资源简介 模块检测卷(一)(时间：75分钟 满分：100分)一、选择题(共16小题，每小题3分，共48分，每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。)1.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是( )A.倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染B.若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌C.高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121 ℃，15～30 minD.在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30 min来进行消毒答案 D解析 实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，B正确；高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121 ℃的条件下，维持15～30 min，C正确；接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30 min，进行消毒，D错误。2.某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解为N－乙酰氨基葡萄糖后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述错误的是( )A.土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养B.目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法C.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株D.获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物答案 B解析 据题意可知，要从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，那么应该用以几丁质为唯一碳源的选择培养基培养，A正确；目的菌的纯化和计数可以使用稀释涂布平板法，平板划线法只能用于目的菌的纯化，不能计数，B错误；水解圈直径/菌落直径可以反应水解能力的大小，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解几丁质能力越强，反之越弱，因此可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，C正确；几丁质广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的细胞壁中，因此获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物，D正确。3.镇江香醋是一种通过固态发酵工艺制作的小曲醋，酿造的工业流程示意如下图所示。下列相关叙述正确的是( )A.冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境B.制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基C.碳源不足且氧气充足时，醋酸菌可利用酒精进行发酵D.醋酸发酵中经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况答案 D解析 根据图示，将糯米蒸熟后冷却是为了降低温度，防止杀死酒曲中的酵母菌，A错误；根据图示，制醅过程中需添加麸皮和糠以形成固态发酵醅基，B错误；当氧气充足时，醋酸菌将酒精氧化为醋酸，C错误；醋酸菌为好氧菌，经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况，D正确。4.发酵制氢技术是我国为早日实现“碳中和”开发的新能源技术之一。传统农业中，水稻、小麦的秸秆常被焚烧，既产生浓烟污染环境，又增加了CO2排放，研究团队将秸秆制成发酵液培养某种细菌，进行发酵制氢。下列说法错误的是( )A.鉴定该细菌是否为纤维素分解菌，可在培养基中加入酚红试剂B.水稻、小麦的秸秆中富含纤维素，可为产氢细菌提供碳源C.底物浓度、温度、pH等是影响发酵产氢量的重要因素D.与传统农业相比，发酵制氢技术既能减少CO2的排放量又能获得新能源答案 A解析 刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌降解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此鉴定该细菌是否为纤维素分解菌，可在培养基中加入刚果红试剂，A错误；纤维素的组成元素为C、H、O，可以为产氢细菌提供碳源，B正确；温度、pH会影响酶活性，底物作为发酵的原料，因此底物浓度、温度、pH等是影响发酵产氢量的重要因素，C正确；与传统农业相比，发酵制氢技术通过将秸秆中的含碳有机物转换成有机酸等工业原料，减少了CO2的排放量，又获得了氢这种新能源，D正确。5.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种分解尿素的细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是( )A.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌B.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整C.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落D.该实验结果出现了单菌落，能达到菌种纯化的目的答案 B解析 倒平板后无需晃动，B错误。6.研究人员利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势，通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，其实验流程如下图，a～e表示不同操作。下列相关叙述正确的是( )A.通过a操作获得完整且有活性的原生质体，主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性B.b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，以获得未分化状态的杂种细胞C.d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值小于1D.甲、乙植株是两个不同物种，因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育答案 C解析 植物细胞的细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶专一性获得完整且有活性的原生质体，A错误；b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，获得的是已分化的杂种细胞，B错误；通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，d为再分化，所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值先小于1(促进芽的分化)后大于1(促进根的分化)，C正确；甲、乙植株是两个不同物种，目的植株含有甲、乙的全部染色体，可正常进行减数分裂产生配子产生后代，D错误。7.甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白(血凝素蛋白)密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是( )A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp，BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点答案 C解析 将待测DNA用限制酶切割后进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，A正确；图甲获得重组质粒的过程，需要经过逆转录形成一条DNA链，再形成双链cDNA分子以及获取R蛋白基因及与质粒的重组过程，所以需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶等，B正确；通过PCR技术从一个cDNA分子特异性扩增出完整的R蛋白基因的过程中，第一轮循环将产生2个两条链不等长的DNA片段，第二轮循环将产生4个两条链不等长的DNA片段，第三轮循环将产生8个DNA片段，其中有2个为两条核苷酸链等长的R蛋白基因，另外6个为两条链不等长的DNA片段，C错误；据图乙可知，重组质粒被HindⅢ切割后产生了1 400 bp、400 bp和200 bp三种长度的DNA片段，据此推测该质粒长度最短为1 400＋400＋200＝2 000(bp)，重组质粒被HindⅢ和BamHⅠ同时切割后，产生长度为560 bp、420 bp和200 bp的三种DNA片段，说明在HindⅢ酶切后，BamHⅠ又将长度为1 400 bp的DNA片段切割成1个长度为560 bp和2个长度为420 bp的DNA片段，将长度为400 bp的DNA片段切割成2个长度为200 bp的DNA片段，故BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点，D正确。●将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是( )A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的B.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体C.①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性答案 D解析 B淋巴细胞是从小鼠的脾中提取的，骨髓瘤细胞是体内细胞的恶性克隆性增生形成的，A错误；经①诱导融合过程形成的细胞不都是能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，B错误；①促进动物细胞融合，可利用灭活的病毒，也可以利用聚乙二醇作诱导剂， C错误；过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。●如图是科学家培养转基因试管牛的过程示意图，下列相关叙述错误的是( )A.1部位的细胞具有发育的全能性，将来发育成胎儿的各种组织B.过程①可以用外源促性腺激素处理，使其排出更多的卵子C.进行过程③时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理D.为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定答案 A解析 1部位的细胞表示透明带，不具有发育的全能性，3表示内细胞团细胞，将来发育成胎儿的各种组织，A错误；过程①可以用外源促性腺激素处理，使雌性个体超数排卵，B正确；进行过程③胚胎移植时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理，提高胚胎移植的成功率，C正确；为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定，即取2部位(滋养层)的细胞做DNA检测来鉴定性别，D正确。8.下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程，相关叙述错误的是( )①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定A.本实验使用了体积分数为95%的酒精B.步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料C.步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液D.步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5 min后即可呈现蓝色答案 D解析 DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精，本实验使用了体积分数为95%的酒精，目的是析出提取含杂质较少的DNA，A正确；肝细胞含有细胞核和众多的细胞器，步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料，B正确；步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液，上清液中含有DNA，C正确；步骤⑥中DNA鉴定时向试管中加入二苯胺试剂后，应将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后可观察到蓝色，D错误。9.当目的基因和质粒都用HindⅢ处理、连接后，目的基因可能正向插入载体，也可能反向插入载体，为判断目的基因的插入方向，可使用限制酶处理，并进行电泳检测(如图)。下列选项中能判断目的基因插入方向的限制酶是( )注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长20 000 bp。A.HindⅢ B.EcoRⅠC.BamHⅠ D.EcoRⅠ和HindⅢ答案 B解析 识图分析可知，图中质粒用限制酶HindⅢ处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：5 000＋4 000＝9 000 bp和1 000＋2 000＋5 000＋3 000＝11 000 bp，因此用该限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，A错误；识图分析可知，图中质粒用限制酶EcoRⅠ处理，并进行电泳后，正向插入的质粒会出现的DNA片段为：1 000＋2 000＋5 000＝8 000 bp和5 000＋4 000＋3 000＝1 2000 bp，而反向插入的质粒切割后会出现的DNA片段为：1 000＋2 000＋4 000＝7 000 bp和5 000＋3 000＋5 000＋3 000＝13 000 bp，因此正向插入和反向插入限制酶EcoRⅠ处理电泳后得到的DNA片段大小不同，可以判断目的基因的插入方向，B正确；识图分析可知，图中质粒用限制酶BamHⅠ处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：5 000＋1 000＝6 000 bp和4 000＋2 000＋5 000＋3 000＝14 000 bp，因此用该限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，C错误；识图分析可知，图中质粒用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ共同处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：2 000＋1 000＝3 000 bp、5 000 bp、4 000 bp、5 000＋3 000＝8 000 bp，因此用EcoRⅠ和HindⅢ限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，D错误。10.“标记”是生物技术与工程常用的技术手段，下列相关叙述错误的是( )A.诱导植物原生质体融合时，通过红绿荧光蛋白标记检测细胞融合情况B.分析工程酵母发酵产物的合成及分泌时，通过同位素标记监测产物转移路径C.验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达D.对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量答案 C解析 诱导植物原生质体融合时，利用红绿荧光标记蛋白，通过红绿荧光蛋白标记混合情况检测细胞融合情况，A正确；利用同位素标记法可以监测工程酵母发酵产物的合成及分泌时产物转移路径，B正确；验证转基因抗虫棉是否成功时，应该通过接种实验验证，即为转基因抗虫棉接种相应抗的害虫，检测抗虫棉是否表现出抗虫特性，C错误；对目的基因进行扩增时，可通过荧光标记技术，利用荧光基团和淬灭基团制成探针，实时定量测定产物的量，D正确。11.酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。科研人员通过两种途径如下图改良酵母菌种，实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是( )A.途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌，再利用PEG诱导融合B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体C.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标D.酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同，根本原因是酶的种类不同答案 B解析 途径Ⅰ需用几丁质酶处理酵母菌去除其细胞壁，再利用PEG诱导融合，A错误；途径Ⅱ是将糖化酵母的淀粉酶基因提取出来，通过构建基因表达载体导入酿酒酵母细胞中，从而获得目的酵母菌，B正确；通过两种途径改良酵母菌种，实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的，所以淀粉转化为酒精的效率作为最终鉴定目的菌的指标，C错误；酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同，根本原因是基因的选择性表达，D错误。12.枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸，在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值，被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。将枯草杆菌蛋白酶分子的Asp(99)和Glu(156)改成Lys，可使其在pH＝6时的活力提高10倍。下列说法正确的是( )A.完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现B.该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有独特的优势C.经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状不可遗传D.蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息答案 A解析 氨基酸的排列顺序是由基因决定的，因此完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现，A正确；该成果培育了新品种，而不是新物种，B错误；经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶的基因发生了改变，因此经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状可以遗传，C错误；蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，虽然合成了改造的基因，但它最终要达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求，D错误。13.生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑与挑战。下列有关叙述错误的是( )A.科学家将玉米的α－淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，阻断淀粉储藏使花粉失去活性而防止转基因花粉的传播，达到防止基因污染的目的B.中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验C.生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，具有致病能力强、攻击范围广的特点D.利用设计试管婴儿技术，解决不孕夫妇的生育问题答案 D解析 在转基因研究工作中，科学家会采取很多方法防止基因污染。例如，我国科学家将来自玉米的α－淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，由于α－淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播，A正确；中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人，B正确；生物武器有多种类型，包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等；生物武器的致病能力强、攻击范围广，因而会给人类的生存安全构成了严重威胁，C正确；人类利用试管婴儿技术解决不孕夫妇的生育问题，D错误。14.下图为从土壤中分离、扩大培养能分解石油的细菌的示意图，有关分析错误的是( )A.为获得分解石油的细菌，配制培养基时，应以石油为唯一的碳源B.②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中，若稀释10倍，则试管内盛有9 mL无菌水C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行③过程，在酒精灯火焰附近进行D.④过程纯化能分解石油的细菌，该方法能用于计数答案 D解析 为获得分解石油的细菌，故配制培养基时应以石油为唯一的碳源，这样分解石油的细菌能在该培养基上生长得很好，其他微生物的生长则受到抑制，A正确；②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中，若稀释10倍，则试管内盛有10－1＝9(mL)无菌水，B正确；25 ℃左右时培养基会凝固，应待培养基冷却至50℃左右时进行③过程，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；根据图中菌落的分布情况可知，④过程通过平板划线法纯化能分解石油的细菌，该方法不能用于菌种的计数，D错误。15.如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞(ES细胞)，对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述错误的是( )A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术答案 D解析 卵母细胞进行减数分裂时停止在减数第二次分裂中期，因此接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，A正确；显微镜下可以通过显微操作去核，B正确；图中形成的器官来源于病人的细胞，用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术，不用进行胚胎移植技术，D错误。●红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列有关叙述错误的是( )A.构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因的启动子的下游B.一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达C.用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中可合成并提取EPOD.用PCR扩增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列答案 C解析 启动子是一段特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，故构建表达载体时需将EPO基因(目的基因)插入乳腺蛋白基因的启动子的下游，A正确；某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO，所以一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达，B正确；用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵(将来发育成雌性个体)中，待其发育到一定阶段，方可合成EPO，C错误；用PCR扩增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，D正确。●为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt)的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。下列相关说法错误的是( )A.p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列B.超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织答案 C解析 根据题干推测，p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列，A正确；超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因，在含有潮霉素的培养基上，超表达载体能够存活，从而起到筛选作用，B正确；由于红豆杉细胞中本身存在Bapt基因，无论超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测过程⑤是否成功，C错误；工厂化生产紫杉醇属于细胞产物的获得，只需要培养到愈伤组织阶段即可，D正确。16.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。有一对夫妇均为镰状细胞贫血致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇和孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。下列相关叙述错误的有( )A.与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”B.根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2C.该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，若Ⅱ－3与另一正常女子婚配，则生出患病孩子的概率为1/202D.若将正常的血红蛋白基因成功导入患者的骨髓造血干细胞中，可用于治疗该病答案 B解析 据图可知，正常基因模板链的核酸序列5′－ACGAGTT－3′，按照碱基互补配对的原则，则与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”，A正确；图中夫妇的基因型均为Bb，根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2和Ⅱ－1，他们的基因型依次为bb和BB，B错误；该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，说明该地区人群中b的基因频率为1/100，则B的基因频率为99/100，则正常人群中携带者的概率为2×1/100×99/100÷(1－1/10 000)＝2/101，结合图示可知，Ⅱ－3 的基因型为Bb，若其与正常女子Bb或BB婚配，则生出患病孩子的概率为2/101×1/4＝1/202，C正确；镰状细胞贫血症是由基因突变导致的，属于遗传病，将正常血红蛋白的基因导入患者的骨髓造血干细胞中则可产生正常的红细胞，进而可达到治疗目的，D正确。二、非选择题(共4小题，共52分)17.(14分)食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。(1)发酵原料中的淀粉为微生物提供________(营养物质)。参与发酵的多种微生物种间关系属于________。(2)研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。下图为醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。①用________________法将接菌种种到添加了碳源、________、无机盐、水以及________的培养基中，培养一段时间，获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。②由图1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现________________________的趋势，且在不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于________________，上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行________发酵。在第7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是______________________________________________________________________________________________________________________________。③图2显示，醋酸菌在________天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：_______________________________________________________________。答案 (1)碳源 竞争 (2)①稀释涂布平板法 氮源 琼脂 ②先快速升高后缓慢降低 溶解氧的存在 酒精 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖(营养物质减少及有害代谢产物的积累) ③1～3(1～5) C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量解析 (1)淀粉属于多糖，为微生物提供碳源。参与发酵的多种微生物为了生长繁殖，他们之间争夺营养物质和生存空间，其种间关系属于竞争关系。(2)①为了了解醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况，利用稀释涂布平板法得到单菌落后计数。该培养基为固体培养基，该培养基中应该含有碳源、氮源、无机盐、水以及琼脂等。②由图1可知，酵母菌在发酵过程中先快速升高后缓慢降低。发酵初期，上层溶解氧的浓度高，因而上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，由于溶解氧的消耗殆尽，酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精。由于酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖，在第7天以后酵母菌的数量呈降低趋势。③由图2可知，醋酸菌在1～3天直线的斜率最大，其繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：C2H5OH ＋O2CH3COOH ＋H2O＋能量。18.(12分)下图为通过植物体细胞杂交培育“番茄－马铃薯”植株的过程，请回答：(1)取马铃薯和番茄充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其________，每次处理后用________冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片切成薄片备用。(2)图中过程①用____________________处理可获得具有活力的原生质体。过程②一般可用________________(化学物质)作为诱导剂来诱导细胞融合。(3)过程④为________，该过程中需要的条件有________(填字母)。A.无菌环境 B.一定浓度的植物激素 C.适宜的温度 D.充足的光照 E.充足的养料(4)人们培育“番茄－马铃薯”的目的是想获得地上结番茄，地下结马铃薯的植株，从理论上这种设想是可以实现的，原因是____________________________。但最后却未能如愿，其原因是基因的表达相互调控、相互影响。尽管如此，从整个过程来看，植物体细胞杂交的研究在____________________方面，取得了巨大突破。(5)番茄有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时，参照品种B的最佳激素配比(见下表)进行预实验。品种B组织培养阶段 细胞分裂素浓度/(μmol·L－1) 生长素浓度/(μmol·L－1)Ⅰ.诱导形成愈伤组织 m1 n1Ⅱ.诱导形成幼芽 m2 n2Ⅲ.诱导生根 m3 n3在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是______阶段。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1>2.0)，以0.5(μmol·L－1)为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素最高浓度应设为______(μmol·L－1)。答案 (1)消毒 无菌水(2)纤维素酶和果胶酶 聚乙二醇(PEG)(3)脱分化 ABCE(4)该植株同时具有番茄和马铃薯的遗传信息 克服远缘杂交不亲和的障碍(5)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ m1＋1.0解析 (1)为防止微生物污染，应取马铃薯和番茄充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，并去除残留于叶片上的药剂。(2)据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，由于植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原则，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，②为原生质体融合的过程，常利用化学诱导剂聚乙二醇(PEG)诱导融合。(3)④表示脱分化过程。A植物组织培养需要在无菌无毒的环境中进行，A正确；B植物组织培养需要一定的植物激素条件，如细胞分裂素和生长素，B正确；C植物组织培养需要适宜的温度，以保证细胞代谢的正常进行，C正确；D植物组织培养在脱分化过程不需要光照，D错误；E植物组织培养过程需要充足的养料，以保证代谢的正常进行，E正确。故选ABCE。(4)人们培育“番茄－马铃薯”的目的是想获得地上结番茄，地下结马铃薯的植株，由于该植株同时具有番茄和马铃薯的遗传信息，因此理论上这种设想是可以实现的。植物体细胞杂交的研究克服了不同生物在远缘杂交不亲和的障碍方面，取得了巨大突破。(5)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中都发生了基因的选择性表达。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1＞2.0)，以0.5(μmol·L－1)为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为m1－1.0(μmol·L－1)、m1－0.5(μmol·L－1)、m1(μmol·L－1)、m1＋0.5(μmol·L－1)、m1＋1.0(μmol·L－1)，可见细胞分裂素的最高浓度应设为m1＋1.0(μmol·L－1)。19.(12分)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。通常，我们采用动物细胞融合技术来制备单克隆抗体，利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段。(1)若单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则特定抗原通常是____________________。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为______________________________________________________________________。(2)图中诱导细胞融合时需要采用________________、____________________ 或电融合法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是________________________________。(3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行____________和________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(4)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示：丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响丁酸钠的浓度/(mmol·L－1) 时间/h48 96 1440 1∶320 1∶640 1∶1 2000.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 5000.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 5000.75 1∶320 1∶320 1∶640注：表中比值表示抗体效价，值越高表明越有利于抗体的产生。①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是________________，该实验的自变量为_______________________。②根据表中数据，分析丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系：______________________________________________________________________。答案 (1)肠癌细胞(膜)表面的蛋白质 单克隆抗体可特异性的结合癌细胞，不损伤正常细胞(2)灭活病毒诱导法 聚乙二醇(PEG)融合法 既能迅速大量增殖，又能产生抗体(3)克隆化培养 抗体检测(4)①维持培养液的pH 丁酸钠的浓度和培养时间 ②在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生解析 (1)单克隆抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”，单克隆抗体可以识别癌细胞表面特定的抗原(癌细胞表面的蛋白质)，引导药物定向杀伤癌细胞，将癌细胞消灭掉而不影响正常细胞，所以疗效高，毒副作用小。(2)诱导动物细胞融合常用的方法有：电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、灭活的病毒诱导法等。若该过程是制备单克隆抗体，在诱导细胞融合中，所形成的融合细胞有两两融合细胞3种：AA型、BB型、AB型，用来培养的融合细胞应该是AB型的杂交瘤细胞，从中选择出它的方法是用选择培养基进行筛选，同种自身融合的细胞都不能存活，存活生长的是异种细胞融合的杂交细胞，杂交瘤细胞的特点是：既能无限繁殖，又能产生特异性抗体。(3)通过特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞后，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(4) ①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5% CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。由表格信息可知，该实验的自变量为丁酸钠的浓度和培养时间。②依据表中数据可知，丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系为：在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生。注意，培养时间不同，“一定浓度范围”不同。20.(14分)与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖含量高，汁多质脆，富含多种维生素，更富有生产应用价值。科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题：(1)在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示。图1中强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被____________酶识别并结合，驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用图1所示的______________酶组合，将含P基因的DNA片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。(2)将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中应加入________以筛选出成功导入T－DNA的玉米愈伤组织。筛选出的愈伤组织经过________过程可形成丛芽，最终获得多个玉米株系。现对a1、a2、a3、a4四个甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定，结果如图2。其中a4株系P蛋白表达量较低的原因可能是______________________________________________________________________________________________________________________________。(3)研究人员发现了一种RNA剪接抑制剂，该抑制剂会使玉米相关基因的表达受阻。针对该抑制剂的具体作用，科研人员提出以下假说：假说1：该抑制剂导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。假说2：该抑制剂导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。为了验证上述假说，需分别从实验组和对照组胚细胞中提取RNA，经过________过程形成cDNA，然后对cDNA进行PCR后，再分析电泳后的条带。若要证明假说2成立，需要选择图3中所示的引物________(填数字)进行PCR。答案 (1)RNA聚合(酶) BamHⅠ和SacⅠ(2)潮霉素 再分化 a4株系玉米中可能没有导入目的基因(或“目的基因未表达”) (3)逆转录 3和4解析 (1)RNA聚合酶与DNA的启动子结合，驱动基因的转录。首先P基因和Ti质粒需要相同的限制酶切位点，其次，BamHⅠ后面有强启动子不能丢弃，EcoRⅠ和NotⅠ限制酶会破坏目的基因，因此选择BamHⅠ和SacⅠ限制酶的组合；(2)农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，重组质粒中有潮霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，但植物细胞能表现出对潮霉素的抗性，因此，培养基中需加入潮霉素进行筛选，并以此为特性进行筛选，将筛选出的愈伤组织经过再分化(细胞分化)形成丛芽，从而获得多个转基因玉米株系；a4株与野生型的X蛋白表达量基本相同，可能原因是a4株系玉米中导入目的基因或目的基因未表达；(3)为验证上述假说，可分别从实验组和对照组胚细胞中提取总RNA，逆转录形成cDNA，然后对cDNA进行PCR后，再分析电泳后的条带；若要证明假说2成立，即RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切下去，即选择图示引物3和4进行PCR可得到电泳条带。●稻米的直链淀粉是由蜡质基因(waxy)控制合成的淀粉合成酶(GBSS)催化形成，直链淀粉含量高的米饭质地和适口性不高。将waxy反义基因片段导入水稻细胞抑制内源基因表达，可降低直链淀粉含量。为防止同时导入的标记基因影响，科研人员构建了2种载体，通过共转化以期获得含有目的基因、不含标记基因和报告基因(gus)的转基因水稻，相关流程如下图。请回答下列问题。(1)waxy反义基因片段导入水稻细胞后可抑制内源基因表达，原因是________________________________。为构建反义基因与gus的融合基因，在利用PCR技术获取反义基因与gus过程中，需要在设计的两对引物________端分别添加限制酶____________、____________的识别序列。(2)过程③中将农杆菌1、2按照1∶9比例充分混匀感染水稻愈伤组织，3天后转入含有__________的选择培养基筛选抗性愈伤组织。(3)提取T0代植株的基因组DNA，根据反义基因和gus基因部分序列设计引物进行PCR1检测，同时根据反义基因和终止子的部分序列设计引物进行PCR2检测，结果如下图，其中M为标准参照，1为阳性对照，2为阴性对照，3～8号为抗性植株DNA的PCR产物。其中2是根据____________的DNA为模板进行PCR的结果，据图可以确定________号植株为共转化失败的水稻。(4)过程⑤将共转化成功的T0代植株进行自交，收获种子，取半粒种子进行GUS检测(gus的表达产物能使白色X－Gluc水解生成蓝色产物)。选择检测结果为________色的种子种植得到T1代植株。最终还需检测____________________，才可判断是否改良成功。答案 (1)反义基因转录形成的mRNA可与内源基因mRNA结合，抑制翻译 5′ SalⅠ和BamHⅢ BamHⅢ和HindⅢ(2)潮霉素 (3)非转基因水稻 5、6 (4)白 稻米中直链淀粉的含量解析 (1)由于反义基因转录形成的mRNA可与内源基因mRNA碱基互补配对，从而使核糖体不能与mRNA结合，因此抑制翻译过程，所以waxy反义基因片段导入水稻细胞后可抑制内源基因表达；为构建反义基因与gus的融合基因，从图中看出，在反义基因两端存在SalⅠ和BamHⅢ限制酶切位点，而在gus基因两端存在BamHⅢ和HindⅢ现在酶切位点，DNA聚合酶延伸时，将脱氧核苷酸加到引物的3′端，为了不破坏目的基因，该限制酶识别序列应添加在引物的5′端，所以利用PCR技术获取反义基因与gus过程中，需要在设计的两对引物5′端分别添加SalⅠ和BamHⅢ、BamHⅢ和HindⅢ的酶切位点。(2)从图中看出T－DNA的序列中含有潮霉素抗性基因，而四环素抗性基因没有在T－DNA序列，所以需要将愈伤组织转移至含有潮霉素的选择培养基中筛选抗性愈伤组织；愈伤组织转入再生培养基经再分化形成胚状体。(3)1为阳性对照，即含有目的基因的片段，2为阴性对照，即是根据非转基因水稻的DNA为模板扩增的结构。在左图是根据反义基因和gus基因部分序列设计引物进行PCR1检测，右图是根据反义基因和终止子的部分序列设计引物进行 PCR2检测，5号和6号在左图中存在序列，而在右图中没有终止子，所以是共转化失败的水稻。(4)实验的目的是通过共转化以期获得含有目的基因、不含标记基因和报告基因(gus)的转基因水稻，而gus的表达产物能使白色X－Gluc水解生成蓝色产物，所以进行GUS检测时，如果是白色，则不含GUS，选择检测结构为白色的种子种植，由于直链淀粉含量高的米饭质地和适口性不高，所以最终还要检测稻米中直链淀粉的含量。模块检测卷(一)(时间:75分钟 满分:100分) 一、选择题(本题共16小题,每小题3分,共48分。每小题给出的四个选项中,只有一个选项是最符合题目要求的)1.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是 ( )倒平板后,对空白培养基进行培养,可检测培养基是否被污染若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基,则不宜用此培养皿培养大肠杆菌高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121 ℃,15~30 min在接种箱或超净工作台的使用过程中,可用紫外线照射30 min来进行消毒2.某些微生物能合成几丁质酶,使几丁质降解为N-乙酰氨基葡萄糖后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株,通过微生物培养获得几丁质酶,用于生物防治。下列相关叙述错误的是 ( )土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物3.镇江香醋是一种通过固态发酵工艺制作的小曲醋,酿造的工业流程示意如下图所示。下列相关叙述正确的是 ( )冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基碳源不足且氧气充足时,醋酸菌可利用酒精进行发酵醋酸发酵中经常翻动发酵物,利于控制发酵温度和通气状况4.发酵制氢技术是我国为早日实现“碳中和”开发的新能源技术之一。传统农业中,水稻、小麦的秸秆常被焚烧,既产生浓烟污染环境,又增加了CO2排放,研究团队将秸秆制成发酵液培养某种细菌,进行发酵制氢。下列说法错误的是 ( )鉴定该细菌是否为纤维素分解菌,可在培养基中加入酚红试剂水稻、小麦的秸秆中富含纤维素,可为产氢细菌提供碳源底物浓度、温度、pH等是影响发酵产氢量的重要因素与传统农业相比,发酵制氢技术既能减少CO2的排放量又能获得新能源5.为纯化菌种,在鉴别培养基上划线接种分解尿素的细菌,培养结果如图所示。下列叙述错误的是 ( )为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌倒平板后需间歇晃动,以保证表面平整图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多,应从Ⅲ区挑取单菌落该实验结果出现了单菌落,能达到菌种纯化的目的6.研究人员利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势,通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株,其实验流程如下图,a~e表示不同操作。下列相关叙述正确的是 ( )通过a操作获得完整且有活性的原生质体,主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合,以获得未分化状态的杂种细胞d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐,且生长素与细胞分裂素用量比值小于1甲、乙植株是两个不同物种,因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育7.甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白(血凝素蛋白)密切相关,现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程,图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是 ( )电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时,在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp,BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点8.下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程,相关叙述错误的是 ( )①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定本实验使用了体积分数为95%的酒精步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤,并获取上清液步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5 min后即可呈现蓝色9.当目的基因和质粒都用HindⅢ处理、连接后,目的基因可能正向插入载体,也可能反向插入载体,为判断目的基因的插入方向,可使用限制酶处理,并进行电泳检测(如图)。下列选项中能判断目的基因插入方向的限制酶是 ( )注:EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同,数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp),质粒全长20 000 bp。HindⅢ EcoRⅠBamHⅠ EcoRⅠ和HindⅢ10.“标记”是生物技术与工程常用的技术手段,下列相关叙述错误的是 ( )诱导植物原生质体融合时,通过红绿荧光蛋白标记检测细胞融合情况分析工程酵母发酵产物的合成及分泌时,通过同位素标记监测产物转移路径验证转基因抗虫棉是否成功时,通过RNA分子标记检测目的基因是否表达对目的基因进行扩增时,通过荧光标记技术实时定量测定产物的量11.酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱。科研人员通过两种途径如下图改良酵母菌种,实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是 ( )途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同,根本原因是酶的种类不同12.枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸,在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值,被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。将枯草杆菌蛋白酶分子的Asp(99)和Glu(156)改成Lys,可使其在pH=6时的活力提高10倍。下列说法正确的是 ( )完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有独特的优势经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状不可遗传蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息13.生物技术的进步在给人类带来福祉的同时,会引起人们对它安全性的关注,也会与伦理道德发生碰撞,带来新的伦理困惑与挑战。下列有关叙述错误的是 ( )科学家将玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中,阻断淀粉储藏使花粉失去活性而防止转基因花粉的传播,达到防止基因污染的目的中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等,具有致病能力强、攻击范围广的特点利用设计试管婴儿技术,解决不孕夫妇的生育问题14.下图为从土壤中分离、扩大培养能分解石油的细菌的示意图,有关分析错误的是 ( )为获得分解石油的细菌,配制培养基时,应以石油为唯一的碳源②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中,若稀释10倍,则试管内盛有9 mL无菌水待培养基冷却至50 ℃左右时进行③过程,在酒精灯火焰附近进行④过程纯化能分解石油的细菌,该方法能用于计数15.如图所示为治疗性克隆的基本过程,首先取病人的体细胞核,移植到去核的卵母细胞中,在早期胚胎形成后,从中分离获得胚胎干细胞(ES细胞),对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理,将定向分化后的细胞移植给病人,从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述错误的是 ( )接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期获得图中去核的卵母细胞时,可通过显微操作去核图中形成的器官用于移植,理论上可以避免免疫排斥反应治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术16.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。有一对夫妇均为镰状细胞贫血致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇和孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。下列相关叙述错误的有 ( )与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5'—AACTCGT-3'”根据凝胶电泳带谱分析,基因纯合的是Ⅱ-2该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000,若Ⅱ-3与另一正常女子婚配,则生出患病孩子的概率为1/202若将正常的血红蛋白基因成功导入患者的骨髓造血干细胞中,可用于治疗该病二、非选择题(共4小题,共52分)17.(14分)食醋酿造是多种微生物共同作用的过程,主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段,期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类,经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。(1)(6分)发酵原料中的淀粉为微生物提供 (营养物质)。参与发酵的多种微生物种间关系属于 。 (2)(8分)研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。下图为醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。①用 法将接菌种种到添加了碳源、 、无机盐、水以及 的培养基中,培养一段时间,获得单菌落后,挑选菌落数符合要求的平板进行计数。 ②由图1可知,整个发酵过程中酵母菌数量呈现 的趋势,且在不同层次上随着深度增加而减少。初期,由于 ,上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后,随着发酵条件的变化,酵母菌基本停止繁殖而主要进行 发酵。在第7天以后随发酵时间延长,酵母菌的数量呈降低趋势,原因是 。 ③图2显示,醋酸菌在 天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸,反应简式为: 。 18.(12分)下图为通过植物体细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程,请回答:(1)(2分)取马铃薯和番茄充分展开的嫩叶片,用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其 ,每次处理后用 冲洗叶片5次,去除残留于叶片上的药剂,处理后的叶片切成薄片备用。 (2)(2分)图中过程①用 处理可获得具有活力的原生质体。过程②一般可用 (化学物质)作为诱导剂来诱导细胞融合。 (3)(2分)过程④为 ,该过程中需要的条件有 (填字母)。 A.无菌环境 B.一定浓度的植物激素 C.适宜的温度 D.充足的光照 E.充足的养料(4)(2分)人们培育“番茄-马铃薯”的目的是想获得地上结番茄,地下结马铃薯的植株,从理论上这种设想是可以实现的,原因是 。但最后却未能如愿,其原因是基因的表达相互调控、相互影响。尽管如此,从整个过程来看,植物体细胞杂交的研究在 方面,取得了巨大突破。 (5)(4分)番茄有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时,参照品种B的最佳激素配比(见下表)进行预实验。品种B组织培养阶段 细胞分裂素浓度/(μmol·L-1) 生长素浓度/(μmol·L-1)Ⅰ.诱导形成愈伤组织 m1 n1Ⅱ.诱导形成幼芽 m2 n2Ⅲ.诱导生根 m3 n3在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是 阶段。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度,参照品种B的激素配比(m1>2.0),以0.5(μmol·L-1)为梯度,设计5个浓度水平的实验,细胞分裂素最高浓度应设为 (μmol·L-1)。 19.(12分)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物,此类靶向药物可称为“生物导弹”。通常,我们采用动物细胞融合技术来制备单克隆抗体,利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段。(1)(2分)若单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌,则特定抗原通常是 。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为 。 (2)(3分)图中诱导细胞融合时需要采用 、 或电融合法等方法诱导,杂交瘤细胞的特点是 。 (3)(2分)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行 和 ,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 (4)(5分)近年来,科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响,某科研小组进行了相关实验,结果如表所示:丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响丁酸钠的浓度/ (mmol·L-1) 时间/h48 96 1440 1∶320 1∶640 1∶1 2000.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 5000.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 5000.75 1∶320 1∶320 1∶640注:表中比值表示抗体效价,值越高表明越有利于抗体的产生。①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养,CO2的主要作用是 ,该实验的自变量为 。 ②根据表中数据,分析丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系: 。 20.(14分)与普通玉米相比,甜玉米中可溶性糖含量高,汁多质脆,富含多种维生素,更富有生产应用价值。科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示,P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题:(1)(4分)在超量表达P基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示。图1中强启动子是一段有特殊结构的DNA片段,能被 酶识别并结合,驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达,应优先选用图1所示的 酶组合,将含P基因的DNA片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。 (2)(6分)将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养,培养基中应加入 以筛选出成功导入T-DNA的玉米愈伤组织。筛选出的愈伤组织经过 过程可形成丛芽,最终获得多个玉米株系。现对a1、a2、a3、a4四个甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定,结果如图2。其中a4株系P蛋白表达量较低的原因可能是 。 (3)(4分)研究人员发现了一种RNA剪接抑制剂,该抑制剂会使玉米相关基因的表达受阻。针对该抑制剂的具体作用,科研人员提出以下假说:假说1:该抑制剂导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。假说2:该抑制剂导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。为了验证上述假说,需分别从实验组和对照组胚细胞中提取RNA,经过 过程形成cDNA,然后对cDNA进行PCR后,再分析电泳后的条带。若要证明假说2成立,需要选择图3中所示的引物 (填数字)进行PCR。 (共77张PPT)模块检测卷（一）D一、选择题(共16小题，每小题3分，共48分，每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。)1.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是( )A.倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染B.若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌C.高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121 ℃，15～30 minD.在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30 min来进行消毒01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，B正确；高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121 ℃的条件下，维持15～30 min，C正确；接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射30 min，进行消毒，D错误。012.某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解为N－乙酰氨基葡萄糖后进一步转化利用。科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，用于生物防治。下列相关叙述错误的是( )A.土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养B.目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法C.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株D.获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物B01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213010304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121302解析：据题意可知，要从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，那么应该用以几丁质为唯一碳源的选择培养基培养，A正确；目的菌的纯化和计数可以使用稀释涂布平板法，平板划线法只能用于目的菌的纯化，不能计数，B错误；水解圈直径/菌落直径可以反应水解能力的大小，水解圈直径/菌落直径越大，说明该菌降解几丁质能力越强，反之越弱，因此可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株，C正确；几丁质广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳和真菌的细胞壁中，因此获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物，D正确。3.镇江香醋是一种通过固态发酵工艺制作的小曲醋，酿造的工业流程示意如下图所示。下列相关叙述正确的是( )A.冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境B.制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基C.碳源不足且氧气充足时，醋酸菌可利用酒精进行发酵D.醋酸发酵中经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：根据图示，将糯米蒸熟后冷却是为了降低温度，防止杀死酒曲中的酵母菌，A错误；根据图示，制醅过程中需添加麸皮和糠以形成固态发酵醅基，B错误；当氧气充足时，醋酸菌将酒精氧化为醋酸，C错误；醋酸菌为好氧菌，经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况，D正确。010204050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121303A.冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境B.制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基C.碳源不足且氧气充足时，醋酸菌可利用酒精进行发酵D.醋酸发酵中经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况4.发酵制氢技术是我国为早日实现“碳中和”开发的新能源技术之一。传统农业中，水稻、小麦的秸秆常被焚烧，既产生浓烟污染环境，又增加了CO2排放，研究团队将秸秆制成发酵液培养某种细菌，进行发酵制氢。下列说法错误的是( )A.鉴定该细菌是否为纤维素分解菌，可在培养基中加入酚红试剂B.水稻、小麦的秸秆中富含纤维素，可为产氢细菌提供碳源C.底物浓度、温度、pH等是影响发酵产氢量的重要因素D.与传统农业相比，发酵制氢技术既能减少CO2的排放量又能获得新能源A01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213010203050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121304解析：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌降解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，因此鉴定该细菌是否为纤维素分解菌，可在培养基中加入刚果红试剂，A错误；纤维素的组成元素为C、H、O，可以为产氢细菌提供碳源，B正确；温度、pH会影响酶活性，底物作为发酵的原料，因此底物浓度、温度、pH等是影响发酵产氢量的重要因素，C正确；与传统农业相比，发酵制氢技术通过将秸秆中的含碳有机物转换成有机酸等工业原料，减少了CO2的排放量，又获得了氢这种新能源，D正确。5.为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种分解尿素的细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是( )A.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌B.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整C.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落D.该实验结果出现了单菌落，能达到菌种纯化的目的解析：倒平板后无需晃动，B错误。B01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题12136.研究人员利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势，通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，其实验流程如下图，a～e表示不同操作。下列相关叙述正确的是( )A.通过a操作获得完整且有活性的原生质体，主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性B.b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，以获得未分化状态的杂种细胞C.d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值小于1D.甲、乙植株是两个不同物种，因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育C01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：植物细胞的细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，利用纤维素酶和果胶酶专一性获得完整且有活性的原生质体，A错误；b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，获得的是已分化的杂种细胞，B错误；通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，d为再分化，所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值先小于1(促进芽的分化)后大于1(促进根的分化)，C正确；甲、乙植株是两个不同物种，目的植株含有甲、乙的全部染色体，可正常进行减数分裂产生配子产生后代，D错误。010203040507类题类题080910111415类题类题1617181920类题121306A.通过a操作获得完整且有活性的原生质体，主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性B.b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，以获得未分化状态的杂种细胞C.d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值小于1D.甲、乙植株是两个不同物种，因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育7.甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白(血凝素蛋白)密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是( )A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp，BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点C01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：将待测DNA用限制酶切割后进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，A正确；图甲获得重组质粒的过程，需要经过逆转录形成一条DNA链，再形成双链cDNA分子以及获取R蛋白基因及与质粒的重组过程，所以需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶等，B正确；010203040506类题类题080910111415类题类题1617181920类题121307A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp，BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点通过PCR技术从一个cDNA分子特异性扩增出完整的R蛋白基因的过程中，第一轮循环将产生2个两条链不等长的DNA片段，第二轮循环将产生4个两条链不等长的DNA片段，第三轮循环将产生8个DNA片段，其中有2个为两条核苷酸链等长的R蛋白基因，另外6个为两条链不等长的DNA片段，C错误；010203040506类题类题080910111415类题类题1617181920类题121307A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp，BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点据图乙可知，重组质粒被HindⅢ切割后产生了1 400 bp、400 bp和200 bp三种长度的DNA片段，据此推测该质粒长度最短为1 400＋400＋200＝2 000(bp)，重组质粒被HindⅢ和BamHⅠ同时切割后，产生长度为560 bp、420 bp和200 bp的三种DNA片段，说明在HindⅢ酶切后，BamHⅠ又将长度为1 400 bp的DNA片段切割成1个长度为560 bp和2个长度为420 bp的DNA片段，将长度为400 bp的DNA片段切割成2个长度为200 bp的DNA片段，故BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点，D正确。010203040506类题类题080910111415类题类题1617181920类题121307A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.据图乙可推测重组质粒长度最短为2 000 bp，BamHⅠ在重组质粒上最少有3个酶切位点●将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示，下列有关叙述正确的是( )A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的B.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体C.①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：B淋巴细胞是从小鼠的脾中提取的，骨髓瘤细胞是体内细胞的恶性克隆性增生形成的，A错误；经①诱导融合过程形成的细胞不都是能无限增殖并产生相应抗体的细胞，还需要经过两次筛选才能获得无限增殖并产生相应抗体的杂交瘤细胞，B错误；①促进动物细胞融合，可利用灭活的病毒，也可以利用聚乙二醇作诱导剂， C错误；过程③中由于单克隆抗体具有高度特异性，使其靶向作用非常准确，D正确。01020304050607类题080910111415类题类题1617181920类题1213类题A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾中提取的B.经①形成的杂交瘤细胞都能无限增殖并能产生所需抗体C.①促进细胞融合可利用灭活的病毒，不可以利用聚乙二醇作诱导剂D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性●如图是科学家培养转基因试管牛的过程示意图，下列相关叙述错误的是( )A.1部位的细胞具有发育的全能性，将来发育成胎儿的各种组织B.过程①可以用外源促性腺激素处理，使其排出更多的卵子C.进行过程③时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理D.为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定A01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：1部位的细胞表示透明带，不具有发育的全能性，3表示内细胞团细胞，将来发育成胎儿的各种组织，A错误；过程①可以用外源促性腺激素处理，使雌性个体超数排卵，B正确；进行过程③胚胎移植时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理，提高胚胎移植的成功率，C正确；为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定，即取2部位(滋养层)的细胞做DNA检测来鉴定性别，D正确。01020304050607类题080910111415类题类题1617181920类题1213类题A.1部位的细胞具有发育的全能性，将来发育成胎儿的各种组织B.过程①可以用外源促性腺激素处理，使其排出更多的卵子C.进行过程③时，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理D.为确保得到所需性别的转基因牛，往往对移植前的胚胎进行性别鉴定8.下面表示“DNA粗提取与鉴定”实验的基本流程，相关叙述错误的是( )①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定A.本实验使用了体积分数为95%的酒精B.步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料C.步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液D.步骤⑥向试管中加入二苯胺试剂后静置5 min后即可呈现蓝色D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121301020304050607类题类题0910111415类题类题1617181920类题121308解析：DNA不溶于酒精，尤其是体积分数为95%的冷冻酒精，而细胞中的某些物质可以溶解于酒精，本实验使用了体积分数为95%的酒精，目的是析出提取含杂质较少的DNA，A正确；肝细胞含有细胞核和众多的细胞器，步骤①中可以使用猪的肝细胞作为实验材料，B正确；步骤③中可以使用纱布对研磨液进行过滤，并获取上清液，上清液中含有DNA，C正确；步骤⑥中DNA鉴定时向试管中加入二苯胺试剂后，应将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后可观察到蓝色，D错误。9.当目的基因和质粒都用HindⅢ处理、连接后，目的基因可能正向插入载体，也可能反向插入载体，为判断目的基因的插入方向，可使用限制酶处理，并进行电泳检测(如图)。下列选项中能判断目的基因插入方向的限制酶是( )注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长20 000 bp。A.HindⅢ B.EcoRⅠ C.BamHⅠ D.EcoRⅠ和HindⅢB01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：识图分析可知，图中质粒用限制酶HindⅢ处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：5 000＋4 000＝9 000 bp和1 000＋2 000＋5 000＋3 000＝11 000 bp，因此用该限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，A错误；识图分析可知，图中质粒用限制酶EcoRⅠ处理，并进行电泳后，正向插入的质粒会出现的DNA片段为：1 000＋2 000＋5 000＝8 000 bp和5 000＋4 000＋3 000＝1 2000 bp，而反向插入的质粒切割后会出现的DNA片段为：1 000＋2 000＋4 000＝7 000 bp和5 000＋3 000＋5 000＋3 000＝13 000 bp，因此正向插入和反向插入限制酶EcoRⅠ处理电泳01020304050607类题类题0810111415类题类题1617181920类题121309注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长20 000 bp。A.HindⅢB.EcoRⅠC.BamHⅠD.EcoRⅠ和HindⅢ后得到的DNA片段大小不同，可以判断目的基因的插入方向，B正确；识图分析可知，图中质粒用限制酶BamHⅠ处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：5 000＋1 000＝6 000 bp和4 000＋2 000＋5 000＋3 000＝14 000 bp，因此用该限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，C错误；识图分析可知，图中质粒用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ共同处理，并进行电泳后，无论正向插入还是反向插入的均会出现的DNA片段为：2 000＋1 000＝3 000 bp、5 000 bp、4 000 bp、5 000＋3 000＝8 000 bp，因此用EcoRⅠ和HindⅢ限制酶处理后不能判断目的基因的插入方向，D错误。01020304050607类题类题0810111415类题类题1617181920类题121309注：EcoRⅠ、BamHⅠ和HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长20 000 bp。A.HindⅢB.EcoRⅠC.BamHⅠD.EcoRⅠ和HindⅢ10.“标记”是生物技术与工程常用的技术手段，下列相关叙述错误的是( )A.诱导植物原生质体融合时，通过红绿荧光蛋白标记检测细胞融合情况B.分析工程酵母发酵产物的合成及分泌时，通过同位素标记监测产物转移路径C.验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达D.对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量C01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121301020304050607类题类题0809111415类题类题1617181920类题121310解析：诱导植物原生质体融合时，利用红绿荧光标记蛋白，通过红绿荧光蛋白标记混合情况检测细胞融合情况，A正确；利用同位素标记法可以监测工程酵母发酵产物的合成及分泌时产物转移路径，B正确；验证转基因抗虫棉是否成功时，应该通过接种实验验证，即为转基因抗虫棉接种相应抗的害虫，检测抗虫棉是否表现出抗虫特性，C错误；对目的基因进行扩增时，可通过荧光标记技术，利用荧光基团和淬灭基团制成探针，实时定量测定产物的量，D正确。11.酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。科研人员通过两种途径如下图改良酵母菌种，实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是( )A.途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌，再利用PEG诱导融合B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体C.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标D.酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同，根本原因是酶的种类不同B01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：途径Ⅰ需用几丁质酶处理酵母菌去除其细胞壁，再利用PEG诱导融合，A错误；途径Ⅱ是将糖化酵母的淀粉酶基因提取出来，通过构建基因表达载体导入酿酒酵母细胞中，从而获得目的酵母菌，B正确；通过两种途径改良酵母菌种，实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的，所以淀粉转化为酒精的效率作为最终鉴定目的菌的指标，C错误；酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同，根本原因是基因的选择性表达，D错误。01020304050607类题类题0809101415类题类题1617181920类题121311A.途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌，再利用PEG诱导融合B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体C.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标D.酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸产物不完全相同，根本原因是酶的种类不同12.枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸，在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值，被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。将枯草杆菌蛋白酶分子的Asp(99)和Glu(156)改成Lys，可使其在pH＝6时的活力提高10倍。下列说法正确的是( )A.完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现B.该成果体现了蛋白质工程在培育新物种方面具有独特的优势C.经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状不可遗传D.蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息A01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121301020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1312解析：氨基酸的排列顺序是由基因决定的，因此完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现，A正确；该成果培育了新品种，而不是新物种，B错误；经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶的基因发生了改变，因此经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状可以遗传，C错误；蛋白质工程是在深入了解蛋白质分子的结构与功能关系的基础上进行的，虽然合成了改造的基因，但它最终要达到的目的是改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求，D错误。13.生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，会引起人们对它安全性的关注，也会与伦理道德发生碰撞，带来新的伦理困惑与挑战。下列有关叙述错误的是( )A.科学家将玉米的α－淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，阻断淀粉储藏使花粉失去活性而防止转基因花粉的传播，达到防止基因污染的目的B.中国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验C.生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，具有致病能力强、攻击范围广的特点D.利用设计试管婴儿技术，解决不孕夫妇的生育问题D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121301020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：在转基因研究工作中，科学家会采取很多方法防止基因污染。例如，我国科学家将来自玉米的α－淀粉酶基因与目的基因一起转入植物中，由于α－淀粉酶基因可以阻断淀粉储藏使花粉失去活性，因而可以防止转基因花粉的传播，A正确；中国政府禁止生殖性克隆人，坚持四不原则(不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验)，不反对治疗性克隆人，B正确；生物武器有多种类型，包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等；生物武器的致病能力强、攻击范围广，因而会给人类的生存安全构成了严重威胁，C正确；人类利用试管婴儿技术解决不孕夫妇的生育问题，D错误。14.下图为从土壤中分离、扩大培养能分解石油的细菌的示意图，有关分析错误的是( )A.为获得分解石油的细菌，配制培养基时，应以石油为唯一的碳源B.②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中，若稀释10倍，则试管内盛有9 mL无菌水C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行③过程，在酒精灯火焰附近进行D.④过程纯化能分解石油的细菌，该方法能用于计数D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：为获得分解石油的细菌，故配制培养基时应以石油为唯一的碳源，这样分解石油的细菌能在该培养基上生长得很好，其他微生物的生长则受到抑制，A正确；②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中，若稀释10倍，则试管内盛有10－1＝9(mL)无菌水，B正确；25 ℃左右时培养基会凝固，应待培养基冷却至50℃左右时进行③过程，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；根据图中菌落的分布情况可知，④过程通过平板划线法纯化能分解石油的细菌，该方法不能用于菌种的计数，D错误。01020304050607类题类题0809101115类题类题1617181920类题121314A.为获得分解石油的细菌，配制培养基时，应以石油为唯一的碳源B.②过程从锥形瓶中吸取1 mL菌液注入试管中，若稀释10倍，则试管内盛有9 mL无菌水C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行③过程，在酒精灯火焰附近进行D.④过程纯化能分解石油的细菌，该方法能用于计数15.如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞(ES细胞)，对ES细胞进行基因修饰和定向分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述错误的是( )A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术D01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：卵母细胞进行减数分裂时停止在减数第二次分裂中期，因此接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期，A正确；显微镜下可以通过显微操作去核，B正确；图中形成的器官来源于病人的细胞，用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应，C正确；治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术，不用进行胚胎移植技术，D错误。01020304050607类题类题0809101114类题类题1617181920类题121315A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术●红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列有关叙述错误的是( )A.构建表达载体时需将EPO基因插入乳腺蛋白基因的启动子的下游B.一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达C.用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中可合成并提取EPOD.用PCR扩增人EPO基因，需要一段已知的EPO基因核苷酸序列C01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121301020304050607类题类题080910111415类题1617181920类题1213类题解析：启动子是一段特殊序列结构的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，故构建表达载体时需将EPO基因(目的基因)插入乳腺蛋白基因的启动子的下游，A正确；某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO，所以一般情况下，该转基因羊中的EPO基因只在羊的乳腺细胞中表达，B正确；用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的受精卵(将来发育成雌性个体)中，待其发育到一定阶段，方可合成EPO，C错误；用PCR扩增人EPO基因，前提是需要一段已知的EPO基因核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，D正确。●为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt)的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。下列相关说法错误的是( )A.p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列B.超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织C01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：根据题干推测，p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列，A正确；超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因，在含有潮霉素的培养基上，超表达载体能够存活，从而起到筛选作用，B正确；由于红豆杉细胞中本身存在Bapt基因，无论超表达载体是否成功导入，都能与Bapt基因探针形成杂交分子，因此不能通过Bapt基因探针来检测过程⑤是否成功，C错误；工厂化生产紫杉醇属于细胞产物的获得，只需要培养到愈伤组织阶段即可，D正确。01020304050607类题类题080910111415类题1617181920类题1213类题A.p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列B.超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织16.单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。有一对夫妇均为镰状细胞贫血致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为这对夫妇和孩子核酸分子杂交诊断的结果示意图。下列相关叙述错误的有( )A.与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”B.根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2C.该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，若Ⅱ－3与另一正常女子婚配，则生出患病孩子的概率为1/202D.若将正常的血红蛋白基因成功导入患者的骨髓造血干细胞中，可用于治疗该病B01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：据图可知，正常基因模板链的核酸序列5′－ACGAGTT－3′，按照碱基互补配对的原则，则与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”，A正确；图中夫妇的基因型均为Bb，根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2和Ⅱ－1，他们的基因型依次为bb和BB，B错误；01020304050607类题类题080910111415类题类题17181920类题121316A.与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”B.根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2C.该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，若Ⅱ－3与另一正常女子婚配，则生出患病孩子的概率为1/202D.若将正常的血红蛋白基因成功导入患者的骨髓造血干细胞中，可用于治疗该病该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，说明该地区人群中b的基因频率为1/100，则B的基因频率为99/100，则正常人群中携带者的概率为2×1/100×99/100÷(1－1/10 000)＝2/101，结合图示可知，Ⅱ－3 的基因型为Bb，若其与正常女子Bb或BB婚配，则生出患病孩子的概率为2/101×1/4＝1/202，C正确；镰状细胞贫血症是由基因突变导致的，属于遗传病，将正常血红蛋白的基因导入患者的骨髓造血干细胞中则可产生正常的红细胞，进而可达到治疗目的，D正确。01020304050607类题类题080910111415类题类题17181920类题121316A.与图中正常基因模板链杂交的探针碱基对应序列为“5′—AACTCGT－3′”B.根据凝胶电泳带谱分析，基因纯合的是Ⅱ－2C.该地区镰状细胞贫血患病率为1/10 000，若Ⅱ－3与另一正常女子婚配，则生出患病孩子的概率为1/202D.若将正常的血红蛋白基因成功导入患者的骨髓造血干细胞中，可用于治疗该病二、非选择题(共4小题，共52分)17.(14分)食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。(1)发酵原料中的淀粉为微生物提供________(营养物质)。参与发酵的多种微生物种间关系属于________。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213碳源竞争(2)研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。下图为醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213①用________________法将接菌种种到添加了碳源、________、无机盐、水以及________的培养基中，培养一段时间，获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。稀释涂布平板法氮源琼脂01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213②由图1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现________________________的趋势，且在不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于________________，上层菌增殖速度高于中层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行________发酵。在第7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是________________________________________________________________________________________________________________________。先快速升高后缓慢降低溶解氧的存在酒精酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖(营养物质减少及有害代谢产物的积累)01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213③图2显示，醋酸菌在___________天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：___________________________________________________________。1～3(1～5)01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：(1)淀粉属于多糖，为微生物提供碳源。参与发酵的多种微生物为了生长繁殖，他们之间争夺营养物质和生存空间，其种间关系属于竞争关系。(2)①为了了解醋醅不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况，利用稀释涂布平板法得到单菌落后计数。该培养基为固体培养基，该培养基中应该含有碳源、氮源、无机盐、水以及琼脂等。②由图1可知，酵母菌在发酵过程中先快速升高后缓慢降低。发酵初期，上层溶解氧的浓度高，因而上层菌增殖速度高于中01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121318.(12分)下图为通过植物体细胞杂交培育“番茄－马铃薯”植株的过程，请回答：01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(1)取马铃薯和番茄充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其________，每次处理后用________冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片切成薄片备用。消毒无菌水01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(2)图中过程①用____________________处理可获得具有活力的原生质体。过程②一般可用________________(化学物质)作为诱导剂来诱导细胞融合。(3)过程④为________，该过程中需要的条件有________(填字母)。A.无菌环境 B.一定浓度的植物激素 C.适宜的温度 D.充足的光照 E.充足的养料纤维素酶和果胶酶聚乙二醇(PEG)脱分化ABCE01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(4)人们培育“番茄－马铃薯”的目的是想获得地上结番茄，地下结马铃薯的植株，从理论上这种设想是可以实现的，原因是_________________________________。但最后却未能如愿，其原因是基因的表达相互调控、相互影响。尽管如此，从整个过程来看，植物体细胞杂交的研究在____________________________方面，取得了巨大突破。该植株同时具有番茄和马铃薯的遗传信息克服远缘杂交不亲和的障碍01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(5)番茄有A、B两品种。科研人员在设计品种A组织培养实验时，参照品种B的最佳激素配比(见下表)进行预实验。品种B组织培养阶段 细胞分裂素浓度/(μmol·L－1) 生长素浓度/(μmol·L－1)Ⅰ.诱导形成愈伤组织 m1 n1Ⅱ.诱导形成幼芽 m2 n2Ⅲ.诱导生根 m3 n3在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是_________阶段。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1>2.0)，以0.5(μmol·L－1)为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素最高浓度应设为_______(μmol·L－1)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲm1＋1.001020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213解析：(1)为防止微生物污染，应取马铃薯和番茄充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，并去除残留于叶片上的药剂。(2)据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，由于植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原则，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，②为原生质体融合的过程，常利用化学诱导剂聚乙二醇(PEG)诱导融合。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(3)④表示脱分化过程。A植物组织培养需要在无菌无毒的环境中进行，A正确；B植物组织培养需要一定的植物激素条件，如细胞分裂素和生长素，B正确；C植物组织培养需要适宜的温度，以保证细胞代谢的正常进行，C正确；D植物组织培养在脱分化过程不需要光照，D错误；E植物组织培养过程需要充足的养料，以保证代谢的正常进行，E正确。故选ABCE。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(4)人们培育“番茄－马铃薯”的目的是想获得地上结番茄，地下结马铃薯的植株，由于该植株同时具有番茄和马铃薯的遗传信息，因此理论上这种设想是可以实现的。植物体细胞杂交的研究克服了不同生物在远缘杂交不亲和的障碍方面，取得了巨大突破。(5)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中都发生了基因的选择性表达。为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1＞2.0)，以0.5(μmol·L－1)为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为m1－1.0(μmol·L－1)、m1－0.5(μmol·L－1)、m1(μmol·L－1)、m1＋0.5(μmol·L－1)、m1＋1.0(μmol·L－1)，可见细胞分裂素的最高浓度应设为m1＋1.0(μmol·L－1)。19.(12分)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称为“生物导弹”。通常，我们采用动物细胞融合技术来制备单克隆抗体，利用单克隆抗体来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段。(1)若单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则特定抗原通常是__________________________。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为_________________________________________________________。(2)图中诱导细胞融合时需要采用________________、____________________ 或电融合法等方法诱导，杂交瘤细胞的特点是___________________________。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213肠癌细胞(膜)表面的蛋白质单克隆抗体可特异性的结合癌细胞，不损伤正常细胞灭活病毒诱导法聚乙二醇(PEG)融合法既能迅速大量增殖，又能产生抗体(3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行____________和________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(4)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进行了相关实验，结果如表所示：丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响克隆化培养抗体检测01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213丁酸钠的浓度/(mmol·L－1) 时间/h48 96 1440 1∶320 1∶640 1∶1 2000.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 5000.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 5000.75 1∶320 1∶320 1∶640注：表中比值表示抗体效价，值越高表明越有利于抗体的产生。①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是__________________________，该实验的自变量为_______________________________。②根据表中数据，分析丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系：_____________________________________________________________________________________________。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213维持培养液的pH丁酸钠的浓度和培养时间在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生解析：(1)单克隆抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”，单克隆抗体可以识别癌细胞表面特定的抗原(癌细胞表面的蛋白质)，引导药物定向杀伤癌细胞，将癌细胞消灭掉而不影响正常细胞，所以疗效高，毒副作用小。(2)诱导动物细胞融合常用的方法有：电融合法、聚乙二醇(PEG)融合法、灭活的病毒诱导法等。若该过程是制备单克隆抗体，在诱导细胞融合中，所形成的融合细胞有两两融合细胞3种：AA型、BB型、AB型，用来培养的融合细胞应该是AB型的杂交瘤细胞，从中选择出它的方法是用选择培养基进行筛选，同种自身融合的细胞都不能存活，存活生长的是异种细胞融合的杂交细胞，杂交瘤细胞的特点是：既能无限繁殖，又能产生特异性抗体。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(3)通过特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞后，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(4) ①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含5% CO2的培养箱中培养，CO2的主要作用是维持培养液的pH。由表格信息可知，该实验的自变量为丁酸钠的浓度和培养时间。②依据表中数据可知，丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系为：在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生。注意，培养时间不同，“一定浓度范围”不同。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题121320.(14分)与普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖含量高，汁多质脆，富含多种维生素，更富有生产应用价值。科研人员通过转基因技术培育出了超量表达P蛋白的转基因甜玉米。在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示，P蛋白在玉米株系的表达量如图2所示。回答下列问题：01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(1)在超量表达P基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1所示。图1中强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被____________酶识别并结合，驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用图1所示的_________________酶组合，将含P基因的DNA片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213RNA聚合(酶)BamHⅠ和SacⅠ(2)将农杆菌液浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中应加入________以筛选出成功导入T－DNA的玉米愈伤组织。筛选出的愈伤组织经过________过程可形成丛芽，最终获得多个玉米株系。现对a1、a2、a3、a4四个甜玉米株系的蛋白质表达量进行测定，结果如图2。其中a4株系P蛋白表达量较低的原因可能是____________________________________________________________。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213潮霉素再分化a4株系玉米中可能没有导入目的基因(或“目的基因未表达”)(3)研究人员发现了一种RNA剪接抑制剂，该抑制剂会使玉米相关基因的表达受阻。针对该抑制剂的具体作用，科研人员提出以下假说：假说1：该抑制剂导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪。假说2：该抑制剂导致RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213为了验证上述假说，需分别从实验组和对照组胚细胞中提取RNA，经过________过程形成cDNA，然后对cDNA进行PCR后，再分析电泳后的条带。若要证明假说2成立，需要选择图3中所示的引物________(填数字)进行PCR。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213逆转录3和4解析：(1)RNA聚合酶与DNA的启动子结合，驱动基因的转录。首先P基因和Ti质粒需要相同的限制酶切位点，其次，BamHⅠ后面有强启动子不能丢弃，EcoRⅠ和NotⅠ限制酶会破坏目的基因，因此选择BamHⅠ和SacⅠ限制酶的组合；(2)农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，重组质粒中有潮霉素抗性基因和卡那霉素抗性基因，但植物细胞能表现出对潮霉素的抗性，因此，培养基中需加入潮霉素进行筛选，并以此为特性进行筛选，将筛选出的愈伤组织经过再分化(细胞分化)形成丛芽，从而获得多个转基因玉米株系；a4株与野生型的X蛋白表达量基本相同，可能原因是a4株系玉米中导入目的基因或目的基因未表达；01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(3)为验证上述假说，可分别从实验组和对照组胚细胞中提取总RNA，逆转录形成cDNA，然后对cDNA进行PCR后，再分析电泳后的条带；若要证明假说2成立，即RNA前体上内含子1和外显子2的对应序列同时被剪切下去，即选择图示引物3和4进行PCR可得到电泳条带。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213●稻米的直链淀粉是由蜡质基因(waxy)控制合成的淀粉合成酶(GBSS)催化形成，直链淀粉含量高的米饭质地和适口性不高。将waxy反义基因片段导入水稻细胞抑制内源基因表达，可降低直链淀粉含量。为防止同时导入的标记基因影响，科研人员构建了2种载体，通过共转化以期获得含有目的基因、不含标记基因和报告基因(gus)的转基因水稻，相关流程如下图。请回答下列问题。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(1)waxy反义基因片段导入水稻细胞后可抑制内源基因表达，原因是_________________________________________________________。为构建反义基因与gus的融合基因，在利用PCR技术获取反义基因与gus过程中，需要在设计的两对引物____端分别添加限制酶_______________、_______________的识别序列。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213反义基因转录形成的mRNA可与内源基因mRNA结合，抑制翻译5′SalⅠ和BamHⅢBamHⅢ和HindⅢ(2)过程③中将农杆菌1、2按照1∶9比例充分混匀感染水稻愈伤组织，3天后转入含有__________的选择培养基筛选抗性愈伤组织。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213潮霉素(3)提取T0代植株的基因组DNA，根据反义基因和gus基因部分序列设计引物进行PCR1检测，同时根据反义基因和终止子的部分序列设计引物进行PCR2检测，结果如下图，其中M为标准参照，1为阳性对照，2为阴性对照，3～8号为抗性植株DNA的PCR产物。其中2是根据______________的DNA为模板进行PCR的结果，据图可以确定________号植株为共转化失败的水稻。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213非转基因水稻5、6(4)过程⑤将共转化成功的T0代植株进行自交，收获种子，取半粒种子进行GUS检测(gus的表达产物能使白色X－Gluc水解生成蓝色产物)。选择检测结果为________色的种子种植得到T1代植株。最终还需检测____________________，才可判断是否改良成功。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213白稻米中直链淀粉的含量解析：(1)由于反义基因转录形成的mRNA可与内源基因mRNA碱基互补配对，从而使核糖体不能与mRNA结合，因此抑制翻译过程，所以waxy反义基因片段导入水稻细胞后可抑制内源基因表达；为构建反义基因与gus的融合基因，从图中看出，在反义基因两端存在SalⅠ和BamHⅢ限制酶切位点，而在gus基因两端存在BamHⅢ和HindⅢ现在酶切位点，DNA聚合酶延伸时，将脱氧核苷酸加到引物的3′端，为了不破坏目的基因，该限制酶识别序列应添加在引物的5′端，所以利用PCR技术获取反义基因与gus过程中，需要在设计的两对引物5′端分别添加SalⅠ和BamHⅢ、BamHⅢ和HindⅢ的酶切位点。(2)从图中看出T－DNA的序列中含有潮霉素抗性基因，而四环素抗性基因没有在T－DNA序列，所以需要将愈伤组织转移至含有潮霉素的选择培养基中筛选抗性愈伤组织；愈伤组织转入再生培养基经再分化形成胚状体。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213(3)1为阳性对照，即含有目的基因的片段，2为阴性对照，即是根据非转基因水稻的DNA为模板扩增的结构。在左图是根据反义基因和gus基因部分序列设计引物进行PCR1检测，右图是根据反义基因和终止子的部分序列设计引物进行 PCR2检测，5号和6号在左图中存在序列，而在右图中没有终止子，所以是共转化失败的水稻。(4)实验的目的是通过共转化以期获得含有目的基因、不含标记基因和报告基因(gus)的转基因水稻，而gus的表达产物能使白色X－Gluc水解生成蓝色产物，所以进行GUS检测时，如果是白色，则不含GUS，选择检测结构为白色的种子种植，由于直链淀粉含量高的米饭质地和适口性不高，所以最终还要检测稻米中直链淀粉的含量。01020304050607类题类题080910111415类题类题1617181920类题1213 展开更多...... 收起↑ 资源列表 模块检测卷(一).pptx 模块检测卷(一)（原卷版）.docx 模块检测卷(一)（解析版）.docx
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