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第2章 细胞工程（能力提升）——高二生物学苏教版（2019）选择性必修三单元测试卷
一、单项选择题：本题共13小题，每题3分，共54分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.胚状体是指离体培养条件下，植物的一个或一些细胞未经受精过程但经过了胚胎发育过程形成的胚状类似物。用人工薄膜包裹胚状体及提供营养的胶质可制成人工种子。下列说法错误的是( )
A.人工薄膜、胶质分别相当于种皮、胚乳
B.胚状体的形成需经脱分化、再分化过程
C.提供营养的胶质中也可添加一些除草剂
D.与自然种子相比，人工种子发生变异的概率更高
2.科研人员将拟南芥根段作为组织培养材料，在激素诱导下形成愈伤组织，并进一步发育为植株。下列叙述正确的是( )
A.激素诱导会改变根细胞的遗传物质
B.愈伤组织细胞只能分化不能分裂
C.高度分化的植物细胞具有全能性
D.植物组织培养利于增加拟南芥的多样性
3.下列实验步骤错误的是( )
A.植物原生质体A+植物原生质体B→灭活病毒→筛选→杂交原生质体
B.淋巴细胞＋骨髓瘤细胞→细胞融合→两次筛选→产生特定抗体的杂交瘤细胞
C.动物组织→胰蛋白酶→细胞悬液→原代培养→传代培养
D.离体细胞消毒、接种→脱分化→愈伤组织→再分化→试管苗
4.科学家通过体外诱导成纤维细胞，获得了类似干细胞的一种细胞，称为诱导多能干细胞（iPS细胞）。下列关于干细胞的叙述，错误的是( )
A.干细胞是从早期胚胎中分离提取的细胞
B.一般认为，精原干细胞和神经干细胞只能分化成特定的细胞或组织
C.iPS细胞除了可由成纤维细胞转化而来，还可由已分化的T细胞和B细胞诱导转化而来
D.由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用
5.为探究提高丹东蓝莓品质和产量的新途径，某生物兴趣小组以丹东蓝莓的主要品种——H5蓝莓为实验材料进行脱毒处理，其技术路线为：取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽。下列有关叙述错误的是( )
A.取材时可选用HS蓝莓的芽尖，芽尖细胞处于离体状态时才有可能表现出全能性
B.用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液对外植体消毒时，要控制好时间，以避免对其造成伤害
C.诱导H5蓝莓的愈伤组织期间及后续培养过程中，都需要给予一定强度的光照
D.脱分化会使外植体失去其特有的结构和功能，形成的愈伤组织中不含有叶绿体
6.我国科学家利用基因编辑技术，获得一只生物节律核心基因BMAL1敲除的猕猴。取其成纤维细胞与去核的卵母细胞融合，发育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，获得5只克隆猴，用于研究节律机制。以下叙述错误的是( )
A.克隆猴基因组成差异小，作为实验动物便于研究
B.可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
C.受精卵经基因编辑后形成的胚胎可发育为克隆猴
D.克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
7.下列关于动物细胞培养和植物细胞培养的叙述，正确的是( )
A.动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物细胞培养的原理是植物细胞的全能性
B.植物细胞培养的主要目的是获得植物在生长和生存过程中必需的次生代谢物
C.在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞可以直接用离心法收集
D.动物细胞培养需在培养基中添加血清等天然成分，并将它们置于95%O2和5%CO2的气体环境中培养
8.将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是( )
A.“合子”第一次分裂后形成的细胞已失去全能性
B.肠细胞不能表达全能性可能是受某些物质的限制
C.“合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着细胞分化
D.“合子”细胞通过有丝分裂进行增殖
9.某杂种植株的获取过程如图所示，下列叙述正确的是( )
A.叶片消毒后，可用自来水冲洗以避免消毒时间过长产生毒害
B.过程①中，应将叶片置于含有纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中
C.过程③中，可使用聚乙二醇或灭活的病毒来诱导原生质体融合
D.过程④中.杂种细胞经脱分化形成愈伤组织的过程体现了植物细胞的全能性
10.如图为猪输卵管上皮细胞培养过程示意图。下列有关叙述不正确的是( )
A.丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象
B.甲→乙、丙→丁这两个过程需要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
C.为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气
D.丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基中进行
11.植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。下列叙述错误的是( )
A.植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理
B.经纤维素酶和果胶酶充分处理后，植物细胞团分散为单个完整的悬浮细胞
C.为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压
D.利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗
12.大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错误的是( )
A.体细胞核移植过程中只能通过显微操作方法去除细胞核
B.体细胞核移植过程中用的受体细胞是发育到MⅡ时期的卵母细胞
C.重构胚需要用电刺激、Ca2＋载体等手段进行激活
D.用体细胞核移植技术克隆出大熊猫，体现了动物细胞核具有全能性
13.不同物种之间存在着天然的生殖隔离，利用传统的有性杂交的方法很难得到杂种后代。科学家采用体细胞杂交的方法得到了“番茄—马铃薯”杂种植株。图为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，所含有的染色体组分别是AA和BB。下列叙述错误的是( )
A.植物体细胞杂交实现的基础是细胞膜的流动性
B.①过程是用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
C.甲乙进行体细胞杂交产生的杂种植株的染色体组是AB
D.杂种植株遗传物质来自两个亲本，但未表现出双亲的所有性状
二、多项选择题：本题共5小题，每小题5分，共25分。在每小题给出的四个选项中，有不止一个选项是符合题目要求的。全部选对得5分，选对但选不全得3分，有选错得0分。
14.中药材怀菊含有多种活性物质，具有精热、明目等功效。植物组织培养技术可用于怀菊的脱毒和快速繁殖。下列叙述正确的是( )
A. 怀菊中含有的次生代谢物通常是怀菊基本生命活动所必需的
B.怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传
C.利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗
D.生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的小
15.胚胎移植、胚胎分割过程中很多操作环节都需进行检查，下列叙述正确的是( )
A.体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力
B.胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查
C.进行胚胎移植前需要对供体和受体进行免疫检查
D.胚胎移植时滋养层细胞将来会发育成胎膜胎盘
16.科研人员将复苏128代含血清冻存的非洲绿猴肾（Vero）细胞传代至136代后，用无血清冻存液制备成无血清Vero细胞库，随后从中取出1mL细胞补加9mL无血清培养基进行培养，结果如图。下列相关叙述正确的是( )
A.使用无血清培养可保证实验的连续性
B.②处细胞的生长速率较①处细胞慢
C.潜伏期的大部分细胞贴壁后开始分裂
D.更换培养基对衰退期细胞数量下降无影响
17.人的乳腺癌包含HER2（肿瘤细胞表面一种过量表达的受体，可作为治疗靶点）高表达、低表达等类型。目前，抗体药物偶联物T-DXd已经获得相关认定,被用于治疗乳腺癌。在临床试验中，科学家发现T-DXd对于HER2表达水平不同的乳腺癌均表现出非常好的疗效，将疾病进展风险降低了一半。对此说法错误的是( )
A.也可以选择细胞呼吸酶作为抗原,来制作特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体
B.培养杂交瘤细胞时需要加入CO2,目的是调节气体环境，刺激细胞呼吸
C.制备单克隆抗体时利用选择培养基可以获得产生特定抗体的杂交瘤细胞
D.T-DXd对HER2表达不同的乳腺癌均有疗效说明单克隆抗体特异性强、灵敏度高
18.2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线：下列叙述错误的是( )
A.卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿”
B.该技术可以有效避免母亲线粒体DNA中的致病基因遗传给后代
C.捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的蛋白质—染色体复合物
D.“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
三、非选择题：本题共3小题，共36分。
19.（10分）科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄一马铃薯”植株，请回答下列问题：
（1）获得a、b所选用的酶为____________。植物体细胞杂交依据的生物学原理主要有____________。
（2）过程②为原生质体融合，所用的化学诱导剂一般是____________，③过程成功的标志是____________。
（3）诱导f中植株生根的过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较4过程____________（填“高”或“低”）；若番茄细胞内含m条染色体，马铃薯细胞内含n条染色体，则“番茄一马铃薯”杂种植株的体细胞内含____________条染色体，最终获得的“番茄一马铃薯”属于____________倍体植株，则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？____________。
20.（13分）2018年1月25日报道，两只克隆猕猴“中中”和“华华”在中国诞生，突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题，将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景，图为过程流程图，请回答下列有关问题：
（1）动物细胞培养一般分为____________和传代培养两个阶段过程。在前一阶段，贴壁的细胞会出现____________现象，所以要进行传代培养。
（2）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是____________。
（3）①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至____________时期再进行，目前使用的去核方法是____________。
（4）在猕猴体细胞核移植实验中，若最终获得的克隆猴与供体猴性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因：____________。
（5）上述过程中涉及的动物细胞工程技术有____________。克隆猴的成功，说明了动物____________具有全能性。
21.（13分）图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：
（1）图中向小鼠注射含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有____________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它____________，并能大量制备。
（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有____________的特性；诱导融合的方法有____________（至少写出两种）
（3）图中两次筛选的目的不同，先用特定的____________培养基进行第一次筛选，其目的是____________；还需要进行____________和____________，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和____________两大技术，其中动物细胞融合技术的意义是：____________。
答案以及解析
1.答案：D
解析：人工薄膜相当于种皮，提供营养的胶质相当于胚乳，A说法正确；由题意可知，制作人工种子的胚状体一般由植物的体细胞经过离体培养得到，因此胚状体的培育需要经过脱分化和再分化过程，B说法正确；为提高人工种子的效果，可在提供营养的胶质中添加一些除草剂，以抑制人工种子周围杂草的生长而有利于人工种子的萌发和生长，C说法正确；体细胞胚是由无性繁殖体系产生的，因此人工种子不易发生变异，能够保持优良品种的遗传特性，与之相比自然种子更容易发生变异，D说法错误。
2.答案：C
解析：激素诱导会影响基因的表达，但是不会改变根细胞的遗传物质，A错误；愈伤组织细胞分化程度低，既能分化也能分裂，B错误；高度分化的植物细胞仍具有全能性， C正确；植物组织培养属于无性繁殖，不利于增加拟南芥的多样性，D错误。
3.答案：A
解析：A、原生质体A和原生质体B融合采用物理方法（离心、振动、电激）和化学方法（聚乙二醇），灭活病毒可用于动物细胞融合，A错误；B、浆细胞（属于淋巴细胞）和骨髓瘤细胞融合，需要筛选两次，筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞），筛选出能够产生特异性抗体的细胞群，B正确；C、胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行原代培养，由于存在接触性抑制，再用胰蛋白酶能将组织细胞分散开来，进行传代培养，C正确；D、植物组织培养过程中，离体细胞消毒、接种，然后脱分化形成愈伤组织，再分化形成试管苗，D正确。故选A。
4.答案：A
解析：A、胚胎干细胞是从早期胚胎中分离提取的细胞，而干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，成体干细胞可取自骨髓等，A错误；B、一般认为，成体干细胞具有组织特异性，精原干细胞和神经干细胞只能分化成特定的细胞或组织，B正确；C、iPS细胞（诱导多能干细胞）除了可由成纤维细胞转化而来，还可由已分化的T细胞和B细胞诱导转化而来，C正确；D、目前普遍认为iPS细胞的应用前景较广，由iPS细胞产生的特定细胞，可以在新药的测试中发挥重要作用，D正确。故选A。
5.答案：C
解析：A、分裂旺盛的细胞更容易表现全能性，可选用芽尖，体细胞离体才能表现全能性，否则基因选择性表达，A正确；B、酒精和次氯酸钠均可破坏蛋白质的结构，消毒需要控制时间，B正确；C、光可以诱导分化，故培养愈伤组织时需要无光条件，而光能诱导叶绿素形成，再分化过程需要光照条件，C错误；D、脱分化会形成愈伤组织，使外植体失去其特有的结构和功能，形成的愈伤组织在无光条件下，不含有叶绿体，D正确。故选C。
6.答案：C
解析：A、由于克隆猴基因组成差异小，用克隆猴作为实验动物，有利于使实验中的无关变量的控制，有利于增强实验的可信度，A正确；B、细胞融合的过程需要人工诱导，如聚乙二醇（PEG）融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合，B正确；C、受精卵经基因编辑后形成的胚胎发育成的个体不能叫做克隆猴，克隆猴是通过核移植技术后发育而成的，C错误；D、动物细胞核含有该物种的全套遗传信息，克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性，D正确。故选C。
7.答案：C
解析：A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，A错误；B、植物细胞培养的主要目的是通过大规模的细胞培养，以获得人类所需的细胞次生代谢物，B错误；C、在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞可以直接用离心法收集，C正确；D、动物细胞培养需在培养基中添加血清等天然成分，并将它们置于95%空气和5%CO2的气体环境中培养，D错误。故选C。
8.答案：A
解析：“合子”第一次分裂后形成的细胞仍具有全能性，且全能性较高，A错误；将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”，有些“合子”发育成正常的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪，肠细胞不能表达全能性可能是受某些物质的限制，B正确；“合子”发育成正常蝌蚪的过程中细胞种类增多，因此伴随着细胞分化，C正确；“合子”能发育成正常的蝌蚪，说明“合子”细胞通过有丝分裂进行增殖，D正确。
9.答案：B
解析：叶片消毒后，应用无菌水冲洗以避免消毒时间过长产生毒害，A错误；植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，去除细胞壁后要防止原生质体吸水涨破，所以应将叶片置于含有纤维素酶和果胶酶的等渗或略高渗溶液中，B正确；诱导植物原生质体融合可以用聚乙二醇，灭活的病毒是诱导动物细胞融合的方法，C错误；细胞的全能性是指细胞经分裂分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能或特性，细胞通过脱分化形成愈伤组织没有表现出植物细胞的全能性，D错误。
10.答案：C
解析：A、丙为原代培养，丁为传代培养，丙、丁过程均会出现细胞贴壁生长和接触抑制现象，A正确；B、由于动物细胞间存在粘连蛋白，故甲→乙和丙→丁过程需要用用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，B正确；C、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，C错误；D、丙为原代培养，丁为传代培养，二者都需在添加血清的合成培养基进行培养，因为对动物细胞培养所需要的营养尚不明确，D正确。故选C。
11.答案：B
解析：A、为了避免杂菌污染，植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理，A正确；B、纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得的是原生质体，不能获得单个完整的悬浮细胞，B错误；C、细胞的正常生长需要适宜的条件，因此，为使悬浮细胞正常生长，培养基须保持适当的温度、pH和渗透压，C正确；D、利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗，同样也不受季节和天气得限制，D正确。故选B。
12.答案：A
解析：A、体细胞核移植过程中普遍采用的是显微操作方法去除细胞核，也可采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法去核，A错误；B、体细胞核移植过程中用的受体细胞是发育到MⅡ时期的卵母细胞，该细胞的细胞质中含有激活细胞核全能性发挥的物质，B正确；C、重构胚需要用电刺激、Ca2＋载体、蛋白酶合成抑制剂等手段进行激活，C正确；D、用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细胞的细胞核具有全能性，不能体现细胞具有全能性，D正确。故选A。
13.答案：C
解析：A、植物体细胞杂交实现的基础是细胞膜的流动性，使得原生质体能够融合，A正确；B、①过程是用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，以获得原生质体，B正确；C、甲乙进行体细胞杂交产生的杂种植株的染色体组是AABB，而不是AB，C错误；D、杂种植株遗传物质来自两个亲本，但由于基因的选择性表达，未表现出双亲的所有性状，D正确。故选C。
14.答案：BC
解析：A、怀菊中含有的次生代谢物不是怀菊基本生命活动所必需的，A错误;B、怀菊快速繁殖过程中产生的体细胞突变可通过无性生殖遗传，B正确;C、利用怀菊的茎段作为外植体，通过植物组织培养可获得脱毒苗，C正确;D、生芽培养基中细胞分裂素与生长素的比值比生根培养基中的大，D错误。故选BC。
15.答案：ABD
解析：A、正常受精是在母体的输卵管内完成受精的过程，体外受精后需检查受精状况和受精卵的发育能力，A正确；B、胚胎移入受体母畜后需对其进行是否妊娠的检查，以防移入失败，B正确；C、受体母畜不需要进行免疫检查，因为一般不会产生免疫排斥反应，C错误；D、滋养层细胞是囊胚外层的细胞，胚胎移植时滋养层细胞将来会发育成胎膜胎盘，D正确。故选ABD。
16.答案：ABC
解析：将细胞所需的营养物质按照种类和所需量严格配制而成的培养基是合成培养基，由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分，但是由于血清的批次差异使得合成培养基的成分存在不确定性，故使用无血清培养基可使成分相对明确，消除上述不确定性，更能保证实验的连续性，A项正确；Vero细胞在培养时会出现贴壁现象，贴壁培养的细胞在增殖时会因密度过大、有害代谢物质积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，细胞表面相互接触后会出现接触抑制现象而停止生长进入平台期，②处细胞即将进入平台期，说明其生长可能停止了，而①处正处于对数生长期的起始，其生长和增殖速率均很快，B项正确；在潜伏期，Vero细胞刚进入新的培养瓶中，由于贴附因子的存在，大部分细胞会贴附在瓶壁，然后开始进行分裂，C项正确；更换培养基，可清除有害的代谢物质，进而延缓衰退期细胞数量下降的速率，D项错误。
17.答案：ABC
解析：细胞呼吸酶是所有活细胞都含有的酶，所以不能作为抗体特异性识别肿瘤细胞的抗原，A错误；动物细胞培养时加入CO2的目的是维持培养液pH,B错误；制备单克隆抗体时选择培养基只能筛选出融合的杂交瘤细胞而不能筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞，C错误；T-DXd对HER2表达量较多和表达量较少肿瘤细胞的识别效果都很好，说明该单克隆抗体特异性强、灵敏度高，D正确。
18.答案：A
解析：A、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，A错误；B、母亲为“三亲婴儿”提供的是卵母细胞的细胞核，后代的线粒体基因来自捐献者的卵母细胞，故该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，B正确；C、核移植的受体细胞处于MII期，捐赠者的卵子去核实质是指去掉细胞中的纺锤体染色体复合物，C正确；D、“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自卵母细胞捐献者，所以“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，D正确。故选A。
19.答案：（1）纤维素酶和果胶酶；细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（2）PEG（聚乙二醇）；杂种细胞再生出细胞壁
（3）高；m+n；六；单倍体
解析：（1）a和b为原生质体，获得a、b需要去除细胞壁，植物细胞壁的组成成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，应该选用的酶为纤维素酶和果胶酶；植物体细胞杂交技术需要两大环节：①原生质体融合，利用了生物膜具有一定流动性的原理；②通过植物组织培养技术将杂种细胞培育为杂种植株，利用了植物细胞的全能性。
（2）过程②为原生质体融合，所用的化学诱导剂一般是聚乙二醇（PEG），③过程成功的标志是：杂种细胞再生出细胞壁。
（3）植物组织培养时，培养基中生长素/细胞分裂素＞1，有利于诱导生根；生长素/细胞分裂素＜1，有利于诱导生芽；生长素/细胞分裂素≈1，有利于诱导产生愈伤组织。④过程是脱分化产生愈伤组织的过程，诱导f中植株生根的过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程高。通过植物体细胞杂交技术获得的“番茄-马铃薯”杂种植株中既含有番茄的染色体，也含有马铃薯的染色体，即含有（m+n）条染色体。番茄是二倍体生物，马铃薯是四倍体生物，所以“番茄—马铃薯”中含有六个染色体组，属于六倍体植物。由植物的配子发育而成的个体，含有该物种配子中染色体数目，称为单倍体，所以此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株含有三个染色体组，为单倍体。
20.答案：（1）原代培养；接触抑制
（2）动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难
（3）MⅡ；显微操作
（4）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆猴的性状产生影响
（5）动物细胞培养、动物细胞核移植、（早期）胚胎移植；体细胞的细胞核
解析：（1）动物细胞培养的过程分为原代培养和传代培养两个阶段。原代培养是指从供体获取组织或细胞后的初次培养，将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养，称为传代培养，原代培养贴壁的细胞会出现接触抑制的现象，所以要进行传代培养。
（2）由于动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率低。
（3）过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至MⅡ（减数第二次分裂中）时期再进行。目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法，还可以采用其他方法，如梯度离心，紫外光短时间照射，化学物质处理等。
（4）克隆动物的遗传物质来自供核的亲本和提供卵母细胞（质）的亲本，因此克隆动物表现的与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度来说，是因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆猴的性状产生影响，据此可推测获得的克隆猴与供体猴性状不完全相同。
（5）由图可知，上述动物细胞工程中涉及的技术有动物细胞培养、动物细胞核移植、（早期）胚胎移植。克隆猴的成功，说明了动物体细胞的细胞核具有全能性。
21.答案：（1）Ab1、Ab2、Ab3、Ab4；特异性强、灵敏度高
（2）体外大量繁殖（无限繁殖），又能产生特异性（专一性）抗体；聚乙二醇、灭活的病毒
（3）选择；获得杂交瘤细胞；克隆化培养；抗体检测
（4）动物细胞培养；突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
解析：（1）结合题图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4多种抗体的混合物；与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它特异性强、灵敏度高，并且可以大量制备。
（2）杂交瘤细胞具有既能在体外大量繁殖（无限繁殖），又能产生特异性（专一性）抗体的特性；诱导动物细胞融合的方法有物理方法如离心、化学方法如聚乙二醇，此外也可用灭活的病毒诱导融合。
（3）图中两次筛选的目的不同：先用特定的选择培养基进行第一次筛选，经筛选获得的杂交瘤细胞；还需要进行克隆化培养和抗体检测，最终获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
（4）由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的动物细胞融合和动物细胞培养两大技术；其中动物细胞融合的意义是：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。第2章 细胞工程（基础夯实）——高二生物学苏教版（2019）选择性必修三单元测试卷
一、单项选择题：本题共13小题，每题3分，共54分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1.下列关于植物组织培养的叙述，正确的是( )
A.进行植物组织培养时须用适宜浓度的乙醇和次氯酸钠的混合液消毒
B.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生芽
C.移栽前先打开封口膜或瓶盖让试管苗在培养箱中生长几日
D.无论脱分化还是再分化过程，均需要提供光照环境
2.下列关于植物细胞工程的应用，叙述正确的是( )
A.单倍体是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
B.脱毒苗培育所选的组织培养材料可以来自植株的任何部位
C.葡萄的扦插、桃树的嫁接等繁殖方式都属于微型繁殖
D.次生代谢物是一类小分子有机化合物，是植物生长生存所必需的
3.人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产等，都离不开动物细胞培养。下列有关动物细胞培养的叙述错误的是( )
A.动物细胞培养时一般要在含95%空气和5%CO2的CO2培养箱中培养
B.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养时需保证无菌、无毒的环境
C.培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清
D.培养瓶中的细胞都需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
4.如图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图，有关叙述正确的是( )
A.①、②过程中均发生细胞的增殖和分化
B.利用此过程获得的试管苗可能为杂合子
C.多倍体植株的培育需经过如图所示过程
D.愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株
5.下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，下列有关叙述正确的是( )
A.利用蛋白酶合成抑制剂或电刺激可以激活重构胚
B.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定
C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植
6.我国科学家利用植物体细胞杂交技术培育新品种耐盐植株的过程（如图所示），序号代表过程或结构。下列分析正确的是( )
A.可用灭活病毒诱导原生质体甲和乙的融合
B.由愈伤组织得到④需要脱分化、再分化等过程
C.获得的杂种植株一定能表现出双亲的优良性状
D.再分化培养基中生长素/细胞分裂素的比值高有利于根的分化
7.若下图表示细胞工程操作中的某些过程，请判断下列相关描述中正确的是( )
A.若该图表示植物体细胞杂交技术，则C细胞再生出细胞壁后标志着该技术成功
B.若该图表示动物细胞融合技术，其融合的原理与植物原生质体融合的基本原理不同
C.若A、B分别是白菜（2n）和甘蓝（2n）的体细胞，则C细胞发育成的植株不可育
D.若A、B分别是取自优良奶牛的卵母细胞和精子，则B细胞需经过获能处理才能和A结合
8.下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是( )
A.以根尖、茎尖为材料利用组织培养技术可获得脱毒苗
B.单倍体育种过程中的某个阶段用到了植物组织培养技术
C.利用人参细胞培养可工厂化生产初生代谢产物人参皂甙
D.利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，克服了生物远缘杂交不亲和的障碍
9.植物体细胞杂交过程中细胞融合的方式有对称融合和非对称融合。对称融合是将两个物种的两个完整的原生质体融合在一起，由于两个物种的全套基因组合在一起，有用基因和不利基因共处于一个杂种中，往往需要多次回交才能除去杂种中的不利基因。非对称融合是将一个物种的部分染色体和细胞质与另一个物种的一个完整原生质体融合在一起，可以较好地减少不利基因的重组，所得杂种只需较少次数的回交就可以达到改良作物的目的。下列相关叙述错误的是( )
A.植物体细胞杂交可以克服有性杂交的不亲和性，打破物种之间的生殖隔离
B.植物对称融合方式中两个植物细胞完成融合的标志是两个细胞核融合形成一个细胞核
C.在非对称融合过程中，可以利用物理射线、化学试剂等方式去除部分染色体
D.在进行植物体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁
10.治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物
B.将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应
C.体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动
D.治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题
11.我国首例克隆猫“大蒜”于2019年7月21日经代孕猫自然分娩顺利出生，它是从本体猫“大蒜”的大腿部采集了一块皮下组织，提取体细胞的细胞核与去核的卵母细胞融合，形成重构胚，激活后的胚胎再植入代孕猫的子宫内，直至分娩。下列相关叙述正确的是( )
A.需用显微操作法对减数分裂I中期的卵母细胞去核
B.将皮下组织细胞注射到去核卵母细胞中，用钙离子载体诱导两细胞融合
C.克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞有全能性，克隆猫与供体猫的性状完全相同
D.克隆猫“大蒜”的胚胎与代孕猫建立生理和组织上的联系，其遗传物质一般不会发生变化
12.下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是( )
A.悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞都可用离心法直接收集
B.克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程
C.动物细胞培养和植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性
D.将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于有性生殖
13.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.所需培养基为合成培养基，使用时通常需要加入一些天然成分
B.传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，无须再用酶处理
C.细胞培养时需置于含有95%O2和5%CO2的混合气体的CO2培养箱
D.培养细胞1是原代培养，往往会因为细胞密度过大、有害物质积累等分裂受阻
二、多项选择题：本题共5小题，每小题5分，共25分。在每小题给出的四个选项中，有不止一个选项是符合题目要求的。全部选对得5分，选对但选不全得3分，有选错得0分。
14.柑橘花叶病毒（CiMV）能引起柑橘果皮出现各种绿色花纹，使其商业价值下降。CiMV外壳蛋白中11-475残基（485taa）的肽具有较强的免疫原性。为及早发现并消除受感染的树木，研究人员利用动物细胞工程技术开发了一种针对CiMV的灵敏且快速的兔源性单克隆抗体（mAb）诊断试剂盒。下列说法正确的是( )
A.制备mAb过程中，需用CiMV的485aa对实验兔进行多次免疫处理
B.可用PEG处理已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，促使二者融合
C.经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养可以获得大量mAb
D.该诊断试剂盒利用了mAb与CiMV的485aa特异性结合的原理
15.植物细胞工程技术包括植物组织培养技术和体细胞杂交技术，在快速繁殖、农作物育种及提高农作物产量等方面具有广泛应用。下列有关说法错误的是( )
A.可以利用植物组织培养脱分化所得到的胚状体，进而发育成完整植株
B.由茎尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变和基因重组
C.进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题
D.利用灭活的病毒能诱导植物原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性
16.和牛是世界公认的高档肉牛品种，下图是通过胚胎工程培育试管和牛的过程，下列叙述正确的是( )
A.试管和牛需要在体外受精，在试管中发育成熟，它的产生属于有性生殖
B.试管和牛所采用的技术中包含核移植技术、早期胚胎培养和胚胎移植等
C.为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对雌性和牛进行处理
D.从和牛的输卵管冲出的卵子，往往可直接与获能的精子进行体外受精
17.胚胎工程的发展，实现了优良家畜的大量繁殖。下列有关叙述错误的是( )
A.试管牛、试管羊的产生属于无性繁殖
B.利用胚胎分割技术可获得多个基因型相同的胚胎
C.饲喂促性腺激素有助于供体母牛排出比自然情况下更多的次级卵母细胞
D.用Ca2+载体法可以促进皮肤细胞与去核卵母细胞融合
18.嵌合体是指在同一个体中，由基因型不同的细胞或组织相互接触且维持各自并存的混合状态。科研人员利用大鼠的iPS细胞与小鼠的囊胚构建嵌合体（大鼠和小鼠体细胞中染色体数目分别为40条和42条），培养过程如下图所示。下列叙述错误的是( )
A.体外培养卵母细胞，为防止污染，应利用培养皿或培养瓶进行密闭培养
B.过程A前往往需要超数排卵处理，过程B为胚胎移植
C.移植后的囊胚进一步扩大，导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来
D.嵌合体鼠的体细胞在有丝分裂后期染色体数目为82条
三、非选择题：本题共3小题，共36分。
19.（11分）青岛农业大学科研人员从一只成年雌性森林猫皮肤组织中分离培养得到成纤维细胞，将该细胞的细胞核移入中华田园猫的卵母细胞，构建重组细胞，然后经人工激活后获得多枚体细胞克隆胚胎。将克隆胚胎移植到受体母猫中，经过62天孕育，成功得到一只森林猫体细胞克隆后代。请回答下列相关问题：
（1）在构建重组细胞前，要对成年雌性森林猫皮肤组织中分离得到的成纤维细胞进行动物细胞培养，培养时需提供适宜的气体环境，其中CO2的作用是____________。培养时要定期更换培养液，目的是____________。
（2）猫泛白细胞减少症也叫猫瘟热，该病是由猫泛白细胞减少症病毒引起的猫（特别是幼龄猫）的一种发热性高度接触性、致死性传染病，而抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的应用会大大降低该病毒引起的死亡率。下图为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为____________。①②筛选的目的分别是____________。
20.（12分）下图中亲本植株体细胞染色体数为2n，A、B、C、D表示以亲本植株为材料进行的四种人工繁殖过程。请据图回答下列问题：
（1）四种人工繁殖过程都用到的植物细胞工程技术是____________，该技术除用于植物的快速繁殖外，还能用于培育脱毒植株、生产人工种子、作物新品种培育、细胞产物的工厂化生产等。
（2）B过程中①需经过的生理过程有____________。在此过程中起关键作用的两种激素分别是____________。
（3）②过程表示原生质体融合，其原理是____________。要获得原生质体，必须先利用____________去除细胞壁。
（4）利用体细胞杂交技术，我国科学家培育出了多种柑橘属不同种间的杂种植株。此技术与杂交育种相比具有的优点是____________。
21.（13分）近年来由于栖息地丧失和人为捕猎，亚洲黑熊数量骤减，近日动物学家在某林地发现了少量野生亚洲黑熊。他们期望通过体外受精、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。请回答下列问题：
（1）若过程①代表体外受精，黑熊A通过超数排卵获得的细胞必须培养到____________期，从黑熊C采集到的精子需要进行____________处理才具备受精能力。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是____________。
（2）D受体雌性在接受来自黑熊♀A体内的胚胎之前，须和黑熊♀A进行____________处理。胚胎移植的优势是____________（答出一点即可）。
（3）过程②普遍使用的方法是通过____________得到无核的卵母细胞。最终F的遗传物质来自于____________。
（4）为了获得更多的胚胎，可以对过程①得到的胚胎进行胚胎分割，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将____________。
答案以及解析
1.答案：C
解析：A、进行植物组织培养时，将流水充分冲洗后的外植体（幼嫩的茎段）用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2～3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2～3次，A错误；B、进行植物组织培养时，培养基中生长素与细胞分裂素的比值升高，有利于根的分化、抑制芽的形成，B错误；C、移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱中生长几日，C正确；D、在植物组织培养过程中，脱分化期间一般不需要光照，再分化过程每日需要给予适当时间和强度的光照，D错误。故选C。
2.答案：A
解析：A、由于大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体，染色体加倍后得到的植株的隐性性状容易显现，因此单倍体也是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，A正确；B、植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒，因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B错误；C、葡萄的扦插、桃树的嫁接等繁殖方式都属于营养生殖，但都不属于微型繁殖，C错误；D、次生代谢物是一类小分子有机化合物，一般认为不是植物基本的生命活动所必需的，D错误。故选A。
3.答案：D
解析：A、动物细胞培养时，一般要在含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中培养，A正确；B、动物细胞培养是动物细胞工程的基础，培养时需保证无菌、无毒的环境，以防止杂菌污染，B正确；C、培养液中通常含有糖类、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清，C正确；D、培养瓶中的细胞，一类悬浮在培养液中生长增殖，另一类则贴壁生长，贴壁生长的细胞会出现接触抑制现象，需要定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖，D错误。故选D。
4.答案：B
解析：A、①为脱分化形成愈伤组织的过程，这个过程细胞进行增殖而不进行细胞分化，②为再分化过程，该过程中植物细胞会发生细胞的增殖和分化过程，A错误；B、通过植物组织培养获得新个体的过程属于无性繁殖，通过无性繁殖获得的新个体其遗传物质未发生改变，因而能保持亲本的优良性状，若选用的胡萝卜离体组织取自杂合子，则获得的试管苗也为杂合子，B正确；C、多倍体植株的培育最常用、最有效的方法是用秋水仙素或低温诱导来处理萌发的种子或幼苗，不需要经过植物组织培养过程，C错误；D、愈伤组织需要在分化培养基上经过再分化过程形成植株，D错误。故选B。
5.答案：A
解析：A、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育的进程，A正确；B、后代丁的细胞核的遗传物质来自甲，细胞质的遗传物质来自于乙牛，则丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定，B错误；C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，C错误；D、过程③将激活后的重组细胞培养至囊胚或桑椹胚后移植，D错误。故选A。
6.答案：D
解析：A、灭活病毒诱导细胞融合用于动物细胞融合，而甲、乙细胞属于植物细胞，故不可用灭活病毒诱导原生质体甲和乙的融合，A错误；B、杂种细胞得到愈伤组织属于脱分化，由愈伤组织得到④需要再分化等过程，B错误；C、由于存在细胞分化，利用植物体细胞杂交获得的杂种植株，不一定能同时表现出两个亲本的所有优良性状，C错误；D、生长素具有促进生根作用，再分化培养基中生长素/细胞分裂素的比值高有利于根的分化，D正确。故选D。
7.答案：D
解析：A、杂交细胞再生出新的细胞壁是植物细胞融合成功的标志之一，发育成完整植株是植物体细胞杂交技术成功的标志，A错误；B、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，都是细胞膜具有一定的流动性，B错误；C、若A、B分别是白菜（2n）和甘蓝（2n）的体细胞，则C细胞发育成的植株含有同源染色体，减数分裂时能正常联会，则C细胞发育成的植株可育，C错误；D、若A、B分别是优良奶牛的精子和卵细胞，在进行体外受精时，一般要把A卵细胞培养到减数第二次分裂中期，精子需进行获能处理后才具有受精能力，才能与A细胞结合为受精卵，D正确。故选D。
8.答案：C
解析：A、植物顶端分生区附近（如茎尖、根尖）的病毒极少，甚至无病毒，所以切取一定大小的茎尖或根尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，A正确；B、单倍体育种过程包括花药离体培养和秋水仙素处理两个阶段，其中的花药离体培养用到了植物组织培养技术，B正确；C、利用人参细胞培养可工厂化生产次生代谢产物人参皂甙，C错误；D、利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜-甘蓝”的过程，利用了植物组织培养技术，该异源多倍体的培育克服了生物远缘杂亲不亲和的障碍，D正确。故选C。
9.答案：B
解析：A、植物体细胞杂交可以克服有性杂交的不亲和性，打破物种之间的生殖隔离，A正确；B、植物对称融合方式中两个植物细胞完成融合的标志是两个细胞融合再生出新的细胞壁，B错误；C、非对称融合是将一个物种的含部分染色体的原生质体与另一个物种完整的原生质体融合在一起，用物理射线、化学试剂等方式可以诱导染色体数目发生变化，C正确；D、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，在进行植物体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，D正确。故选B。
10.答案：A
解析：A、核移植过程中需对处于减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞去核，这里的“核”其实是纺锤体—染色体复合物，A正确；B、图中的个体A、B分别为提供细胞质的个体、提供细胞核的个体，个体B的细胞核遗传物质和组织器官的细胞核遗传物质相同，理论上将图中获得的组织器官移植给个体B，则基本不会发生免疫排斥反应，B错误；C、体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH，C错误；D、治疗性克隆也会面临伦理问题，我国对对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，D错误。故选A。
11.答案：D
解析：A、需用显微操作法对减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞去核,A错误；B、将皮下组织细胞注射到去核卵母细胞中，可通过电刺激促进两细胞融合，B错误；C、克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞核有全能性，由于受体卵细胞质中有遗传物质，克隆猫与供体猫的性状不完全相同，C错误；D、克隆猫“大蒜”的胚胎与代孕猫建立生理和组织上的联系，其遗传物质一般不会发生变化，遗传物质由供体细胞提供，D正确。故选D。
12.答案：B
解析：A、在进行动物细胞传代培养时，悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁生长的细胞需重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集，A错误；B、克隆牛技术涉及体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等过程，该技术可加速家畜遗传改良，B正确；C、植物组织培养的原理是植物细胞的全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，两者原理不同，C错误；D、胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法，将小鼠桑葚胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于无性生殖，D错误。故选B。
13.答案：C
解析：A、在配制动物细胞培养液时，除了需要添加一定的营养物质（如糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等）外，往往还需加入动物的血清和血浆等天然成分，属于合成培养基，A正确；B、传代培养时，悬浮培养的细胞没有体现贴壁生长的现象，因而可以直接用离心法收集，无须再用酶处理，B正确；C、细胞培养时需置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱，C错误；D、培养细胞1是原代培养，该过程是获得组织细胞中进行的初次培养，往往会因为细胞密度过大、有害物质积累等分裂受阻，D正确。故选C。
14.答案：ABD
解析：A、制备mAb过程中，需用CiMV的485aa对实验兔进行多次免疫处理，得到产生特异性抗体的B淋巴细胞，A正确；B、PEG促融法可以促使PEG处理已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，B正确；C、经选择培养后的杂交瘤细胞在体外扩大培养或注射到兔腹腔内增殖均可以获得大量mAb，C错误；D、该诊断试剂盒利用了mAb与CiMV的485aa特异性结合的原理，具有准确、高效、简易、快速的优点，D正确。故选ABD。
15.答案：ABD
解析：A、可以利用植物组织培养再分化所得到的胚状体，进而发育成完整植株，A错误；B、由茎尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生基因突变，但不会发生基因重组，因为基因重组发生在减数分裂过程中，B错误；C、植物体细胞杂交技术最大的优点就是克服生物远缘杂交不亲和的障碍，因此，进行植物体细胞杂交的实验，不必考虑亲本细胞的生殖隔离问题，C正确；D、利用聚乙二醇诱导植物原生质体融合的原理是细胞膜具有流动性，灭活病毒诱导法是诱导动物细胞融合的特有方法，D错误。故选ABD。
16.答案：CD
解析：A、试管和牛需要在体外受精，早期胚胎在试管中发育，后胚胎移植形成试管动物，经历过受精作用属于有性生殖，A错误；B、试管和牛所采用的技术中包含早期胚胎培养和胚胎移植等，不含核移植技术，克隆技术应用核移植技术，B错误；C、胚胎工程中，常用促性腺激素对雌性和牛进行处理，进行超数排卵，C正确；D、从输卵管中冲出的卵子已经成熟，可直接与获能的精子完成体外受精，D正确。故选CD。
17.答案：ACD
解析：A、试管牛、试管羊的产生过程经过了两性生殖细胞的融合，因而属于有性繁殖，A错误；B、利用胚胎分割技术可获得多个基因型相同的胚胎，这些胚胎获得属于无性繁殖，B正确；C、注射促性腺激素有助于供体母牛排出比自然情况下更多的次级卵母细胞，该操作为超数排卵技术，促性腺激素的化学本质是蛋白质，不能饲喂，否则被消化导致无效，C错误；D、用Ca2+载体法可以激活皮肤细胞与去核卵母细胞融合形成的重构胚，促使其完成细胞分裂和发育的进程，D错误。故选ACD。
18.答案：ACD
解析：A、细胞培养过程中细胞代谢需要氧气，因此不能进行密闭培养，A错误；
B、过程A为卵母细胞的获得，在此之前往往需要超数排卵处理，过程B为胚胎移植，B正确；
C、移植后的囊胚进一步扩大，囊胚内的细胞不断增殖分化，并通过剧烈有序的运动，使囊胚细胞重新组合，最终形成原肠胚，原肠胚进一步分裂分化形成胚胎，C错误；
D、嵌合体鼠的体细胞中含有大鼠和小鼠的细胞，因此在有丝分裂后期染色体数目为80或84条，D错误。
故选ACD。
19.答案：（1）维持培养液的pH；可以避免代谢产物积累对细胞增殖造成影响，同时还可满足细胞生长所需要的营养
（2）免疫的B淋巴细胞；第①次筛选的目的是获得杂交瘤细胞、第②次筛选是获得能产生特异性专一性）抗体的杂交瘤细胞，
解析：（1）要分离成纤维细胞就需将成纤维细胞分散开，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织可获得分散的单个成纤维细胞。而后进行动物细胞培养，培养时需提供适宜的气体环境，即95%的空气和5%的二氧化碳，其中其中CO2的作用是维持培养液的pH。培养时要定期更换培养液，这样可以避免代谢产物积累对细胞增殖造成影响，同时还可满足细胞生长所需要的营养。
（2）在制备单克隆抗体时，需将小鼠骨髓瘤细胞和已免疫小鼠的B淋巴细胞融合。图示为用小鼠制备该单克隆抗体的简图，若甲细胞为小鼠骨髓瘤细胞，则乙细胞为经过免疫的B淋巴细胞。在进行动物细胞融合后，需进行两次筛选，第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞，即图中的①；第二次筛选是获得能产生特异性专一性）抗体的杂交瘤细胞，该过程需要经过克隆化培养和抗原-抗体杂交的手段。
20.答案：（1）植物组织培养
（2）脱分化和再分化；生长素和细胞分裂素
（3）细胞膜的流动性；纤维素酶和果胶酶
（4）克服远缘杂交不亲和的障碍
解析：（1）图示A过程是花药离体培养得到单倍体植株，过程B经历了胚状体阶段，过程C的先芽后根，过程D具有去壁后原生质体，四种方法最终都得到了完整植株，故都用到了植物组织培养技术。
（2）过程为组织培养过程，外植体需经过脱分化再分化才能形成胚状体；在此过程中起关键作用的两种激素分别是生长素和细胞分裂素，且植物激素的配比不同会导致器官发生和形态构建的不同。
（3）细胞膜的流动性是原生质体能够融合的结构基础，原生质体融合发的原理是细胞膜的流动性；植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁制备原生质体。
（4）D过程为植物体细胞的杂交，与传统的杂交育种相比，其优点是克服远缘杂交不亲和的障碍（打破生殖隔离）。
21.答案：（1）MⅡ期；获能；透明带反应；卵细胞膜反应
（2）同期发情；可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；使供体的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍
（3）显微操作；黑熊A和黑熊B
（4）内细胞团均等分割
解析：（1）超数排卵排出的细胞必须生长到MⅡ期才具有受精能力，故黑熊A通过超数排卵获得的细胞必须培养到MII期；从黑熊C采集到的精子需要进行获能处理才具备受精能力。受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是①透明带反应，②乱细胞膜反应。
（2）D受体雌性接受来自黑熊♀A体内的胚胎，所以必须和黑熊♀A进行同期发情处理，目的是使体内的生理环境保持一致，提高胚胎的存活率；受体子宫对外来胚胎不发生免疫排斥反应，这是移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础。胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；大大缩短了供体本身的繁殖周期；使供体的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。
（3）体细胞核移植普遍使用的方法是通过显微操作去掉卵母细胞中的染色体-纺锤体复合物得到无核的卵母细胞。最终F的遗传物质来自于黑熊A（细胞质遗传物质）和黑熊B（细胞核遗传物质）。
（4）为了获得更多的胚胎，可以对过程①得到的胚胎进行胚胎分割，胚胎分割时，应选择发育到桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行操作，选择对象应是发育良好、形态正常，对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。

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