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(共46张PPT)
重点突破练(一)
第一章 发酵工程
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题组一　微生物的基本培养技术
1.培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述，错误的是
A.培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
B.培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定
C.培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求
D.培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质
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培养基是根据不同微生物的生长繁殖需求进行配制的，不能满足各种微生物生长繁殖的需求，C错误。
2.(2024·淮安高二检测)如表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法，错误的是
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编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
用量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
A.此培养基不能培养酵母菌
B.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源和氮源
C.表中各成分的用量按照所培养的微生物的营养需要来确定
D.若除去①，再在此培养基中加入有机碳源，则可用于培养大肠杆菌
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编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
用量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
酵母菌(异养型微生物)必须从环境中摄取现成的有机物才能生存，此培养基中没有任何有机物，因此不能培养酵母菌，A正确；
培养基是为了培养某种生物而配制的营养基质，据此可推测，表中各成分的用量按照所培养的微生物的营养需要来确定，C正确；
除去①，再在此培养基中加入有机碳源，此培养基也不能用来培养大肠杆菌，因为缺少了氮源，D错误。
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3.如图是平板划线法接种微生物的示意图，下列叙述错误的是
A.该接种过程一般需要灼烧接种环5次
B.划线结束可看到划线末端出现不连续的单菌落
C.若培养的是尿素分解菌，可加入酚红指示剂
D.该接种方法不能准确计数培养液中微生物的数量
√
为了防止杂菌污染，每一次划线之前和划线操作结束后
都需要将接种环灼烧灭菌，图示中共有4个划线区域，
因此需要灼烧接种环5次，A正确；
划线结束后，将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养一段时间后，可看到划线末端出现不连续的单菌落，B错误；
若培养的是尿素分解菌，因该菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，使培养基的pH呈碱性，酚红指示剂将变红，所以可加入酚红指示剂来鉴定，C正确；
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使用该接种方法(平板划线法)，大部分微生物的菌落连在一起，故不能准确计数培养液中微生物的数量，D正确。
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4.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。据图分析，下列说法错误的是
A.获得图甲效果的接种方法是稀释涂布平板法
B.获得图乙效果的接种方法是平板划线法
C.若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌落可能会连成一片
D.两种接种方式用到的工具相同
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两种接种方式用到的接种工具不同，获得图甲效果的接种方法是稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，获得图乙效果的接种方法是平板划线法，接种工具是接种环，A、B正确，D错误；
稀释涂布平板法纯化微生物时，如果菌液浓度过高会使细菌细胞连在一起，形成的菌落也会连成片，平板划线法纯化微生物时，如果挑取的菌液浓度过高也会使部分菌落连在一起，C正确。
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题组二　微生物的选择培养和计数
5.微生物接种的方法有很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种法和穿刺接种法等。下列关于各类接种方法的叙述，错误的是
A.不同接种方法的核心都是要防止杂菌的污染，保持培养物的纯度
B.上述四种接种方法，仅稀释涂布平板法可用于微生物的计数
C.斜面接种法和穿刺接种法均可用于保存菌种
D.平板划线法仅需在划线前灼烧一次接种环即可
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平板划线法每次划线之前及划线操作结束时，都需要灼烧接种环，D错误。
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6.下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的说法，不正确的是
A.相同稀释倍数的样液至少涂布三个平板才能保证结果的准确性
B.将不同稀释度下计算的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数
C.本实验需要设置一个接种等体积无菌水的对照组以提高实验结果的可信度
D.土壤中真菌的数量比细菌的数量少，所以真菌的稀释倍数要比细菌小
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为了保证结果准确，一般选取同一稀释度下、菌落数在30～300的平板进行计数，B错误。
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7.(多选)漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存产漆酶菌株的过程，下列相关叙述不正确的是
A.生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C.在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步计数
D.斜面培养基中含有大量营养物质，可在常温下长期保存菌株
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生活污水中含有大量微生物，但含有的木质较少，可能分离不出产漆酶菌株，A错误；
在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，不是计数，C错误；
斜面培养基中含有大量营养物质，不能在常温下保存，可在低温下临时保存菌株，D错误。
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8.(多选)(2023·南京高二调研)MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度的不同种类抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，进行药敏试验以了解病原菌对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验所用器材，图2为实验结果示意图。下列叙述正确的是
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A.为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中①②③
B.据图2可知，抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅱ的MIC
C.图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突
变株
D.无法确定图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素Ⅳ的抗性越强
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为获得长满测试菌的平板，需要采
用稀释涂布平板法接种，该方法需
要使用图1中①酒精灯、②涂布器和
③培养基，④接种环是平板划线法接种时需要的接种工具，A正确；
MIC为药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度，相同浓度的抗生素抑菌圈越大，其MIC越小，分析题图可知，抗生素Ⅰ的抑菌圈明显大于抗生素Ⅱ的抑菌圈，因此对于该试验所用的测试菌而言，抗生素Ⅰ的MIC小于抗生素Ⅱ的MIC，B错误；
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图2抑菌圈中出现菌落的原因可能
是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ
的突变株，故能在含有抗生素Ⅳ的
抑菌圈内生长，C正确；
在抑菌圈中出现的菌落均是对抗生素Ⅳ具有抗性的菌株，无法通过题图信息判断它们之间抗性的强弱，D正确。
题组三　传统发酵技术
9.某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A.①③ B.②④ C.②③ D.①④
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缺氧环境有利于乳酸菌的生长繁殖，如果密封不严，则会抑制乳酸菌的生长繁殖，促进好氧微生物的生长繁殖，①③错误，②④正确。
10.果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是
A.葡萄汁要装满发酵瓶，营造无氧环境，以利于发酵
B.在葡萄酒发酵过程中，每隔一段时间打开瓶盖一次，放出CO2
C.果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D.在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，以利于醋酸菌的代谢
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为了防止发酵过程中发酵液溢出，葡萄汁装入发酵瓶时不能装满，要留大约1/3的空间，A错误；
制作葡萄酒时，因为酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的同时，也会产生CO2，所以每隔一段时间要将瓶盖拧松一次，排出多余的CO2，但不能打开瓶盖，以防O2和杂菌进入，B错误；
制作果酒时要将温度严格控制在18～25 ℃，而制作果醋时要将温度严格控制在30～35 ℃，C错误；
制作果醋的原理是醋酸菌发酵产生醋酸，醋酸菌是好氧细菌，因此制作果醋时应适时通入空气(或O2)，D正确。
11.米酒、酸奶、泡菜等都属于传统发酵制品，下列相关叙述正确的是
A.米酒发酵液中冒出的“气泡”都来源于酵母菌的无氧呼吸
B.制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸
C.酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧、保证乳酸菌的有氧呼吸
D.为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
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酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故米酒发酵液中冒出的“气泡”并不都是来源于酵母菌的无氧呼吸，A错误；
醋酸菌为好氧细菌，制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，B正确；
乳酸菌为厌氧细菌，需要在无氧条件下进行发酵，C错误；
发酵前原料不需要灭菌，D错误。
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12.(2024·连云港高二质检)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是
A.果酒、果醋制作中涉及的微生物的代谢类型完全相同
B.泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中
及时补水
C.果酒中的酒精可以为醋酸菌发酵提供碳源、氮源和能源
D.醋酸菌利用果酒中的酒精进行醋酸发酵过程中会产生大量气泡
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制作果酒的微生物是酵母菌，制作果醋的微生物是醋酸菌，酵母菌是异养兼性厌氧菌，醋酸菌属于异养好氧菌，代谢类型不同，A错误；
泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水且在发酵过程中及时补水，以创造无氧环境，B正确；
果酒中的酒精可以为醋酸菌的发酵提供碳源和能源，不能提供氮源，C错误；
醋酸菌利用果酒中的酒精进行醋酸发酵过程中不会产生气体，没有气泡产生，D错误。
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13.(2021·全国乙，37)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程，利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的过程示意图如下。
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回答下列问题：
(1)米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供______。
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蛋白质
碳源
大豆中含有丰富的蛋白质，可为微生物的生长繁殖提供氮源。小麦中的淀粉可以为微生物的生长繁殖提供碳源。
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(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的________、________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质，通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于__________(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
蛋白酶
脂肪酶
氨基酸
异养好氧
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米曲霉在发酵过程中产生的蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使发酵的产物具有独特的风味。米曲霉发酵时需要利用现有的有机物和需要氧气，说明其代谢类型是异养好氧型。
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(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于_________(填“真核生物”或“原核生物”)，添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是_______________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是_________________。
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原核生物
酒精和二氧化碳
酒精、乳酸、食盐
乳酸菌没有核膜包被的细胞核，
属于原核生物。酵母菌属于兼
性厌氧型微生物，既可以进行
有氧呼吸，也可以进行无氧呼
吸，无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳。在发酵池中酵母菌产生的酒精能抑制杂菌的生长，乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长。
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14.牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶常用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图1所示操作。请回答下列问题：
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(1)牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是____________________________。
基本不会破坏牛奶的营养成分
(2)取最终的酸奶稀释液0.1 mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的_____。
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乙
(3)图示接种方法为稀释涂布平板法，理
想情况下，培养一段时间后可在培养基
表面形成菌落。若用该方法培养设置了
3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，
则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为
__________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_____(填“大”或“小”)，如果培养基上出现________________________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
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6.4×107
小
(形状、大小、颜色)不同
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用图3中_____(填字母)所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。
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B
5(或五)
15.(2024·宿迁高二期中)营养缺陷型菌株是在人工诱变或自发突变后由于某些酶的缺失导致代谢过程中的一些合成反应不能正常进行的菌株。如图是实验人员利用“影印法”筛选出某种氨基酸缺陷型菌株的示意图。请据图回答下列问题：
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(1)与完全培养基相比，图中基本培养基组成成分上的区别是________________。过程①的接种方法为________________，接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是______
__________________。
不含该种氨基酸
稀释涂布平板法
液充分渗入培养基
使菌
(2)进行过程②时，应先将丝绒布转印至_______(填“基本”或“完全”)培养基上，原因是________________________________
_______________________。丝绒布在两个培养基之间进行转印的操作要点是________
_______________________________。
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基本
防止将特定营养成分(或氨基酸)从完全培养基带入基本培养基
养基之间保持丝绒布转印方向一致
在两种培
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进行过程②时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，目的是防止将特定营养成分从完全培养基带入基本培养基。丝绒布在两种培养基之间进行转印的操作要点是保持丝绒布转印方向一致。
(3)筛选氨基酸缺陷型菌株的方法是挑选_____(填字母)的菌落。
A.完全培养基和基本培养基对应位置上都有
B.完全培养基中有，基本培养基对应位置上
没有
C.基本培养基中有，完全培养基对应位置上
没有
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营养缺陷型菌株是由于某些酶的缺失导致代谢过程中的一些合成反应不能正常进行，因而在完全培养基上才能生长，在基本培养基对应位置上不能生长，故选B。
(4)统计菌落数时要每隔24 h观察计数一次，直到菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致遗漏，若培养时间太长将导致_______________________________(写出两点)，影响计数。
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菌落粘连(重叠、混杂)、菌体死亡
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统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止因培养时间不足遗漏菌落的种类和数目，若培养时间太长易导致菌落粘连、培养基表面干燥脱水、微生物衰败、菌落特征不易观察等影响计数。作业6　重点突破练(一)
(分值：100分)
第1～8题，每题4分；第9～12题，每题5分，共52分。
题组一　微生物的基本培养技术
1．培养微生物需要提供适宜的培养基。下列关于培养微生物的培养基的叙述，错误的是(　　)
A．培养基为目标微生物提供适宜的生长环境
B．培养基的成分需根据微生物的代谢特点而定
C．培养基需满足各种微生物生长繁殖的需求
D．培养基通常需包含水、无机盐、碳源、氮源等营养物质
2．(2024·淮安高二检测)如表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法，错误的是(　　)
编号 ① ② ③ ④ ⑤
成分 (NH4)2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O
用量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL
A.此培养基不能培养酵母菌
B．培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源和氮源
C．表中各成分的用量按照所培养的微生物的营养需要来确定
D．若除去①，再在此培养基中加入有机碳源，则可用于培养大肠杆菌
3.如图是平板划线法接种微生物的示意图，下列叙述错误的是(　　)
A．该接种过程一般需要灼烧接种环5次
B．划线结束可看到划线末端出现不连续的单菌落
C．若培养的是尿素分解菌，可加入酚红指示剂
D．该接种方法不能准确计数培养液中微生物的数量
4．如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。据图分析，下列说法错误的是(　　)
A．获得图甲效果的接种方法是稀释涂布平板法
B．获得图乙效果的接种方法是平板划线法
C．若在纯化土壤细菌时菌液浓度过高，培养基上的菌落可能会连成一片
D．两种接种方式用到的工具相同
题组二　微生物的选择培养和计数
5．微生物接种的方法有很多，如平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种法和穿刺接种法等。下列关于各类接种方法的叙述，错误的是(　　)
A．不同接种方法的核心都是要防止杂菌的污染，保持培养物的纯度
B．上述四种接种方法，仅稀释涂布平板法可用于微生物的计数
C．斜面接种法和穿刺接种法均可用于保存菌种
D．平板划线法仅需在划线前灼烧一次接种环即可
6．下列有关利用稀释涂布平板法对土壤中微生物进行计数的说法，不正确的是(　　)
A．相同稀释倍数的样液至少涂布三个平板才能保证结果的准确性
B．将不同稀释度下计算的菌落数求平均值得到较为准确的菌落数
C．本实验需要设置一个接种等体积无菌水的对照组以提高实验结果的可信度
D．土壤中真菌的数量比细菌的数量少，所以真菌的稀释倍数要比细菌小
7．(多选)漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。如图是分离、纯化和保存产漆酶菌株的过程，下列相关叙述不正确的是(　　　　)
A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品
B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落
C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步计数
D．斜面培养基中含有大量营养物质，可在常温下长期保存菌株
8．(多选)(2023·南京高二调研)MIC是指药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度。某研究小组将含有相同浓度的不同种类抗生素Ⅰ～Ⅳ的四个大小相同的纸片分别贴在长满测试菌的平板上，进行药敏试验以了解病原菌对四种抗生素的敏感程度，用于指导临床合理选用抗生素。图1为实验所用器材，图2为实验结果示意图。下列叙述正确的是(　　　　)
A．为获得长满测试菌的平板，需要使用图1中①②③
B．据图2可知，抗生素Ⅰ的MIC大于抗生素Ⅱ的MIC
C．图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株
D．无法确定图2抑菌圈中离纸片越近的菌落对抗生素Ⅳ的抗性越强
题组三　传统发酵技术
9．某人利用乳酸菌制作泡菜，因操作不当导致泡菜腐烂，其原因可能是(　　)
①密闭缺氧的环境抑制了乳酸菌的生长繁殖
②密封不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖
③密封不严，氧气抑制了其他厌氧微生物的生长繁殖
④密封不严，氧气促进了好氧微生物的生长繁殖
A．①③ B．②④ C．②③ D．①④
10．果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是(　　)
A．葡萄汁要装满发酵瓶，营造无氧环境，以利于发酵
B．在葡萄酒发酵过程中，每隔一段时间打开瓶盖一次，放出CO2
C．果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃
D．在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，以利于醋酸菌的代谢
11．米酒、酸奶、泡菜等都属于传统发酵制品，下列相关叙述正确的是(　　)
A．米酒发酵液中冒出的“气泡”都来源于酵母菌的无氧呼吸
B．制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸
C．酸奶和泡菜制作中均需要及时通氧、保证乳酸菌的有氧呼吸
D．为降低杂菌污染，发酵前需要对器具、原料等进行灭菌
12．(2024·连云港高二质检)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是(　　)
A．果酒、果醋制作中涉及的微生物的代谢类型完全相同
B．泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中及时补水
C．果酒中的酒精可以为醋酸菌发酵提供碳源、氮源和能源
D．醋酸菌利用果酒中的酒精进行醋酸发酵过程中会产生大量气泡
13．(18分)(2021·全国乙，37)工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程，利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史，某企业通过发酵制作酱油的过程示意图如下。
回答下列问题：
(1)米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的________________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供________________。
(2)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的____________、__________能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和__________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质，通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于__________(填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。
(3)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于____________(填“真核生物”或“原核生物”)，添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是____________________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是________________________________________________________________________。
14．(14分)牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶常用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图1所示操作。请回答下列问题：
(1)牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是____________________________________________。
(2)取最终的酸奶稀释液0.1 mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的________。
(3)图示接种方法为稀释涂布平板法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为__________个，运用这种方法统计的结果往往较实际值______(填“大”或“小”)，如果培养基上出现__________________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用图3中________(填字母)所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。
15．(16分)(2024·宿迁高二期中)营养缺陷型菌株是在人工诱变或自发突变后由于某些酶的缺失导致代谢过程中的一些合成反应不能正常进行的菌株。如图是实验人员利用“影印法”筛选出某种氨基酸缺陷型菌株的示意图。请据图回答下列问题：
(1)与完全培养基相比，图中基本培养基组成成分上的区别是______________________。过程①的接种方法为__________________，接种后的培养皿不能立即倒置培养的原因是________________________________________________________________________。
(2)进行过程②时，应先将丝绒布转印至________(填“基本”或“完全”)培养基上，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
丝绒布在两个培养基之间进行转印的操作要点是______________________________。
(3)筛选氨基酸缺陷型菌株的方法是挑选________(填字母)的菌落。
A．完全培养基和基本培养基对应位置上都有
B．完全培养基中有，基本培养基对应位置上没有
C．基本培养基中有，完全培养基对应位置上没有
(4)统计菌落数时要每隔24 h观察计数一次，直到菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致遗漏，若培养时间太长将导致__________________________(写出两点)，影响计数。
答案精析
1．C　[培养基是根据不同微生物的生长繁殖需求进行配制的，不能满足各种微生物生长繁殖的需求，C错误。]
2．D　[酵母菌(异养型微生物)必须从环境中摄取现成的有机物才能生存，此培养基中没有任何有机物，因此不能培养酵母菌，A正确；培养基是为了培养某种生物而配制的营养基质，据此可推测，表中各成分的用量按照所培养的微生物的营养需要来确定，C正确；除去①，再在此培养基中加入有机碳源，此培养基也不能用来培养大肠杆菌，因为缺少了氮源，D错误。]
3．B　[为了防止杂菌污染，每一次划线之前和划线操作结束后都需要将接种环灼烧灭菌，图示中共有4个划线区域，因此需要灼烧接种环5次，A正确；划线结束后，将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养一段时间后，可看到划线末端出现不连续的单菌落，B错误；若培养的是尿素分解菌，因该菌合成的脲酶可将尿素分解成氨，使培养基的pH呈碱性，酚红指示剂将变红，所以可加入酚红指示剂来鉴定，C正确；使用该接种方法(平板划线法)，大部分微生物的菌落连在一起，故不能准确计数培养液中微生物的数量，D正确。]
4．D　[两种接种方式用到的接种工具不同，获得图甲效果的接种方法是稀释涂布平板法，接种工具是涂布器，获得图乙效果的接种方法是平板划线法，接种工具是接种环，A、B正确，D错误；稀释涂布平板法纯化微生物时，如果菌液浓度过高会使细菌细胞连在一起，形成的菌落也会连成片，平板划线法纯化微生物时，如果挑取的菌液浓度过高也会使部分菌落连在一起，C正确。]
5．D　[平板划线法每次划线之前及划线操作结束时，都需要灼烧接种环，D错误。]
6．B　[为了保证结果准确，一般选取同一稀释度下、菌落数在30～300的平板进行计数，B错误。]
7．ACD　[生活污水中含有大量微生物，但含有的木质较少，可能分离不出产漆酶菌株，A错误；在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化，不是计数，C错误；斜面培养基中含有大量营养物质，不能在常温下保存，可在低温下临时保存菌株，D错误。]
8．ACD　[为获得长满测试菌的平板，需要采用稀释涂布平板法接种，该方法需要使用图1中①酒精灯、②涂布器和③培养基，④接种环是平板划线法接种时需要的接种工具，A正确；MIC为药敏试验中某种抗生素对测试菌的最低抑制浓度，相同浓度的抗生素抑菌圈越大，其MIC越小，分析题图可知，抗生素Ⅰ的抑菌圈明显大于抗生素Ⅱ的抑菌圈，因此对于该试验所用的测试菌而言，抗生素Ⅰ的MIC小于抗生素Ⅱ的MIC，B错误；图2抑菌圈中出现菌落的原因可能是病原菌中出现了能抗抗生素Ⅳ的突变株，故能在含有抗生素Ⅳ的抑菌圈内生长，C正确；在抑菌圈中出现的菌落均是对抗生素Ⅳ具有抗性的菌株，无法通过题图信息判断它们之间抗性的强弱，D正确。]
9．B　[缺氧环境有利于乳酸菌的生长繁殖，如果密封不严，则会抑制乳酸菌的生长繁殖，促进好氧微生物的生长繁殖，①③错误，②④正确。]
10．D　[为了防止发酵过程中发酵液溢出，葡萄汁装入发酵瓶时不能装满，要留大约1/3的空间，A错误；制作葡萄酒时，因为酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的同时，也会产生CO2，所以每隔一段时间要将瓶盖拧松一次，排出多余的CO2，但不能打开瓶盖，以防O2和杂菌进入，B错误；制作果酒时要将温度严格控制在18～25 ℃，而制作果醋时要将温度严格控制在30～35 ℃，C错误；制作果醋的原理是醋酸菌发酵产生醋酸，醋酸菌是好氧细菌，因此制作果醋时应适时通入空气(或O2)，D正确。]
11．B　[酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，故米酒发酵液中冒出的“气泡”并不都是来源于酵母菌的无氧呼吸，A错误；醋酸菌为好氧细菌，制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，B正确；乳酸菌为厌氧细菌，需要在无氧条件下进行发酵，C错误；发酵前原料不需要灭菌，D错误。]
12．B　[制作果酒的微生物是酵母菌，制作果醋的微生物是醋酸菌，酵母菌是异养兼性厌氧菌，醋酸菌属于异养好氧菌，代谢类型不同，A错误；泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水且在发酵过程中及时补水，以创造无氧环境，B正确；果酒中的酒精可以为醋酸菌的发酵提供碳源和能源，不能提供氮源，C错误；醋酸菌利用果酒中的酒精进行醋酸发酵过程中不会产生气体，没有气泡产生，D错误。]
13．(1)蛋白质　碳源　(2)蛋白酶　脂肪酶　氨基酸　异养好氧　(3)原核生物　酒精和二氧化碳　酒精、乳酸、食盐
解析　(1)大豆中含有丰富的蛋白质，可为微生物的生长繁殖提供氮源。小麦中的淀粉可以为微生物的生长繁殖提供碳源。(2)米曲霉在发酵过程中产生的蛋白酶能将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸，产生的脂肪酶能将脂肪分解为甘油和脂肪酸，使发酵的产物具有独特的风味。米曲霉发酵时需要利用现有的有机物和需要氧气，说明其代谢类型是异养好氧型。(3)乳酸菌没有核膜包被的细胞核，属于原核生物。酵母菌属于兼性厌氧型微生物，既可以进行有氧呼吸，也可以进行无氧呼吸，无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳。在发酵池中酵母菌产生的酒精能抑制杂菌的生长，乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长。
14．(1)基本不会破坏牛奶的营养成分　(2)乙　(3)6.4×107　小　(形状、大小、颜色)不同　(4)B　5(或五)
15．(1)不含该种氨基酸　稀释涂布平板法　使菌液充分渗入培养基　(2)基本　防止将特定营养成分(或氨基酸)从完全培养基带入基本培养基　在两种培养基之间保持丝绒布转印方向一致　(3)B　(4)菌落粘连(重叠、混杂)、菌体死亡
解析　(2)进行过程②时，应先将丝绒布转印至基本培养基上，目的是防止将特定营养成分从完全培养基带入基本培养基。丝绒布在两种培养基之间进行转印的操作要点是保持丝绒布转印方向一致。(3)营养缺陷型菌株是由于某些酶的缺失导致代谢过程中的一些合成反应不能正常进行，因而在完全培养基上才能生长，在基本培养基对应位置上不能生长，故选B。(4)统计菌落种类和数量时要每隔24 h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止因培养时间不足遗漏菌落的种类和数目，若培养时间太长易导致菌落粘连、培养基表面干燥脱水、微生物衰败、菌落特征不易观察等影响计数。

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