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第1章 发酵工程（能力提升）——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三单元测试卷
一、单项选择题：本题共18小题，每题3分，共54分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.下列关于传统发酵食品制作的叙述，错误的是( )
A．多种微生物参与了豆腐的发酵，主要是毛霉
B．用水密封泡菜坛是为了营造乳酸菌无氧呼吸条件
C．当O2不足、糖源充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸
D．利用酵母菌发酵制作葡萄酒过程中要适时排气
2.如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是( )
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 （NH4）2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C.若除去①，此培养基可培养硝化细菌
D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
3.某同学把制酒产生的酒糟和水搅拌后，封存在缸中，一段时间后开缸，香气扑鼻，经检测，该过程中产生了醋。下列相关分析正确的是( )
A.产生醋的主要原因是把酒糟封存在缸中
B.利用酒糟制成醋的本质是微生物将糖直接转为乙酸
C.发酵产生醋酸的菌种可能来源于空气中
D.醋酸菌的最适生长温度为28℃
4.从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜逐渐变酸，乳酸菌与杂菌数目也发生变化，下列有关分析不正确的是( )
A.泡菜制作初期就有乳酸菌的存在
B.密闭的发酵环境使乳酸菌在种间竞争中占据一定优势
C.在发酵过程中，乳酸含量逐渐增多，可以抑制其他微生物的生长
D.发酵过程中，杂菌数目的减少使乳酸菌与杂菌的种间竞争减弱，因此乳酸菌数目一直增多
5.如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是( )
A.过程①和②都发生在细胞质基质，过程③和④都发生在线粒体中
B.醋酸发酵是否产生乙酸，可用pH试纸来检验
C.可利用碱性重铬酸钾检测是否有酒精产生
D.过程①～④所需的最适温度相同
6.泡菜腌制过程中会发生反硝化作用，在硝酸盐还原酶的作用下，硝酸盐转化成了亚硝酸盐。已知硝酸盐还原酶在pH为5.0左右时活性最高。某兴趣小组测定了不同盐浓度下泡菜制作过程中亚硝酸盐含量的变化情况，结果如图所示。下列叙述正确的是( )
A.亚硝酸盐是乳酸菌通过无氧呼吸产生的物质
B.5%盐浓度下，发酵后期pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制
C.在泡菜制作过程中，有机物种类和重量随天数增加而减少
D.据图可知，发酵5天左右，泡菜品质较好
7.下列关于腐乳发酵原理的叙述，不正确的是( )
A.腐乳发酵有多种微生物参与，如毛霉、酵母、曲霉等
B.发酵后期需要密封腌制，由此可推知毛霉为厌氧微生物
C.发酵过程中，蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸
D.发酵过程中毛霉和曲霉为竞争关系
8.我国利用不同微生物发酵制作食品的历史悠久。以下关于微生物发酵的说法正确的是( )
A.利用乳酸菌制作酸奶需经常放气
B.腐乳发酵后期密封处理有利于毛霉繁殖
C.泡菜坛内的白膜和变酸的果酒表面的菌膜所含菌种不同
D.家庭制作果酒与工厂化生产的主要区别在于菌种不同
9.下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是( )
A.图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响
B.图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生醋酸速率（V2）的影响
C.图3能表示在利用乳酸菌制泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸的变化趋势
D.图4能表示在一普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化
10.镇江陈醋具有“色、香、酸、醇、浓”之特色，其主要工艺流程如下图。相关叙述正确的是( )
A.作为工业生产，镇江陈醋的酿制过程需要做到严格无菌
B.“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，有助于霉菌的糖化等过程
C.接种醋酸菌后的固态发酵需要“翻缸”，主要目的是抑制杂菌
D.后发酵时间越长，醋体中风味物质的不断堆积导致醋品更佳
11.传统发酵技术在生活生产实践中广泛应用。下列有关叙述错误的是( )
A.果酒发酵的主要微生物属于真核生物，果醋发酵菌种属于原核生物
B.果酒、果醋发酵过程中都可以通过控制发酵温度实现对微生物类型的控制
C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反
D.泡菜制作的过程中，乳酸菌能在缺氧条件下产生乳酸
12.由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业，农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程过程及其应用的叙述，正确的是( )
A.分离、提纯产物来获得微生物细胞本身或其代谢产物，是发酵工程的中心环节
B.单细胞蛋白指从大量培养的微生物菌体中获得的蛋白质，可作为家禽、家畜饲料
C.在啤酒的工业化生产过程中，酒精的生成主要在后发酵阶段完成
D.利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物的生长
13.如图表示果酒和果醋生产过程中的物质变化情况，相关叙述正确的是( )
A.果醋发酵阶段，进行④过程时发酵液中糖类充足
B.制作果酒的主要发酵菌进行①②的场所相同
C.过程③⑤需要氧气，而过程①②④不需要氧气
D.进行果醋发酵的微生物，细胞内基因主要位于染色体上
14.马奶酒是具有民族传统特色的饮料，其发酵机理是乳酸菌和酵母菌进行乳酸发酵及酒精发酵。马奶酒酵母菌株与一般微生物优先利用葡萄糖不同，它是在生长起始期就能优先利用半乳糖，然后同时利用这两种糖进行生长。下列有关叙述错误的是( )
A.马奶酒酵母菌株细胞中能合成半乳糖酶
B.乳酸菌和酵母菌都可进行乳酸发酵和酒精发酵
C.可用平板划线法对马奶中“特殊”酵母菌进行纯培养
D.马奶酒酵母菌株能优先利用半乳糖的原因可能是其发生了变异
15.某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。有关叙述正确的是( )
A.用湿热灭菌法对该实验中的鲜奶进行灭菌
B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后培养基凝固前立即进行
C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34，则鲜奶中细菌数为3.4×106个/mL
D.对鲜奶中细菌计数，常采用稀释涂布平板法，统计的结果往往比实际值偏高
16.下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作的说法，正确的是( )
A.培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌
B.称量、溶化和倒平板都需要在酒精灯火焰旁进行
C.倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影响酵母菌生长
D.将平板倒置放入适宜温度的恒温培养箱中培养
17.获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，研究人员对于无菌技术则围绕着如何避免杂菌污染展开讨论。下列操作中错误的是( )
A.倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染
B.在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射30min来进行消毒
C.若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养皿培养大肠杆菌
D.高压蒸汽灭菌时的灭菌条件通常是121℃，15～30min
18.下图①~④表示采用不同方法分离和纯化大肠杆菌的部分操作。下列叙述错误的是( )
A.①属于倒平板操作，盖上培养皿的皿盖后应立即将平板倒置
B.②中在火焰上灼烧过的接种环需冷却后才能伸入菌液中蘸取菌液
C.③属于涂布平板操作，涂布时可转动培养皿使菌液分布均匀
D.④属于平板划线操作，注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连
二、非选择题：本题共3小题，共46分。
19.（12分）如图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程图和发酵装置示意图。回答下列问题：
(1)过程①需要先清洗后切块，以减少____________。
(2)过程③发酵所需的微生物是____________，产生的酒精可以与____________ (试剂)发生显色反应。
(3)过程④在变酸的酒的表面，观察到的菌膜是____________在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用____________法(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)将其接种到固体培养基上，经培养得到肉眼可见的菌落。
(4)在发酵装置示意图中，过程④需要将装置中的充气口开关____________。果醋的制作是否成功，除了观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定，还可以通过检测和比较醋酸发酵前后的____________作进一步鉴定。
20.（16分）某工厂对产生的高浓度有机废水进行处理，得到的消化液的COD（即化学需氧量，是一个重要且能较快测定的有机物污染参数）仍较高，研究人员通过如图所示流程成功地从土壤中筛选到能高效降低消化液的COD的目的菌。请回答下列问题。
（1）初选时，接种土壤稀释液，初步筛选出降低COD能力相对较强的菌株，将其接种到_________（填“液体”或“固体”）培养基中，使菌株的数量进一步增加，之后接种到_________（填“液体”或“固体”）培养基上以得到单菌落，挑取菌落进行纯化培养，重复多次，即可得到能高效降低COD的目的菌。
（2）图示获得单菌落的接种方法为_________。若制作的四个平板的菌落数分别是33、87、83和85，可推测1mL用于接种的菌液中目的菌数为_________个，利用该方法得到的结果可能偏_________，原因是_________。
（3）除上述计数法之外，_________也是一种快速直观的测定微生物数量的方法，该方法需利用特定的细菌计数板或_________，统计的结果一般比上述方法_________。
21.（18分）回答与“能分解尿素的微生物的分离与计数”实验有关的问题：
（1）制备尿素固体培养基时，培养基冷却至60℃后，加入经G6玻璃砂漏斗通过__________方式快速灭菌得到的尿素溶液，用该灭菌方法的原因是____________________。
（2）将采集到的土样配置成细菌悬液后，将菌液分别涂布到LB固体培养基和尿素固体培养基，涂布接种后需要对玻璃刮刀进行灼烧，其目的是____________________。在尿素固体培养基中有的菌落周围会有红色环带出现，这是由于____________________。
（3）能分解尿素的幽门螺杆菌与消化道疾病的形成密切相关，而乳酸菌可作为药物应用于清除幽门螺杆菌的感染。为筛选出抗幽门螺杆菌最强的乳酸菌，进行如下实验：将培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌后待时灭菌锅盖才能被打开。培养基倒入培养皿内，待冷凝后再将含幽门螺杆菌的培养基加到其上层。在培养基表面直接垂直放上已__________的牛津杯（圆形小管）后，再将3种乳酸菌的发酵液分别加入杯中，为防止液体渗漏牛津杯不能再移动，故培养时应注意____________________，实验结果如下图所示，可见__________（编号）中的乳酸菌抑制作用最强。
答案以及解析
1.答案：C
解析：A、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，A正确；
B、乳酸菌进行无氧呼吸，用水密封泡菜坛是为了营造乳酸菌无氧呼吸条件，B正确；
C、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当氧气充足，缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C错误；
D、酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，制作葡萄酒过程中要适时排气，D正确。
故选C。
2.答案：C
解析：异养型微生物必须从环境中摄取现成的有机物才能生存，此培养基中没有任何有机物，因此可用来培养自养型微生物，A正确；此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，B正确；硝化细菌利用的氮源是NH3，可将氧化成HNO2，进而将HNO2氧化成HNO3，可见，除去①，此培养基不能用来培养硝化细菌，C错误；氨基酸中含有C和N，因此培养基中的氨基酸可充当碳源、氮源，D正确。
3.答案：C
解析：A、醋酸菌是需氧型细菌，产生醋的主要原因是发酵装置中进入了氧气，不是把酒糟封存在缸中，A错误；B、利用酒糟制成醋的本质是醋酸菌可将乙醇转化为了乙酸，B错误；C、发酵产生醋酸的菌种可能来源于空气中，C正确；D、多数醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，D错误。故选C。
4.答案：D
解析：A、泡菜制作初期多种微生物并存，也存在乳酸菌，才可制作到泡菜，A正确；B、乳酸菌是厌氧细菌，密闭发酵产生了厌氧环境，有些菌是好氧的，于是乳酸菌在种间竞争中占据一定优势，B正确；C、发酵过程中，乳酸含量不断增多，酸度不断增长，氧气含量不断减少，直至全部消耗，可以抑制其他微生物的生长，C正确；D、发酵后期，由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制，因此乳酸菌数目不会一直增多，D错误。故选D。
5.答案：B
解析：A、过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，细胞呼吸的第一阶段以及无氧呼吸均发生在细胞质基质中，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，发生在线粒体中，而过程④为果醋制作过程，醋酸菌为需氧型细菌，属于原核生物，没有线粒体，A错误；B、果醋制作过程中，可以通过品尝或用pH试纸检验是否产生醋酸，B正确；C、检测发酵过程中是否有酒精产生，利用的是酸性重铬酸钾来检测，C错误；D、过程①②③是酵母菌的呼吸作用，所需的最适温度基本相同（18～30℃），过程④是醋酸菌的酿醋过程，所需的最适温度在30～35℃，故过程①～④所需的最适温度不相同，D错误。故选B。
6.答案：B
解析：A、亚硝酸盐不是乳酸菌无氧呼吸的产物，乳酸菌无氧呼吸的产物是乳酸，A错误；B、已知硝酸盐还原酶在pH为5.0左右时活性最高。5%盐浓度下，发酵后期乳酸逐渐增多，pH下降，可能使硝酸盐还原酶的活性被抑制，使亚硝酸盐含量下降，B正确；C、在泡菜制作过程中，有机物种类会增加，但有机物的含量会降低，C错误；D、据图可知，发酵5天左右，亚硝酸盐的含量较高，不适合食用，D错误。故选B。
7.答案：B
解析：A、制作泡菜所利用的乳酸菌最初来自于所选蔬菜自身原有的，一般不需要接种，A正确；B、毛霉属于需氧型微生物，B错误；C、发酵过程中蛋白质被蛋白酶分解成小分子的肽和氨基酸，从而使腐乳有了特殊的风味，C正确；D、毛霉和青霉均为异养需氧型，都以豆腐中的有机物为发酵底物，因此，发酵过程中毛霉和青霉为竞争关系，D正确。故选B。
8.答案：C
解析：A、乳酸菌无氧呼吸不会产生二氧化碳，制作泡菜过程中不需要经常放气，A错误；B、腐乳发酵后期，加盐、加卤汤、密封处理等可抑制微生物生长，不利于毛霉繁殖，B错误；C、泡菜坛内的白色菌膜是酵母菌繁殖所致，果酒表面的菌膜是醋酸菌繁殖所致，C正确；D、家庭制作果酒的菌种来源于原料或自然环境，原料不需要灭菌，而工厂化制作果酒，为了达到最佳效果，必须先将原料进行灭菌，然后再接种菌种进行发酵，但菌种都是酵母菌，D错误。故选C。
9.答案：D
解析：A、酵母菌酿酒初期，进行有氧呼吸，然后进行无氧呼吸，发酵后期由于产物积累，影响酒精发酵，因此曲线先从O点开始上升，再下降，A错误；B、在果醋的制作过程中，溶氧量越多，醋酸菌产生乙酸的速率（V2）越快，B错误；C、在利用乳酸菌制作泡菜的过程中，一定时间内泡菜坛内乳酸越来越多，C错误；D、在一个普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，一定时间内随时间的延长，溶液的pH逐渐降低，D正确。故选D。
10.答案：B
解析：A、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，传统发酵技术是通过控制某些条件抑制其他微生物的繁殖，做不到严格无菌，A错误；B、“淋饭”有助于提高发酵原料的透气性，为霉菌的糖化等过程提供氧气，B正确；C、醋酸发酵过程中利用的微生物是醋酸菌，发酵需要充足的氧气，所以“翻缸”目的是提供氧气，C错误；D、后发酵时间不能太长，需要适宜，发酵时间越长，可能会产生其他有害的物质或者滋生其他杂菌，D错误。故选B。
11.答案：C
解析：A、果酒发酵的菌种是酵母菌，酵母菌属于真核生物，果醋发酵菌种是醋酸菌，属于原核生物，A正确；B、果酒、果醋发酵的菌种生活的温度条件不同，可以通过控制发酵温度实现对微生物类型的控制，B正确；C、果醋制作过程中，醋酸菌有氧呼吸产生CO2和水，CO2溶于水形成碳酸，随着CO2浓度的增加，溶液的pH逐渐降低；果酒制作过程中，酵母菌无氧呼吸产生CO2与酒精，CO2溶于水形成碳酸，随着CO2浓度的增加，溶液的pH逐渐降低，因此果酒、果醋制作过程中溶液的pH都是逐渐降低的，C错误；D、泡菜发酵的实验原理是乳酸菌在无氧条件下将糖分解为乳酸，D正确。故选C。
12.答案：D
解析：A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，A错误；B、单细胞蛋白是指微生物菌体，B错误；C、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和酒精的生成是在主发酵完成，C错误；D、利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料能通过固氮提高土壤肥力进而促进植物的生长，D正确。故选D。
13.答案：B
解析：A、识图分析可知，过程④是醋酸菌在缺少糖源时，将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，过程⑤是醋酸菌在氧气、糖源充足时，将葡萄糖转变成醋酸，A错误；B、识图分析，图中①②过程为酒精发酵，过程①为细胞呼吸的第一阶段，发生在细胞质基质中，过程②为无氧呼吸的第二阶段，也发生在细胞质基质中，B正确；C、识图分析，过程③为有氧呼吸的第二、三阶段，其中第三阶段需要氧气的参与，图中④⑤均为醋酸发酵，醋酸菌为好氧性细菌，因此④⑤均需要氧气的参与，图中①②过程为酒精发酵，不需要氧气的参与，C错误；D、进行果醋发酵的微生物为醋酸菌，醋酸菌属于原核生物，细胞内无染色体存在，D错误。故选B。
14.答案：B
解析：A、一般发酵食品中的酵母菌细胞中能合成半乳糖酶，因此能利用半乳糖，A正确；B、乳酸菌是厌氧型细菌，只能进行乳酸发酵，B错误；C、平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，C正确；D、马奶酒酵母菌株能优先利用半乳糖的原因可能是其发生了基因突变，D正确。故选B。
15.答案：C
解析：A、实验的目的是检测鲜奶中的细菌数，若使用湿热灭菌法处理鲜奶，则鲜奶就不含有细菌了，A错误；B、若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行，B错误；C、从图中可以看出涂布时添加的0.1mL的鲜奶共稀释了10×10×10×10=104倍，所以1mL鲜奶中细菌数为（35+33+34）÷3×104×10=3.4×106个/mL，C正确；D、使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。故选C。
16.答案：D
解析：A、接种室、接种箱等常用紫外线消毒法处理，接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；B、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而称量、溶化、配制培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，因为培养基最后还需要灭菌，B错误；C、倒好的平板需要冷却后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影响接种后微生物的生长，C错误；D、将平板倒置放入适宜温度的恒温培养箱中培养，防止冷凝水滴落影响微生物生长，D正确。故选D。
17.答案：B
解析：A、实验室中检测培养基是否被污染，一般在倒平板后，对空白培养基进行培养，A正确；B、在接种箱或超净工作台的使用之前，可用紫外线照射30min来进行消毒，B错误；C、空气中的微生物可能在皿盖和皿底之间的培养基上滋生，因此若培养皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌，C正确；D、高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min，D正确。故选B。
18.答案：A
解析：A、①属于倒平板操作，盖上培养皿的皿盖后需冷却凝固后才能将平板倒置，A错误；B、②中在火焰上灼烧过的接种环需冷却后才能伸入菌液中蘸取菌液，以免杀死菌种，B正确；C、③属于涂布平板操作，涂布时可转动培养皿使菌液分布均匀，C正确；D、④属于平板划线操作，操作时注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连，D正确。故选A。
19.答案：(1)杂菌的污染
(2)酵母菌；酸性重铬酸钾
(3)醋酸菌；平板划线
(4)开启；pH
解析：（1）过程①如果先切块，则内部组织容易被杂菌污染，所以应先清洗后切块，以减少杂菌污染。
（2）参与果酒发酵的微生物是酵母菌，其产生的酒精可用酸性重铬酸钾鉴定，颜色由橙色变成灰绿色。
（3）在变酸的酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用平板划线把它们接种到固体培养基上，经培养得到肉眼可见的菌落。
（4）参与果醋制作的醋酸菌是嗜氧菌，因此过程④需要将发酵装置中的充气口开关开启。果醋的制作是否成功，除了通过观察菌膜的形成、嗅味和品尝进行初步鉴定外，还可以通过检测和比较醋酸发酵液前后的pH值进一步鉴定。
20.答案：（1）液体;固体
（2）稀释涂布平板法;8.5×105;小;当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（3）显微镜直接计数;血细胞计数板;大
解析：（1）微生物扩大培养需要用液体培养基，而要得到单菌落，需要接种到固体培养基进行纯化培养。
（2）分析题图菌落的分布情况可知，所用接种方法为稀释涂布平板法。
分析题图可知，接种到平板培养的菌液稀释倍数为103四个平板中有一个平板的菌落数为33，与其他三个平板相比，误差较大，应舍去，即可以用于计算的菌落数分别是87、83、85，（87+83+85）÷3=85，因此推测1mL用于接种的菌液中目的菌数为85÷0.1×103=8.5×105（个）。利用该方法得到的结果可能偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（3）除上述计数法之外，利用显微镜进行直接计数，也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，比稀释涂布平板法统计的结果大。
21.答案：（1）过滤；尿素高温易分解
（2）杀死玻璃刮刀上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者；有的细菌会产生脲酶，脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，从而使培养基中的酚红由黄色变成红色
（3）灭菌；轻轻加压，使牛津杯与培养基接触无空隙；③
解析：
（1）因为尿素高温易分解，不能用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，G6玻璃砂漏斗孔径小，细菌不能滤过，故尿素溶液用灭菌过的G6玻璃砂漏斗进行过滤灭菌。
（2）在进行稀释涂布平板法进行接种时，涂布接种后需要对玻璃刮刀进行灼烧，其目的是灼烧能及时杀死玻璃刮刀上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者。在尿素固体培养基中有的细菌会产生脲酶，脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，从而使培养基中的酚红由黄色变成红色，因此在尿素固体培养基中有的菌落周围会有红色环带出现。
（3）为了防止杂菌污染，在培养基表面直接垂直放上已灭菌的牛津杯（圆形小管）。再将3种乳酸菌的发酵液分别加入杯中，为防止液体渗漏牛津杯不能再移动，应轻轻加压，使牛津杯与培养基接触无空隙。乳酸菌可应用于清除幽门螺杆菌的感染。②③乳酸菌都能形成抑菌圈，且乳酸菌③的抑菌圈更大，可见③中的乳酸菌对幽门螺杆菌的抑制作用最强。第1章 发酵工程（基础夯实）——高二生物学浙科版（2019）选择性必修三单元测试卷
一、单项选择题：本题共18小题，每题3分，共54分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.下列关于果酒和果醋制作的叙述，正确的是( )
A.葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵
B.变酸的果酒表面形成的菌膜可能是醋酸菌繁殖形成的
C.果醋制作过程中打开发酵瓶是因为全过程需要通入氧气，排出二氧化碳
D.制作果酒和果醋时都应用质量分数为50%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作
2.关于“发酵食品加工的基本方法”的叙述中，错误的是( )
A.果酒制作中，对葡萄进行多次反复冲洗以防止杂菌污染
B.果酒制作过程中，若发酵条件控制不当果酒可能变酸
C.果醋制作相对于果酒制作所需的发酵温度更高
D.果醋制作过程中，应连续充入无菌空气以利于醋酸发酵
3.某高校采用发酵罐进行葡萄酒发酵。下列叙述正确的是( )
A.可以采用过滤、沉淀等方法来获得葡萄酒
B.发酵工程中的中心环节是分离和提纯产物
C.可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵
D.在发酵工程中培养基需经过严格的灭菌，而发酵设备则保持干净不需灭菌
4.传统发酵过程中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是( )
A.制作好葡萄酒后打开瓶盖，盖上纱布，并且提高温度才能制作葡萄醋
B.泡菜发酵后期，乳酸菌占优势，需定期开盖放气
C.制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没大部分菜料
D.果酒与果醋发酵时温度宜控制在18～25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30～35℃
5.下列关于传统发酵食品制作的说法，正确的是( )
A.制作泡菜过程中，有机物的干重和种类将减少
B.泡菜的制作前期需要通入氧气，后期应严格保持无氧环境
C.果醋发酵过程中需要不断充气，控制发酵温度为30～35℃
D.醋酸菌对氧气敏感，因此其细胞呼吸方式为有氧呼吸，场所为细胞质基质和线粒体
6.传统发酵技术制作的食品是我国饮食文化的重要组成部分，下列有关说法错误的是( )
A.腐乳的制作中有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉
B.白萝卜制作泡菜的过程中,用沸水短时处理可抑制某些微生物的繁殖，但会延长腌制时间
C.先酿制果酒再生产果醋是因为果酒的发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率
D.微生物发酵产生了不同的代谢物使得臭豆腐具有特殊的味道
7.酸笋是我国一种传统发酵制品，由新鲜竹笋经乳酸菌发酵后形成,是南方地区日常食用的烹饪食材。目前，我国的酸笋发酵生产工艺主要分为两种，一为传统酸笋自然发酵，二为纯种发酵法。下列关于两种发酵法的叙述错误的是( )
A.传统酸笋自然发酵是利用新鲜竹笋表面的微生物进行发酵
B.进行纯种发酵时需要人为地添加经纯化培养的菌种进行发酵
C.传统发酵方法简单、成本低、发酵时间短，但品质不可控
D.相对于传统发酵，纯种发酵液中乳酸菌的数量更多
8.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是( )
A.将外植体插入诱导愈伤组织形成的培养基时需在酒精灯火焰旁进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.无菌操作时对操作的空间、操作者的衣着和手要进行清洁和灭菌
9.研究者从某种海洋微生物中分离了一种新的抗真菌药物，为治疗真菌感染提供新思路。下列有关药物研制或生产叙述错误的是( )
A.按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配置的培养基具有选择作用
B.用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，纯化海洋微生物
C.用固体培养基培养物微生物获得次级代谢产物，用于抗真菌活性检测
D.获得目的微生物后，可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生产量
10.产脂肪酶细菌可用于含油废水处理，在含有底物的培养基上可分解脂肪形成肉眼可见的透明圈。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株。筛选具体流程如图所示，相关叙述正确的是( )
A.步骤①取土壤样品灭菌后溶于无菌水中制成菌悬液
B.步骤③中菌落周围的透明圈越大，其脂肪酶活性不一定越高
C.产脂肪酶的细菌进行培养时应放在4℃的恒温箱中培养
D.步骤②的固体平板是以脂肪为唯一碳源和氮源的选择培养基
11.为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是( )
A.采样时应随机采集植物园中多个不同地点的土壤样本
B.培养细菌时，可选用牛肉膏蛋白胨固体培养基
C.土壤溶液稀释倍数越低，越容易得到单菌落
D.鉴定细菌种类时，除形态学鉴定外，还可借助生物化学的方法
12.培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是( )
A.培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性
B.配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁
C.所有培养基中都含有水、无机盐、碳源、氮源等基本的物质
D.传代培养杂交瘤细胞时，培养基中需加胶原蛋白酶以分散细胞
13.获得纯净微生物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术的发展应围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列有关无菌技术的说法，正确的是( )
A.配制固体培养基时，应该先倒平板再进行湿热灭菌
B.对于实验者的衣物、手及涂布器等不应进行灭菌，只要消毒即可
C.用过的培养基应该灭菌后再丢弃，长时间未使用的培养基仍然可直接使用
D.在用平板划线法接种过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线
14.药物敏感试验简称药敏试验，旨在了解某病原微生物对各种抗生素的敏感程度，以指导临床合理选用抗生素。纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法，在纸片周围会形成透明的抑菌圈。下列叙述正确的是( )
A.图1所示操作需待培养基冷却至50℃左右时进行，不需要在酒精灯旁操作
B.图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落可能是该病原微生物发生了基因突变
C.进行药敏试验，需将平板上布满测试菌，需使用的接种工具是接种环
D.接种后的平板在培养时的放置应如图2中②所示，可以防止污染
15.下列有关细菌培养的叙述，正确的是( )
A.细菌的纯培养物指不含有代谢废物的细菌培养物
B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风芽孢杆菌的生长
D.培养细菌时一般将培养基调至中性或弱碱性
16.平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是( )
A.不含氮源的平板不能用于微生物培养
B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒
C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃
D.稀释涂布平板法可统计样品中的活菌数
17.如图为酵母菌纯培养的部分操作过程示意图，下列相关叙述正确的是( )
A.①②③步骤的完成均需要在酒精灯火焰附近操作以防止杂菌污染
B.②步骤中用接种环蘸取一环菌液后应立即将试管直接塞上棉塞
C.③到④的过程中接种环共灼烧4次，而且1区和5区的划线不能相连
D.将接种后的平板放入28℃左右的恒温培养箱中培养24～48h
18.培养基是指供给微生物、植物或动物细胞（或组织）生长繁殖的，由不同物质组合配制而成的营养基质。针对下表中的三组培养基，下列叙述错误的是( )
组别 培养基成分
a 蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水
b 葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖
c 矿质元素、蔗糖、维生素、甘氨酸、水、琼脂
A.a组培养基可用于醋化醋杆菌的扩大培养，该培养过程需用到磁力搅拌器和摇床
B.b组培养基可用于分离含脲酶的微生物，该实验中需用全营养LB固体培养基作对照
C.c组培养基可用于诱导植物愈伤组织再分化，添加的植物生长调节剂需先高温灭菌
D.上述培养基不仅要为相应的细胞提供营养物质还要为其生存和繁殖提供适宜的环境
二、非选择题：本题共3小题，共46分。
19.（12分）根据相关知识，回答下列问题：
（1）以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，请分析回答：
①图1中甲过程利用的微生物是____________，其细胞结构中____________（填“含有”或“不含”）线粒体。甲过程发酵温度控制在18~30℃，经过10~12d，样液中是否含有酒精，可以用____________来检验，其原理是在____________条件下，该物质和酒精反应呈现____________色。
②若利用图2所示装置制作果醋，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是____________。为了更好地获得产品，还可以在____________上做进一步改进。
③利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是____________。
（2）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由：____________。
20.（16分）磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：
（1）经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为____________个。
（2）通常情况下，对获得的纯菌种可以依据____________对细菌进行初步的鉴定和分类。
（3）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量。用摇床进行培养的好处是____________。（答出2点）获得纯淀粉分解菌的关键是____________。
（4）图5的接种方法中接种环至少需要灼烧____________次。
21.（18分）尿素是一种重要的农业肥料，需经细菌分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌的有关问题，请回答。
（1）如图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步____________到培养基的表面。除此方法外，获得纯培养物的接种方法还有____________。
（2）在培养基上进行划线操作中，在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是____________。
（3）下面是两种培养基配方：
表1：A培养基配方
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 H2O
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 1000mL
表2：B培养基配方
纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4·7H2O KH2PO4 MgSO4·7H2O KCl 酵母浸膏 H2O
5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 1000mL
①微生物纯培养的操作步骤：____________（用字母顺序回答）。
a.接种b.配制培养基c。灭菌d。分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择____________（填“A”或“B”）配方的培养基，在该培养基中加入酚红指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。
③据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是____________（“自养型”或“异养型”）。
（4）三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，取0.2mL稀释液涂布，得到以下统计结果：
甲同学涂布了1个平板，统计的菌落数是260；
乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是210、240和246，取平均值232；
丙同学涂布了3个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
在三位同学的统计中，____________同学的统计结果是相对准确可信的。按照该同学的结果，每毫升原液中的菌体数是____________。用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量____________。
答案以及解析
1.答案：B
解析：葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大于1/3的空间，因为发酵过程中会产生二氧化碳，A错误；变酸的酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的，B正确；果醋制作过程中打开发酵瓶是因为全过程需要通入氧气，但不会排出二氧化碳，C错误；发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，D错误；因此，本题答案选B。
2.答案：A
解析：A、果酒制作中，不能对葡萄进行多次反复冲洗，以防止菌种流失，A错误；B、果酒制作过程中，若发酵条件控制不当，可能有醋酸菌混入进行醋酸发酵使果酒变酸，B正确；
果醋发酵最适温度为30－35℃，果酒发酵最适温度为18－25℃，因此果醋制作所需的发酵温度更高，C正确；
醋酸菌是好氧菌，果醋制作过程中，应连续充入无菌空气以利于醋酸发酵，D正确。故选A。
3.答案：C
解析：A、发酵工程生产的产品不同，分离提纯的方法一般不同：①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取，葡萄酒属于发酵产品，应用萃取、蒸馏等方法获得，A错误；B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；C、发酵液中残留糖的浓度可指示发酵的进程，随着发酵的进行，当发酵液中糖的浓度降到较低水平时，酵母代谢减慢，此时可终止发酵，C正确；D、在发酵工程中，为了获得纯净培养物，防止外来杂菌的污染，培养基和发酵设备都应经过严格的灭菌才能使用，D错误。故选C。
4.答案：A
解析：A、醋酸菌为需氧菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，打开瓶盖，盖上纱布，还需要适当提高发酵装置的温度才能制作葡萄醋，A正确；B、乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，B错误；C、制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢出，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，C错误；D、果酒和果醋制作所需的温度不同，其中果酒发酵时温度宜控制在18-30℃，果醋发酵时温度宜控制在30-35℃，泡菜的制作温度要低于30℃，D错误。故选A。
5.答案：C
解析：A、制作泡菜的过程中，乳酸菌无氧呼吸作用消耗有机物，有机物的干重降低，但由于一些中间物质的产生，有机物的种类将增多，A错误；B、乳酸菌是厌氧菌，泡菜的制作过程中都应严格保持无氧条件，B错误；C、果醋发酵时要接种醋酸杆菌（异养需氧型），将温度控制在30℃～35℃，且需要营造有氧环境，C正确；D、醋酸菌是原核生物，无线粒体，D错误。故选C。
6.答案：B
解析：腐乳的制作中有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉，A正确；用沸水短时处理可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品质，也会缩短腌制时间，B错误；先酿制果酒，产生的酒精能杀死一部分杂菌，有利于醋酸菌生长，进而提高果醋的产率，C正确；微生物发酵将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为不同的代谢物，使得臭豆腐具有特殊的味道，D正确。
7.答案：C
解析：相对于纯种发酵，传统发酵存在发酵时间过长的问题，C错误。
8.答案：A
解析：A、在酒精灯火焰旁（防止杂菌污染），将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中，A正确；B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养不能加入抗生素，B错误；C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；D、无菌操作时，对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行消毒，D错误。故选A。
9.答案：C
解析：A、按海水的成分和浓度添加相应的无机盐配置的培养基具有选择作用，目的是选择海洋微生物，A正确；B、分离和纯化最常用固体培养基，固体培养基上接种的方法通常是平板划线法和稀释涂布平板法，即用接种环在培养基表面对样品连续划线、逐步稀释，可得到海洋微生物的单菌落，B正确；C、获得代谢产物需要借助液体培养基，即用液体培养基培养微生物可从培养液汇总获得次级代谢产物，用于抗真菌活性检测，C错误；D、利用基因工程的手段可以定向改造生物获得符合人类需要的产品，因此，获得目的微生物后，可进一步利用基因工程方法调节代谢途径提高生产量，D正确。故选C。
10.答案：B
解析：A、土壤样品中包含目的菌株，进行灭菌会杀死所有微生物包括要培养的目的菌株，所以不可以进行灭菌处理，A错误；B、透明圈与菌落的比值越大，说明该菌株脂肪酶活性越高，步骤③中菌落周围的透明圈越大，其脂肪酶活性不一定越高，B正确；C、产脂肪酶的细菌进行培养时，将培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，C错误；D、要筛选可以产生脂肪酶的细菌，需要用以脂肪作为唯一碳源的固体培养基，D错误。故选B。
11.答案：C
解析：A、采集植物园中土壤样本的原则之一是要随机采样，A正确；B、牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培养，B正确；C、土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的细菌分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C错误；D、不同种类细菌的理化特性一般不同，鉴定细菌种类时，除根据菌落特征进行形态学鉴定外，还可以借助生物化学的方法进行鉴定，D正确。故选C。
12.答案：B
解析：A、培养霉菌时需将pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或是微碱性，A错误；B、在配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁操作，因为之后有灭菌处理，B正确；C、培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐等物质，但并不是所有培养基中都含有碳源或氮源，如筛选自养微生物时不需要添加碳源，C错误；D、因为杂交瘤细胞没有接触抑制现象，所以传代培养杂交瘤细胞时，培养基中不需加胶原蛋白酶以分散细胞，D错误。故选B。
13.答案：D
解析：A、配制好的培养基先灭菌后再进行倒平板，这样做可以最大程度上避免其他杂菌对培养基和实验室的污染，A错误；B、对于实验者的衣物、手不应进行灭菌，只要消毒即可，而涂布器需要经过灭菌，B错误；C、使用过的微生物培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃，以防止杂菌污染环境，长时间未使用的培养基不可再使用，C错误；D、在用平板划线法接种的过程中，应将经灼烧灭菌的接种环冷却后再在固体培养基上划线，避免高温杀伤菌种，D正确。故选D。
14.答案：B
解析：A、图1所示操作是倒平板，需要在酒精灯旁操作，以防止杂菌污染，A错误；B、图3中Ⅳ的抑菌圈中出现了部分菌落可能是该病原微生物发生了基因突变，产生了耐药性，从而存活下来，B正确；C、进行药敏试验，需将平板上布满测试菌，利用的接种方法是稀释涂布平板法，需使用的接种工具是涂布器，C错误；D、接种后的平板在培养时需要倒置培养，即图2中①所示，图2中②是培养皿正置，倒置培养既能防止培养基中水分过快蒸发，又能防止冷凝形成的水珠倒流，D错误。故选B。
15.答案：D
解析：A、细菌的纯培养物指由单一细菌繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，A错误；B、青霉素能够破坏细菌的细胞壁而抑制细菌的生长繁殖，但对真菌无明显影响，B错误；C、向液体培养基中通入氧气能抑制破伤风杆菌的生长，因为破伤风杆菌为厌氧菌，C错误；D、在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，D正确。故选D。
16.答案：D
解析：A、不含氮源的平板可用于固氮菌的培养，A错误；B、平板涂布时，涂布器在使用前必须浸在酒精中，使用时将涂布器放在火焰上灼烧灭菌，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布，B错误；C、接种后即使未长出菌落的培养基在丢弃前也要进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；D、稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，D正确。故选D。
17.答案：A
解析：A、①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，为防止杂菌污染，①②③步骤的完成均需要在酒精灯火焰附近操作，A正确；B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞，B错误；C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，③到④的过程中接种环共灼烧6次，C错误；D、培养酵母菌时，将接种后的平板倒置放入28℃左右的培养箱内中培养24～48h，D错误。故选A。
18.答案：C
解析：A、a组培养基可用于醋化醋杆菌的扩大培养，磁力搅拌器和摇床都是扩大菌落与其所需要的营养物质的接触面积，利于菌落的培养，A正确；B、b组培养基以尿素作为唯一氮源，含脲酶的微生物在该培养基上能生长，其它微生物在该培养基上因缺乏氮源而不能生长，可用于分离含脲酶的微生物，该实验中需用全营养LB固体培养基作对照，通过对照可以判断选择培养基的选择作用，B正确；C、c组培养基不含生长素和细胞分裂素等植物激素，不能用来诱导植物愈伤组织再分化，C错误；D、上述培养基不仅要为相应的细胞提供营养物质，还要为其生存和繁殖提供适宜的环境，以利于其正常生长，D正确。故选C。
19.答案：（1）酵母菌；含有；重铬酸钾；酸性；灰绿；避免空气中其他微生物进入发酵装置；充气口填充棉花或安装过滤装置；C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量
（2）支持A的观点，乳酸菌代谢过程中不产生气体
解析：（1）①图1甲过程是酒精发酵，因此使用的微生物是酵母菌；酵母菌属于真核生物，含有线粒体；检测酒精可以使用酸性重铬酸钾溶液进行检测，在酸性条件下会从橙色变为灰绿色。②果醋发酵利用的是醋酸菌，是需氧型菌，因此充气口要打开，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的目的是避免空气中其他微生物进入发酵装置；为了更好地获得产品，还可以在充气口填充棉花或安装过滤装置上做进一步改进。③利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是：C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O＋能量。
（2）市场上购买的真空包装酸菜，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，说明有气体产生，乳酸菌代谢过程中不产生气体，因此支持A同学的观点。
20.答案：（1）3.8×106
（2）菌落（的形状、大小、颜色等）特征
（3）增加培养液中的溶氧量，使菌株与培养液充分接触，有利于物质交换；防止杂菌污染
（4）4
解析：（1）取10g土壤加入90mL无菌水中，相当于稀释了10倍。步骤③进行了3次稀释，每次稀释了10倍，则共将土壤悬浮液稀释了10000倍，则每克土样中的活菌数为（39+38+37）÷3÷0.1×104=3.8×106个。
（2）不同的微生物具有特定的菌落特征，所以可通过观察菌落的形状、大小、颜色等特征对细菌进行初步的鉴定和分类。
（3）用摇床进行培养，可以增大培养液中溶氧量，促进微生物的有氧呼吸，还能够增加菌体与培养液的接触，有利于物质交换，提高营养物质的利用率。获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。
（4）由图中所示接种方法可以看出，一共划线了3次，每次划线前需要灼烧接种环，最后一次划线后需要灼烧接种环，因此接种环一共需要灼烧4次。
21.答案：（1）平板划线；稀释；稀释涂布平板法
（2）灭菌
（3）bcad；A；异养型
（4）乙；1.16×109；少
解析：（1）图中的接种工具是接种环，且在培养基表面划线，故图中是利用平板划线法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分离到培养基的表面，从而获得单菌落；除此之外，常用的微生物接种方法还有稀释涂布平板法。
（2）平板划线操作的第一步之前要灼烧接种环，目的是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基；平板划线除首次划线外，在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是使划线的菌种来自上次划线的末端，即要灭菌处理；平板划线结束时要灼烧接种环，其目的是避免接种环上残留的菌种污染环境和感染操作者。
（3）①微生物纯培养的操作步骤是b配制培养基、c灭菌、a接种和d分离和培养。②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述以尿素为唯一氮源的培养基，即B培养基；在该培养基中加入酚红指示剂，尿素分解菌能够将尿素分解为氨，从而使酚红指示剂变红，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。③B培养基的成分中，碳源为有机物，所培养微生物的同化作用类型是异养型。
（4）分析题意，甲同学只涂布了1个平板，实验数据说服力不够，丙同学其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，数据缺乏正确性，所以乙同学的统计结果是相对准确可信的；微生物统计时，应选择菌落数在30-300之间的进行计数，按照该同学的结果，每克样品中的菌落数=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=232÷0.2×106=1.16×109；由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落，因此用这种方法测得的菌体数比实际活菌数量少。

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