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2023级高二下学期第一次月考生物试题
一、选择题(本题共25小题，共40分。其中1-20每小题1.5分，21-25每题2分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的)
1. 下列有关传统发酵技术的叙述 ，正确的是（ ）
A. 传统发酵技术的操作过程是在严格无菌的条件下进行的
B. 泡菜 、果酒、果醋制作过程中菌种产生 CO2 的场所都是细胞质基质
C. 传统发酵技术所用的菌种一般是接种的纯净的菌种
D. 制作腐乳时，豆腐表面生长出的白色“绒毛”主要为毛霉菌丝
2. 关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基并进行酵母菌的纯培养过程，下列说法错误的是（　　）
A. 培养基配制好并调节pH后用湿热灭菌法灭菌
B. 在酒精灯火焰旁进行倒平板及接种操作
C. 将一个未接种的平板作为对照一起放至恒温培养箱中培养
D. 实验结束后使用过的培养基直接丢弃掉
3. 有关平板划线操作的叙述，错误的是（ ）
A. 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
B. 每次划线前，灼烧接种环待其冷却后再划线
C. 在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液
D. 每次划三至五条平行线，注意用力大小要适当，不要划破培养基
4. 青霉素具有抗菌作用强、疗效高、毒性低等优点，是治疗敏感性细菌感染的首选药物，也是生产量最大、应用最广泛的抗生素，由青霉菌分泌。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展，青霉素已经步入产业化生产的道路。下列说法错误的是（　　）
A. 可经过不断诱变、筛选获得生产用高产青霉菌株
B. 发酵工程所用培养基和设备先接入菌种再进行严格的灭菌
C. 发酵过程要不断通气、搅拌，随时检测培养液微生物数量、产物浓度、溶氧等
D. 青霉素作为青霉菌的次生代谢物，需通过适当的提取、分离和纯化措施获得
5. 丙草胺（一种含氮物质）是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（　　）
A. 用以丙草胺为唯一氮源的培养基进行培养
B. 将培养基pH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖
C. 通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1.7×109个
D. 还可用显微镜直接计数法，其计数结果往往比实际值偏大
6. 紫罗兰（2n＝14）花色丰富、抗虫性强、种子富含亚麻酸。为了让油菜（2n＝38）具有紫罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了如下图实验。下列说法错误的是（　　）
A. 制备原生质体时，可将植物细胞置于略高渗溶液一段时间，再用酶解法处理
B. 原生质体融合依赖膜的流动性，融合后的原生质体形成细胞壁后再进行有丝分裂
C. 融合原生质体后，可以利用选择培养基从混合细胞群体中筛选出所需杂种细胞
D. 筛选出的杂种植株具有两种生物的遗传物质，能表现两种生物的所有优良性状
7. 花药是植物的雄性器官，包括花粉粒和体细胞性质的药壁、药隔组织等。科研人员利用四倍体番茄的花药进行单倍体育种。下列说法正确的是（ ）
A. 利用花药离体培养获得的一定是单倍体植株
B. 利用单倍体育种获得的植株一定为纯合子
C. 脱分化阶段需要光照并添加适当比例的植物激素
D. 可用秋水仙素处理单倍体幼苗使其染色体数目加倍
8. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 培养基中应含糖类、氨基酸、无机盐、血清和琼脂等细胞所需的营养物质
B. 培养瓶中的细胞需定期用胰蛋白酶处理，分瓶后才能继续增殖
C. 细胞需置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养
D. 动物细胞培养的结果是获得大量的细胞或完整的动物个体
9. 胚胎移植技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。在我国部分地区，牛、羊的胚胎移植已进入生产应用阶段，这些成果促进了我国畜牧业的发展。下列关于胚胎移植的说法错误的是（ ）
A. 可利用外源促性腺激素诱导供体母畜超数排卵
B. 可取囊胚的内细胞团做DNA分析进行性别鉴定
C. 检验合格的胚胎需移入同期发情处理的受体后才能正常发育
D. 胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
10. 线粒体DNA突变引起的遗传病通常是母系遗传病。目前患有线粒体遗传病的妇女若想要获得健康的后代，可以采用线粒体替换（MR）技术，用捐赠的健康卵子或受精卵中正常的线粒体来替换患病妇女的卵子或受精卵中异常的线粒体，从而获得具有正常线粒体的重构卵子或重构胚胎，并通过人工繁育技术生育健康的后代。下列说法错误的是（　　）
A. 重构卵子与重构胚胎相比较，重构卵子形成胚胎还需经体外受精过程
B. 重构胚胎移植到患者的子宫内将会发生免疫排斥反应
C. 人工繁育技术涉及动物细胞培养、胚胎移植等技术
D. 通过MR技术生育的后代中含三个亲本的遗传物质
11. 某些哺乳动物的胚胎干细胞经定向诱导可获得多种组织细胞，制备流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A. 为获得更多的囊胚，采用促性腺激素注射促进雄鼠产生更多的精子
B. 细胞a和细胞b内含有的核DNA不同，所以全能性高低不同
C. 用胰蛋白酶处理a，可获得分散的成体干细胞
D. 胚胎干细胞和诱导出的各种细胞都需在CO2培养箱中进行培养
12. 嗜热菌又称高温细菌，是一类生活在火山口及其周围区域、温泉、工厂高温废水排放区等高温环境中的微生物。研究者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是（ ）
A. 热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌
B. 甲、乙试管为液体培养基，液体培养基能分离获得水生噬热杆菌单菌落
C. 丙中噬热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件
D. 图2中周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌
13. 下列关于现代生物技术的叙述，正确的是（ ）
A. 利用发酵工程工厂化生产谷氨酸时，需要维持酸性环境并严格控制温度
B. 利用组织培养技术产生突变体，可直接培育出具有优良性状的植物新品种
C. 进行核移植操作时，采集到的卵母细胞需培养至MI期，进行显微操作去核
D. 植物体细胞杂交技术和转基因技术都能解决传统育种的远缘杂交不亲和的问题
14. 下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（ ）
A. 植物体内某些体细胞没有表现出全能性，原因是所含基因不同
B. 在生物的生长发育过程中，所有的细胞都表现出全能性
C. 用花粉培育成的植株往往高度不育，说明花粉细胞不具有全能性
D. 利用植物组织培养技术培育花卉的原理是植物细胞具有全能性
15. 下列有关植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A. 利用植物组织培养技术培育脱毒苗，获得抗病毒的新品种
B. 利用植物组织培养技术获得试管苗，能保持优良品种的遗传特性
C. 利用植物细胞培养技术获得紫草宁，实现了细胞产物的工厂化生产
D. 利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，实现了不同生物远缘杂交育种
16. 草莓营养价值高，被誉为“水果皇后”，中国国内优良草莓栽培的品种很多。下图为利用现代生物技术改良草莓品系的过程，相关叙述错误的是（ ）
A. 过程Ⅰ能定向改变生物的遗传性状
B. 过程Ⅱ可直接用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导植物细胞融合
C. 凤梨风味绿色草莓植株的培育原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
D. 杂种细胞A形成的标志是再生出新的细胞壁，该过程与高尔基体有关
17. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ）
A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精精子需要获能
B. ②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，无细胞分化
C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D. ⑤代表胚胎移植，受体应处于适合的生理状态，可事先用激素对供体和受体进行同期发情处理
18. 动物细胞培养是动物细胞工程的基本技术。下列关于动物细胞培养的说法，合理的是（ ）
A. 除细胞所需的各种营养成分外，培养基中还需添加动物血清和琼脂
B. 细胞培养过程中需不断通入氧气，以保证细胞的正常生命活动
C. 培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制
D. 传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞发生分化所致
19. 图是科学家制备iPS细胞的一种方法，可用于治疗镰状细胞贫血。下列叙述错误的是（ ）
A. 过程①可以取成纤维细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等
B. 过程②类似于植物组织培养的脱分化过程
C. 过程③过程包含细胞分化，遗传物质发生改变
D. 将iPS技术制备的专用干细胞移植回病人后，不发生免疫排斥
20. 有部分人体内缺乏乳糖酶，饮用鲜牛奶后会导致肠胃不适、消化不良。“低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。下图是“低乳糖奶牛”的培育过程，相关叙述正确的是（ ）
A. 犊牛的性状和黑白花奶牛的性状完全一致
B. 去核的卵母细胞可用去核的乳腺细胞代替
C. 犊牛的出生体现了动物细胞的全能性
D. 体细胞核移植技术可用于提供人类器官移植所需的供体和保护濒危动物
21.(2023·江苏徐州高二期末)抗原检测的关键是制备适用于抗原检测的抗体，如图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述正确的是(　　)
A. 每个B淋巴细胞可产生多种抗体，所以需要进行细胞筛选
B. 细胞融合可使用灭活的病毒，灭活的病毒失去感染性和抗原性
C. 细胞融合和细胞筛选时所用的培养液在成分上相同
D. 经过图示细胞筛选过程之后的细胞还需进行进一步筛选
22.为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用人帕金森病模型鼠进行如图实验，相关叙述错误的是(　　)
A. 过程①中通常选择MⅡ期的卵母细胞去除细胞核
B. 过程②的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
C. 过程③对受体小鼠需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能
D. 克隆特定疾病模型的动物，可以为该疾病致病机制的研究和开发相应的药物提供帮助
23. 质粒是基因工程中常用的分子载体。下列有关质粒的说法正确的是（ ）
A. 质粒是独立于细菌拟核DNA之外的链状DNA分子，可在体外进行自我复制
B. 质粒上的基因表达不遵循中心法则，所以可用作外源DNA分子的载体
C. 质粒上的抗生素合成基因可作为标记基因用于重组质粒的筛选和鉴定
D. 作为外源DNA分子的载体，质粒需具有限制酶能够切割的位点
24.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列有关说法正确的是(　　)
A. DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯键
B. 限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割烟草花叶病毒的核酸
C. E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶
D. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，所以也能剪切自身的DNA
25.甲、乙、丙三种限制酶均识别6个核苷酸序列，下列有关说法错误的是(　　)
A. 甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的
B. 甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能
C. DNA连接酶的作用位点是b处
D. 切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段
二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
26. 金黄色葡萄球菌是一种常见的病原菌，在血平板（完全培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组利用微生物选择培养技术，测定了某处土壤中金黄色葡萄球菌数量。下列说法正确的是（　　）
A. 从功能上分类，血平板属于选择培养基
B. 倒平板前待培养基冷却至室温后加入血液，以免高温破坏血细胞
C. 待涂布的菌液被培养基吸收后应倒置培养，防止水分过度蒸发
D. 应将菌液稀释合适的倍数以获得菌落数在30-300的平板进行计数
27. 获得微生物纯培养物的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法。下列选项中，属于对二者共同点的描述的是（ ）
A. 利用无菌水梯度稀释分散菌种，以达到分离纯化菌种目的
B. 在酒精灯火焰处进行接种，培养时一般需要将平板倒置
C. 设置不接种的空白平板同时培养，以检验培养基是否有杂菌污染
D. 能够培养得到单菌落，选取菌落数目稳定时的记录作为结果进行计数
28. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如下图。下列说法正确的是（　　）
A. ①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控
B. 实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变
C. 获得脱毒苗常用的外植体是成熟的根和茎，脱毒苗具有更强的抗病能力
D. 辣椒素是次生代谢物，通过细胞培养获得辣椒素的过程可不需要实现细胞的全能性
29. 下图所示为治疗性克隆的流程，下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①和②分别采用的是细胞融合技术和动物细胞培养技术
B. 胚胎干细胞来自囊胚中具有全能性的b细胞
C. 图中获得的组织器官移植给个体B不易发生免疫排斥反应
D. 如果克隆过程中需进行基因改造则应选择c细胞为受体细胞
30. 细胞融合技术应用广泛，图为细胞融合的过程。据图分析，下列叙述错误的是（ ）
A. 若细胞a、b分别代表植物细胞，需在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶处理以获得两种原生质体
B. 若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择培养基中筛选后即可大规模培养生产单克隆抗体
C. 将基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞诱导融合（只考虑两两融合）可得到9种基因型细胞
D. 如果a、b分别表示优良奶牛的卵母细胞和精子，则体外受精时，精子必须进行获能处理，而卵母细胞需要培养到MⅡ期才能完成受精
三、非选择题：本题共4小题，共45分。
31.（10分） 为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。请据图回答下列问题：
（1）配制好的培养基灭菌通常使用__________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③中的培养基以__________为唯一碳源。
（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是__________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是__________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为__________个。
（4）步骤⑤需要振荡培养其目的是提高培养液的溶解氧含量，同时使 ，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是 。
32.（11分） 猕猴桃因貌似猕猴而得名，是一种品质鲜嫩、营养丰富的美味水果。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如图所示。请分析并回答下列问题：
（1）因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”之间存在__________，所以用有性杂交方法很难得到可育后代，上述①～⑥培育优良品种H的过程所应用的技术是 、_____________技术。
（2）图中B、D是__________；G是__________；②过程需使用 酶进行处理。
（3）过程③使用的化学法包括：__________融合法和高Ca2+—高pH融合法等。
（4）⑤⑥过程分别称为 。该过程中，植物激素中__________是关键激素。
（5）过程③得到两两融合的细胞有__________种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。为了能筛选到杂种细胞F，若在①过程对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用____________处理，以便最终能获得优良杂种植株H。
33.（14分）人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题：
细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用____________________的方法。每隔2周
用 作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是____________________________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导因素是___________________________。
(2)需用特定的______________培养基对融合细胞进行筛选；甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是__________，过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得________________________________________，杂交瘤细胞的特点是____________________________。
(3)多次筛选后的杂交瘤细胞可注射到小鼠的腹腔内增殖，从腹水中提取PD－1单克隆抗体。检测PD-1单克隆抗体的原理是___________________________________________________。
34.（10分） 下图表示畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列有关问题。
（1）方法Ⅰ和方法Ⅱ培育优良种牛的本质区别为生殖方式不同，前者是___________，后者是___________。
（2）②过程常用促性腺激素处理，目的是使B牛___________，从B牛体内获得的卵母细胞需要培养到___________（时期）。
（3）A牛精子必须在B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与B牛的卵子结合，完成受精作用，这个过程叫___________。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到___________。
（4）生产上常用___________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个基因相同的家畜个体，可以使用___________技术，这一过程中，要特别注意将内细胞团均等分割，其原因是___________________________________________________。
聊城2023级高二下学期第一次月考生物试题
一、选择题(本题共25小题，共40分。其中1-20每小题1.5分，21-25每题2分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的)
1.D【详解】A、传统发酵技术的操作过程是无需严格的灭菌，在发酵过程中都是多种微生物同时存在，在发酵过程中随着条件的改变使的目的菌种成为优势种，A错误；B、泡菜制作过程中用的乳酸菌，乳酸菌无氧呼吸不产生 CO2 ，果酒制作过程中酵母细胞前期主要进行有氧呼吸，产生 CO2 的场所是线粒体内膜，后期主要进行无氧呼吸，产生 CO2的场所是细胞质基质，果醋制作过程中发酵菌种是醋酸菌，醋酸菌是原核生物，无线粒体，故产生 CO2 的场所是细胞质基质，B错误；C、传统发酵技术所用的菌种一般是多种菌种并存，在发酵过程中，随着发酵条件的改变，其它菌种逐渐被淘汰，C错误；D、制作腐乳时，豆腐表面生长出的白色“绒毛”主要为毛霉直立菌丝，D正确。
2.D 【详解】A、操作顺序为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板，培养基应该用湿热灭菌法，A正确；
B、培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板．操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基，B正确；C、未接种的培养基作为空白对照，可以排除无关变量对实验的干扰，C正确；
D、实验使用过的培养基应该放在专门的回收地方，防止污染，D错误。
3.C【详解】A、结合分析可知，平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以获得单个菌落，A正确；B、每次划线前，灼烧接种环需要待其冷却后再划线，否则高温会杀死菌种，B正确C、在平板划线时，第一区域内划线时接种环上的菌种直接来自菌液，而第二区域内划线时，接种环上的菌种来自于上一次划线区域，C错误；D、每次划三至五条平行线，注意用力大小要适当，不要划破培养基，否则无法形成单个菌落，D正确。
4.B 【详解】A、高产青霉菌株是通过诱变育种获得的，但诱变育种的原理是基因突变，由于基因突变具有不定向性，故需要经过筛选才能获得高产青霉菌株，A正确；B、发酵工程所用培养基和设备必须严格控制无菌，避免杂菌污染，防止发酵失败，B错误；C、发酵过程要随时检测培养液微生物数量、产物浓度、溶氧等，以保证发酵过程的顺利进行，获得所需的发酵产物，C正确；D、产品不同，分离提纯的方法一般不同，青霉素作为青霉菌的次生代谢物，需通过适当的提取、分离和纯化措施获得，D正确。
5.B【详解】A、要分离出能有效降解丙草胺细菌菌株，需要以丙草胺为唯一氮源的培养基进行培养，该培养甚中只有降解丙草胶的细菌菌株才能生长，其他微生物的生长会受到抑制，A正确；
B、培养细菌的培养基中性偏碱，将培养基 pH 调至中性或微碱性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖，B错误；
C、5号试管的稀释倍数是106，则每克土壤中的菌株数为 (168+175+167)÷3÷0.1×106=1.7×109个，C正确；
D、图中利用的是稀释涂布平板法进行计数，还可用显微镜直接计数法，由于死亡的微生物往往计算在内，因此其计数结果往往比实际值偏大，D正确。
6.D 【详解】A、制备原生质体时，可将植物细胞置于略高渗溶液一段时间，再用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，去除植物细胞壁，A正确；B、原生质体融合首先是细胞膜的融合，依赖膜的流动性实现，融合的原生质体形成细胞壁后再进行有丝分裂形成杂种植株，B正确；C、融合原生质体后，两两融合的细胞有AA型、BB型、AB型，可以利用选择培养基从混合细胞群体中筛选出所需杂种细胞，C正确；D、筛选出的杂种植株具有两种生物的遗传物质，但由于基因的选择性表达，不能表现两种生物的所有优良性状，D错误。
7.D【详解】A、花药包括花粉粒和体细胞性质的药壁、药隔组织等，在花药离体培养过程中，如果药壁、药隔组织形成了植株，则是四倍体，A错误；B、如果四倍体番茄的基因型是AAaa，则精子的基因型可以是Aa，经过单倍体育种获得的植株基因型是AAaa，还是杂合子，B错误；C、脱分化阶段需要避光，C错误；D、秋水仙素抑制纺锤丝的形成，从而使染色体数目加倍，所以可用秋水仙素处理单倍体幼苗使其染色体数目加倍 ，D正确。
8.C【详解】A、动物细胞培养的培养基中不含琼脂，是液体培养基，A错误；B、动物细胞培养中，细胞具有贴壁生长以及接触抑制的特点，因此在培养中需要用胰蛋白酶处理贴壁的细胞并进行分瓶培养，B错误；C、细胞需置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中进行培养，CO2可以维持pH稳定，C正确；D、动物细胞培养的结果是获得大量的细胞，而不能获得完整的动物个体，D错误。
9.B【详解】A、为获得更多的卵母细胞，可利用外源促性腺激素诱导供体母畜超数排卵，A正确；
B、可取囊胚的滋养层细胞做DNA分析，进行性别鉴定，B错误；C、同期发情处理是为了使供、受体母牛具有相同的生理状况，以保证胚胎移植入相同的生理环境，故检验合格的胚胎需移入同期发情处理的受体后才能正常发育，C正确；D、胚胎移植是将胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，D正确。
10.B【详解】A、重构胚胎只需培养一段时间就可以进行胚胎移植，而重构卵子形成胚胎还需经体外受精过程，A正确；B、重构胚胎移植到患者的子宫内一般不会发生免疫排斥反应，有利于胚胎在母体内存活，B错误；
C、人工繁育技术涉及动物细胞培养、体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等技术，C正确；
D、重构卵子中含有患病妇女的核遗传物质和健康捐卵妇女的线粒体，使重构卵子受精并发育为胚胎，胚胎移植后便可发育成健康的后代，含正常女性线粒体遗传物质、患病女性核遗传物质和父本核遗传物质，D正确。
11.D 【详解】A、为了获得更多的囊胚，可以采用促性腺激注射促进成熟雌性个体超数排卵，然后将卵细胞从母体内取出，在试管内与人工采集的精子进行体外受精，培育成胚胎，A错误；B、细胞a和细胞b是由同一个受精卵经过有丝分裂形成的，故核DNA相同，B错误；C、运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞，首先必须用胰蛋白酶处理内细胞团，分解细胞间的胶原蛋白等，使之分散成单个细胞，C错误；D、动物细胞培养时需要在5% CO2的培养箱中进行培养，以维持培养液的pH，D正确。
12. B 【详解】 A、热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌，A正确； B、甲、乙试管为液体培养基，液体培养基不能分离出单菌落，B错误； C、丙中噬热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件，C正确； D、图2中周围不显蓝色的菌落，说明其产生的淀粉酶可以在高温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌，D正确。
13.D 【详解】A、在谷氨酸的发酵生产过程中，中性和弱碱性条件下利于谷氨酸的积累，酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，同时还需要严格控制发酵罐内温度、pH值和溶氧等发酵条件，以保证其产量，A错误；
B、基因突变是不定向的，故利用组织培养技术产生突变体，还需进行筛选，才能培育出具有优良性状新品种，B错误；C、采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期（或MⅡ期）才能进行显微操作去核，C错误；
D、植物体细胞杂交技术和基因工程育种都可打破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
14.D 【详解】A、植物体内的体细胞所含有的基因相同，但细胞全能性被抑制，需要在离体、营养、激素等条件下才能表现全能性，A错误；B、在生物的生长发育过程中，大部分的细胞都不能表现出全能性，需要特定条件表现，B错误；C、细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍具有产生完整有机体或分化成其他各种细胞的潜能和特性，花粉发育成植株即体现了全能性，C错误；D、植物组织培养技术将离体的细胞或器官培育成完整植株，原理是植物细胞的全能性，D正确。
15.A 【详解】A、利用植物的幼嫩的芽或茎进行植物组织培养可以培育脱毒苗，脱毒苗病毒少或无毒，但不能抗病毒，A错误；B、利用植物组织培养技术获得试管苗的过程属于无性繁殖，能保持亲本的优良性状，B正确；
C、利用组织培养技术获得紫草宁，是利用了植物细胞培养技术，实现了细胞产物的工厂化生产，C正确；
D、利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”，使得后代可育，打破了生殖隔离，克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。
16.B 【详解】A、过程Ⅰ利用基因工程技术，其原理是基因重组，使导入了胰岛素基因的草莓产生了胰岛素，能定向改变生物的遗传性状，A正确；B、在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导原生质体的融合，B错误；C、凤梨风味绿草莓植株培育过程中原生质体融合利用了细胞膜的流动性，杂种细胞培育成植株的过程依赖植物细胞的全能性，C正确；D、杂种细胞A形成的标志是再生出细胞壁，该过程涉及的细胞器主要是高尔基体，D正确。
17.D 【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误；
B、②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B错误；
C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑葚胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误；
D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。
18.C 【详解】A.培养动物细胞要用液体培养基，不需要添加琼脂，而 动物血清中含有细胞增殖必需的物质，A错误；B.细胞培养过程中需不断通入无菌95%的空气和5%的二氧化碳，以保证细胞的正常生命活动，B错误；
C.培养过程中用胰蛋白酶处理后分瓶可以有效解除细胞间的接触抑制，从而保证细胞的增殖过程，C正确；
D.正常细胞的细胞分裂次数是有限的，据此可知，传代培养中的细胞失去增殖能力是由于细胞衰老或遗传物质发生改变所致，D错误。
19.C 【详解】A.过程①表示从患者体内取出具有增殖分化能力的体细胞，可以是成纤维细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等，A正确；B.过程②表示成纤维细胞失去特定的形态，形成iPS细胞，类似于植物组织培养的脱分化过程，B正确；C.过程②表示iPS细胞增殖分化产生了多种类型的细胞，该过程包含了细胞分化，细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此遗传物质没有发生改变，C错误；
D.iPS技术使用患者自己的体细胞通过体外诱导成iPS细胞，所以将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。
20.D 【详解】A.犊牛的细胞核基因来自黑白花奶牛，但其细胞质基因来自卵母细胞，因此其性状与黑白花奶牛的性状不完全一致，A错误；
B.卵母细胞质中有促进细胞核全能性表达的物质，因此去核的卵母细胞不可用去核的乳腺细胞代替，B错误；
C.高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，犊牛的出生体现了动物细胞的细胞核具有全能性，C错误；
D.体细胞核移植技术可用于通过细胞培养人体器官用于人类组织器官的移植，也可以用于动物繁殖，进而保护濒危动物，D正确。
21.D 【详解】每个B淋巴细胞只能产生一种抗体，A错误；灭活的病毒失去感染性，但保留抗原性，B错误；细胞融合时所用的培养液一般需要加入诱导剂，细胞筛选时所用的是选择培养基，两者在成分上有差异，C错误。
22.C【详解】细胞核移植中选取MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞，常采用显微操作去除细胞核，A正确；过程②的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，使之分化形成神经元，B正确；该过程属于自体移植，几乎不会发生免疫排斥反应，因此过程③对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能，C错误；克隆特定疾病模型的动物，可以为该疾病致病机制的研究和开发相应的药物提供强有力的帮助，为疾病治疗提供帮助，D正确。
23.D【详解】A、质粒是独立于细菌拟核DNA之外的小型环状DNA分子，可在体外进行自我复制，A错误；
B、质粒上的基因表达遵循中心法则，B错误；
C、质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因用于重组质粒的筛选和鉴定，C错误；
D、作为外源DNA分子的载体，质粒需具有多个限制酶能够切割的位点，以便能插入目的基因，D正确。
24.B【详解】DNA连接酶连接的是两个DNA片段，A错误；限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，限制酶不能切割，B正确；E.coli DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶，C错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，D错误。
25.C
二、不定项选择题（本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。）
26.CD【详解】A、根据题干信息“金黄色葡萄球菌在血平板上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”可知：血平板属于鉴别培养基，A错误；
B、倒平板后待培养基冷却至室温后加入血液，以免高温破坏血细胞，B错误；
C、平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以减少使培养基中的水分过快地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染，C正确；
D、实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30～300、适于计数的平板。在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，D正确。
27.BC 【详解】A、利用无菌水梯度稀释分散菌种，以达到分离纯化菌种的目的是稀释涂布平板法的操作，平板划线法不用无菌水稀释，A错误；
B、为防止杂菌污染，接种操作时都需要在酒精灯火焰处进行；为了便于观察和防止培养基中水分过快蒸发和冷凝形成的水滴倒流，培养时一般需要将平板倒置，B正确；
C、设置不接种的空白平板同时培养，以检验培养基是否有杂菌污染，确保实验结果的准确性，C正确；
D、两种接种方法操作得当都能够培养得到单菌落，但能用于菌落计数的接种方法是稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，D错误。
28.D 【详解】A、在进行植物组织培养时，需要在培养基中添加适当比例的生长素和细胞分裂素诱导细胞的脱分化和再分化，因此①和②都会受到外源激素的调控，A错误；
B、①表示脱分化，实现①过程的条件是外植体细胞的基因发生了选择性表达，而不是基因突变，B错误；
C、因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养可以获得脱毒植株，并非成熟的根和茎，并且脱毒苗也不一定具有更强的抗病毒能力，C错误；
D、植物代谢会产生一些一般认为不是植物基本的生命活动所必需的产物-次生代谢物，由图可知辣椒素就是次生代谢物，通过细胞培养得到高产细胞系时就可产生，不需要发育成植株，所以不需要实现植物细胞的全能性，D正确。
29.BC 【详解】A、图中①表示核移植技术，②表示早期胚胎培养技术，A错误；
B、b表示内细胞团，c表示滋养层，胚胎干细胞来自于囊胚中具有全能性的b细胞，B正确；
C、由于重组细胞a的细胞核来自于个体B细胞，具有遗传特性，其因此图中获得的组织器官移植给个体B不易发生免疫排斥反应，C正确；D、如果克隆过程中需进行基因改造则应选择b细胞为受体细胞，D错误。
30.AB【详解】A、若细胞a、b分别代表植物细胞，防止细胞吸水涨破，需在等渗溶液中用纤维素酶和果胶酶处理以获得两种原生质体，A错误；
B、若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后，还需要经过抗体阳性检测才能大规模培养生产单克隆抗体，B错误；C、若a和b分别为基因型AaBb、aaBb植株的花粉细胞，AaBb能产生AB、aB、Ab、ab四种花粉，aaBb能产生aB、ab两种花粉，去壁两两融合可以得到AABB、aaBB、AAbb、aabb、Aabb、AaBb、AaBB、AaBb、aaBb共9种基因型的细胞，C正确；
D、体外受精时，精子必须进行获能处理，卵母细胞需要培养到MⅡ期才成熟，这样两者才能完成受精，D正确。
三、非选择题：本题共4小题，共45分。
31.（除特殊标注外，每空1分，共10分）（1） 高压蒸汽灭菌 石油 （2） 稀释涂布平板法 涂布不均匀 检测培养基平板灭菌是否合格 （3）5.7×107 （4）菌体与培养液充分接触（2分）（5）筛选出分解石油能力最好的细菌（2分）
【解析】（1）根据题意，要分离和纯化高效分解石油的细菌，配制好的培养基灭菌通常可以使用高压蒸汽灭菌法。图中步骤②是扩大培养来自被石油污染过的土壤中细菌，步骤③是利用添加石油扩大培养分解石油的细菌，步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是步骤③的培养基中石油是唯一碳源。
（2）过程④是对分解石油的细菌进行分离，分析B图可知，分解石油的细菌在培养基表面分布较为均匀，说明同学甲进行过程④的操作中接种方法是稀释涂布平板法；图B中培养基表面左侧的菌落数目明显比右侧多，推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是接种时涂布不均匀；在接种前需随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格。
（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为（56+58+57） ÷ 3 ÷ 0.1×100×1000=5.7×107。
（4）步骤⑤需要振荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触，提高营养物质利用率。
（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是筛选出分解石油能力最好的细菌，其中石油剩余量最少的一组所含的细菌就是分解石油能力最好的细菌。
32.（每空1分，共11分）（1） 生殖隔离 植物组织培养技术 植物体细胞杂交 （2）原生质体 愈伤组织 纤维素酶和果胶酶 （3）聚乙二醇（PEG） （4） 脱分化、再分化 生长素、细胞分裂素
（5）3 碘乙酰胺
【解析】（1）“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”是两个不同种，它们之间存在生殖隔离，通过①~⑥培育优良品种H杂种植株的过程所应的技术是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
（2）图中B、D是去除细胞壁的原生质体，G为愈伤组织；②过程去除了植物细胞壁需使用纤维素酶和果胶酶。
（3）过程③为让两个不同种原生质体进行融合，其中化学方法除了聚乙二醇（ PEG ）融合法，还有高 Ca2+一高pH融合法等。
（4）过程⑤⑥为植物组织培养，⑤是细胞脱分化形成愈伤组织，⑥愈伤组织再分化发育为植株。在该过程中生长素和细胞分裂素的比例会影响细胞分裂和分化，是培养过程中的关键激素。
（5）过程③将两个不同种的原生质体进行融合，其中包括“中华猕猴桃”自身融合和“美味猕猴桃”自身高融合以及“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”融合的细胞共3种。射线处理会使胞失去分裂能力，碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长，已经对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用碘乙酰胺处理，它们自身融合的细胞无法生长，只有当两个不同种的原生质体融合才能生长，筛选到杂种细胞F，以便最终能获得优良杂种植株H。
33.（除特殊标注外，每空1分，共14分）(1)定期更换培养液　 cTnI 加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞　 灭活的病毒 （2）选择（2分） 乙和丙（2分） 　能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞（能产生所需抗体的杂交瘤细胞）（2分）　 既能迅速大量增殖，又能产生抗体（2分） (3)抗原--抗体的特异性结合（2分）
【解析】(1)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对细胞自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的生物诱导因素是灭活的病毒。(2)图中过程①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中过程①第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程②第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙；过程②的目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。
34.（除特殊标注外，每空1分，共10分）（1） 有性生殖 无性生殖 （2） 超数排卵 MⅡ期 （3）精子获能 两个极体 （4） 桑葚胚（或囊胚） 胚胎分割 若分割不均匀，将影响分割后胚胎的恢复和进一步发育（2分）
【解析】（1）采用方法I培育试管牛时采用了体外受精技术，因此属于有性生殖；采用方法Ⅱ培育克隆动物时采用了核移植技术，因此属于无性生殖。
（2）用促性腺激素处理使得供体母牛超数排卵；卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能精子结合。
（3）精子在生殖道内经过相应生理变化后，才能与卵子结合，称为精子获能；卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙能够观察到两个极体。
（4）胚胎移植需选择处于桑椹胚或囊胚期的胚胎；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此获得多个性状相同的家畜可用胚胎分割技术，该技术要注意将内细胞团均等分割，以保证分割后的胚胎都能正常发育。

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