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第二节细胞工程
第二章 细胞工程
二 动物细胞融合技术与单克隆抗体
第二课时
单克隆抗体
单克隆抗体的应用
1．为什么要号召新冠感染痊愈者捐献自己的血浆？这样的血浆对新冠感染患者有什么作用呢？
血浆中有新冠病毒的抗体, 可以用于治疗新冠感染患者。
但一个捐献者的200-300毫升的血浆，如果合格，一般也只能治疗2-3个患者。
众志成城 抗疫情
一、单克隆抗体
抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白
能产生抗体的细胞是浆细胞
单克隆
由一个细胞经过无性繁殖(多次有丝分裂)形成的一个细胞群
单克隆抗体
由一个浆细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一，特异性强的抗体
浆细胞
记忆B细胞
B淋巴细胞
增殖分化
受抗原刺激
1、抗体的传统生产方法:
抗原
反复注射动物
从动物的血清中分离抗体
缺点：
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低
怎样才能获得大量的单一性抗体呢？
B淋巴细胞尽管可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每一个B细胞只分泌一种特异性抗体
做为科学家的你，如何设计生产方案？
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
杂交瘤细胞
细胞
融合
G. Kohler
C. Milstein
英国科学家米尔斯坦和柯勒于1975年设计和实践了这个想法，并获得成功。摘得1984年诺贝尔生理及医学奖。
能产生单一抗体
其寿命仅有几天，无法长期体外培养
动物细胞培养技术
无限增殖
产生抗体
无限增殖
单克隆抗体的制备过程：
2、单克隆抗体制备过程：
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
融合
多种细胞
①B淋巴细胞培养几天后死亡
②由于培养基中缺乏相应的营养物，骨髓瘤细胞死亡
杂交瘤细胞
选择培养基培养
用培养液稀释
多孔细胞培养板
阳性检测和克隆化培养
第一次筛选：
用特定的选择培养基筛选出多种杂交瘤细胞
第二次筛选：
筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞
注射到小鼠体内
体外培养
由单个杂交瘤细胞通过克隆，所产生的化学性质单一、特异性强的抗体
单克隆抗体
培养液
腹水
免疫原理
动物细胞融合技术
（原理：细胞膜流动性）
动物细胞培养技术
（原理：有丝分裂）
二、单克隆抗体的应用
1、特点：特异性强，灵敏度高，产量高
2、应用：
诊断试剂
准确，高效，快速
用于治疗疾病
用于运载药物
“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物
资料1 用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，在妊娠第8天就可以作出诊断，这比原来的诊断方法提前了10d左右，可以避免孕妇在不知道妊娠的情况下因服用药物而对胎儿造成不利影响。该方法检测的准确率在90%以上。
在受精后不久，胎盘滋养层细胞就会分泌人绒毛膜促性腺激素(HCG)，是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在孕妇的尿液中大量存在。而在非妊娠妇女尿液中几乎不含有。
思考·讨论
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）
A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞
随堂演练
3. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ）
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.②④ B.①③⑤ C.①②③④ D.②③
4.“生物导弹”是指（ ）
A.单克隆抗体 　　　　　　　　 B.杂交瘤细胞
C.产生特定抗体的B淋巴细胞　　 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物
随堂演练
5.新型冠状病毒表面的刺突蛋白(S蛋白)与人呼吸道黏膜上皮细胞ACE2受体结合，入侵细胞后可引起肺炎。针对此环节研发单克隆抗体是治疗新冠肺炎的研究热点之一，下列相关叙述错误的是
A.①过程需多次向小鼠体内注射S蛋白，以便于从
脾脏中获得致敏的B淋巴细胞
B.②过程可通过电融合法使两个细胞融合
C.经③过程筛出的细胞既能无限增殖又能产生识别
S蛋白的单克隆抗体
D.S蛋白的单克隆抗体能够阻断病毒入侵正常细胞以减弱对机体的毒害
√
课后实践
查阅资料撰写关于单克隆抗体小论文

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