1.1发酵工程的培养基(课件 学案 练习,共3份)苏教版(2019)选择性必修3 生物技术与工程

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1.1发酵工程的培养基(课件 学案 练习,共3份)苏教版(2019)选择性必修3 生物技术与工程

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第一节 发酵工程的培养基
[学习目标] 1.概述培养基的成分和类型。2.掌握配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的方法。
1.培养基的类型
(1)培养基:主要是指为人工培养微生物等而制备的,适合微生物等______、________或积累代谢产物的营养基质。
(2)类型
2.基础培养基
(1)概念:各种培养基的配方虽然不同,但其成分一般都含有______、______、________和________等最基本的物质,这些最基本的物质是大多数微生物对营养条件的______需求,提供这些基本需求的培养基就是基础培养基。
(2)培养基的成分
3.特殊培养基
(1)概念:以____________为基础,进一步配制的具有______用途的培养基。
(2)选择培养基
①概念:是一种能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中______出来的特殊培养基。
(3)鉴别培养基
①用于快速分类__________不同类型微生物的特殊培养基,也可用于______________产生某种代谢产物的微生物菌种。
②实例
a.在添加可溶性淀粉的培养基中,如果菌落周围形成淀粉________,说明是能产生________的菌株。
b.在添加________的培养基中,如果培养基的颜色由__________,说明是产酸微生物。
(4)加富培养基
①概念:也称______培养基,即在培养基中加入______某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质,如血液、______、酵母浸膏、动植物______。
②实例:培养百日咳博德氏菌需要含有__________成分的加富培养基。
③加富培养基与选择培养基的比较
a.加富培养基类似于______培养基。
b.采用加富培养基的目的,是______所需分离的微生物的数量,使其形成__________,以分离出该种微生物。
c.采用选择培养基的目的,一般是________不需要的微生物生长和繁殖,而使所需要的微生物______,再分离出所需微生物。
4.常用培养基的配制
(1)①牛肉膏蛋白胨培养基
a.用途:培养细菌。
b.配方:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g、______15~20 g、水1 000 mL。
②高氏Ⅰ号培养基
a.用途:分离和培养______。
b.配方:可溶性淀粉20 g、KNO3 1 g、NaCl 0.5 g、______________ 0.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、______________ 0.01 g、琼脂15~20 g、水1 000 mL。
(2)配制要求
①配制培养基需要根据培养目的调节培养基的______。
②对培养基进行______是获得纯净的微生物培养物的前提。实验室一般用________________进行灭菌。
5.配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基
(1)实验目的
学会配制培养基,如培养______的培养基。
(2)实验原理
酵母菌生长繁殖需要的营养物质有______、______、______和无机盐等。马铃薯葡萄糖琼脂培养基具有酵母菌生长所需的碳元素、氮元素和其他营养物质。
(3)实验步骤
判断正误
(1)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源(  )
(2)所有微生物在培养时,培养基中都需加入氮源(  )
(3)培养不同微生物的培养基成分完全一样(  )
(4)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(  )
任务一:培养基成分的分析
1.如表是牛肉膏蛋白胨培养基的配方,分析回答下列问题:
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 3 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL
(1)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质分别是什么?属于有机物还是无机物?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(2)该培养基培养的微生物同化作用类型是什么?请说明理由。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(3)所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源吗?请举例说明。
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________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
2.培养细菌、真菌等不同微生物的培养基的配方有所不同,为什么?
________________________________________________________________________
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1.几种微生物的营养和能量来源
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 NH、NO等 光能
硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物
2.培养基的成分及功能
营养要素 来源 功能
碳源(提供碳元素的物质) 无机碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 ①构成微生物体的重要成分; ②有机碳既是碳源又是能源
有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
氮源(提供氮元素的物质) 无机氮源 铵盐、硝酸盐等 合成含氮的代谢产物
有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉、酵母粉等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物
水 外界摄入 ①良好的溶剂;②维持生物大分子结构的稳定
无机盐 无机物 是微生物生长繁殖所必需的,也是合成多种代谢产物所必需的
1.下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的叙述,错误的是(  )
A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素
B.碳源物质不是该微生物的能源物质
C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质
D.琼脂是该微生物的营养要素之一
2.关于微生物的营养,下列说法正确的是(  )
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量
任务二:培养基的种类的探讨
1.微生物的培养离不开培养基,根据下面某微生物培养基的配方,回答下列问题:
KH2PO4     1.4 g
Na2HPO4    2.1 g
MgSO4·7H2O   0.2 g
葡萄糖     10.0 g
尿素      1.0 g
琼脂      15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL。
(1)根据培养基的物理性质判断,该培养基属于哪种培养基?并说明理由。
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
(2)此配方能否筛选出产生脲酶(脲酶的作用是催化尿素水解为氨和二氧化碳)的细菌?为什么?从此角度判断该培养基属于什么类型?
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
2.如果在上述培养基中加入酚红指示剂,培养能够分解尿素的细菌,酚红指示剂将变红的原因是什么?从此角度判断该培养基属于什么类型?
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3.简要说明选择培养基与鉴别培养基的主要区别是什么?
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1.几种选择培养基的设计
特性 主要用途 设计原理
加入青霉素、四环素等 分离酵母菌或霉菌等真菌 能抑制某些细菌和放线菌的生长,对真菌无作用
不加氮源 分离固氮微生物 固氮微生物能利用空气中的氮气
不加碳源 分离自养型微生物 自养型微生物能利用无机碳源
2.几种常用的鉴别培养基
名称 主要用途 主要化学物质 特征性变化
伊红—亚甲蓝琼脂培养基 鉴别大肠杆菌 伊红、亚甲蓝 出现带金属光泽的深紫色菌落
刚果红培养基 鉴别纤维素分解菌 刚果红、纤维素 纤维素被分解后出现透明圈
油脂培养基 鉴别产脂肪酶菌株 食用油、吐温、中性红指示剂 由淡红色变成深红色
淀粉培养基 鉴别产淀粉酶菌株 可溶性淀粉 淀粉被水解后出现淀粉水解圈
溴甲酚紫培养基 鉴别产酸微生物  溴甲酚紫 培养基颜色由紫色转为黄色
3.(多选)下列对各种培养基的分析和实际相符的是(  )
A.利用缺乏氮源的培养基,能分离出固氮微生物
B.在培养基中添加青霉素、四环素等,可以选择培养出酵母菌等真菌
C.产酸微生物能使添加了溴甲酚紫的培养基由紫色转为黄色
D.加富培养基和选择培养基都能抑制不需要的微生物的生长和繁殖
4.马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于真菌的筛选,其配制过程如下:将马铃薯去皮切成小块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯滤液。在马铃薯滤液中加入一定量的琼脂,用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是(  )
A.应在培养基中加入青霉素,以抑制细菌的生长
B.除碳源外,马铃薯滤液还提供氮源和无机盐
C.氮源进入细胞后,可参与合成磷脂、核苷酸等物质
D.加入稀碘液后,周围为蓝色的菌落,一般能产生淀粉酶
答案精析
梳理教材新知
1.(1)生长 繁殖 (2)①组织 微生物 提取物 牛肉膏蛋白胨 取材 营养 配制 营养成分 重复性 准确 蒸馏水 成分 含量 可重复性 繁琐 较高 ②琼脂 ③基础 特殊
2.(1)水 碳源 氮源 无机盐 基本 (2)能量 蔗糖 淀粉 蛋白质 核酸 铵盐 牛肉膏 蛋白胨
3.(1)基础培养基 特殊 (2)①分离 ②纤维素 氮源 抑制或杀死 酚 放线菌 亚硫酸铋 细菌 放线菌 酵母菌 (3)①鉴定 分离和筛选 ②a.水解圈 淀粉酶 b.溴甲酚紫 紫色转为黄色 (4)①营养 有利于 血清 组织液 ②血液 ③a.选择 b.增加 生长优势 c.抑制 增殖
4.(1)①b.琼脂 ②a.放线菌 b.K2HPO4·3H2O FeSO4·7H2O (2)①pH ②灭菌 高压蒸汽灭菌锅 
5.(1)酵母菌 (2)水 碳源 氮源 (3)过滤 加热 补水 5.5 污染 1/5 灭菌 自然倾斜 试管壁 培养皿底部 名称 高压蒸汽灭菌锅 103 kPa 121
判断正误
(1)× (2)× (3)× (4)√
提示 (1)培养基中加入琼脂的目的是作为凝固剂。(2)对于固氮微生物的培养不需要添加氮源。(3)培养不同微生物的培养基成分不同,常用牛肉膏蛋白胨培养基培养细菌,马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养酵母菌等。
探究核心知识
任务一
1.(1)牛肉膏主要提供碳源,蛋白胨主要提供氮源。二者均属于有机物。
(2)该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型。该微生物的碳源和氮源来自有机物。
(3)并不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源。自养微生物能利用无机碳源(比如空气中的CO2),其培养基中不需要加入碳源;固氮微生物可利用N2作为氮源,其培养基中不需要加入氮源。
2.细菌和真菌的代谢类型有所不同,所以培养基的配方有所不同。
跟踪训练
1.D [以CO2为唯一碳源的自养微生物,CO2不是该微生物的能源物质,B正确;水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质是大多数微生物对营养条件的基本需求,C正确;琼脂是凝固剂,不是该微生物的营养要素之一,D错误。]
2.D [对一些微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物可以既作碳源,又作氮源,A错误;无机碳源不能提供能量,B错误;除水以外的无机物种类繁多、功能多样,如CO2可作自养型微生物的碳源,C错误;硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨,同时氨的氧化过程也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源,D正确。]
任务二
1.(1)该培养基属于固体培养基;因为该培养基的配方中含有凝固剂琼脂。
(2)能筛选出产脲酶的细菌;因为该培养基中以尿素作为唯一氮源,只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存;该培养基属于选择培养基。
2.当培养能够分解尿素的细菌时,该细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会导致培养基的pH升高,酚红指示剂将变红;该培养基属于鉴别培养基。
3.选择培养基是根据某种或某类微生物的特殊营养需求配制的,能将所需微生物从混杂的微生物群体中筛选出来;鉴别培养基则在培养基中加入某种试剂或药物,使培养后微生物会发生某种变化,从而快速分类鉴别或分离不同类型的微生物。
跟踪训练
3.ABC [加富培养基是通过增加所需分离的微生物的数量,使其形成生长优势,从而达到分离该微生物的目的。]
4.D [青霉素能抑制某些细菌的生长,因此在培养基中加入青霉素后可以筛选真菌,A正确;各种培养基的配方虽然不同,但其成分一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质,因此培养基中的马铃薯滤液除了为微生物生长提供碳源外,还可提供氮源和无机盐,B正确;磷脂和核苷酸中都含有氮元素,因此氮源进入细胞后,可参与合成磷脂、核苷酸等物质,C正确;淀粉遇稀碘液显蓝色,产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,因此会形成透明圈,D错误。](共66张PPT)
第一节
发酵工程的培养基
第一章 发酵工程
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学习目标
1.概述培养基的成分和类型。
2.掌握配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的方法。
1.培养基的类型
(1)培养基:主要是指为人工培养微生物等而制备的,适合微生物等 、_____或积累代谢产物的营养基质。
梳理 教材新知
生长
繁殖
(2)类型
组织
微生物
提取物
牛肉膏蛋白胨
取材
营养
配制
营养成分
重复性
准确
蒸馏水
成分
含量
可重复性
繁琐
较高
琼脂
基础
特殊
2.基础培养基
(1)概念:各种培养基的配方虽然不同,但其成分一般都含有 、 、
和 等最基本的物质,这些最基本的物质是大多数微生物对营养条件的 需求,提供这些基本需求的培养基就是基础培养基。

碳源
氮源
无机盐
基本
(2)培养基的成分
能量
蔗糖
淀粉
蛋白质
核酸
铵盐
牛肉膏
蛋白胨
3.特殊培养基
(1)概念:以 为基础,进一步配制的具有 用途的培养基。
(2)选择培养基
①概念:是一种能将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中 出来的特殊培养基。
基础培养基
特殊
分离
纤维素
氮源
抑制或杀死

放线菌
亚硫酸铋
细菌
放线菌
酵母菌
(3)鉴别培养基
①用于快速分类 不同类型微生物的特殊培养基,也可用于________
产生某种代谢产物的微生物菌种。
②实例
a.在添加可溶性淀粉的培养基中,如果菌落周围形成淀粉 ,说明是能产生 的菌株。
b.在添加 的培养基中,如果培养基的颜色由 ,说明是产酸微生物。
鉴定
分离和
筛选
水解圈
淀粉酶
溴甲酚紫
紫色转为黄色
(4)加富培养基
①概念:也称 培养基,即在培养基中加入 某些微生物生长和繁殖所需的特殊物质,如血液、 、酵母浸膏、动植物 。
②实例:培养百日咳博德氏菌需要含有 成分的加富培养基。
③加富培养基与选择培养基的比较
a.加富培养基类似于 培养基。
b.采用加富培养基的目的,是 所需分离的微生物的数量,使其形成
,以分离出该种微生物。
营养
有利于
血清
组织液
血液
选择
增加
生长优势
c.采用选择培养基的目的,一般是 不需要的微生物生长和繁殖,而使所需要的微生物 ,再分离出所需微生物。
抑制
增殖
4.常用培养基的配制
(1)①牛肉膏蛋白胨培养基
a.用途:培养细菌。
b.配方:牛肉膏3 g、蛋白胨10 g、NaCl 5 g、 15~20 g、水1 000 mL。
②高氏Ⅰ号培养基
a.用途:分离和培养 。
b.配方:可溶性淀粉20 g、KNO3 1 g、NaCl 0.5 g、 0.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、 0.01 g、琼脂15~20 g、水1 000 mL。
琼脂
放线菌
K2HPO4·3H2O
FeSO4·7H2O
(2)配制要求
①配制培养基需要根据培养目的调节培养基的 。
②对培养基进行 是获得纯净的微生物培养物的前提。实验室一般用
进行灭菌。
pH
灭菌
高压蒸汽灭菌锅
5.配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基
(1)实验目的
学会配制培养基,如培养 的培养基。
(2)实验原理
酵母菌生长繁殖需要的营养物质有 、 、 和无机盐等。马铃薯葡萄糖琼脂培养基具有酵母菌生长所需的碳元素、氮元素和其他营养物质。
酵母菌

碳源
氮源
(3)实验步骤
过滤
加热
补水
5.5
污染
1/5
灭菌
自然倾斜
试管壁
培养皿底部
名称
高压蒸汽灭菌锅
103 kPa
121
(1)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源(  )
(2)所有微生物在培养时,培养基中都需加入氮源(  )
(3)培养不同微生物的培养基成分完全一样(  )
(4)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(  )
提示 培养基中加入琼脂的目的是作为凝固剂。
提示 对于固氮微生物的培养不需要添加氮源。
提示 培养不同微生物的培养基成分不同,常用牛肉膏蛋白胨培养基培养细菌,马铃薯葡萄糖琼脂培养基培养酵母菌等。
×
×
×

任务一:培养基成分的分析
1.如表是牛肉膏蛋白胨培养基的配方,分析回答下列问题:
探究 核心知识
(1)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质分别是什么?属于有机物还是无机物?
提示 牛肉膏主要提供碳源,蛋白胨主要提供氮源。二者均属于有机物。
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 3 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL
(2)该培养基培养的微生物同化作用类型是什么?请说明理由。
提示 该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型。该微生物的碳源和氮源来自有机物。
(3)所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源吗?请举例说明。
提示 并不是所有微生物的培养基中都需要加入碳源、氮源。自养微生物能利用无机碳源(比如空气中的CO2),其培养基中不需要加入碳源;固氮微生物可利用N2作为氮源,其培养基中不需要加入氮源。
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 水
用量 3 g 10 g 5 g 20 g 1 000 mL
2.培养细菌、真菌等不同微生物的培养基的配方有所不同,为什么?
提示 细菌和真菌的代谢类型有所不同,所以培养基的配方有所不同。
核心归纳
1.几种微生物的营养和能量来源
微生物 碳源 氮源 能源
蓝细菌 CO2 光能
硝化细菌 CO2 NH3 NH3的氧化
根瘤菌 糖类等有机物 N2 有机物
大肠杆菌 糖类、蛋白质等有机物 蛋白质等 有机物
核心归纳
2.培养基的成分及功能
营养要素 来源 功能
碳源(提供碳元素的物质) 无机 碳源 CO2、NaHCO3等含碳无机物 ①构成微生物体的重要成分;
②有机碳既是碳源又是能源
有机 碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等
氮源(提供氮元素的物质) 无机 氮源 铵盐、硝酸盐等 合成含氮的代谢产物
核心归纳
营养要素 来源 功能
氮源(提供氮元素的物质) 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、豆饼粉、酵母粉等 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物
水 外界摄入 ①良好的溶剂;②维持生物大分子结构的稳定
无机盐 无机物 是微生物生长繁殖所必需的,也是合成多种代谢产物所必需的
1.下列有关以CO2为唯一碳源的自养微生物所需营养物质的叙述,错误的是
A.铵盐和硝酸盐等无机氮为该微生物提供必要的氮元素
B.碳源物质不是该微生物的能源物质
C.水、无机盐也是该微生物不可缺少的营养物质
D.琼脂是该微生物的营养要素之一

跟踪训练
以CO2为唯一碳源的自养微生物,CO2不是该微生物的能源物质,B正确;
水、无机盐、碳源、氮源等最基本的物质是大多数微生物对营养条件的基本需求,C正确;
琼脂是凝固剂,不是该微生物的营养要素之一,D错误。
2.关于微生物的营养,下列说法正确的是
A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源
B.凡是碳源都能提供能量
C.除水以外的无机物仅提供无机盐
D.无机氮源也可能提供能量

对一些微生物来说,含C、H、O、N的有机化合物可以既作碳源,又作氮源,A错误;
无机碳源不能提供能量,B错误;
除水以外的无机物种类繁多、功能多样,如CO2可作自养型微生物的碳源,C错误;
硝化细菌所利用的氮源是无机氮源——氨,同时氨的氧化过程也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源,D正确。
任务二:培养基的种类的探讨
1.微生物的培养离不开培养基,根据下面某微生物培养基的配方,回答下列问题:
KH2PO4     1.4 g
Na2HPO4     2.1 g
MgSO4·7H2O   0.2 g
葡萄糖     10.0 g
尿素      1.0 g
琼脂      15.0 g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL。
(1)根据培养基的物理性质判断,该培养基属于哪种培养基?并说明理由。
提示 该培养基属于固体培养基;因为该培养基的配方中含有凝固剂琼脂。
(2)此配方能否筛选出产生脲酶(脲酶的作用是催化尿素水解为氨和二氧化碳)的细菌?为什么?从此角度判断该培养基属于什么类型?
提示 能筛选出产脲酶的细菌;因为该培养基中以尿素作为唯一氮源,只有产生脲酶的细菌能利用尿素作为氮源而生存;该培养基属于选择培养基。
2.如果在上述培养基中加入酚红指示剂,培养能够分解尿素的细菌,酚红指示剂将变红的原因是什么?从此角度判断该培养基属于什么类型?
提示 当培养能够分解尿素的细菌时,该细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会导致培养基的pH升高,酚红指示剂将变红;该培养基属于鉴别培养基。
3.简要说明选择培养基与鉴别培养基的主要区别是什么?
提示 选择培养基是根据某种或某类微生物的特殊营养需求配制的,能将所需微生物从混杂的微生物群体中筛选出来;鉴别培养基则在培养基中加入某种试剂或药物,使培养后微生物会发生某种变化,从而快速分类鉴别或分离不同类型的微生物。
核心归纳
1.几种选择培养基的设计
特性 主要用途 设计原理
加入青霉素、四环素等 分离酵母菌或霉菌等真菌 能抑制某些细菌和放线菌的生长,对真菌无作用
不加氮源 分离固氮微生物 固氮微生物能利用空气中的氮气
不加碳源 分离自养型微生物 自养型微生物能利用无机碳源
核心归纳
2.几种常用的鉴别培养基
名称 主要用途 主要化学物质 特征性变化
伊红—亚甲蓝琼脂培养基 鉴别大肠杆菌 伊红、亚甲蓝 出现带金属光泽的深紫色菌落
刚果红培养基 鉴别纤维素分解菌 刚果红、纤维素 纤维素被分解后出现透明圈
油脂培养基 鉴别产脂肪酶菌株 食用油、吐温、中性红指示剂 由淡红色变成深红色
核心归纳
名称 主要用途 主要化学物质 特征性变化
淀粉培养基 鉴别产淀粉酶菌株 可溶性淀粉 淀粉被水解后出现淀粉水解圈
溴甲酚紫培养基 鉴别产酸微生物  溴甲酚紫 培养基颜色由紫色转为黄色
3.(多选)下列对各种培养基的分析和实际相符的是
A.利用缺乏氮源的培养基,能分离出固氮微生物
B.在培养基中添加青霉素、四环素等,可以选择培养出酵母菌等真菌
C.产酸微生物能使添加了溴甲酚紫的培养基由紫色转为黄色
D.加富培养基和选择培养基都能抑制不需要的微生物的生长和繁殖

跟踪训练


加富培养基是通过增加所需分离的微生物的数量,使其形成生长优势,从而达到分离该微生物的目的。
4.马铃薯葡萄糖琼脂培养基常用于真菌的筛选,其配制过程如下:将马铃薯去皮切成小块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯滤液。在马铃薯滤液中加入一定量的琼脂,用水定容后灭菌。下列相关叙述错误的是
A.应在培养基中加入青霉素,以抑制细菌的生长
B.除碳源外,马铃薯滤液还提供氮源和无机盐
C.氮源进入细胞后,可参与合成磷脂、核苷酸等物质
D.加入稀碘液后,周围为蓝色的菌落,一般能产生淀粉酶

青霉素能抑制某些细菌的生长,因此在培养基中加入青霉素后可以筛选真菌,A正确;
各种培养基的配方虽然不同,但其成分一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等最基本的物质,因此培养基中的马铃薯滤液除了为微生物生长提供碳源外,还可提供氮源和无机盐,B正确;
磷脂和核苷酸中都含有氮元素,因此氮源进入细胞后,可参与合成磷脂、核苷酸等物质,C正确;
淀粉遇稀碘液显蓝色,产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,因此会形成透明圈,D错误。
网络构建
课时对点练
题组一 培养基的成分及功能
1.(2023·南京高二检测)某杆菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长,此时微量维生素对该菌的培养而言属于
A.碳源 B.氮源
C.激素 D.特殊营养物质

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2.(2023·淮安高二调研)下列关于培养微生物所需营养物质的描述,正确的是
A.所有碳源都能为微生物生长提供能源
B.蛋白胨可为微生物生长提供碳源和氮源
C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐
D.培养基中营养物质浓度越高,微生物生长繁殖越快

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有机碳源能为大多数微生物生长提供碳源和能源,无机碳源能为自养微生物生长提供碳源,但不能提供能源,A错误;
蛋白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素等,B正确;
硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等,C错误;
培养基中的营养物质需要控制一定的浓度和比例,营养物质浓度太高会导致培养基渗透压过高,从而抑制微生物的生长,D错误。
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3.如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源
C.若除去①,此培养基可培养硝化细菌
D.培养基中若加入氨基酸,则它可充当碳源、氮源

此培养基中不含有机碳源,适合用来培养自养型微生物,A正确;
硝化细菌能进行化能合成作用,但不能固氮,因此若除去①,此培养基不能培养硝化细菌,C错误。
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题组二 培养基的类型
4.天然培养基是利用营养成分难以控制的天然物质配制而成的,合成培养基则是采用成分已知的化学试剂加蒸馏水配制而成的。下列说法正确的是
A.用合成培养基进行实验时,可重复性好
B.天然培养基的营养不如合成培养基丰富
C.微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快
D.合成培养基中不含有机物

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合成培养基中化学成分及其含量明确、实验的可重复性好,A正确;
天然培养基的营养成分一般比合成培养基丰富,B错误;
微生物生长的快慢除了与培养基的成分有关外,还受其他因素的影响,因此不能单一认为微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快,C错误;
合成培养基中也含有机物,D错误。
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5.获得某种特定的微生物一般需要用鉴别培养基进行鉴定,下列属于鉴别培养基的是
A.加入纤维素粉的培养基
B.加入青霉素的培养基
C.加入溴甲酚紫的培养基
D.加入血液成分的培养基

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加入纤维素粉的培养基可以分离出能分解纤维素的微生物,加入青霉素的培养基可以选择培养出酵母菌或霉菌等真菌,因此二者均属于选择培养基,A、B不符合题意;
加入溴甲酚紫的培养基可用于鉴别产酸微生物,属于鉴别培养基,C符合题意;
加入血液成分的培养基可用于培养百日咳博德氏菌,属于加富培养基,D不符合题意。
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6.下列关于微生物培养基种类划分的叙述,错误的是
A.培养基按其物理性质可以分为液体培养基、固体培养基和半固体培
养基
B.培养基按其化学成分可以分为天然培养基、合成培养基
C.培养基按其用途可以分为基础培养基和特殊培养基
D.培养基按其营养构成可以分为含水培养基和无水培养基

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水是微生物必需的营养要素之一,培养基中必须含有水,D错误。
7.下列不属于选择培养基的是
A.培养金黄色葡萄球菌所用的加高浓度食盐的培养基
B.分离自养型细菌所用的不含碳源的培养基
C.用于检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基
D.抑制乳酸菌生长而不抑制酵母菌生长的含抗生素的培养基

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培养金黄色葡萄球菌的培养基中加入了高浓度食盐,在该培养基中只有金黄色葡萄球菌能够耐盐生存,其他微生物的生存受抑制,所以该培养基属于选择培养基,A不符合题意;
不含碳源的培养基中只有自养型细菌能够生存,其他微生物的生存受抑制,所以该培养基属于选择培养基,B不符合题意;
检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基属于鉴别培养基,C符合题意;
含抗生素的培养基可以抑制乳酸菌的生长,而不能抑制酵母菌的生长,所以该培养基属于选择培养基,D不符合题意。
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8.下列关于微生物培养的特殊培养基的叙述,错误的是
A.分离出分解纤维素的微生物应以纤维素作唯一碳源
B.利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物
C.分离分解尿素的细菌的培养基中加入尿素作唯一氮源和能源
D.在培养基中添加一定量的NaCl可筛选出耐盐微生物

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利用尿素作为唯一氮源的选择培养基可分离、筛选分解尿素的细菌,尿素一般不能作为能源物质,糖类可以提供能量,C错误。
题组三 培养基的制备
9.某同学准备配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基并对酵母菌进行纯培养,则该同学的操作顺序应为
①用马铃薯、琼脂和葡萄糖配制培养基 ②待培养基冷却至50 ℃左右时,将培养基分装到洁净的试管中 ③放入高压蒸汽锅中灭菌 ④在试管壁注明培养基的名称等信息,以3~5支为一个单位包扎起来 ⑤测试并调节培养基的pH至5.5
A.①⑤②④③ B.①③②④⑤
C.①④⑤②③ D.①②④③⑤

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10.下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述,错误的是
A.分装时注意不要污染试管口
B.配制培养基时,待其中琼脂溶化后需补足水至1 000 mL
C.制作斜面培养基时,倒入试管中的培养基高度约为试管高度的1/2
D.应采用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌

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11.某培养基成分如图所示。下列相关叙述正确的是
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葡萄糖4~10 g,(NH4)2SO4 4 g,K2HPO4 7 g,KH2PO4 2 g,MgSO4 1 g,CaCl2 0.02 g,微量元素(Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo)各2~10 μg,蒸馏水1 000 mL,pH 7.2
A.从培养基组成来看,该培养基属于固体培养基
B.从培养基的pH分析该培养基可用于培养霉菌
C.去掉(NH4)2SO4,该培养基可用于选择培养固氮微生物
D.微量元素在生物体中含量很少,培养基中可以不加或少加

从培养基组成来看,该培养基属于合成培养基,因其不含凝固剂琼脂,属于液体培养基,A错误;
该培养基的pH为7.2(弱碱性),适于细菌的培养,培养霉菌需将pH调至酸性,B错误;
去掉(NH4)2SO4后,培养基成分缺乏氮源,只有固氮微生物能生长,故可用于固氮微生物的培养,C正确;
微量元素在生物体内的含量少但很重要,是生物体必不可少的成分,培养基中必须添加,D错误。
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12.科研人员在进行实验时常用到甲和乙两种培养基。甲培养基的成分:蛋白胨、牛肉膏、NaCl、水。乙培养基的成分:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂、水。下列相关叙述错误的是
A.蛋白胨可提供的主要营养是氮源和维生素等
B.配制甲、乙培养基时使用的水可以是蒸馏水
C.乙培养基的琼脂能为微生物的生长提供碳源
D.乙为选择培养基,可分离出分解尿素的细菌

琼脂为凝固剂,不能为微生物的生长提供碳源,C错误。
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13.(多选)下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述,正确的是
A.培养基应先调pH再进行灭菌
B.培养基应先灭菌再分装到试管
C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦
D.分装要待培养基冷却到60 ℃左右时进行


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配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤为:配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌,即培养基应先调pH再分装,分装后再灭菌,以避免分装用的试管上有杂菌,造成污染,A正确,B错误。
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14.(多选)(2024·宿迁高二期中)科学地选用和设计适合微生物生长需求的培养基是进行微生物实验的前提。培养基的种类各异,下列对各种培养基的分析和实际相符的是
A.天然培养基营养成分丰富且复杂,一般用于发酵工业生产
B.在液体培养基中添加一定量的琼脂,可以配制成固体培养基
C.淀粉是一种能被所有微生物利用的碳源,是培养基的主要成分
D.在选择培养基中滴加一定浓度的酚溶液可以抑制细菌的生长



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淀粉属于糖类,能够作为大部分微生物的碳源,但有些微生物不能利用淀粉,如谷氨酸棒状杆菌,C错误;
在培养基中加入10%的酚溶液可以抑制细菌和霉菌的生长,D正确。
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15.如表是牛肉膏蛋白胨培养基的配方,探究下列问题:
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材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 蒸馏水
用量 3 g 10 g 5 g 20 g 定容至1 000 mL
注:牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
(1)根据培养基的物理性质判断,该培养基属于_______培养基,理由是________________________________。
(2)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质属于有机物还是无机物?______。
固体
该培养基的配方中含有凝固剂琼脂
有机物
(3)该培养基培养的微生物同化作用类型是______________,理由是______
__________________________。
(4)试从碳源和氮源的角度分析,不同类型微生物所需的培养基成分的特点,并完成表格。
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异养型微生物
该微
生物的碳源和氮源是有机物
项目 自养型微生物 异养型微生物
碳源 CO2、Na2CO3等无机物
氮源
糖类等有机物
NH3、硝酸盐等无机物
尿素、蛋白质等有机物
16.已知有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X (5 g/L)。
Ⅱ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X (15 g/L)。
Ⅲ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X (45 g/L)。
回答下列问题:
(1)Ⅰ号培养基中为微生物提供氮源的是________________。
Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是____。
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牛肉膏、蛋白胨
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牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源。
Ⅱ号、Ⅲ号培养基中能为微生物提供碳源的有机物是X。
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(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会______,其原因是_______________________________
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下降
不能降解X的细菌因缺乏碳源不能
增殖,而能降解X的细菌能够增殖
Ⅱ号培养基是以有机物X为唯一碳源的选择培养基,只有能降解X的细菌才能增殖,而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。
(3)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X分解为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供_______和___________________________________。
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在有氧条件下,丙酮酸参与细菌的有氧呼吸,可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。
能量
合成其他物质的原料(两空顺序可颠倒)第一章 发酵工程
作业1 发酵工程的培养基
(分值:100分)
第1~12题,每题5分;第13~14题,每题6分,共72分。
题组一 培养基的成分及功能
1.(2023·南京高二检测)某杆菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长,此时微量维生素对该菌的培养而言属于(  )
A.碳源 B.氮源
C.激素 D.特殊营养物质
2.(2023·淮安高二调研)下列关于培养微生物所需营养物质的描述,正确的是(  )
A.所有碳源都能为微生物生长提供能源
B.蛋白胨可为微生物生长提供碳源和氮源
C.硝酸钾只能为微生物生长提供无机盐
D.培养基中营养物质浓度越高,微生物生长繁殖越快
3.如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是(  )
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
含量/g 0.4 4.0 0.5 0.5 100 mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类,即水、无机盐、氮源
C.若除去①,此培养基可培养硝化细菌
D.培养基中若加入氨基酸,则它可充当碳源、氮源
题组二 培养基的类型
4.天然培养基是利用营养成分难以控制的天然物质配制而成的,合成培养基则是采用成分已知的化学试剂加蒸馏水配制而成的。下列说法正确的是(  )
A.用合成培养基进行实验时,可重复性好
B.天然培养基的营养不如合成培养基丰富
C.微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快
D.合成培养基中不含有机物
5.获得某种特定的微生物一般需要用鉴别培养基进行鉴定,下列属于鉴别培养基的是(  )
A.加入纤维素粉的培养基
B.加入青霉素的培养基
C.加入溴甲酚紫的培养基
D.加入血液成分的培养基
6.下列关于微生物培养基种类划分的叙述,错误的是(  )
A.培养基按其物理性质可以分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基
B.培养基按其化学成分可以分为天然培养基、合成培养基
C.培养基按其用途可以分为基础培养基和特殊培养基
D.培养基按其营养构成可以分为含水培养基和无水培养基
7.下列不属于选择培养基的是(  )
A.培养金黄色葡萄球菌所用的加高浓度食盐的培养基
B.分离自养型细菌所用的不含碳源的培养基
C.用于检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基
D.抑制乳酸菌生长而不抑制酵母菌生长的含抗生素的培养基
8.下列关于微生物培养的特殊培养基的叙述,错误的是(  )
A.分离出分解纤维素的微生物应以纤维素作唯一碳源
B.利用缺乏氮源的培养基可分离出固氮微生物
C.分离分解尿素的细菌的培养基中加入尿素作唯一氮源和能源
D.在培养基中添加一定量的NaCl可筛选出耐盐微生物
题组三 培养基的制备
9.某同学准备配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基并对酵母菌进行纯培养,则该同学的操作顺序应为(  )
①用马铃薯、琼脂和葡萄糖配制培养基 ②待培养基冷却至50 ℃左右时,将培养基分装到洁净的试管中 ③放入高压蒸汽锅中灭菌 ④在试管壁注明培养基的名称等信息,以3~5支为一个单位包扎起来 ⑤测试并调节培养基的pH至5.5
A.①⑤②④③ B.①③②④⑤
C.①④⑤②③ D.①②④③⑤
10.下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述,错误的是(  )
A.分装时注意不要污染试管口
B.配制培养基时,待其中琼脂溶化后需补足水至1 000 mL
C.制作斜面培养基时,倒入试管中的培养基高度约为试管高度的1/2
D.应采用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌
11.某培养基成分如图所示。下列相关叙述正确的是(  )
葡萄糖4~10 g,(NH4)2SO4 4 g,K2HPO4 7 g,KH2PO4 2 g,MgSO4 1 g,CaCl2 0.02 g,微量元素(Fe、Co、Mn、Zn、Cu、Ni、Mo)各2~10 μg,蒸馏水1 000 mL,pH 7.2
A.从培养基组成来看,该培养基属于固体培养基
B.从培养基的pH分析该培养基可用于培养霉菌
C.去掉(NH4)2SO4,该培养基可用于选择培养固氮微生物
D.微量元素在生物体中含量很少,培养基中可以不加或少加
12.科研人员在进行实验时常用到甲和乙两种培养基。甲培养基的成分:蛋白胨、牛肉膏、NaCl、水。乙培养基的成分:KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂、水。下列相关叙述错误的是(  )
A.蛋白胨可提供的主要营养是氮源和维生素等
B.配制甲、乙培养基时使用的水可以是蒸馏水
C.乙培养基的琼脂能为微生物的生长提供碳源
D.乙为选择培养基,可分离出分解尿素的细菌
13.(多选)下列关于配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的叙述,正确的是(    )
A.培养基应先调pH再进行灭菌
B.培养基应先灭菌再分装到试管
C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦
D.分装要待培养基冷却到60 ℃左右时进行
14.(多选)(2024·宿迁高二期中)科学地选用和设计适合微生物生长需求的培养基是进行微生物实验的前提。培养基的种类各异,下列对各种培养基的分析和实际相符的是(    )
A.天然培养基营养成分丰富且复杂,一般用于发酵工业生产
B.在液体培养基中添加一定量的琼脂,可以配制成固体培养基
C.淀粉是一种能被所有微生物利用的碳源,是培养基的主要成分
D.在选择培养基中滴加一定浓度的酚溶液可以抑制细菌的生长
15.(16分)如表是牛肉膏蛋白胨培养基的配方,探究下列问题:
材料 牛肉膏 蛋白胨 NaCl 琼脂 蒸馏水
用量 3 g 10 g 5 g 20 g 定容至
1 000 mL
注:牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。
(1)根据培养基的物理性质判断,该培养基属于________培养基,理由是________________________________________________________________________。
(2)该培养基中主要提供碳源和氮源的物质属于有机物还是无机物?__________________。
(3)该培养基培养的微生物同化作用类型是______________,理由是____________________________。
(4)试从碳源和氮源的角度分析,不同类型微生物所需的培养基成分的特点,并完成表格。
项目 自养型微生物 异养型微生物
碳源 CO2、Na2CO3等无机物
氮源
16.(12分)已知有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。
Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X (5 g/L)。
Ⅱ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X (15 g/L)。
Ⅲ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X (45 g/L)。
回答下列问题:
(1)Ⅰ号培养基中为微生物提供氮源的是____________________。
Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是________。
(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会________,其原因是_________________________________________________________。
(3)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X分解为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供__________________和____________________。
答案精析
1.D
2.B [有机碳源能为大多数微生物生长提供碳源和能源,无机碳源能为自养微生物生长提供碳源,但不能提供能源,A错误;蛋白胨能为微生物的生长繁殖提供碳源、氮源和维生素等,B正确;硝酸钾能为微生物生长提供无机盐和氮源等,C错误;培养基中的营养物质需要控制一定的浓度和比例,营养物质浓度太高会导致培养基渗透压过高,从而抑制微生物的生长,D错误。]
3.C [此培养基中不含有机碳源,适合用来培养自养型微生物,A正确;硝化细菌能进行化能合成作用,但不能固氮,因此若除去①,此培养基不能培养硝化细菌,C错误。]
4.A [合成培养基中化学成分及其含量明确、实验的可重复性好,A正确;天然培养基的营养成分一般比合成培养基丰富,B错误;微生物生长的快慢除了与培养基的成分有关外,还受其他因素的影响,因此不能单一认为微生物在合成培养基上比在天然培养基上生长快,C错误;合成培养基中也含有机物,D错误。]
5.C [加入纤维素粉的培养基可以分离出能分解纤维素的微生物,加入青霉素的培养基可以选择培养出酵母菌或霉菌等真菌,因此二者均属于选择培养基,A、B不符合题意;加入溴甲酚紫的培养基可用于鉴别产酸微生物,属于鉴别培养基,C符合题意;加入血液成分的培养基可用于培养百日咳博德氏菌,属于加富培养基,D不符合题意。]
6.D [水是微生物必需的营养要素之一,培养基中必须含有水,D错误。]
7.C [培养金黄色葡萄球菌的培养基中加入了高浓度食盐,在该培养基中只有金黄色葡萄球菌能够耐盐生存,其他微生物的生存受抑制,所以该培养基属于选择培养基,A不符合题意;不含碳源的培养基中只有自养型细菌能够生存,其他微生物的生存受抑制,所以该培养基属于选择培养基,B不符合题意;检测大肠杆菌的伊红—亚甲蓝培养基属于鉴别培养基,C符合题意;含抗生素的培养基可以抑制乳酸菌的生长,而不能抑制酵母菌的生长,所以该培养基属于选择培养基,D不符合题意。]
8.C [利用尿素作为唯一氮源的选择培养基可分离、筛选分解尿素的细菌,尿素一般不能作为能源物质,糖类可以提供能量,C错误。]
9.A 10.C
11.C [从培养基组成来看,该培养基属于合成培养基,因其不含凝固剂琼脂,属于液体培养基,A错误;该培养基的pH为7.2(弱碱性),适于细菌的培养,培养霉菌需将pH调至酸性,B错误;去掉(NH4)2SO4后,培养基成分缺乏氮源,只有固氮微生物能生长,故可用于固氮微生物的培养,C正确;微量元素在生物体内的含量少但很重要,是生物体必不可少的成分,培养基中必须添加,D错误。]
12.C [琼脂为凝固剂,不能为微生物的生长提供碳源,C错误。]
13.AC [配制马铃薯葡萄糖琼脂培养基的实验步骤为:配制培养基→调节pH→分装→包扎→灭菌,即培养基应先调pH再分装,分装后再灭菌,以避免分装用的试管上有杂菌,造成污染,A正确,B错误。]
14.ABD [淀粉属于糖类,能够作为大部分微生物的碳源,但有些微生物不能利用淀粉,如谷氨酸棒状杆菌,C错误;在培养基中加入10%的酚溶液可以抑制细菌和霉菌的生长,D正确。]
15.(1)固体 该培养基的配方中含有凝固剂琼脂 (2)有机物
(3)异养型微生物 该微生物的碳源和氮源是有机物 (4)糖类等有机物 NH3、硝酸盐等无机物 尿素、蛋白质等有机物
16.(1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖 (3)能量
合成其他物质的原料(两空顺序可颠倒)
解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中,牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源。Ⅱ号、Ⅲ号培养基中能为微生物提供碳源的有机物是X。(2)Ⅱ号培养基是以有机物X为唯一碳源的选择培养基,只有能降解X的细菌才能增殖,而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)在有氧条件下,丙酮酸参与细菌的有氧呼吸,可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。

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