叶绿体可避免基因污染
B．EPSPS酶基因在杂草和农作物中转录形成的mRNA不相同
C．可利用PCR技术获取和大量扩增EPSPS酶
D．农作物细胞有细胞壁，需先去除细胞壁才可将EPSPS酶基因导入其中
19．在转基因成果造福人类的同时，转基因产品的安全性问题也被广泛关注。实际上，转基因技术及其应用就是伴随着质疑、担忧甚至反对的声音而不断发展的。下列关于转基因技术的叙述，错误的是(　　)
A．转基因产品的研究和利用不会对人类产生任何不利的影响
B．科学家应科学地认识、评估和利用转基因产品
C．开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因产品安全的前提
D．转基因食品安全性是目前对转基因产品安全性的争论的主要集中点之一
20．(2024·苏州高二月考)下列关于试管婴儿、设计试管婴儿技术及安全伦理的叙述，错误的是(　　)
A．试管婴儿、设计试管婴儿技术在生物学上所依据的原理都是无性生殖
B．试管婴儿、设计试管婴儿技术对人类的作用是不同的
C．设计试管婴儿形成的胚胎需经遗传学分析后植入母体孕育
D．不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争
二、非选择题(本题包括3小题，共40分。)
21．(16分)(2024·六安高二月考)人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法，乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。回答下列问题：
(1)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的______，以其作为模板，在________酶的作用下逆转录合成cDNA，cDNA与载体需在______________________酶的作用下构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。
(2)(2分)如图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，质粒中LacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X－gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。图中过程①有两种限制酶选择方案，它们分别是______________或______________________________。
(3)获取目的基因的方法除了图中用酶切的方法从细胞中分离以外，还可以通过__________来获得。据图可知，该目的基因的具体功能是__________________________。
(4)为了筛选含目的基因的重组质粒的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中加入______________，培养一段时间挑选出______色的菌落进一步培养获得大量目的菌。
22．(16分)(2024·泰安高二检测)大肠杆菌β-半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X－gal)水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ′编码Z酶氨基端的一个片段(称为α-肽)，该质粒结构及限制酶的识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的DNA片段与pUC18质粒进行基因工程操作。回答下列问题：
(1)实验中使用限制酶破坏了pUC18质粒和DNA片段的____________键。限制酶主要来源于原核生物，不能切割原核生物自身DNA分子的原因是_____________________________。
(2)为保证能通过菌落的颜色辨别出含重组质粒的大肠杆菌，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是________________________________。用重组质粒转化改造后的大肠杆菌，将其接种到含氨苄青霉素和X－gal的固体培养基上进行培养，含重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为______，原因是_______________________________________。
(3)有科学家检测了291种没有经过人工转基因操作的栽培番薯，发现这些番薯都含有农杆菌的部分基因，并且在番薯的根、茎、叶等器官中都检测到了相关基因的表达。但是，科学家在番薯的近缘野生种中却没有发现这些基因，产生这种现象的原因可能是___________________________________________________________________________。这一事实对我们认识有关转基因食品的安全性启示：_____________。
23．(每空1分，共8分)(2024·包头高二月考)利用PGD/PGS技术检测的试管婴儿已在我国诞生。PGD是指胚胎植入前的基因诊断，主要用于检查胚胎是否携带有遗传缺陷的基因；PGS是指在胚胎植入前进行染色体异常检测。通过比对、分析，从而有助于避免遗传物质异常的胚胎产生。回答下列问题：
(1)试管婴儿的培育需经过体外受精、________________、____________以及在母体中发育和产出(分娩)等过程。
(2)设计试管婴儿时，为了筛选的需要，胚胎移植时常采用______(填“1”“2”或“多”)个胚胎进行移植。
(3)利用________(填“PGD”或“PGS”)技术可以筛选不携带地中海贫血基因的试管婴儿。为了避免某些遗传疾病的发生，有时需对胚胎的性别进行鉴定，目前最有效、最准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是从被测囊胚的____________(部位)取出几个细胞，提取DNA；然后利用PCR扩增______基因；最后选择出与特异性探针出现______(填“阳”或“阴”)性反应的男性胚胎。
(4)设计试管婴儿也引起了人们的广泛争议，我国已建立了相应的法律体系和制度条文，以避免该技术________。
参考答案及解析
一、选择题(本题包括20小题，每小题3分，共60分，每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．下列有关基因工程的叙述，不正确的是(　　)
A．基因工程的原理是通过对DNA分子操作实现基因重组
B．不同生物共用一套遗传密码为基因工程提供了理论依据
C．不同生物的DNA结构大致相同是重组DNA形成的保障
D．基因工程工具酶的发现为目的基因导入受体细胞创造了条件
答案　D
解析　基因工程工具酶的发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件，D错误。
2．(2024·潮州高二月考)已知限制酶BamHⅠ和BglⅡ的识别位点分别是－G↓GATCC－、－A↓GATCT－。下列有关说法错误的是(　　)
A．限制酶的识别序列可能由4个、6个、8个或其他数量的核苷酸组成
B．上述两种限制酶切割出的末端只能用E.coli DNA连接酶进行“缝合”
C．上述两种限制酶切割出的末端之间相互连接后不会再被这两种限制酶识别
D．若用两种限制酶同时切割目的基因和质粒，可提高重组质粒构建的成功率
答案　B
解析　不同限制酶识别序列有差异，限制酶的识别序列可能由4个、6个、8个或其他数量的核苷酸组成，A正确；上述两种限制酶切割出的末端为黏性末端，能用E.coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶进行“缝合”，B错误；上述两种限制酶切割出的末端之间相互连接后形成的序列为，不会再被这两种限制酶识别，C正确；若用两种限制酶同时切割目的基因和质粒，可形成不同的末端，能避免目的基因和质粒自身环化和反向连接，从而提高重组质粒构建的成功率，D正确。
3．某研究所的研究人员拟将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌的细胞内，已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗氨苄青霉素基因，目的基因要插入基因B中，且大肠杆菌本身不带有任何抗性基因。下列相关叙述正确的是(　　)
A．导入大肠杆菌的质粒一定为重组质粒
B．抗生素抗性基因是目的基因表达的必要条件
C．成功导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基上生长
D．能在含链霉素的培养基中生长的大肠杆菌不一定符合生产要求
答案　D
解析　导入大肠杆菌的质粒可能为重组质粒，也可能为普通质粒，A错误；抗生素抗性基因为基因表达载体中的标记基因，是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来，与目的基因的表达无关，B错误；由于目的基因要插入基因B中，抗氨苄青霉素基因被破坏，大肠杆菌不能抗氨苄青霉素，因此成功导入重组质粒的大肠杆菌不能在含氨苄青霉素的培养基上生长，C错误；能在含链霉素的培养基中生长的大肠杆菌可能导入了重组质粒或普通质粒，因此不一定符合生产要求，D正确。
4．(2024·徐州高二月考)在利用香蕉进行DNA粗提取与鉴定实验中，下列相关叙述错误的是(　　)
A．研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放
B．香蕉研磨后离心取上清液，加入体积分数为95%的冷酒精，有利于DNA析出
C．将出现白色丝状物的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀物
D．向DNA丝状物中加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色
答案　D
解析　冷冻研磨可以从各种环境样本中获得高质量的 DNA，研磨前先用液氨冷冻处理香蕉，有利于DNA的释放，A正确；DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，香蕉研磨后离心取上清液，加入体积分数为95%的冷酒精，有利于DNA析出，B正确；将出现白色丝状物(粗提取得到的DNA)的溶液倒入离心管中离心，弃上清液取沉淀物，C正确；将DNA丝状物溶于2 mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂，沸水浴加热出现蓝色，D错误。
5．利用PCR技术将某小段DNA分子扩增n次，下列有关该过程的说法正确的是(　　)
A．测定DNA分子两端的核苷酸序列，以便设计引物
B．共有(2n－2)对引物参与子代DNA分子的合成
C．向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶等
D．保持反应体系温度恒定，确保扩增的正常进行
答案　A
解析　利用PCR技术扩增DNA时需要引物的参与，因此需要测定DNA分子两端的核苷酸序列，以便设计引物，A正确；DNA进行半保留复制，扩增n次后，有(2n－2)个DNA分子是重新合成的，且每个DNA分子含1对引物，而含最初模板链的2个DNA分子中含有1对引物，因此扩增n次后共有(2n－1)对引物参与子代DNA分子的合成，B错误；PCR技术中DNA双链的解开不需要解旋酶，且利用PCR技术扩增DNA分子是在较高温度下进行的，因此需要耐高温的DNA聚合酶，C错误；PCR扩增的过程一般为高温变性、低温复性、中温延伸，可见整个过程中不需要保持恒温，D错误。
6.如图为基因表达载体的模式图，下列叙述错误的是(　　)
A．构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶
B．终止子位于基因的下游，使翻译在所需要的地方停止下来
C．构建成功后可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代
D．抗生素抗性基因作为标记基因
答案　B
解析　终止子位于基因的下游，其作用是使转录在所需要的地方停止，B错误。
7．(2024·丽江高二月考)大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述，错误的是(　　)
A．将提取的DNA溶于2 mol/L NaCl溶液，可用二苯胺试剂在沸水浴加热条件下鉴定DNA
B．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理
C．根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点
D．用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果
答案　C
解析　由于DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度较大，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，所以将提取的DNA溶于2 mol/L NaCl溶液后，可用二苯胺试剂在沸水浴加热条件下进行鉴定，A正确；DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，B正确；因为质粒的本质是环状的DNA，限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该限制酶在质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，C错误；凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒，被染色的质粒还需要通过紫外灯照射才能看到结果，D正确。
8．科研人员通过PCR获得肝细胞特异性启动子——白蛋白启动子，将该启动子与Cre重组酶基因结合构建表达载体，培育出在肝细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠。下列叙述正确的是(　　)
A．将该表达载体导入肝细胞以获得转基因小鼠
B．通过PCR获得白蛋白启动子需设计特异性的引物
C．构建该表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
D．通过PCR检测目的基因是否完成表达
答案　B
解析　将该表达载体导入小鼠受精卵以获得转基因小鼠，A错误；构建该表达载体需要限制酶和DNA连接酶，C错误；检测目的基因是否完成表达常用抗原—抗体杂交技术，D错误。
9．(2024·营口高二月考)为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，如图为重组Ti质粒上T－DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因
B．RNA聚合酶与启动子1识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录
C．可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织
D．用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两个条带
答案　B
解析　以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，A正确；抗除草剂基因位于启动子2的后面，因此RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录，B错误；由于图中T－DNA的序列中含有目的基因和抗除草剂基因，故可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织，C正确；用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，得到两种片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、含有抗除草剂基因的片段，因此经电泳分离至少得到两个条带，D正确。
10．(2024·大同高二月考)人血白蛋白在临床上被广泛应用。我国科学家通过生物工程技术在水稻胚乳中提取到人血白蛋白，其流程如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A．PCR扩增时需要DNA模板、引物、耐高温的RNA聚合酶等
B．过程①须用农杆菌转化法将人血白蛋白基因导入水稻胚乳细胞中
C．过程①需将目的基因与胚乳中特异性表达基因的启动子等调控元件重组
D．过程②改变生长素和细胞分裂素的浓度及比例不影响细胞的脱分化过程
答案　C
解析　PCR扩增时需要DNA模板、引物、耐高温的DNA聚合酶、脱氧核苷酸等，A错误；过程①可用农杆菌转化法将含有人血白蛋白基因的基因表达载体导入水稻细胞中，通过植物组织培养获得转基因水稻植株，其受体细胞并不是特定的胚乳细胞，B错误；过程①在构建基因表达载体时，需将目的基因与胚乳中特异性表达基因的启动子等调控元件重组，从而使目的基因在水稻的胚乳细胞中特异性表达，C正确；过程②进行植物组织培养，主要包括脱分化和再分化过程，生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素，改变它们的浓度及比例对脱分化和再分化过程均有影响，D错误。
11．(2024·绍兴高二月考)将苏云金杆菌的Bt抗虫蛋白基因(Bt基因)导入棉花细胞培育得到抗虫棉，但一段时间种植后发现其抗虫效果减弱。为提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，以下采取的措施不正确的是(　　)
A．转基因棉田周围种植非抗虫棉，可降低棉铃虫抗性基因的突变率
B．转入多种抗虫基因能提高抗虫持久性，因为棉铃虫基因突变频率低且不定向
C．为棉铃虫提供庇护所，可使敏感型棉铃虫在种群中维持一定比例
D．提高Bt基因的表达量，可降低抗虫棉种植区棉铃虫的种群密度
答案　A
解析　基因突变可以自发发生且具有不定向性，突变频率与环境没有直接关系，所以在转基因棉田周围种植非抗虫棉，不能降低棉铃虫抗性基因的突变率，A错误；因为棉铃虫基因突变频率低且具有不定向性，因此转入多种抗虫基因能避免单一抗虫基因频率上升，进而提高抗虫持久性，B正确；为棉铃虫提供庇护所，可使敏感型棉铃虫在种群中维持一定比例，增加抗性棉铃虫和敏感型棉铃虫交流的机会，进而提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，C正确；提高Bt基因的表达量，即提高抗虫棉中Bt抗虫蛋白的含量，能高效杀死棉铃虫，进而可降低抗虫棉种植区棉铃虫的种群密度，提高转基因抗虫棉的抗虫持久性，D正确。
12．科学家运用蛋白质工程对绿色荧光蛋白进行改造获得黄色荧光蛋白，荧光蛋白在细胞内生命活动的检测、肿瘤的示踪研究领域有着重要的作用。下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是(　　)
A．蛋白质工程能够生产自然界中不存在的蛋白质
B．蛋白质工程最终还是要通过改造或合成基因来完成
C．蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质结构出发最终推测出脱氧核苷酸序列
D．基因定点突变技术可帮助改造生产新的蛋白质
答案　C
解析　蛋白质工程生产蛋白质的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质，C错误。
13．(2024·重庆江北区高二月考)下列关于转基因产品及其安全性的叙述，正确的是(　　)
A．转基因食品生产的都是自然界中存在的物质，安全检测是不必要的
B．转基因玉米在环境保护上的重要作用是减少了农药使用对环境造成的污染
C．种植转基因植物不会因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性
D．我国通过减少农业转基因技术的研发来保证转基因产品的安全
答案　B
解析　转基因食品通常导入了外来基因，由于基因间的互作机制等原因，安全检测是必要的，A错误；转基因玉米由于导入了抗虫基因，故其在环境保护上的重要作用是减少了农药使用对环境造成的污染，B正确；种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的遗传多样性，故应在种植时划分区域，注意其与非转基因植物的距离等，C错误；保证转基因产品的安全应是趋利避害，不能因噎废食，故不能通过减少农业转基因技术的研发来保证转基因产品的安全，D错误。
14．(2024·泰州高二月考)我国政府禁止生殖性克隆人，也同样重视治疗性克隆所涉及的伦理问题。下列说法错误的是(　　)
A．生殖性克隆与治疗性克隆的目的是不同的
B．在治疗性克隆中干细胞的研究前景广阔
C．干细胞的研究是不受任何限制的
D．治疗性克隆是为了获得治疗所需的细胞，也需要严格的监管
答案　C
解析　生殖性克隆的目的是产生独立生存的新个体，治疗性克隆是为了获得特定的细胞、组织或器官，从而达到治疗疾病的目的，A正确；用干细胞诱导形成组织、器官，不需要破坏胚胎，且干细胞来自病人本身，将其移植给病人可避免发生免疫排斥反应，因此在治疗性克隆中，干细胞的研究前景广阔，B正确；干细胞的研究不能用于其他非法途径，因此是受限制的，C错误。
15．如同发明炸药时没有想把炸药用于人类互相残杀的战争中一样，科学家在创造重组DNA技术时，也不是为了用于战争，但无法抵挡新技术在军事方面的运用，生物武器就这样出现了。下列关于生物武器的说法，错误的是(　　)
A．生物武器难以检测，用其进行杀伤时可能并不会被马上察觉
B．生物武器没有明确的标识，潜在危害大
C．依靠科学力量和人类的文明合作，生物武器也可被适当发展
D．生物武器适应能力强，具有强大的感染力和致病力
答案　C
解析　我国在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误。
16．(2024·宝鸡高二月考)如图1为某种质粒的简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，箭头所指分别为限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述不正确的是(　　)
A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ的酶切位点有1个
C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理
D．一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
答案　B
解析　目的基因两侧都有且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ的酶切位点有2个，B错误；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。
17．(2024·大同高二月考)如图是通过基因工程获得转基因生物或产品的流程图，下列说法正确的是(　　)
A．若利用图示流程构建工程菌批量生产胰岛素，应先从垂体细胞中获取总RNA
B．利用PCR扩增目的基因时，可在特异性引物3′端添加NcoⅠ和NheⅠ的切割位点
C．制备能分泌人胰岛素的工程菌时，酵母菌比大肠杆菌更适合作为受体细胞
D．图中m为启动子，n为终止子，m是解旋酶识别和结合的位点
答案　C
解析　若利用图示流程构建工程菌批量生产胰岛素，应先从胰岛B细胞中获取总RNA，A错误；利用PCR扩增目的基因时，可在特异性引物5′端添加NcoⅠ和NheⅠ的切割位点，这样可以保证构建的限制酶切割位点位于目的基因的两端，B错误；制备能分泌人胰岛素的工程菌时，酵母菌比大肠杆菌更适合作为受体细胞，这是因为酵母菌细胞中含有内质网和高尔基体，能对合成的胰岛素进行加工，C正确；图中m为启动子，n为终止子，m是RNA聚合酶识别和结合的位点，D错误。
18．(2024·吉安高二期中)草甘膦是一种可以杀灭多种植物(包括农作物)的除草剂，其杀灭植物的原理是能够破坏植物叶绿体中的EPSPS合成酶。通过转基因的方法，让农作物产生更多的EPSPS酶，就能抵抗草甘膦，从而让农作物不被草甘膦杀死。下列有关叙述正确的是(　　)
A．将EPSPS酶基因导入农作物的叶绿体可避免基因污染
B．EPSPS酶基因在杂草和农作物中转录形成的mRNA不相同
C．可利用PCR技术获取和大量扩增EPSPS酶
D．农作物细胞有细胞壁，需先去除细胞壁才可将EPSPS酶基因导入其中
答案　A
解析　将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染，因为叶绿体基因组不会进入花粉，A正确；由于EPSPS酶基因相同，其在杂草和农作物中转录形成的mRNA相同，这也是基因工程得以实现的基础之一，B错误；PCR技术是一项在体外扩增DNA的技术，可利用PCR技术获取和大量扩增EPSPS酶基因，但不能用于扩增EPSPS酶，C错误；将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法等，不需要先去除细胞壁，D错误。
19．在转基因成果造福人类的同时，转基因产品的安全性问题也被广泛关注。实际上，转基因技术及其应用就是伴随着质疑、担忧甚至反对的声音而不断发展的。下列关于转基因技术的叙述，错误的是(　　)
A．转基因产品的研究和利用不会对人类产生任何不利的影响
B．科学家应科学地认识、评估和利用转基因产品
C．开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因产品安全的前提
D．转基因食品安全性是目前对转基因产品安全性的争论的主要集中点之一
答案　A
解析　由于人们对基因活动方式的了解还不够透彻，仍没有十足的把握控制基因调整后的结果，基因的突然改变可能会导致某些有毒物质的产生；转基因食品可能会诱发某些人的过敏反应；转基因产品还可能降低动物乃至人的免疫能力，从而对人类的健康乃至生存产生影响。
20．(2024·苏州高二月考)下列关于试管婴儿、设计试管婴儿技术及安全伦理的叙述，错误的是(　　)
A．试管婴儿、设计试管婴儿技术在生物学上所依据的原理都是无性生殖
B．试管婴儿、设计试管婴儿技术对人类的作用是不同的
C．设计试管婴儿形成的胚胎需经遗传学分析后植入母体孕育
D．不符合遗传要求的胚胎如何处理会引起道德伦理之争
答案　A
解析　试管婴儿是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎，经胚胎移植后产生后代的技术，属于有性生殖，A错误；设计试管婴儿可用于疾病治疗，试管婴儿用于解决不孕不育问题，B正确。
二、非选择题(本题包括3小题，共40分。)
21．(16分)(2024·六安高二月考)人类是乙型肝炎病毒的唯一宿主，接种乙肝疫苗是预防乙肝病毒感染的最有效方法，乙型肝炎疫苗的研制先后经历了血源性疫苗和基因工程疫苗阶段。回答下列问题：
(1)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的______，以其作为模板，在________酶的作用下逆转录合成cDNA，cDNA与载体需在______________________酶的作用下构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。
(2)(2分)如图为“乙肝基因工程疫苗”的生产和使用过程，质粒中LacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X－gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈白色。图中过程①有两种限制酶选择方案，它们分别是______________或______________________________。
(3)获取目的基因的方法除了图中用酶切的方法从细胞中分离以外，还可以通过__________来获得。据图可知，该目的基因的具体功能是__________________________。
(4)为了筛选含目的基因的重组质粒的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中加入______________，培养一段时间挑选出______色的菌落进一步培养获得大量目的菌。
答案　(1)mRNA　逆转录　限制酶和DNA连接
(2)只用BamHⅠ　同时用EcoRⅠ和BamHⅠ
(3)人工合成(或PCR技术扩增)　指导乙肝病毒外壳的合成　(4)青霉素和X－gal　白
解析　(2)含有目的基因的外源DNA和质粒上都有限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ和EcoRⅤ的识别序列和切割位点，用EcoRⅤ切割会破坏目的基因，因此图中过程①有两种限制酶选择方案，分别是只用BamHⅠ或同时用EcoRⅠ和BamHⅠ。(3)由图可知，目的基因最终产生乙肝病毒外壳进行接种，说明该目的基因的具体功能是指导合成乙肝病毒外壳。(4)用限制酶BamHⅠ切割时破坏了LacZ基因，但没有破坏青霉素抗性基因，因此为了筛选含目的基因的重组质粒的大肠杆菌，可在培养大肠杆菌的通用培养基中加入青霉素和X－gal，根据题干信息“质粒中LacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X－gal，从而使菌落呈现蓝色，若无该基因，菌落则呈白色”可知，培养一段时间挑选出白色的菌落进一步培养获得大量目的菌。
22．(16分)(2024·泰安高二检测)大肠杆菌β-半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X－gal)水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ′编码Z酶氨基端的一个片段(称为α-肽)，该质粒结构及限制酶的识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的DNA片段与pUC18质粒进行基因工程操作。回答下列问题：
(1)实验中使用限制酶破坏了pUC18质粒和DNA片段的____________键。限制酶主要来源于原核生物，不能切割原核生物自身DNA分子的原因是_____________________________。
(2)为保证能通过菌落的颜色辨别出含重组质粒的大肠杆菌，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是________________________________。用重组质粒转化改造后的大肠杆菌，将其接种到含氨苄青霉素和X－gal的固体培养基上进行培养，含重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为______，原因是_______________________________________。
(3)有科学家检测了291种没有经过人工转基因操作的栽培番薯，发现这些番薯都含有农杆菌的部分基因，并且在番薯的根、茎、叶等器官中都检测到了相关基因的表达。但是，科学家在番薯的近缘野生种中却没有发现这些基因，产生这种现象的原因可能是___________________________________________________________________________。这一事实对我们认识有关转基因食品的安全性启示：_____________。
答案　(1)磷酸二酯　原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰　
(2)编码α-肽的DNA序列(LacZ′)缺失，其他序列正常　白色　目的基因与质粒连接时LacZ′基因被破坏，不能合成α-肽，Z酶无活性，不能催化底物(X－gal)水解　(3)栽培番薯中“天然”转入的农杆菌基因促进了一些性状的产生　物种间基因转移的现象在自然界中原本就是存在的，转基因技术是人类对作物更为准确的定向改造，及对自然界中生物进化规律的学习和模仿
解析　(1)限制酶能催化双链DNA分子中磷酸二酯键的断裂。限制酶只能识别特定的序列并进行切割，原核生物DNA分子中可能并不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰无法识别，因此限制酶不能切割原核生物自身DNA分子。(2)已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无Z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性，为保证能通过菌落颜色辨别出含有重组质粒的大肠杆菌，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是编码α-肽的DNA序列缺失，其他序列正常。从图中可知，质粒和目的基因只能用限制酶SalⅠ处理，该过程中质粒的LacZ′基因被破坏，不能合成α-肽，不能催化底物(X－gal)水解产生蓝色物质，故菌落呈白色。(3)科学家检测了291种没有经过人工转基因操作的栽培番薯，发现这些番薯都含有农杆菌的部分基因，番薯的近缘野生种中却没有发现这些基因，可能是栽培番薯在生长繁殖的过程中，与有农杆菌的部分基因的生物进行了一些基因重组，转入了农杆菌基因，并对该基因进行了表达，出现了相关的一些性状。
23．(每空1分，共8分)(2024·包头高二月考)利用PGD/PGS技术检测的试管婴儿已在我国诞生。PGD是指胚胎植入前的基因诊断，主要用于检查胚胎是否携带有遗传缺陷的基因；PGS是指在胚胎植入前进行染色体异常检测。通过比对、分析，从而有助于避免遗传物质异常的胚胎产生。回答下列问题：
(1)试管婴儿的培育需经过体外受精、________________、____________以及在母体中发育和产出(分娩)等过程。
(2)设计试管婴儿时，为了筛选的需要，胚胎移植时常采用______(填“1”“2”或“多”)个胚胎进行移植。
(3)利用________(填“PGD”或“PGS”)技术可以筛选不携带地中海贫血基因的试管婴儿。为了避免某些遗传疾病的发生，有时需对胚胎的性别进行鉴定，目前最有效、最准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是从被测囊胚的____________(部位)取出几个细胞，提取DNA；然后利用PCR扩增______基因；最后选择出与特异性探针出现______(填“阳”或“阴”)性反应的男性胚胎。
(4)设计试管婴儿也引起了人们的广泛争议，我国已建立了相应的法律体系和制度条文，以避免该技术________。
答案　(1)早期胚胎培养　胚胎移植　(2)多　(3)PGD　滋养层　被测(SRY)　阳　(4)被滥用
解析　(1)试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎，再经胚胎移植后产生后代的技术，故试管婴儿的培育需经过体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植以及在母体中发育和产出(分娩)等过程。(3)PGD是指胚胎植入前的基因诊断，主要用于检查胚胎是否携带有遗传缺陷的基因，因此利用PGD技术可以筛选不携带地中海贫血基因的试管婴儿。

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