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高三年级二模模拟1--生物参考答案
1-5CABDD 6-10CBABC 11-15DDBCA
16.BD 17.ACD 18.AB 19.ACD 20.BC
21.(1) 140 只/km2
(2)BD
(3)有机物以碳链为骨架（2分）
(4)季节性 与其他物种的关系等 协同进化
(5)留鸟 公园、乡村农田和人工灌木丛受人类活动影响较大，环境相对稳定，食物资源相对稳定且充足，适合留鸟生存，不需要进行长距离迁徙寻找食物和栖息地等(2分)
(6) 收支平衡
22.(1)O2、CO2 ⑥⑦
(2)ABD
(3) 维持低氧环境 提供适量氧气（或让氧气不至于过低）利于有氧呼吸的进行
(4)降低
(5)萌发一致（或状况相似”） 喷洒等体积无根瘤菌培养液 补充红蓝光 丁
丁组大豆植株用于籽粒生长的能量（或有机物中能量）
23.(1)GLP-1受体 非糖物质转化为葡萄糖
(2)降糖时GLP-1的靶细胞是胰岛B细胞，胰岛B细胞受损会降低药物的疗效
(3)具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用，可避免因剂量问题引发的低血糖现象
(4)胃中是酸性环境，会使多肽变性(或胃中存在蛋白酶，会分解多肽。合理即可)
利用脂质体将药物包裹保护(合理即可)
(5) 二肽基肽酶 降低
(6) +C20烷二酸 引入+C20烷二酸会导致GLP-1不易与白蛋白分离，不能较好发挥降低血糖的作用 +C18烷二酸酸
24.（1）29
（2）抑制 ddhh 63/512（2分）
7 基因突变或基因重组（交换）
（3）不能 也可能是存在细胞质遗传（2分） 正反交结果中F2表现型均为椭圆形
25.(1) 逆转录酶 3' 外
(2)加入特定的脱氧核苷酸，形成黏性末端 此方法构建基因表达载体的优点是将外源基因整合到染色体的特定位点，不影响被转入细胞的原有基因的表达，并提高外源基因表达的稳定性（2分）
(3)线性化
(4)缺乏尿嘧啶
(5)同源区段loxP与URA3基因的连接方式 二
(6)含有5-氟乳清酸高三年级二模考试
生物试题
一、单项选择题：共 15 题，每题 2 分，共 30 分。每题只有一个选项最符合题意。
1. 溶酶体是分解蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的细胞器。当细胞衰老时，其溶酶体破裂，释 放出水解酶，消化整个细胞而使其死亡。下列叙述正确的是
A. 溶酶体漂浮于细胞质中，这有利于细胞吞噬侵入的病原体
B. 某些物质进入溶酶体内时，溶酶体合成的酶可行使其分解作用
C. 溶酶体水解某些物质后的产物，有的被排出细胞，有的被再利用
D. 细胞衰老死亡时，都会出现溶酶体破裂，释放水解酶，消化整个细胞
2 ．茶树根细胞质膜上的硫酸盐转运蛋白负责将硫酸盐从外界环境中转运到植物细胞内。当土壤中 存在硒酸盐时，硫酸盐转运蛋白会将硒酸盐一同转运到根细胞内。吸收的大部分硒会与细胞内的蛋 白质结合，形成硒蛋白。一部分硒蛋白会被转移到细胞壁中进行储存。下列分析错误的是
A ．硒蛋白通过主动运输转移到细胞壁中进行储存
B ．硫酸盐和硒酸盐均以离子的形式被茶树根细胞吸收
C ．硫酸盐转运蛋白对硫酸盐和硒酸盐的转运具有特异性
D ．硒蛋白转移至细胞壁中可避免硒的过量积累对细胞造成毒害 3 . 下列关于细胞生命历程的说法，正确的是
A. 高度分化的细胞中不存在 DNA 复制
B ．基因控制的细胞死亡有利于多细胞生物体细胞的更新
C ．细胞中的基因进行选择性表达，预示着细胞正在进行细胞分化
D ．小麦种子萌发并生长为成熟植株的过程体现了植物细胞的全能性
4 ． 甲表示联会时，有 2 条非同源染色体发生融合，导致染色体失活（失去了着丝粒分裂的功能） 和部分丢失。融合染色体及正常的 2 条相应染色体在之后会随机分配（一极至少有 1 条）。乙表示 一对同源染色体在减数分裂时断裂、联结形成同源双着丝粒染色体，经修复后可以进行后续的减数 分裂。不考虑其它异常情况，下列说法正确的是
A ．情况甲分裂形成的精子中含染色体数目为 3 或 4
B ．只考虑 A/a ，情况乙分裂产生的精子基因型有 4 种
C ． 甲发生在四分体时期，乙发生在减数第二次分裂后期
D ．情况乙中变异的染色体修复后能稳定遗传与部分着丝粒失活有关
5. 生物科学是一门实验科学，选择合适的生物实验材料是生物科学实验、生物科学探究成败的关
键之一。下列有关生物实验材料的叙述，正确的是
A. 可选择 H2O2 酶作为探究温度对酶活性影响的材料 B. 可选择兔的红细胞作为提取细胞中 DNA 的材料 C. 可选择菠菜叶的上表皮作为观察叶绿体的材料
D. 可选择叶肉细胞作为观察质壁分离实验的材料
6. 经典的CRISPR-Cas9 系统可以通过敲除基因实现基因沉默。近日研究人员基于 CRISPR 系统开 发了一个名为 CRISPRoff 的新型编辑器，可以将甲基（Me）添加在 DNA 链的特定位点上；研究人 员还创建了功能相反的编辑器——CRISPRon ，它能逆转基因沉默。下列叙述正确的是
A. CRISPRoff 利用基因重组来实现基因沉默
B. CRISPRoff 对基因的影响不能遗传给后代
C. 新型编辑器对染色体 DNA 的效果低于染色质 DNA
D. CRISPRon 有助于基因与 DNA 聚合酶结合以恢复表达
7 ．鸟类起源于小型带羽毛的兽脚类恐龙，是中国古生物学家徐星经过十余年的化石研究才证明的 结论。其中大量小型恐龙与鸟类的化石呈现头项强直，腰背反折的形态，这种现象被称为角弓反张， 是小脑受损所致。下列叙述正确的是
A ．角弓反张现象可以作为鸟类起源于恐龙的比较解剖学证据
B ．为证明鸟类起源于恐龙需找到在两者之间过渡的生物化石 C ．可以使用 14C 作为“地质时钟”来测定某恐龙化石的生存年代
D ．可以比较细胞色素 C 的差异来判断现存鸟类与恐龙的亲缘关系
8. 初进高原的人都有一种代偿反应，即血红蛋白增多、呼吸急促、心率加快。久而久之，人体对 高原缺氧环境产生了一定的适应性。从高原再回到平原地带，机体原来对高原的生理适应会逐渐地 解脱或消退，这一变化就是所谓“脱适应” 。下列叙述正确的是
A. 初进高原的人即使呼吸急促，体内仍存在向内环境释放乳酸的细胞 B. 初进高原的人心肌细胞中ATP 合成速率大于其在平原时的分解速率 C. 初进高原的人血压升高，适应缺氧环境后血压完全恢复至平原状态 D. 从高原回到平原的“脱适应”过程中内环境中血红蛋白含量会减少
高三生物试题第 1页 共 5页
9. 烧伤作为一种严重的创伤性刺激，可诱导机体产生强烈应激反应，如心率加快、应激性糖尿病 等。下列说法错误的是
A. 大面积烧伤的病人由于严重脱水，促进垂体释放抗利尿激素
B. 严重烧伤会导致副交感神经兴奋，使肾上腺髓质分泌肾上腺素，引起心率加快 C. 已知“应激性糖尿病”的胰岛素水平较高，推测组织细胞对葡萄糖的利用能力下降
D. 大面积烧伤病人，可以借助动物细胞培养技术获取大量自身健康皮肤细胞用于移植
10.矮化后的植物可以美化环境并净化空气，适宜室内栽培。为培育某种矮化植物，需在其生长过 程中进行摘除顶芽等修剪工作，且控制好光照等条件才能达到效果。下列叙述错误的是
A. 能接受光照信号的光敏色素在分生组织的细胞内含量更为丰富
B. 植物自发的矮化变异可能是由赤霉素受体异常或赤霉素合成受阻造成的
C. 摘除顶芽的目的是解除顶端优势，从而促进侧芽合成生长素，以促进生长
D. 植物的生长发育过程的调控包括基因表达的调控、激素调节、环境因素调节
11.下图表示一生物群落中甲、乙两个种群的增长速率随时间变化的曲线。下列说法错误的是
A. t3 时甲种群的数量可能大于 t5 时乙种群的数量
B. t3 ～t5（不含 t3 、t5 ）时间内， 甲、乙两种群的年龄结构不同 C. t2 ～t4 时间内， 甲种群的死亡率升高，种群数量先增大后减小
D.若乙种群为养殖的草鱼，在 t4 时进行捕捞有利于持续获得较大鱼产量
12.二化螟、褐飞虱是水稻的主要害虫。二化螟主要啃食水稻茎秆，褐飞虱则刺吸茎叶汁液。褐飞 虱偏爱在二化螟为害的稻株上取食产卵。稻螟赤眼蜂是二化螟的天敌，而褐飞虱会降低水稻挥发物 对稻螟赤眼蜂的吸引。下列说法错误的是
A. 二化螟、褐飞虱二者存在原始合作关系
B. 可采用样方法对褐飞虱的虫卵密度进行调查
C. 褐飞虱的存在会抑制水稻对二化螟的防御反应
D. 水稻挥发物的作用体现了水稻的生命活动离不开信息的传递
13. 包扎伤口时，需要选用透气的消毒纱布或“创可贴”等敷料。下图为研究人员开发的一种活性蓝 细菌水凝胶贴片，其有助于慢性伤口的愈合。下列叙述错误的是
A. 该水凝胶贴片无需为活性蓝细菌提供有机营养物质
B. 接种蓝细菌前须将水凝胶灭菌后再调 pH 至中性或弱碱性 C. 长期口腔溃疡的患者，其伤口不适宜使用该种水凝胶贴片 D. 水凝胶贴片在开发过程需考虑蓝细菌的储存耐久性等问题
14 ．“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是
A ．用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种微生物
B ．诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞 C ．制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 D ．在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎
15.AI 技术通过大数据分析、机器学习、深度学习等方法，为生物医药研究、药物开发、临床诊断 和治疗等带来革命性的变化。下列关于 AI 技术在生物医药领域的应用，下列叙述错误的是
A ．AI 技术对大量的蛋白质数据进行分析，能够预测患者体内某些蛋白质的三维结构以便设计 新药物，该过程属于蛋白质工程技术
B ．AI 技术通过智能穿戴设备和移动应用程序可实时监测患者的生理参数，预测健康风险，并 提供相应的诊断和治疗建议
C ．AI 技术对大量的基因组数据进行处理和分析，可以识别疾病相关的基因突变，为精准医疗 提供支持
D ．AI 技术设计的某种蛋白质的氨基酸序列推导出的对应基因序列不唯一，且基因序列中不包 含启动子和终止子
二、多项选择题：共 5 题，每题 3 分，共 15 分。每题有不止一个选项符合题意。每题 全选对者得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。
16. 为探究细胞中 ROCK1（一种蛋白激酶基因）过度表达对细胞呼吸的影响设置了两组实验，对 照组为正常成肌细胞，实验组为 ROCK1 基因过度表达的成肌细胞。向体外培养的成肌细胞中加入 不同物质检测细胞耗氧率（OCR ，可反映细胞呼吸情况），结果如图所示。下列叙述错误的是
注：寡霉素为 ATP 合酶抑制剂；FCCP 可作用于线粒体内膜，是线粒体解偶联剂，可使线粒体不 能产生ATP；抗霉素 A 为呼吸链抑制剂，可完全阻止线粒体耗氧。
A ．加入寡霉素后，OCR 降低的值代表机体用于 ATP 合成的耗氧量
B ．FCCP 的加入使细胞耗氧量增加，细胞产生的能量均以热能形式释放
C ．ROCK1 过度表达不仅增加细胞的基础呼吸，而且增加细胞 ATP 的产生
D ．抗霉素 A 加入后，成肌细胞只能进行无氧呼吸，无法产生 NADH 和 CO2 17. 关于“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列说法正确的是
A. 根据 DNA 片段大小配置一定质量分数的琼脂糖溶液以便分离 DNA 分子
B. 琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，其可以在紫外灯下被检测出来
C. 实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理
D. 扩增得到的 PCR 产物与凝胶载样缓冲液混匀后需缓慢注入加样孔以防样品飘散
高三生物试题第 2页 共 5页
18 ．放射自显影技术可用于区分 DNA 复制的方向。复制开始时，首先用低放射性的 3H 脱氧胸苷 作原料进行培养，一定时间后转移到含有高放射性的原料中进行培养，在放射自显影图像上观察比 较放射性标记的强度，结果如图甲和图乙。图丙和图丁分别表示不同 DNA 复制过程模式图。下列
说法错误的是
A ．图甲、图乙分别对应图丙、图丁代表的DNA 复制方式
B . ⑤⑥复制完成后，每条完整子链中 A+G/T+C 的值相等 C . ②③⑤是不连续复制，其模板链的 3′端都指向解旋方向
D ．若解旋酶移动速率恒定，图丙表示的复制方式比图丁的效率高
19. "蓝眼泪"是夜光藻大量繁殖造成的，夜光藻是一种以浮游植物为食的浮游生物，夜晚可以发出 浅蓝色的光来吸引虾的天敌乌贼保护自己，以免被虾捕食，在受到海浪拍打等强扰动时，会在夜晚 海面上出现美丽的蓝色荧光，仿佛浩瀚星空，美不胜收。关于夜光藻的下列叙述中，正确的是
A. 夜光藻吸引了众多游客前往观赏体现了非实用意义的直接价值
B. 夜光藻生活在近海水域，且呈现斑块状分布，体现了群落的水平结构
C. 题目中描述了一条完整的食物链，可以表示为：浮游植物→夜光藻→虾→乌贼
D. "蓝眼泪"现象一般在 3 月底到 5 月初出现，6 月初基本消失，推测最主要的环境因素是温度
20. 瘦素是脂肪细胞分泌的能抑制食欲的激素。有研究表明蛋白酶 P 会影响瘦素的作用，分别用高 脂及正常饮食饲喂实验小鼠一段时间后，发现高脂饮食组小鼠下丘脑神经组织中蛋白酶 P 的含量显 著高于正常饮食组，小鼠细胞膜上瘦素受体的表达量情况如下图所示。下列相关叙述，错误的是
A. 瘦素是一种信息分子，在体内需要源源不断地产生
B. 高脂饮食饲喂野生型小鼠摄食行为低于正常饲喂组
C. A 、B 组结果比较可推测蛋白酶 P 能减少瘦素受体含量
D. 针对高脂饮食导致的肥胖患者可以开发抑制蛋白酶 P 基因表达的药物
三、非选择题：本部分包括 5 题，共计 55 分，除特殊说明外，每空 1 分。
21（11分）．某滩涂浅海区是青脚鹬等候鸟的迁徙驿站，拟在该地区建设具有如下食物关系的人 工湿地以保护候鸟。请回答：
(1)随机选取地面上三条样线，长度为 1km ，以一定的速度步行观察，借助望远镜记录样线两侧各 25m 内看到的青脚鹬数量，分别为 5 、6 、10 只，则该地青脚鹬的种群密度约为 。
(2)对于该食物关系示意图的叙述，错误的有 （填序号）。 A. 该图没有显示的生态系统成分是分解者
B. 肉食性鱼类属于三级或四级消费者
C. 在上图中，碳元素和氮元素均主要以有机物的形式传递
D. 物质循环、能量流动和信息传递都沿着食物链、食物网进行
(3)稳定同位素溯源技术通过测定食物中稳定同位素（如 13C）确定食物来源，选择碳元素的主要依 据是 （2 分）。
(4)候鸟的迁徙行为会使该浅海区生物群落表现出明显的 。调查某种候鸟的生态位，除需 调查其栖息地、食物、天敌外，还需调查 。群落中每种生物都占据着相对稳定的生 态位，这是物种之间及生物与环境间 的结果。
(4)依据迁徙的性质，可以把鸟类分为留鸟、旅鸟和候鸟几种类型。科研人员研究了某区域内不同生 境中鸟类的居留型特征，如下图所示。其中，公园、乡村农田和人工灌木丛三类生境中 占比 最高，请分析可能的原因是 （2 分）。
(5)该滩涂浅海生态系统是否处于生态平衡状态，应看其是否符合结构平衡、功能平衡、 三个 方面的特征。
22（ 11 分）.下图是大豆叶肉细胞和根瘤细胞中的部分代谢示意图，其中A-E 代表物质，①~⑧代 表过程。根瘤菌在根瘤细胞中以类菌体的形式存在，固氮酶对氧气高度敏感，在低氧环境下才能发 挥作用。请回答下列问题。
(1)物质 B 、E 分别是 。发生在细胞质基质中的代谢途径有 （填序号）。
(2)根瘤细胞中合成物质 C 的场所有 。
A.线粒体 B.类菌体 C. 叶绿体基质 D.细胞质基质
(3)类菌体膜内及四周存在大量豆血红蛋白，其意义是：既能 ，有利于固氮 酶发挥作用，又能 ，以保障足量物质 C 的供应。
(4)丙酮酸激酶催化 PEP 转化为丙酮酸，当输入根瘤细胞的有机物增多，丙酮酸激酶基因的表达水 平就会 ，这有利于根瘤细胞固氮。
(5)为了提高大豆产量，某科研小组利用大豆种子和根瘤菌，研究补充红蓝光和氮元素的相互作用对 大豆生长和产量的影响，设计如下实验：
①选取 的大豆种子均匀种植于相同且适宜的大田中，并随机分成甲、乙、丙、 丁四个地块。
②乙组和丁组地块喷洒等体积等浓度的根瘤菌溶液， 甲组和丙组 ；
③丙组、丁组地块作 处理， 甲组、乙组不做相应处理。对甲、乙、丙、丁四个地块， 给予相同的农业管理方式。
④在大豆植株发育的不同时期分别检测大豆植株净光合速率，预期结果： 组的平均净 光合速率最高。
⑤称量甲、乙、丙、丁四组大豆产量，结果表明乙组大豆产量高于丁组，请分析原因 。 23（11分）．GLP-1 是一种多肽类激素，具有葡萄糖浓度依赖性降糖作用，即只有在血糖水平升高 的情况下 GLP-1 才发挥降糖作用，而在血糖水平正常时，不会使其进一步降低。肠道进食可以促 进人体整个肠道内 GLP-1 的分泌，其作用机理如下图所示。
(1)人在进食后小肠 L 细胞分泌的 GLP-1 通过体液运输到全身，并与胰岛细胞上的 结合， GLP-1 分泌后，一方面在促进胰岛素分泌的同时抑制胰高血糖素分泌；另一方面通过促进肝脏分泌 激素 FGF21 抑制 来维持血糖含量的相对稳定。
(2)研发人员开发了一系列与天然 GLP-1 有相同生物学作用的 GLP-1 受体激动剂。司美格鲁肽是我 国已上市的 GLP-1 受体激动剂类的新型降糖药物，有口服片剂和一周注射一次的周制剂。I 型糖尿 病是由于胰岛B 细胞受损、胰岛素分泌减少所致，有同学认为司美格鲁肽不能用于治疗 I 型糖尿病， 他的理由是 。
(3)与传统降糖药相比，司美格鲁肽这类降糖药的优点是 。
(4)司美格鲁肽口服片剂在胃中被吸收，在制药过程中要实现 GLP-1 受体激动剂药物的口服有效性， 需要克服的困难有 (答出一点即可) ，请提出一个解决该困难的思路 。
(5)药物研发人员通过对 GLP-1 进行如图所示的改造来延长药物作用时间。由图可推出 GLP-1 与白 蛋白结合使其与 的结合位点结构改变，不易被水解，且 (填“提高”或“降低”) 了肾脏对 GLP-1 的过滤，进而延长药物作用时间。
(6)血浆白蛋白中含有大量的疏水空间，为了增强 GLP-1 与白蛋白的亲和力，药物研发人员给 GLP-1 引入不同的脂肪二酸，并检测 GLP-1 与白蛋白的相对亲和强度，结果如图所示。据下图分析，引 入 后 GLP-1 持续作用时间最长，但药物研发人员最终并未选择该种脂肪二酸引入 GLP-1 ，结合题意做出合理解释 ，推测司美格鲁肽中引入的脂肪二酸最可 能是 。
24（11分）. 已知家蚕（2N=56）蚕茧颜色有黄色和白色，黄色对白色为显性，受等位基因D/d 控 制，但该基因的表达受到另一对等位基因（H/h）的影响，两对等位基因位于常染色体上。
（1）要对雌蚕的基因组进行测序，需要测定 条染色体。
（2）为探究 H/h 、D/d 两对基因间的相互作用及 D/d 基因的位置，科学家做了两组杂交实验，结果 如下表。
亲本组合 F1 F2
实验一 黄茧×白茧 全为白茧 白茧：黄茧=13:3
实验二 白茧×白茧 白茧：黄茧=3:1
①根据实验一可推测 H 基因会 D 基因的表达。已知实验二中一个亲本的基因型与实验一中 F1 的基因型相同，则另一白茧亲本的基因型为 ，F1 自由交配，F2 中黄茧雄蚕的比例为 （2 分）。 ②SSR 是 DNA 中的简单重复序列，非同源染色体上的 SSR 不同，不同品种的同源染色体上 SSR 也不同，利用 SSR 技术可以进行基因定位。科学家将纯合黄茧蚕与隐性纯合白茧蚕杂交得到 F1，
F1 相互交配得到 F2，扩增出亲本及若干 F2 代个体中的 SSR 序列用于确定 D 基因的位置，部分电泳 结果如下图所示：
根据电泳图谱可判断 D/d 基因位于 号染色体上，11 号个体的 7 号染色体 SSR 与其他个体不 同的原因可能是发生了 。
（3）研究发现，家蚕的某些性状遗传为延迟遗传，表现为核基因表达晚了一代的现象，在这种遗 传方式中子代的表型受母体基因型的制约而不由自身基因型决定。为探究蚕茧形状的遗传方式，科 学家利用稳定遗传的亲本做了正反交实验。
上述正反交的实验结果 （填“能”或“不能”）证明蚕茧形状的遗传一定是延迟遗传， 理由是 （2 分）。若存在延迟遗传，请在下列实验基础上完善实验思 路来证明椭圆形性状是由常染色体上的一个显性基因控制的。实验思路：用上述正反交实验中的 F1 分别自由交配得 F2，观察正反交结果中 F2 的表现型及其比例。实验结果为： 。 25（11分）.构建可利用纤维素产乙醇的转基因酿酒酵母菌是解决能源危机的手段之一，思路如下。 Ⅰ . 目的基因的选择与获取纤维素降解途径如下
纤维素 Ⅰ 酶 Ⅰ→ 寡糖 酶 Ⅱ→ 纤维素二糖 酶Ⅲ→ 葡萄糖
（1）提取总RNA 后需在 催化下，在引物的 端进行 DNA 链的延伸得到上图中三 种酶的基因，转入酿酒酵母中，其表达产物在细胞 （填“内”或“外”）发挥作用。
Ⅱ . 目的基因的整合方法
同源重组是碱基序列基本相同的 DNA 区段通过配对、链断裂和再连接而产生片段交换的过程。通 过同源重组将外源基因整合到染色体的特定位点可获得遗传稳定的工程菌株，如图 1 所示。
注：图 1 中 PCR 产物 3′端在酶的作用下会多一个“A”碱基
（2）以酶Ⅰ基因为例构建基因表达载体的过程如图 1，由图推测，T4DNA 聚合酶的作用是 ， 此方法构建基因表达载体的优点是 （2 分）。
（3）图 1 中空白处“？”应使用限制酶将构建好的基因表达载体进行 处理，转入酵母菌 进行整合。
Ⅲ . 标记基因的选择
URA3 是尿嘧啶合成关键酶基因，常被用作标记基因。另外，URA3 编码的蛋白可将外源 5-氟乳清 酸转化为有毒物质，导致细胞死亡。
（4）为得到成功插入酶Ⅰ基因的菌株 1，需将酶Ⅰ基因同 URA3 一起插入 URA3 缺陷型酿酒酵母基因 组 rDNA 内部，并利用 的培养基筛选存活菌株。
（5）在后续插入酶Ⅱ基因时，为继续利用 URA3 作为筛选标记，需切除菌株 1 的 URA3 。为此需改 进表达载体，还应向 URA3 两端引入酿酒酵母基因组中不存在的同源区段 loxP（如图2），该序列 由反向重复序列和间隔序列组成（如图2），决定其方向的是 ，该序 列以下图方式 排列才能通过同源重组达到上述目的。
（6）此后，需要将菌株 1 在 的培养基上培养，存活菌株即为 URA3 被成功切除的菌株 1 ′。

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