资源简介 (共33张PPT)Designed by Freepik动物细胞融合技术与单克隆抗体第二课时第2节 动物细胞工程第二章细胞工程-HOH2O2-HO人教版选择性必修3H2O2学习目标123生命观念科学思维运用结构与功能观，理解动物细胞融合技术的原理和过程。结合具体实例，以流程图的形式表示单克隆抗体的制备过程。社会责任说明单克隆抗体的特点及应用。运用植物体细胞杂交技术，可以跨越不同植物之间生殖隔离的屏障，培育出新的作物类型。那么，有没有技术能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞的优势于一身的动物细胞呢？细胞A细胞B原生质体A原生质体B融合原生质体杂合细胞AB愈合组织杂合植株脱分化再分化植物细胞融合植物组织培养01 动物细胞融合动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。2.结果形成的具有原来________________________的______细胞，称为 _________。两个或多个细胞遗传信息单核杂交细胞1.概念细胞融合37℃40mins1970年人工条件下的人-鼠细胞融合实验01 动物细胞融合3.原理细胞膜的流动性4.动物细胞融合的方法1物理方法 | 电融合法、离心法2化学方法 | 聚乙二醇（PEG）法3生物方法 | 灭活病毒诱导法不同DNA的两个细胞灭活的细胞融合有丝分裂两个完整的杂交细胞动物细胞没有细胞壁，可以直接诱导融合。（动物细胞融合所特有的融合方式）01 动物细胞融合生物方法 | 灭活病毒诱导法动物细胞融合所特有的融合方式灭活灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。原理病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。01 动物细胞融合动物细胞融合所特有的融合方式病毒黏附使细胞凝聚膜打开膜融合细胞质融合细胞核融合生物方法 | 灭活病毒诱导法01 动物细胞融合19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？肺结核病人病理切片病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。01 动物细胞融合5.构建动物细胞融合模型1融合过程: 细胞膜融合 → 细胞质融合 → ________融合。2重组细胞的特点: 具有_________________,杂种细胞表现出两个____________的特点。3融合后的杂交细胞经过________后仍能形成两个完整的杂交细胞。细胞核亲本细胞两种细胞的遗传信息有丝分裂动物细胞A动物细胞B膜融合质融合杂交细胞（单核）动物细胞______培养物理、化学、生物法诱导01 动物细胞融合6.意义突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。7.应用成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。02 单克隆抗体前段时间，全国在抗击COVID-19疫情的时候，我们从新闻里看到很多康复者在捐献血浆，用来治疗其他病人。那么，血浆里到底是什么东西能够治疗新型冠状病毒感染？02 单克隆抗体动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较植物体细胞杂交 动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞膜具有一定的流动性、植物细胞的全能性细胞膜具有一定的流动性用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法课堂归纳02 单克隆抗体动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较课堂归纳植物体细胞杂交 动物细胞融合细胞融合成功的标志主要用途意义再生出细胞壁获得完整的杂种植株打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种细胞核的融合主要用于制造单克隆抗体突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能02 单克隆抗体抗体定义机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。抗体分布① 血清（主要）② 组织液及外分泌液（如乳汁中，为新生儿提供抗体）机体通过什么免疫过程分泌抗体？体液免疫传统抗体的生产方法抗原动物体内多种浆细胞多种抗体（血清）产量低、纯度低、特异性差反复注射每一个浆细胞只能产生一种特异性抗体体内产生的特异性抗体多达百万种02 单克隆抗体如何获得大量的单一抗体呢？抗体的产生效应B淋巴细胞（浆细胞）（每一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体）每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体单一B淋巴细胞细胞群大量纯度高特异性强的抗体选择克隆产生如果利用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强、灵敏度高的抗体——单克隆抗体。【注意】在体外培养条件下一个B淋巴细胞不可能无限增殖有能无限增殖的细胞吗？02 单克隆抗体如果把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，所得到的融合细胞就能大量增殖，产生足够数量的特定抗体。【设想】米尔斯坦1975年成功获得单克隆抗体1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖英国科学家德国科学家科勒+=抗体B细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞02 单克隆抗体注射特定蛋白免疫小鼠培养小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞多种细胞融合选择培养基多种杂交瘤细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞克隆化培养专一抗体检测注射到小鼠腹腔内增殖体外培养单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备筛选1筛选2动物细胞融合动物细胞培养02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.1单克隆抗体的制备过程注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞多种B细胞骨髓瘤细胞将骨髓瘤细胞和B细胞融合多种杂交细胞筛选杂交瘤细胞（既可以大量增殖又能产生抗体）诱导融合为什么要进行筛选？通过什么形式筛选？用特定的选择培养基进行筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.1单克隆抗体的制备过程注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞多种B细胞骨髓瘤细胞将骨髓瘤细胞和B细胞融合多种杂交细胞筛选杂交瘤细胞（既可以大量增殖又能产生抗体）诱导融合筛选出抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞这里的筛选和之前相同吗？02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用第二次筛选96孔板培养和筛选每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞检测原理抗原和抗体能够特异性结合02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用筛选杂交瘤细胞第一次筛选筛选出抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞（需多次）诱导融合后得到多种杂交细胞，还有未融合的细胞等。用特定的选择培养基筛选只有融合的杂交瘤细胞才能生长。两次筛选的比较小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，杂交瘤细胞中有产生其他抗体的细胞用96孔板进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞第二次筛选筛选原因筛选方法筛选结果02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.1单克隆抗体的制备过程注射特定的抗原培养骨髓瘤细胞多种B细胞骨髓瘤细胞将骨髓瘤细胞和B细胞融合多种杂交细胞杂交瘤细胞诱导融合抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内体外培养单克隆抗体02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.1单克隆抗体的制备过程项目 腹腔培养 体外培养优点缺点易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低可大规模培养，大量生产规模小，产量少需要人为控制培养条件，成本相对较高培养杂交瘤细胞的方法比较02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.2单克隆抗体的优点单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合可以大量制备02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用（1）作为诊断试剂—最广泛的应用抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体，比原来诊断方法提前了10d左右，准确率在90﹪以上艾滋病检测试剂02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用（1）作为诊断试剂—最广泛的应用乙肝抗体检测试剂盒新冠病毒抗体检测试剂盒02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用（2）用于运载药物和治疗疾病抗体药物接头抗体-药物偶联物（ADC）①ADC被细胞吞噬⑤细胞凋亡实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤②02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用（2）用于运载药物和治疗疾病ADC示意图多功能脂质体药物进入靶细胞脂溶性药物水溶性药物抗体靶细胞脂质体02 单克隆抗体2.1 单克隆抗体的制备过程2.2 单克隆抗体的优点2.3 单克隆抗体的应用2.3单克隆抗体的应用临床上主要用来治疗淋巴瘤的一种单克隆抗体药物贝伐珠单抗可以抑制肿瘤血管生成，应用于恶性肿瘤的治疗本节小结课堂检测【1】下图为动物细胞融合技术过程图，相关叙述错误的是 ( )。ABCD图中C为灭活的病毒，此外还可用PEG融合法诱导动物细胞融合图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的选择透过性图中②过程表示细胞核融合形成杂种细胞动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体B【解析】图中①过程发生了细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，B错误。课堂检测【2】利用杂交瘤技术制备针对特定抗原的单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是 ( )。ABCDC用于融合的B淋巴细胞应从未受抗原刺激的动物中提取单克隆抗体制备与植物体细胞杂交技术均依据细胞具有全能性的原理筛选2过程需要用到抗体和抗原特异性结合的特性选出的杂交瘤细胞只能通过体外培养获得大量单克隆抗体版权声明版权声明课件版权归属“一起课件”，仅可自用，不可传播，不得用作商业性使用，不得上传至百度文库、等盈利网站。任何侵权行为将被视为版权侵害，侵权者将承担一定的法律责任。 展开更多...... 收起↑ 资源列表 2.2动物细胞工程(第二课时）（课件）.pptx 视频素材1.mp4
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