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(共80张PPT)
模块检测试卷(一)
1.如表所示为某培养基的配方，下列叙述错误的是
单项选择题
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成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4·7H2O (CH2O) 蒸馏水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至1 000 mL 0.1万单位
A.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B.该培养基不能用于培养大肠杆菌
C.根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D.固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
√
单项选择题
固体培养基和液体培养基的区别在于是否加入凝固剂(如琼脂)，题表所示的培养基配方中没有琼脂，因此属于液体培养基，A正确，D错误；
青霉素会抑制大部分细菌的生长繁殖，因此该培养基不能用于培养大肠杆菌，B正确；
该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。
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2.某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不正确的是
A.配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min
B.将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中
处理15 min
C.对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37 ℃下培
养24 h
D.统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒
温度
√
单项选择题
单项选择题
由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，还应保证牛奶的营养价值不被破坏，D错误。
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3.某学校生物兴趣小组探究洋葱研磨液对大肠杆菌生长的抑制作用，下列相关实验操作正确的是
A.药品称量、溶化和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行
B.采用平板划线法将大肠杆菌菌体逐步稀释分散到培养基表面
C.分别将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置
D.通过比较不同滤纸片周围大肠杆菌的菌落数来判断其抑制作用
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单项选择题
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单项选择题
药品称量、溶化是进行配制培养基的过程，培养基配制后需要灭菌，故药品称量和溶化不需要无菌操作，倒平板过程需要进行无菌操作，A错误；
采用稀释涂布平板法将大肠杆菌菌体逐步稀释涂布到培养基表面，B错误；
可分别将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置，加入洋葱研磨液的是实验组，加入无菌水的是对照组，C正确；
将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置，通过比较不同滤纸片抑菌圈的大小来判断其抑制作用，D错误。
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4.(2024·连云港高二月考)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是
A.利用果酒制作果醋的过程中，只需将温度提高到30～35 ℃即可进行果醋发酵
B.果酒制作过程中发酵液pH先上升后下降，果醋制作过程中发酵液pH一直下降
C.泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中及时补水
D.制作泡菜时，为了防止杂菌污染和加速醋酸菌发酵，可加入灭菌后的陈泡菜水
单项选择题
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单项选择题
利用果酒制作果醋过程中，需将温度提高到30～35 ℃、接种醋酸菌、充入氧气可进行果醋发酵，A错误；
果酒制作过程中酵母菌细胞呼吸产生CO2，使发酵液pH下降，B错误；
泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水创造无氧环境，C正确；
加入陈泡菜水的目的是增加乳酸菌的数量，使乳酸菌在短时间内发展为优势菌种，而灭菌后的陈泡菜水中乳酸菌已经死亡，达不到上述效果，D错误。
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5.在自制酸奶的过程中，除了高温加热以外，其他灭菌方法还有
A.紫外线照射 B.真空包装
C.用保鲜膜密闭 D.添加防腐剂
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单项选择题
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紫外线照射可以杀灭真菌，A符合题意；
真空包装、用保鲜膜密闭、添加防腐剂都起到了抑菌作用，不属于灭菌方法，B、C、D不符合题意。
6.科学家利用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成一株完整的新植株(如图)。关于这一科学事实，下列相关叙述错误的是
A.培育成的新植株是单倍体植株
B.这种生殖方式属于无性生殖
C.细胞数目的增多是通过有丝分裂
D.证明了植物细胞具有全能性
单项选择题
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单项选择题
二倍体胡萝卜韧皮部细胞离体培养成的植株
仍属于二倍体，不是单倍体，A错误；
图示采用了植物组织培养技术，属于无性生
殖，B正确；
植物组织培养过程中，细胞通过有丝分裂方式增殖，C正确；
该实验证明了植物细胞具有全能性，D正确。
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7.利用胡萝卜根段培养获得试管苗的过程如图。下列有关叙述错误的是
A.步骤②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡3 min，再用无菌水冲洗2～3次
B.步骤③切取的组织块中需带有形成层，原因是其分裂旺盛易脱分化
C.步骤⑤和步骤⑥所用培养基中生长素和细胞分裂素相对含量不同
D.对试管苗炼苗的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
单项选择题
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单项选择题
步骤②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡10 s(时间过长会伤害植物细胞)，再用无菌水冲洗2～3次，A错误；
对试管苗炼苗的操作步骤之一是用流水除去根部培养基，需将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间后，再移栽到大田土壤中，D正确。
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8.(2024·南京高二检测)紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术能够在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。如图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。下列叙述错误的是
A.紫草叶肉细胞须经脱分化处理后才可以加入反
应器中培养
B.反应器中紫草细胞的生长呈现“S”型增长规律
C.细胞数量与细胞所处的生长期都能影响紫草素的
产量
D.在培养过程中，要保证充足的氧气供应和适宜的光照
单项选择题
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单项选择题
紫草素是从紫草的愈伤组织细胞中提取
得到的，所以生产前须将离体的紫草细
胞进行脱分化，以获得大量的紫草愈伤
组织细胞，A正确；
据图可知，反应器中紫草细胞开始生长较慢，经过适应期，然后进入稳定期，细胞的生长呈现“S”型增长规律，B正确；
经过脱分化形成的愈伤组织，细胞进行有氧呼吸，所以应不断补充氧气，但诱导形成愈伤组织的过程中不需要提供光照，D错误。
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9.临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生进行产前诊断。具体操作步骤如图所示，下列选项中说法错误的是
A.秋水仙素处理可使细胞周期停滞
在中期，便于进行染色体分析
B.实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C.细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞
生长
D.利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
单项选择题
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秋水仙素可抑制分裂前期纺锤
体的形成，可使细胞周期停滞
在中期，该时期染色体形态稳
定、数目清晰，有利于进行染色体分析，A正确；
细胞在低渗溶液中会吸水，故实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察，B正确；
利用该技术能够检测唐氏综合征等染色体异常遗传病，不能够检测镰状细胞贫血，因为镰状细胞贫血是基因突变导致的，D错误。
单项选择题
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10.研究表明，髓系细胞触发TREM2(一种免疫抑制受体)，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列相关说法正确的是
A.步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋
白和TREM2抗体
B.步骤③筛选得到的细胞需传代培养以
防止出现接触抑制
C.植物组织培养需要的气体条件和步骤⑥相同
D.TREM2单克隆抗体的使用可以增强免疫系统的免疫监视功能
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步骤①向小鼠注射TREM2蛋白，让小鼠产生免疫反应，获得能产生抗体的B淋巴细胞，步骤⑤向小鼠腹腔注射杂交细胞，目的是获得单克隆抗体，A错误；
步骤③筛选得到的是杂交细胞，能无限增殖，不会出现接触抑制，B错误；
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动物细胞培养过程中加入CO2用于维持培养液的pH，而植物组织培养的过程中通常不需要加入CO2，C错误；
TREM2单克隆抗体具有强特异性，能与TREM2特异性结合，提高肿瘤免疫疗法的疗效，增强免疫系统的免疫监视功能，D正确。
11.研究人员利用胚胎干细胞制造出了不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，可用来研究人类的早期胚胎发育。下列说法错误的是
A.动物的早期胚胎、骨髓、神经系统中均存在干细胞
B.对“拟原肠胚”进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率
C.该模型可用于研究酒精、药物和病原体对早期胚胎发育的影响
D.利用核移植技术也能获得胚胎干细胞，但其遗传物质主要来自供核体
单项选择题
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胚胎分割需要选择形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚，B错误。
12.(2024·苏州高二检测)下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是
A.限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列
B.限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸
基团
C.有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双
链DNA片段的平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键
D.用作分子“搬运工”的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组
DNA分子的筛选
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大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A错误；
限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，即一条链断开1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团，所以限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团，B正确；
单项选择题
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T4 DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误；
作为载体的质粒通常采用抗性基因(四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因)作为标记基因，便于成功导入重组DNA分子的受体细胞的筛选，D错误。
13.目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因是长度为300 bp的片段。下列有关说法不正确的是
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单项选择题
A.PCR退火温度不宜太低，避免引物错配和模
板链形成双链
B.电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大
小、带电量和构象有关
C.选取引物甲、丙，扩增出450 bp的片段时，
可以说明目的基因正接
D.选取引物甲、乙，扩增出400 bp的片段时，可以说明目的基因反接
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单项选择题
退火是在高温解旋后降低温度让引物与模板
链结合，退火温度不宜太低，避免引物错配
和模板链形成双链，A正确；
电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大
小、带电量和构象有关，如电泳一段时间后，
较大的DNA分子迁移距离小，离加样孔近，而较小的DNA分子迁移距离大，离加样孔远，B正确；
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单项选择题
由于使用的引物是甲和丙，没有与目的基因相应位置配对，因此不管目的基因正接还是反接，均为450 bp的片段，C错误。
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单项选择题
14.下列叙述中支持“种植转基因农作物对人类是有利的”观点的是
A.转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白
B.转基因农作物的扩散会威胁生物的多样性
C.推广种植抗虫棉可减少农药使用对环境的污染
D.转基因农作物可打破自然物种的原有界限，破坏生态系统的稳定性
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单项选择题
转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白，对人类有害，A不符合题意；
转基因农作物的花粉扩散到近缘物种，进而会威胁生物的多样性，B不符合题意；
推广种植抗虫棉可减少农药使用，进而减少对环境的污染，对人类有利，也能提高经济效益，C符合题意；
转基因农作物可能会导致基因污染，进而打破自然物种的原有界限，破坏生态系统的稳定性，对人类不利，D不符合题意。
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15.(2024·连云港高二检测)鱼茶味酸而微咸，富含多种必需氨基酸。鱼茶的发酵菌群主要是乳酸菌，如图是某同学绘制的鱼茶发酵过程中各菌种数量及发酵液pH的变化曲线。下列叙述正确的是
A.与制作传统泡菜类似，鱼茶发酵也不需要严
格灭菌
B.鱼茶发酵初期，各菌种的种间关系主要是种
间竞争
C.利用显微镜直接计数可快速直观统计微生物数量
D.醋酸菌和酵母菌消失的原因都是因为氧气已耗尽
多项选择题
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传统泡菜制作和鱼茶发酵过程都是传统发酵过程，一般利用的是自然条件下的微生物，不需要严格灭菌，A正确；
由图可以看出，醋酸菌、酵母菌和乳酸菌
的数量在发生变化，醋酸菌和酵母菌的数
量呈先上升后下降趋势，而乳酸菌的含量呈先上升后稳定趋势，据此推测鱼茶发酵初期各菌种的种间关系主要是种间竞争，B正确；
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显微镜直接计数可利用血细胞计数板等快速观察并统计微生物的数量，C正确；
酵母菌可进行无氧呼吸，消失的原因是养料耗尽、代谢产物积累等，D错误。
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16.(2024·无锡高二期中)我国科学家通过原生质体融合技术将“HB”柚叶肉细胞原生质体和“Nova”橘柚愈伤组织原生质体融合为异源四倍体“NH”。“NH”非组蛋白乙酰化的差异使之具有偏向不同亲本的特征。下列叙述正确的是
A.“NH”细胞中叶绿体基因组来自“HB”柚和“Nova”橘柚
B.“NH”非组蛋白乙酰化的差异会导致蛋白质表达不一致
C.异源四倍体“NH”与优良二倍体品种杂交，可以获取无子三倍体
D.原生质体融合技术能有效克服生殖隔离，极大丰富柑橘属的基因库
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“Nova”橘柚愈伤组织原生质体没有叶绿体，因此“NH”细胞中叶绿体基因组只来自“HB”柚，A错误；
“NH”非组蛋白乙酰化的差异会导致蛋白质表达不一致(即表观遗传)，使之具有偏向不同亲本的特征，B正确；
异源四倍体“NH”与优良二倍体品种杂交，可以获取三倍体，由于该三倍体细胞染色体无法正常联会，不能进行减数分裂形成种子，故为无子三倍体，C正确；
原生质体融合技术不能增加新基因，不能丰富柑橘属的基因库，D错误。
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17.通过引物设计，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变，如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述错误的是
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多项选择题
A.限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在
　引物1和引物2的5′端
B.PCR反应体系需要加入dNTP、热稳定的
　DNA聚合酶、Ca2＋等
C.第2轮PCR中，引物1与图中②结合形成
　两条链等长的突变基因
D.在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且
　两条链等长的DNA占1/4
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多项选择题
√
√
DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸的(从引物的3′端延伸)，据此可知，图中限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的5′端，A正确；
PCR反应体系中需要加入dNTP、热稳定的DNA聚合酶和Mg2＋等，B错误；
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多项选择题
第2轮PCR中，引物1与图中②结合形成两条链不等长的突变基因，因为图中②是由引物2开始直到完整的DNA单链，而引物1与该模板链的退火过程并没有从该模板DNA单链的一端开始，C错误；
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多项选择题
在第3轮PCR结束后，会产生23＝8(个)DNA分子，其中含突变碱基对且两条链等长的DNA分子有2个，其他的DNA分子均是不等长的，故含突变碱基对且两条链等长的DNA分子所占的比例为1/4，D正确。
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多项选择题
18.第三代试管婴儿技术也称胚胎植入前遗传学分析，指在胚胎移植前，取胚胎细胞的遗传物质进行分析，筛选出健康胚胎进行移植的方法。下列有关说法不正确的是
A.胚胎植入前遗传学分析过程需要进行腹腔穿刺取羊水中的细胞
B.体外受精后常在体外培养一段时间后才进行胚胎移植
C.胚胎移植的受体对植入的胚胎的遗传特性几乎没有影响
D.第三代试管婴儿技术的成熟意味着人类可以选择和定制孩子
多项选择题
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√
√
多项选择题
胚胎植入前遗传学分析过程不需要进行羊膜腔穿刺取羊水细胞，因为此时羊水中不含有胚胎细胞，A错误；
第三代试管婴儿技术的成熟，也要受到严格的监管，并不意味着人类可以随意选择和定制孩子，D错误。
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19.(2024·徐州高二检测)发酵型青梅果醋的生产主要采用碱中和青梅汁之后再进行酒精发酵、醋酸发酵，然而这种生产工艺会损失青梅的功能性成分。因此，筛选能够耐受青梅高酸环境的醋酸菌是提高发酵型青梅果醋品质的关键(已知醋酸能与培养基中的碳酸钙反应生成能溶于水的醋酸钙)。请回答以下问题：
(1)食醋生产的三个主要的过程：一是原料中淀粉的分解，即糖化作用(水解)；二是酒精发酵，即_______(填微生物名称)将糖转化成乙醇；三是醋酸发酵，即醋酸菌将乙醇转化成乙酸，该微生物的代谢类型是___________。
非选择题
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酵母菌
异养好氧型
(2)①菌种筛选及发酵生产涉及的三种培养基如表。
非选择题
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培养基A 葡萄糖、酵母粉、无水碳酸钙、琼脂、3%乙醇
培养基B 葡萄糖、酵母粉、3%乙醇
培养基C 葡萄糖、酵母粉、6%乙醇
具体流程：取腐烂一周的青梅若干，加入装有培养基B的摇瓶中培养一段时间，经_____稀释后，接种于培养基A上，选取_________________________________
____________且生长良好的单菌落10株。将上述初筛的10株醋酸菌接种于培养基C
非选择题
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梯度
菌落直径与透明圈直径比值较小(或透明圈较大)
中，结果如图1。研究者选择菌株J－27作为后续实验菌株，原因是____________________________。
乙醇转化率、总酸含量均最高
②研究人员对J－27进行诱变处理，选取突变菌株J－2736，与两种商业化的醋酸菌——沪酿1.01、AS1.41分别接种于青梅果酒中进行青梅果醋发酵，结果如图2。沪酿1.01和AS1.41发酵结束时青梅果醋
非选择题
发酵液中总酸含量为20 g·L－1左右，而两者应用于粮食醋发酵时，发酵液总酸含量一般可以达到50 g·L－1左右。推测原因可能是_____________
__________________________。
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青梅果醋发酵
时pH较低，抑制了菌种活性
非选择题
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依据图2信息可知，沪酿1.01和AS1.41
发酵结束时青梅果醋发酵液中总酸含
量为20 g·L－1左右，而两者应用于粮
食醋发酵时，发酵液总酸含量一般可
以达到50 g·L－1左右，由于醋酸发酵
需要酶的催化，且酶的催化需要温和的条件，易受pH的影响，所以推测原因可能是青梅果醋发酵时pH较低，抑制了菌种活性。
③图2结果说明在青梅果醋发酵过程中，菌株J－2736发酵性能优于沪酿1.01和AS1.41。研究人员继续对J－2736的发酵条件进行了研究，发现初始乙醇含量可能对青梅果醋发酵具有一定影响，实验结果如图3。由结果表明，初始乙醇含量较低或较高时，总酸含量分别是_______________________________________________________________________，
非选择题
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初始乙醇含量较低时，总酸含量也较低；初始乙醇含量较高时，总酸含量更低
试分析造成这种现象的原因：乙醇含量过低，醋酸菌可利用的底物较少，______________
__________，而乙醇含量过高，则会抑制醋酸菌的生长和代谢，____________________
________。
非选择题
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产物乙酸的生
成量较少
导致青梅果醋中总酸含
量较低
非选择题
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果醋的形成是以乙醇为底物，在酶的催化下，通过醋酸菌发酵形成的。依据图3可知，当乙醇含量较低时(5%)，总酸含量较低，此时是由于乙醇作为底物不足；当乙醇含量较高时(9%)，总酸含量更低，推测
原因可能是乙醇含量过高会抑制醋酸菌的生长和代谢，导致青梅果醋中总酸含量较低。
非选择题
20.园艺工作者在栽培开黄花的兰花品种时，偶然发现了一株开白花的兰花。以这株白花兰花作为实验材料，利用离体的组织或细胞培育出完整的植株。据图回答下列问题：
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(1)培养材料选自白花植株的不同部位，下列细胞中不适合进行植物组织培养的是_____。
A.表皮细胞 B.叶肉细胞
C.成熟筛管细胞 D.茎尖分生区细胞
C
非选择题
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成熟筛管细胞的部分细胞器和细胞核都退化了，不能分裂分化，不适合进行植物组织培养，C符合题意。
非选择题
(2)图中生理过程__________(填写图中字母和名称)是对细胞分化不可逆的否定。经过程b产生的胚状体中出现形态结构不同的细胞，其根本原因是__________________。
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a脱分化
基因的选择性表达
一般而言，细胞分化是一个不可逆的过程，但图示过程a脱分化是对其的否定；经过程b产生的胚状体中出现形态结构不同的细胞，是细胞再分化的结果，细胞分化的根本原因是基因的选择性表达。
非选择题
(3)已知柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工厂化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养到__________阶段即可。
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愈伤组织
柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，因此，将柴油树细胞培养到愈伤组织阶段即可。
非选择题
(4)若想获得人工种子，通常将_________和人工胚乳包埋在人工种皮中；用人工种子的繁殖方式属于______繁殖。
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胚状体
无性
人工种子是指将在植物组织培养中得到的胚状体和具有养分的人工胚乳包埋在具有保护功能的人工种皮中；人工种子没有经过两性生殖细胞的结合，属于无性繁殖。
非选择题
(5)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如图所示。
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
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非选择题
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选用新生营养芽为外植体的原因是__________________________________________________________。据图分析，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在生长起始较快、快速生长时间较长、______________等。
新生营养芽细胞分化程度低，分裂能力强，容易诱导形成PLBs
PLBs产量较高
非选择题
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新生营养芽细胞分化程度低，分裂能力强，容易诱导形成PLBs，因此选用新生营养芽为外植体。结合图示可知，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下PLBs产量较高、生长起始较快、快速生长时间较长。
非选择题
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(6)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案时探讨了以下问题：
①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设3个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基__________后按比例加入。
灭菌冷却
非选择题
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②实验进程和取样：实验60天完成，每10天取样，将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。若初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为_____。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的_____________________________________________________________
时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
72
生物碱含量平均值最大(或PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大)
非选择题
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因ABA受热易分解，不适合用高压蒸汽灭菌，可采用过滤除菌法，且等高压蒸汽灭菌后的培养基冷却后再加入；若初始(第0天)数据已知，每10天取样，实验60天完成，设3个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，即每10天需测定的样品数为12个，因此待第60天完成，一共有6次样品测定，一共需要测定的样品数量为12×6＝72(个)；当某3个样品(重复样)的生物碱含量平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
非选择题
21.胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛。请据图回答下列问题：
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(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于_______、_______，细胞B的名称是__________。
供体1
供体2
卵母细胞
非选择题
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由图示可看出应用1中获得的小牛的遗传物质来源于供体1和供体2；细胞B为处于减数第二次分裂中期的卵母细胞。
非选择题
(2)牛完成体内受精的场所是________；胚胎移植后可以通过_____从母体获得正常发育所需要的物质。应用2产生小牛的方法中，采用的胚胎工程技术有__________、__________(至少答出2种)等。
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输卵管
胎盘
体外受精
胚胎移植
非选择题
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应用2产生小牛应用了体外受精(精子与卵细胞在体外结合)、早期胚胎培养(通常培养至桑椹胚或囊胚阶段)、胚胎移植等技术手段。
非选择题
(3)应用3中获取的胚胎干细胞属于_______细胞，还可以在骨髓、外周血、脐带血中获取_______细胞。
(4)应用4中通过__________技术获得二分胚①和②，同时，可以通过取样________细胞进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对___________________的分析进行性别鉴定。
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全能干
多能干
胚胎分割
滋养层
染色体(或性染色体)
非选择题
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获得二分胚的技术是胚胎分割技术；滋养层细胞将来发育为胎儿的胎膜和胎盘，可以通过取样滋养层细胞进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；由于雌雄个体的性染色体组成不同，故也可在细胞水平上通过对染色体(或性染色体)的分析进行性别鉴定。
非选择题
22.多不饱和脂肪酸(PUFAs)是人体必需脂肪酸，猪肉是我国主要的肉类消费品，提高其PUFAs含量对居民健康具重要意义。为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者
从线虫中获得控制PUFAs合成的
必需酶基因fat1，培育转fat1基因
猪，操作过程如图1。图中GFP
基因表达出绿色荧光蛋白。回答
下列问题：
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非选择题
(1)利用PCR技术扩增fat植株植株基因时，应在两种引物的一端分别加上限制酶_________________识别与切割的序列。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体一般选用两种限制酶，选择的原则是_____(填字母)。
a.目的基因编码蛋白质的序列中有两
种限制酶切割位点
b.表达载体内，每种限制酶只有一个
切割位点
c.酶切后，目的基因两端的黏性末端
序列相同
d.酶切后，载体形成的两个黏性末端序列不同
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EcoRⅠ、BamHⅠ
bd
非选择题
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据题图可知，载体有三种限制酶的
切割位点可供选择，分析目的基因
fat1中也存在HindⅢ限制酶切割位
点，所以不能选择HindⅢ，应在
两种引物的一端分别加上限制酶
EcoRⅠ和BamHⅠ识别与切割的序列。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是目的基因编码蛋白质的序列中，不能有限制酶的切割位点，a错误；
非选择题
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表达载体内，每种限制酶只有一个
切割位点，b正确；
酶切后，目的基因形成的两个黏性
末端序列应该不同，否则会自我环
化，c错误；
酶切后，载体形成的两个黏性末端序列应该不同，否则会自我连接，d正确。
非选择题
(2)图1中的连接产物需先导入大肠杆菌中的原因是____________________
___________________________________________________________________________________。
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需先导入大肠杆菌筛选正确的重组表达载体，再导入猪成纤维细胞，以提高转基因的成功率
连接产物为混合物，
非选择题
(3)将重组表达载体转染猪成纤维
细胞，另设一组空白对照。48小
时后在荧光显微镜下观察到____
____________________________
____________________________
____________，说明转染成功。然后以转基因细胞为核供体构建克隆胚胎，最终获得转fat1基因猪。
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染重组表达载体的猪成纤维细胞有绿色荧光，而空白对照组无绿色荧光
转
非选择题
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由题图可知，重组表达载体有绿色
荧光蛋白(GFP)基因，而空白对照
组无绿色荧光蛋白(GFP)基因，48
小时后在荧光显微镜下观察到转染
重组表达载体的猪成纤维细胞有绿
色荧光，而空白对照组无绿色荧光，则说明转染成功。
非选择题
(4)研究者提取转基因猪的基因组DNA，利用限制酶DraⅢ将其完全酶切并电泳分离。然后用探针通过______________的方法，检测fat1基因是否成功整合在猪基因组DNA中，酶切方式及检测结果如图2。
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DNA分子杂交
非选择题
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用DNA分子杂交技术检测fat1基
因是否成功整合在猪基因组DNA
中：用放射性同位素标记的fat1基
因DNA片段作探针，使探针与基
因组DNA杂交，如果显示出杂交
带，就说明fat1基因已成功整合在猪基因组DNA中。
非选择题
①转基因猪1、2、3中分别被转入了__________个fat1基因。
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1、2、1
由电泳结果图示可知，转基因猪1、2、3中分别被转入了1、2、1个fat1基因。
非选择题
②该实验不能说明成功培育转基因猪，理由是______________________
_______________________________________________________。
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没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量
非选择题
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转基因猪已经培育成功的标志是fat1基因在转基因猪体内成功表达，此时能够检测到转基因猪体内含有fat1基因表达的蛋白质，转基因猪体内具有较高的PUFAs含量。
而该实验没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量，因此不能说明成功培育转基因猪。模块检测试卷(一)
(分值：100分)
一、单项选择题：共14小题，每小题2分，共28分。每小题只有一个选项符合题意。
1．如表所示为某培养基的配方，下列叙述错误的是(　　)
成分 NaNO3 K2HPO4 MgSO4·7H2O (CH2O) 蒸馏水 青霉素
含量 3 g 1 g 0.5 g 30 g 定容至 1 000 mL 0.1万 单位
A.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基
B．该培养基不能用于培养大肠杆菌
C．根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型
D．固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基
2．某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，下列相关实验操作不正确的是(　　)
A．配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃、100 kPa条件下处理15～30 min
B．将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min
C．对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在37 ℃下培养24 h
D．统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度
3．某学校生物兴趣小组探究洋葱研磨液对大肠杆菌生长的抑制作用，下列相关实验操作正确的是(　　)
A．药品称量、溶化和倒平板等操作都必须在酒精灯火焰旁进行
B．采用平板划线法将大肠杆菌菌体逐步稀释分散到培养基表面
C．分别将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置
D．通过比较不同滤纸片周围大肠杆菌的菌落数来判断其抑制作用
4．(2024·连云港高二月考)下列关于传统发酵技术的叙述，正确的是(　　)
A．利用果酒制作果醋的过程中，只需将温度提高到30～35 ℃即可进行果醋发酵
B．果酒制作过程中发酵液pH先上升后下降，果醋制作过程中发酵液pH一直下降
C．泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水，且在发酵过程中及时补水
D．制作泡菜时，为了防止杂菌污染和加速醋酸菌发酵，可加入灭菌后的陈泡菜水
5．在自制酸奶的过程中，除了高温加热以外，其他灭菌方法还有(　　)
A．紫外线照射 B．真空包装
C．用保鲜膜密闭 D．添加防腐剂
6．科学家利用植物组织培养技术，将二倍体胡萝卜韧皮部的一些细胞进行离体培养，最终发育成一株完整的新植株(如图)。关于这一科学事实，下列相关叙述错误的是(　　)
A．培育成的新植株是单倍体植株
B．这种生殖方式属于无性生殖
C．细胞数目的增多是通过有丝分裂
D．证明了植物细胞具有全能性
7．利用胡萝卜根段培养获得试管苗的过程如图。下列有关叙述错误的是(　　)
A．步骤②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡3 min，再用无菌水冲洗2～3次
B．步骤③切取的组织块中需带有形成层，原因是其分裂旺盛易脱分化
C．步骤⑤和步骤⑥所用培养基中生长素和细胞分裂素相对含量不同
D．对试管苗炼苗的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
8．(2024·南京高二检测)紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术能够在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。如图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。下列叙述错误的是(　　)
A．紫草叶肉细胞须经脱分化处理后才可以加入反应器中培养
B．反应器中紫草细胞的生长呈现“S”型增长规律
C．细胞数量与细胞所处的生长期都能影响紫草素的产量
D．在培养过程中，要保证充足的氧气供应和适宜的光照
9．临床上常对羊水中胎儿脱落的细胞进行染色体分析，得出染色体数量以及结构变异的重要信息，辅助医生进行产前诊断。具体操作步骤如图所示，下列选项中说法错误的是(　　)
A．秋水仙素处理可使细胞周期停滞在中期，便于进行染色体分析
B．实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察
C．细胞培养过程中需适时更换培养液，防止代谢产物积累过多危害细胞生长
D．利用该技术能够检测镰状细胞贫血、唐氏综合征等染色体异常遗传病
10．研究表明，髓系细胞触发TREM2(一种免疫抑制受体)，在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此，TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列相关说法正确的是(　　)
A．步骤①和⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和TREM2抗体
B．步骤③筛选得到的细胞需传代培养以防止出现接触抑制
C．植物组织培养需要的气体条件和步骤⑥相同
D．TREM2单克隆抗体的使用可以增强免疫系统的免疫监视功能
11．研究人员利用胚胎干细胞制造出了不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，可用来研究人类的早期胚胎发育。下列说法错误的是(　　)
A．动物的早期胚胎、骨髓、神经系统中均存在干细胞
B．对“拟原肠胚”进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率
C．该模型可用于研究酒精、药物和病原体对早期胚胎发育的影响
D．利用核移植技术也能获得胚胎干细胞，但其遗传物质主要来自供核体
12．(2024·苏州高二检测)下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是(　　)
A．限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列
B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团
C．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键
D．用作分子“搬运工”的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
13．目的基因和载体如果用同一种限制酶处理，连接时会出现正反接的情况，为鉴定筛选出的表达载体中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR后，结合电泳技术鉴定，图示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，其中目的基因是长度为300 bp的片段。下列有关说法不正确的是(　　)
A．PCR退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链
B．电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关
C．选取引物甲、丙，扩增出450 bp的片段时，可以说明目的基因正接
D．选取引物甲、乙，扩增出400 bp的片段时，可以说明目的基因反接
14．下列叙述中支持“种植转基因农作物对人类是有利的”观点的是(　　)
A．转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白
B．转基因农作物的扩散会威胁生物的多样性
C．推广种植抗虫棉可减少农药使用对环境的污染
D．转基因农作物可打破自然物种的原有界限，破坏生态系统的稳定性
二、多项选择题：共4小题，每小题3分，共12分。每小题有不止一个选项符合题意。
15．(2024·连云港高二检测)鱼茶味酸而微咸，富含多种必需氨基酸。鱼茶的发酵菌群主要是乳酸菌，如图是某同学绘制的鱼茶发酵过程中各菌种数量及发酵液pH的变化曲线。下列叙述正确的是(　　　　)
A．与制作传统泡菜类似，鱼茶发酵也不需要严格灭菌
B．鱼茶发酵初期，各菌种的种间关系主要是种间竞争
C．利用显微镜直接计数可快速直观统计微生物数量
D．醋酸菌和酵母菌消失的原因都是因为氧气已耗尽
16．(2024·无锡高二期中)我国科学家通过原生质体融合技术将“HB”柚叶肉细胞原生质体和“Nova”橘柚愈伤组织原生质体融合为异源四倍体“NH”。“NH”非组蛋白乙酰化的差异使之具有偏向不同亲本的特征。下列叙述正确的是(　　　　)
A．“NH”细胞中叶绿体基因组来自“HB”柚和“Nova”橘柚
B．“NH”非组蛋白乙酰化的差异会导致蛋白质表达不一致
C．异源四倍体“NH”与优良二倍体品种杂交，可以获取无子三倍体
D．原生质体融合技术能有效克服生殖隔离，极大丰富柑橘属的基因库
17．通过引物设计，运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变，如图为基因工程中获取突变基因的过程，其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对，但不影响引物与模板链的整体配对，反应体系中引物1和引物2分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点。下列有关叙述错误的是(　　　　)
A．限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的5′端
B．PCR反应体系需要加入dNTP、热稳定的DNA聚合酶、Ca2＋等
C．第2轮PCR中，引物1与图中②结合形成两条链等长的突变基因
D．在第3轮PCR结束后，含突变碱基对且两条链等长的DNA占1/4
18．第三代试管婴儿技术也称胚胎植入前遗传学分析，指在胚胎移植前，取胚胎细胞的遗传物质进行分析，筛选出健康胚胎进行移植的方法。下列有关说法不正确的是(　　　　)
A．胚胎植入前遗传学分析过程需要进行腹腔穿刺取羊水中的细胞
B．体外受精后常在体外培养一段时间后才进行胚胎移植
C．胚胎移植的受体对植入的胚胎的遗传特性几乎没有影响
D．第三代试管婴儿技术的成熟意味着人类可以选择和定制孩子
三、非选择题：共4小题，共60分。
19．(16分)(2024·徐州高二检测)发酵型青梅果醋的生产主要采用碱中和青梅汁之后再进行酒精发酵、醋酸发酵，然而这种生产工艺会损失青梅的功能性成分。因此，筛选能够耐受青梅高酸环境的醋酸菌是提高发酵型青梅果醋品质的关键(已知醋酸能与培养基中的碳酸钙反应生成能溶于水的醋酸钙)。请回答以下问题：
(1)(2分)食醋生产的三个主要的过程：一是原料中淀粉的分解，即糖化作用(水解)；二是酒精发酵，即____________________(填微生物名称)将糖转化成乙醇；三是醋酸发酵，即醋酸菌将乙醇转化成乙酸，该微生物的代谢类型是____________________。
(2)①菌种筛选及发酵生产涉及的三种培养基如表。
培养基A 葡萄糖、酵母粉、无水碳酸钙、琼脂、3%乙醇
培养基B 葡萄糖、酵母粉、3%乙醇
培养基C 葡萄糖、酵母粉、6%乙醇
具体流程：取腐烂一周的青梅若干，加入装有培养基B的摇瓶中培养一段时间，经__________________稀释后，接种于培养基A上，选取____________________且生长良好的单菌落10株。将上述初筛的10株醋酸菌接种于培养基C中，结果如图1。研究者选择菌株J－27作为后续实验菌株，原因是____________________________。
　　
②研究人员对J－27进行诱变处理，选取突变菌株J－2736，与两种商业化的醋酸菌——沪酿1.01、AS1.41分别接种于青梅果酒中进行青梅果醋发酵，结果如图2。沪酿1.01和AS1.41发酵结束时青梅果醋发酵液中总酸含量为20 g·L－1左右，而两者应用于粮食醋发酵时，发酵液总酸含量一般可以达到50 g·L－1左右。推测原因可能是___________________________。
③图2结果说明在青梅果醋发酵过程中，菌株J－2736发酵性能优于沪酿1.01和AS1.41。研究人员继续对J－2736的发酵条件进行了研究，发现初始乙醇含量可能对青梅果醋发酵具有一定影响，实验结果如图3。由结果表明，初始乙醇含量较低或较高时，总酸含量分别是____________________________________________________________________________，试分析造成这种现象的原因：乙醇含量过低，醋酸菌可利用的底物较少，______________________，而乙醇含量过高，则会抑制醋酸菌的生长和代谢，________________________________。
20．(20分)园艺工作者在栽培开黄花的兰花品种时，偶然发现了一株开白花的兰花。以这株白花兰花作为实验材料，利用离体的组织或细胞培育出完整的植株。据图回答下列问题：
(1)(1分)培养材料选自白花植株的不同部位，下列细胞中不适合进行植物组织培养的是________。
A．表皮细胞 B．叶肉细胞
C．成熟筛管细胞 D．茎尖分生区细胞
(2)图中生理过程__________(填写图中字母和名称)是对细胞分化不可逆的否定。经过程b产生的胚状体中出现形态结构不同的细胞，其根本原因是________________________________。
(3)(1分)已知柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工厂化生产。若利用此技术，将柴油树细胞培养到____________阶段即可。
(4)若想获得人工种子，通常将__________________和人工胚乳包埋在人工种皮中；用人工种子的繁殖方式属于______________繁殖。
(5)铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如图所示。
在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：
选用新生营养芽为外植体的原因是______________________________________。据图分析，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在生长起始较快、快速生长时间较长、____________________等。
(6)脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案时探讨了以下问题：
①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设3个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基______________后按比例加入。
②实验进程和取样：实验60天完成，每10天取样，将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。若初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为______________。
③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的______________________________时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
21．(每空1分，共12分)胚胎工程技术包含的内容很丰富，如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛。请据图回答下列问题：
(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于________________、________________，细胞B的名称是________________。
(2)牛完成体内受精的场所是______________；胚胎移植后可以通过______________从母体获得正常发育所需要的物质。应用2产生小牛的方法中，采用的胚胎工程技术有______________、____________(至少答出2种)等。
(3)应用3中获取的胚胎干细胞属于__________细胞，还可以在骨髓、外周血、脐带血中获取______________细胞。
(4)应用4中通过______________技术获得二分胚①和②，同时，可以通过取样________________细胞进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对________________的分析进行性别鉴定。
22．(12分)多不饱和脂肪酸(PUFAs)是人体必需脂肪酸，猪肉是我国主要的肉类消费品，提高其PUFAs含量对居民健康具重要意义。为解决猪肉中PUFAs含量不足的问题，研究者从线虫中获得控制PUFAs合成的必需酶基因fat1，培育转fat1基因猪，操作过程如图1。图中GFP基因表达出绿色荧光蛋白。回答下列问题：
(1)(2分)利用PCR技术扩增fat1基因时，应在两种引物的一端分别加上限制酶______________识别与切割的序列。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体一般选用两种限制酶，选择的原则是________(填字母)。
a．目的基因编码蛋白质的序列中有两种限制酶切割位点
b．表达载体内，每种限制酶只有一个切割位点
c．酶切后，目的基因两端的黏性末端序列相同
d．酶切后，载体形成的两个黏性末端序列不同
(2)图1中的连接产物需先导入大肠杆菌中的原因是_______________________________。
(3)将重组表达载体转染猪成纤维细胞，另设一组空白对照。48小时后在荧光显微镜下观察到_____________________________________________________________________，说明转染成功。然后以转基因细胞为核供体构建克隆胚胎，最终获得转fat1基因猪。
(4)研究者提取转基因猪的基因组DNA，利用限制酶DraⅢ将其完全酶切并电泳分离。然后用探针通过______________的方法，检测fat1基因是否成功整合在猪基因组DNA中，酶切方式及检测结果如图2。
①转基因猪1、2、3中分别被转入了______________个fat1基因。
②该实验不能说明成功培育转基因猪，理由是______________________________________。
答案精析
1．D　[固体培养基和液体培养基的区别在于是否加入凝固剂(如琼脂)，题表所示的培养基配方中没有琼脂，因此属于液体培养基，A正确，D错误；青霉素会抑制大部分细菌的生长繁殖，因此该培养基不能用于培养大肠杆菌，B正确；该培养基中的(CH2O)可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确。]
2．D　[由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，还应保证牛奶的营养价值不被破坏，D错误。]
3．C　[药品称量、溶化是进行配制培养基的过程，培养基配制后需要灭菌，故药品称量和溶化不需要无菌操作，倒平板过程需要进行无菌操作，A错误；采用稀释涂布平板法将大肠杆菌菌体逐步稀释涂布到培养基表面，B错误；可分别将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置，加入洋葱研磨液的是实验组，加入无菌水的是对照组，C正确；将浸于洋葱研磨液和无菌水的滤纸片贴在平板不同位置，通过比较不同滤纸片抑菌圈的大小来判断其抑制作用，D错误。]
4．C　[利用果酒制作果醋过程中，需将温度提高到30～35 ℃、接种醋酸菌、充入氧气可进行果醋发酵，A错误；果酒制作过程中酵母菌细胞呼吸产生CO2，使发酵液pH下降，B错误；泡菜制作过程中，需向泡菜坛的坛沿水槽中注满水创造无氧环境，C正确；加入陈泡菜水的目的是增加乳酸菌的数量，使乳酸菌在短时间内发展为优势菌种，而灭菌后的陈泡菜水中乳酸菌已经死亡，达不到上述效果，D错误。]
5．A　[紫外线照射可以杀灭真菌，A符合题意；真空包装、用保鲜膜密闭、添加防腐剂都起到了抑菌作用，不属于灭菌方法，B、C、D不符合题意。]
6．A　[二倍体胡萝卜韧皮部细胞离体培养成的植株仍属于二倍体，不是单倍体，A错误；图示采用了植物组织培养技术，属于无性生殖，B正确；植物组织培养过程中，细胞通过有丝分裂方式增殖，C正确；该实验证明了植物细胞具有全能性，D正确。]
7．A　[步骤②消毒方法一般是先用70%酒精浸泡10 s(时间过长会伤害植物细胞)，再用无菌水冲洗2～3次，A错误；对试管苗炼苗的操作步骤之一是用流水除去根部培养基，需将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间后，再移栽到大田土壤中，D正确。]
8．D　[紫草素是从紫草的愈伤组织细胞中提取得到的，所以生产前须将离体的紫草细胞进行脱分化，以获得大量的紫草愈伤组织细胞，A正确；据图可知，反应器中紫草细胞开始生长较慢，经过适应期，然后进入稳定期，细胞的生长呈现“S”型增长规律，B正确；经过脱分化形成的愈伤组织，细胞进行有氧呼吸，所以应不断补充氧气，但诱导形成愈伤组织的过程中不需要提供光照，D错误。]
9．D　[秋水仙素可抑制分裂前期纺锤体的形成，可使细胞周期停滞在中期，该时期染色体形态稳定、数目清晰，有利于进行染色体分析，A正确；细胞在低渗溶液中会吸水，故实验中低渗处理的目的是使细胞吸水膨胀，使染色体分散便于观察，B正确；利用该技术能够检测唐氏综合征等染色体异常遗传病，不能够检测镰状细胞贫血，因为镰状细胞贫血是基因突变导致的，D错误。]
10．D　[步骤①向小鼠注射TREM2蛋白，让小鼠产生免疫反应，获得能产生抗体的B淋巴细胞，步骤⑤向小鼠腹腔注射杂交细胞，目的是获得单克隆抗体，A错误；步骤③筛选得到的是杂交细胞，能无限增殖，不会出现接触抑制，B错误；动物细胞培养过程中加入CO2用于维持培养液的pH，而植物组织培养的过程中通常不需要加入CO2，C错误；TREM2单克隆抗体具有强特异性，能与TREM2特异性结合，提高肿瘤免疫疗法的疗效，增强免疫系统的免疫监视功能，D正确。]
11．B　[胚胎分割需要选择形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚，B错误。]
12．B　[大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A错误；限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开，即一条链断开1个磷酸二酯键，产生1个游离的磷酸基团，所以限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团，B正确；T4 DNA连接酶既可以连接双链DNA片段互补的黏性末端，又可以连接双链DNA片段的平末端，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键，而不是氢键，C错误；作为载体的质粒通常采用抗性基因(四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因)作为标记基因，便于成功导入重组DNA分子的受体细胞的筛选，D错误。]
13．C　[退火是在高温解旋后降低温度让引物与模板链结合，退火温度不宜太低，避免引物错配和模板链形成双链，A正确；电泳条带迁移的位置和速度与DNA分子的大小、带电量和构象有关，如电泳一段时间后，较大的DNA分子迁移距离小，离加样孔近，而较小的DNA分子迁移距离大，离加样孔远，B正确；由于使用的引物是甲和丙，没有与目的基因相应位置配对，因此不管目的基因正接还是反接，均为450 bp的片段，C错误。]
14．C　[转基因农作物会产生毒性蛋白或过敏蛋白，对人类有害，A不符合题意；转基因农作物的花粉扩散到近缘物种，进而会威胁生物的多样性，B不符合题意；推广种植抗虫棉可减少农药使用，进而减少对环境的污染，对人类有利，也能提高经济效益，C符合题意；转基因农作物可能会导致基因污染，进而打破自然物种的原有界限，破坏生态系统的稳定性，对人类不利，D不符合题意。]
15．ABC　[传统泡菜制作和鱼茶发酵过程都是传统发酵过程，一般利用的是自然条件下的微生物，不需要严格灭菌，A正确；由图可以看出，醋酸菌、酵母菌和乳酸菌的数量在发生变化，醋酸菌和酵母菌的数量呈先上升后下降趋势，而乳酸菌的含量呈先上升后稳定趋势，据此推测鱼茶发酵初期各菌种的种间关系主要是种间竞争，B正确；显微镜直接计数可利用血细胞计数板等快速观察并统计微生物的数量，C正确；酵母菌可进行无氧呼吸，消失的原因是养料耗尽、代谢产物积累等，D错误。]
16．BC　[“Nova”橘柚愈伤组织原生质体没有叶绿体，因此“NH”细胞中叶绿体基因组只来自“HB”柚，A错误；“NH”非组蛋白乙酰化的差异会导致蛋白质表达不一致(即表观遗传)，使之具有偏向不同亲本的特征，B正确；异源四倍体“NH”与优良二倍体品种杂交，可以获取三倍体，由于该三倍体细胞染色体无法正常联会，不能进行减数分裂形成种子，故为无子三倍体，C正确；原生质体融合技术不能增加新基因，不能丰富柑橘属的基因库，D错误。]
17．BC　[DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸的(从引物的3′端延伸)，据此可知，图中限制酶a和限制酶b的识别位点分别加在引物1和引物2的5′端，A正确；PCR反应体系中需要加入dNTP、热稳定的DNA聚合酶和Mg2＋等，B错误；第2轮PCR中，引物1与图中②结合形成两条链不等长的突变基因，因为图中②是由引物2开始直到完整的DNA单链，而引物1与该模板链的退火过程并没有从该模板DNA单链的一端开始，C错误；在第3轮PCR结束后，会产生23＝8(个)DNA分子，其中含突变碱基对且两条链等长的DNA分子有2个，其他的DNA分子均是不等长的，故含突变碱基对且两条链等长的DNA分子所占的比例为1/4，D正确。]
18．AD　[胚胎植入前遗传学分析过程不需要进行羊膜腔穿刺取羊水细胞，因为此时羊水中不含有胚胎细胞，A错误；第三代试管婴儿技术的成熟，也要受到严格的监管，并不意味着人类可以随意选择和定制孩子，D错误。]
19．(1)酵母菌　异养好氧型　(2)①梯度　菌落直径与透明圈直径比值较小(或透明圈较大)　乙醇转化率、总酸含量均最高　②青梅果醋发酵时pH较低，抑制了菌种活性　③初始乙醇含量较低时，总酸含量也较低；初始乙醇含量较高时，总酸含量更低　产物乙酸的生成量较少　导致青梅果醋中总酸含量较低
解析　(2)②依据图2信息可知，沪酿1.01和AS1.41发酵结束时青梅果醋发酵液中总酸含量为20 g·L－1左右，而两者应用于粮食醋发酵时，发酵液总酸含量一般可以达到50 g·L－1左右，由于醋酸发酵需要酶的催化，且酶的催化需要温和的条件，易受pH的影响，所以推测原因可能是青梅果醋发酵时pH较低，抑制了菌种活性。③果醋的形成是以乙醇为底物，在酶的催化下，通过醋酸菌发酵形成的。依据图3可知，当乙醇含量较低时(5%)，总酸含量较低，此时是由于乙醇作为底物不足；当乙醇含量较高时(9%)，总酸含量更低，推测原因可能是乙醇含量过高会抑制醋酸菌的生长和代谢，导致青梅果醋中总酸含量较低。
20．(1)C　(2)a脱分化　基因的选择性表达　(3)愈伤组织　(4)胚状体　无性　(5)新生营养芽细胞分化程度低，分裂能力强，容易诱导形成PLBs　PLBs产量较高　(6)①灭菌冷却　②72　③生物碱含量平均值最大(或PLBs重量和生物碱含量乘积的平均值最大)
解析　(1)成熟筛管细胞的部分细胞器和细胞核都退化了，不能分裂分化，不适合进行植物组织培养，C符合题意。(2)一般而言，细胞分化是一个不可逆的过程，但图示过程a脱分化是对其的否定；经过程b产生的胚状体中出现形态结构不同的细胞，是细胞再分化的结果，细胞分化的根本原因是基因的选择性表达。(3)柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，因此，将柴油树细胞培养到愈伤组织阶段即可。(4)人工种子是指将在植物组织培养中得到的胚状体和具有养分的人工胚乳包埋在具有保护功能的人工种皮中；人工种子没有经过两性生殖细胞的结合，属于无性繁殖。(5)新生营养芽细胞分化程度低，分裂能力强，容易诱导形成PLBs，因此选用新生营养芽为外植体。结合图示可知，与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下PLBs产量较高、生长起始较快、快速生长时间较长。(6)因ABA受热易分解，不适合用高压蒸汽灭菌，可采用过滤除菌法，且等高压蒸汽灭菌后的培养基冷却后再加入；若初始(第0天)数据已知，每10天取样，实验60天完成，设3个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复，即每10天需测定的样品数为12个，因此待第60天完成，一共有6次样品测定，一共需要测定的样品数量为12×6＝72(个)；当某3个样品(重复样)的生物碱含量平均值最大时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
21．(1)供体1　供体2　卵母细胞　(2)输卵管　胎盘　体外受精　胚胎移植　(3)全能干　多能干　(4)胚胎分割　滋养层　染色体(或性染色体)
解析　(1)由图示可看出应用1中获得的小牛的遗传物质来源于供体1和供体2；细胞B为处于减数第二次分裂中期的卵母细胞。(2)应用2产生小牛应用了体外受精(精子与卵细胞在体外结合)、早期胚胎培养(通常培养至桑椹胚或囊胚阶段)、胚胎移植等技术手段。(4)获得二分胚的技术是胚胎分割技术；滋养层细胞将来发育为胎儿的胎膜和胎盘，可以通过取样滋养层细胞进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；由于雌雄个体的性染色体组成不同，故也可在细胞水平上通过对染色体(或性染色体)的分析进行性别鉴定。
22．(1)EcoRⅠ、BamHⅠ　bd　(2)连接产物为混合物，需先导入大肠杆菌筛选正确的重组表达载体，再导入猪成纤维细胞，以提高转基因的成功率　(3)转染重组表达载体的猪成纤维细胞有绿色荧光，而空白对照组无绿色荧光　(4)DNA分子杂交　①1、2、1　②没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量
解析　(1)据题图可知，载体有三种限制酶的切割位点可供选择，分析目的基因fat1中也存在HindⅢ限制酶切割位点，所以不能选择HindⅢ，应在两种引物的一端分别加上限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ识别与切割的序列。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种限制酶，选择的原则是目的基因编码蛋白质的序列中，不能有限制酶的切割位点，a错误；表达载体内，每种限制酶只有一个切割位点，b正确；酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列应该不同，否则会自我环化，c错误；酶切后，载体形成的两个黏性末端序列应该不同，否则会自我连接，d正确。(3)由题图可知，重组表达载体有绿色荧光蛋白(GFP)基因，而空白对照组无绿色荧光蛋白(GFP)基因，48小时后在荧光显微镜下观察到转染重组表达载体的猪成纤维细胞有绿色荧光，而空白对照组无绿色荧光，则说明转染成功。(4)用DNA分子杂交技术检测fat1基因是否成功整合在猪基因组DNA中：用放射性同位素标记的fat1基因DNA片段作探针，使探针与基因组DNA杂交，如果显示出杂交带，就说明fat1基因已成功整合在猪基因组DNA中。①由电泳结果图示可知，转基因猪1、2、3中分别被转入了1、2、1个fat1基因。②转基因猪已经培育成功的标志是fat1基因在转基因猪体内成功表达，此时能够检测到转基因猪体内含有fat1基因表达的蛋白质，转基因猪体内具有较高的PUFAs含量。而该实验没有检测fat1基因是否成功表达；没有在个体生物学水平鉴定转基因猪的PUFAs含量，因此不能说明成功培育转基因猪。

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