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(共69张PPT)
模块检测试卷(二)
1.实验室有一瓶标签上培养基名称缺失的细菌培养基粉末，根据标签(如图)所配制的培养基
A.属于液体培养基
B.属于基础培养基
C.可鉴定产酸微生物
D.可分离固氮菌
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单项选择题
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根据标签中“主要成分”可知，培养
基中含有琼脂，不属于液体培养基，
A不符合题意；
根据基础培养基的有关知识，该培养
基含有最基本的物质，可满足大多数
微生物对营养条件的基本需求，可判断该培养基属于基础培养基，B符合题意；
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单项选择题
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该培养基为基础培养基，不能鉴定产酸微生物，C不符合题意；
蛋白胨中含有有机氮源，所以该培养基不能分离固氮菌，D不符合题意。
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2.艺术不止存在于纸笔之间，我们可以用培养皿当纸，接种环当笔，各种形态颜色的细菌和真菌当颜料，画出别具风格的作品。在如图作品培养过程中，白色毛霉菌带有毛茸茸的感觉，可描绘大熊猫的皮毛，红色大肠杆菌可以描绘鹅嘴，水波则由假单胞杆菌绘就。下列说法错误的是
A.制备培养基时要经过计算—称量—溶化—调pH—灭菌
—倒平板等步骤
B.图甲作品的毛霉菌是真核生物，图乙作品的假单胞杆菌是原核生物
C.使用接种环接种时，取菌种前和接种后都需将接种环进行湿热灭菌
D.培养成型的作品应低温保存，以免菌株疯长影响整体效果
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单项选择题
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3.下列关于微生物实验的基本安全规则的叙述，不正确的是
A.一定不要在实验室吃喝东西
B.凡是实验操作一定要戴上防护镜等
C.一定要遵守无菌操作的规程
D.微生物实验材料丢弃前一定要灭菌
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实验操作不一定都要戴防护镜，B错误；
微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，一定要遵守无菌操作的规程，C正确；
微生物实验材料丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。
单项选择题
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4.下列有关传统发酵技术的说法，不正确的是
A.制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡
B.酸奶一般是以牛奶为原料、乳酸菌参与发酵制作而成的奶制品
C.制作泡菜时需要控制严格的有氧条件、发酵温度和发酵时间
D.在葡萄酒、泡菜的自然发酵过程中，菌种可由原料本身提供
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单项选择题
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酵母菌发酵产生酒精时需要无氧的环境，所以制作果酒时瓶口应密闭，而醋酸菌是好氧细菌，所以制作果醋时要适时通气，中断通氧会引起醋酸菌死亡，A正确；
制作泡菜时需要控制严格的无氧条件、发酵温度和发酵时间等，C错误；
葡萄酒发酵的酵母菌可来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，泡菜发酵所需要的乳酸菌可来自蔬菜表面，D正确。
5.(2024·南通高二检测)如图是利用大豆与奶粉混合，经乳酸菌发酵制成酸豆奶的生产工艺流程。下列相关叙述正确的是
A.豆浆煮沸后需立即与奶粉混合以利于发酵的进行
B.混合后常采用巴氏消毒法以杀死大部分微生物
C.接种后需不断通入无菌氧气以利于乳酸菌发酵
D.发酵过程中随时间的增加，酸度先逐渐增加后减少
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豆浆煮沸后不冷却会使乳酸菌失活，使发酵不能进行，A错误；
巴氏消毒法的消毒温度较低，时间较短，能在杀死大部分微生物的同时不破坏营养成分，B正确；
乳酸菌为厌氧菌，发酵过程中需密封，不需要通入无菌氧气，C错误；
一定范围内，随着发酵时间的增加，乳酸含量增加，因此酸度会逐渐增加，D错误。
6.下列关于天竺葵组织培养的叙述，错误的是
A.天竺葵的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程
B.要控制好培养基中所需植物激素的浓度及比例
C.为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
D.接种外植体到培养基时，一般将天竺葵叶背面接触培养基
单项选择题
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单项选择题
培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例会影响愈伤组织的生长和分化，故要控制好培养基中所需植物激素的浓度及比例，B正确；
植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，C错误。
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7.通过体细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，未涉及的操作是
A.用显微操作技术处理次级卵母细胞，去除细胞核
B.将精子放入适宜的培养液中培养，使其获能
C.用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成发育进程
D.选择合适时期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体
单项选择题
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单项选择题
体细胞核移植过程中，对于受体卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，然后利用显微操作技术去除其细胞核，A不符合题意；
该技术需要的是供体细胞核和受体卵母细胞，不需要精子的参与，B符合题意。
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8.悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是
A.灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象
B.灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行
C.灌流速率越高，营养物质利用越充分
D.培养管通常放置在只含O2的环境中
单项选择题
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单项选择题
过高的灌流速率会导致培养的细胞不能及时利用营养物质，而使营养物质不能得到充分利用，C错误；
培养管通常置于含有O2和CO2的混合气体的环境中，D错误。
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9.治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的免疫排斥反应，如图表示治疗性克隆的部分过程。下列有关叙述错误的是
A.过程①表示细胞核移植
B.细胞A通常为去核的卵母细胞
C.过程②表示脱分化过程
D.胚胎干细胞可增殖也可分化
单项选择题
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过程②表示胚胎干细胞的分裂和分化过程，C错误。
10.如图为某生物工程操作流程模式图，①②为具体制备方法。下列叙述正确的是
A.若此图表示植物体细胞杂交，则①表示脱分化，
②表示再分化
B.若此图表示单克隆抗体的制备，则①可用灭活的病毒进行诱导
C.若此图表示克隆羊的培育，则①涉及体外受精、核移植等技术
D.若此图表示胚胎分割移植，则②要对囊胚或原肠胚进行分割处理
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单项选择题
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单项选择题
若此图表示植物体细胞杂交，则①表示植物原
生质体融合，②表示植物组织培养，A错误；
若此图表示单克隆抗体的制备，则①表示B淋
巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导二者融合，B正确；
克隆羊是无性繁殖，不涉及体外受精，C错误；
胚胎分割移植时的胚胎应选择形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚，D错误。
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11.(2024·常州高二期中)琼脂糖凝胶电泳常用于基因工程中不同DNA片段的检测，研究人员用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，得到图2所示图谱，其中1号泳道是标准DNA样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果；图1为EcoRⅠ切割该DNA分子后的结果。下列说法错误的是
单项选择题
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A.EcoRⅠ的识别序列为GAATTC，切割位点在G和A之间
B.该DNA分子最可能是含1 000碱基对的环状DNA
C.据图2可知，该DNA分子中EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点各有一个
D.EcoRⅠ和SmaⅠ共同处理后，形成2个游离的磷酸基团
单项选择题
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单项选择题
2号、3号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理后的电泳结果，两个泳道均只出现一个DNA片段，且分子量是1 000 bp，说明该DNA分子最可能是含1 000碱基对的环状DNA，B正确；
图2中4号是EcoRⅠ和SmaⅠ两种酶共同处理后的电泳结果，显示800 bp和200 bp两个条带，说明在该DNA分子中，两种限制酶的酶切位点各有一个，C正确；
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单项选择题
图2中4号是EcoRⅠ和SmaⅠ两种酶共同处理后的电泳结果，显示800 bp和200 bp两个条带，每个DNA片段有2个游离的磷酸基团，故共有4个游离的磷酸基团，D错误。
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12.以洋葱为材料提取DNA后，用PCR技术对目的基因进行扩增，并对扩增产物进行电泳检查。若电泳结果有多个条带，则导致该结果的原因是
A.洋葱研磨离心后，取沉淀物进行了纯化
B.所用的引物结合了其他DNA序列
C.进行扩增时，变性温度设置成了72 ℃
D.配制琼脂糖溶液时，没有加入核酸染料
单项选择题
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洋葱研磨离心后，应该取上清液，取沉淀物进行纯化可能提取不到DNA，不会导致电泳结果有多个条带，A不符合题意；
所用的引物结合了其他DNA序列，引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体，则电泳结果有多个条带，B符合题意；
进行扩增时，变性温度应该为94 ℃，若设置成72 ℃，DNA双链不会解开，最后扩增不到DNA，电泳结果不会有多个条带，C不符合题意；
配制琼脂糖溶液时，没有加入核酸染料，会导致看不到条带，D不符合题意。
单项选择题
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13.下列有关基因工程的叙述，错误的是
A.基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异
B.以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2＋处理细胞以使其处于感受态
C.基因的载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入
D.DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上
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单项选择题
DNA连接酶能将两个DNA分子片段连接起来，D错误。
14.下列有关蛋白质工程的叙述，不正确的是
A.蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶
B.蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质
C.T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现
D.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要
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单项选择题
蛋白质工程是对编码蛋白质的基因进行有目的的设计改造，然后进行表达，故蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；
通过蛋白质工程，可产生自然界中不存在的蛋白质，B错误；
蛋白质工程能通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质分子的结构进行定向改造，使之更加符合人类需要，D正确。
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单项选择题
15.(2024·苏州高二期中)利用生物技术可将废水、废料变废为宝，如图为某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线图，下列有关叙述正确的是
多项选择题
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A.沼气池废料在加入反应器之前可不进行灭菌处理
B.该生产过程中不一定有CO2等气体生成
C.图中微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水
D.通过上述发酵过程可以从酵母菌细胞中提取蛋白质
√
√
√
沼气生产利用的是厌氧微生物，在连续搅拌反应器中厌氧微生物会被抑制，因此沼气池废料可不进行灭菌处理，A正确；
据图可知，该生产过程中有酿酒酵母的参与，酵母菌细胞呼吸会产生CO2，故该生产过程中一定有CO2等气体生成，B错误；
糖类是主要的能源物质，微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水，C正确。
多项选择题
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16.(2024·连云港高二质检)紫罗兰(2n＝14)花色丰富、抗虫性强、种子富含亚麻酸。为了让油菜(2n＝38)具有紫罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了如图所示实验。下列有关叙述正确的是
A.制备原生质体时，可使植物细胞处于微弱
的质壁分离状态后再用酶解法处理
B.原生质体融合依赖膜的流动性，融合的原
生质体形成细胞壁后再进行有丝分裂
C.制备人工种子时，需将愈伤组织和养分、生长调节剂等物质一起用人工种
皮包裹
D.获得的紫罗兰－油菜植株为二倍体，产生的配子中含有26条染色体
多项选择题
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多项选择题
用酶解法制备原生质体时，可先用较高
渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处
于微弱的质壁分离状态，然后用酶解法
去除细胞壁，获得原生质体，A正确；
原生质体融合依赖膜的流动性，融合的原生质体只有重新形成细胞壁后，才可进行有丝分裂，B正确；
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多项选择题
制备人工种子时，需将愈伤组织培养成
胚状体，再通过人工种皮包装得到人工
种子，C错误；
获得的紫罗兰－油菜植株为异源四倍体，
共含有14＋38＝52(条)染色体，产生的配子中含有26条染色体，D错误。
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17.下列关于“试管牛”培养流程的叙述，正确的是
A.过程①可对供体母牛注射雌性激素，
使其超数排卵
B.过程②完结的标志是在卵细胞质膜
和透明带的间隙观察到两个极体、
雌雄原核融合
C.大量的研究已经证明，过程③基本不会发生免疫排斥反应
D.移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中受受体的影响
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多项选择题
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过程①可对供体母牛注射促性腺激
素使其超数排卵，A错误；
过程②表示体外受精作用，在实际
胚胎工程操作中，常以在卵细胞质
膜和透明带之间观察到两个极体、雌雄原核融合作为受精完成的标志，B正确；
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多项选择题
胚胎移植时，受体对移入子宫的外
来胚胎基本不发生免疫排斥反应，
这是胚胎移植成功的理论基础，C
正确；
试管牛的遗传物质来自供体母牛和供体公牛，胚胎遗传性状取决于供体，在孕育过程中不会受受体的影响，D错误。
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多项选择题
18.治疗性克隆的一般流程是把患者(供体)体细胞的细胞核转移到去核卵母细胞中形成重组细胞，再把重组细胞体外培养到囊胚，然后从中分离出胚胎干细胞，并诱导胚胎干细胞定向分化为所需的特定细胞类型用于移植。下列说法正确的是
A.供体细胞核注入去核卵母细胞后还需诱导融合
B.胚胎干细胞在核遗传上和供体细胞相同
C.治疗性克隆是治疗遗传病的根本措施
D.治疗性克隆可解决器官移植时的免疫排斥问题
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多项选择题
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√
治疗遗传病的根本措施是基因治疗，C错误。
19.聚羟基丁酸酯(PHB)是某些细菌在碳源充足、氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的PHB产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产PHB合成菌。请回答下列问题：
(1)PHB合成菌的分离培养基的成分有水、葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和_____，其中能提供维生素的有_______________，为使PHB合成菌细胞内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是__________。
非选择题
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琼脂
牛肉膏、蛋白胨
氮源较低
非选择题
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题中分离PHB合成菌的培养基中氮源主要来自蛋白胨，碳源充足、氮源缺乏的状态下可以刺激细菌合成更多的PHB，为了使PHB合成菌细胞内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是氮源较低。
(2)将等浓度土壤稀释液接种在PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。倒置培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，原因是__________________。通过显微观察法初筛PHB合成菌的具体操作是在培养基中加入__________，然后在显微镜下观察，有较多橘黄色颗粒的细菌即为PHB合成菌。复筛时需要提取细胞体内的PHB，将细胞破碎后用______来萃取PHB，从而提取细胞内的PHB。
非选择题
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23
紫外线会杀死细菌
苏丹染料
氯仿
非选择题
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22
23
甲组用紫外线照射，乙组不作处理，培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，故推测造成这种差异的原因是紫外线会杀死细菌；由题干可知，PHB能被苏丹染料染色，故通过显微观察法初筛PHB合成菌的具体操作是在培养基中加入苏丹染料，然后在显微镜下观察，被染色的细菌即为PHB合成菌；由题干可知，PHB可溶于氯仿，复筛时需要提取细胞体内的PHB，故方法是将细胞破碎后用氯仿来萃取PHB，从而提取细胞体内的PHB。
(3)对复筛得到的A～E五个菌株单独培养，检测PHB产量，结果如图。A～E菌株中适合作为工程菌的是菌株_____，依据是_________________
____________、____________。
非选择题
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23
D
菌株D的PHB产量
较高且稳定
合成效率高
非选择题
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据图可知，适合作为工程菌的是菌株D，因为它的PHB含量较高且稳定，而其他菌株的PHB产量较低且不稳定、合成效率较差，不适合作为工程菌。
(4)在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。连续发酵生产PHB时，要随时检测培养液中PHB合成菌的数量、_________等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制_________和溶解氧等发酵条件。
非选择题
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产物浓度
温度、pH
非选择题
20.如图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题：
(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用_________
和________处理。在用促融剂处理时，使用的促融剂主要是_________________。
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纤维素酶
果胶酶
聚乙二醇(或PEG)
非选择题
(2)融合细胞中可能包括____种类型(仅考虑细胞两两融合)的情况，其中杂种细胞的遗传物质组成是_________________________。
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3
A和B植物的遗传物质之和
两两融合细胞中可能包括3种类型，分别是A—A、B—B、A—B，其中杂种细胞的遗传物质组成是A和B植物的遗传物质之和。
非选择题
(3)由杂种细胞经人工诱导培养，经______分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C杂种植株。该植株的性状与亲本植物的性状区别是________________________。
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有丝
具有A和B两种植物的性状
(4)整个培养过程应用了细胞工程的_______
__________和______________两大技术，这种方法培育杂种植株的意义是_________
_____________________________。
植物体
细胞杂交
植物组织培养
同种植物之间杂交不亲和的障碍
克服了不
非选择题
21.癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出的地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。回答下列问题：
1
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非选择题
(1)某些种类癌细胞表面具有高表达膜蛋白PSMA和PD－L1，
如图1。PD－L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃
逸。单克隆抗体最主要的优点在于_____________________
___________，临床上可利用PD－1的单克隆抗体进行癌症
治疗。将等量的纯化PD－1蛋白分别注射到5只小鼠体内，
经过二次免疫后测定小鼠抗PD－1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是_____________________________。然后取小鼠的脾脏细胞用________________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交细胞。
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特异性强、灵敏度高、
可大量制备
刺激机体产生更多的B淋巴细胞
PEG(聚乙二醇)
非选择题
(2)一段时间后，将(1)所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如图2。
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①在检测时需要将PD－1蛋白固定于固相载体表面制成__________，并加入多孔板培养槽中的________(填“细胞”或“上清液”)，即待测样本。
固相抗原
上清液
非选择题
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在检测时需要将PD－1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原。单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。
非选择题
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②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与_____________结合的酶标抗体洗去。
抗PD－1抗体
加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD－1抗体结合的酶标抗体洗去。
非选择题
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③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表_________________。
抗PD－1抗体的量
PD－1蛋白与抗PD－1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表抗PD－1抗体的量。
非选择题
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(3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖CD28在癌
细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既
能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，
诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图3。制备过程：先将_______
_______分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会______________，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
PSMA、
CD28
产生多种抗体
非选择题
抗体具有特异性，所以为了获取既能结合PSMA，还
能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，则需要
先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内，分离出B淋
巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到
两种杂交细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会产生多种抗体，但所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
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非选择题
22.(2024·扬州高二检测)如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答下列问题：
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(1)哺乳动物体内受精的场所是________。图中①过程中防止多精入卵的两道屏障依次为____________________________。
输卵管
透明带反应、卵细胞质膜反应
非选择题
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(2)对图中良种母牛注射促性腺激素的目的是________________。③过程是______________，胚胎发育到______________阶段，可做胚胎移植。
(3)图中b、c分别代表囊胚的________、__________，图中c将来发育成________________。
促使其超数排卵
早期胚胎培养
桑椹胚或囊胚
囊胚腔
内细胞团
胎儿的各种组织
非选择题
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(4)图中由一个囊胚经④过程得到B、C牛，则④过程表示______________
_______________________，由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同的概率为_______，可以取囊胚的滋养层细胞做____________________
________，鉴定性别。
(5)胚胎移植后，要对受体母牛进行__________的检查。
胚胎分割和胚
胎移植(或胚胎分割移植)
100%
DNA分析(或染色体组
型分析)
是否妊娠
非选择题
23.低温、干旱、高盐等均是植物遭受的逆境胁迫，某研究团队欲培育某种抗旱水稻，利用了表中有关限制酶(表中“↓”处表示限制酶作用位点)、图1中耐干旱基因和图2中的质粒展开研究。请分析回答下列问题：
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限制酶 BamHⅠ Sau3AⅠ BclⅠ EcoRⅠ
识别序列 －G↓GATCC－ －↓GATC－ －T↓GATCA－ －G↓AATTC－
非选择题
(1)用PCR技术扩增耐干旱基因时，需选用的引物为____________，PCR过程可以在_____________中自动完成，引物与a、β链结合后，温度升至72 ℃左右的目的是______________________________________________
__________________。
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引物B、C
PCR扩增仪
有利于热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)从引物处起始合成新的DNA链　
非选择题
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在PCR扩增的过程中，引物与解旋
后的单链结合，结合在单链DNA的
3′端，随后热稳定的DNA聚合酶
从引物的3′端进行互补链的合成，
完成子链的合成。因此，图1中的
DNA进行扩增时，选用的引物是引物B、C。PCR过程可以在PCR扩增仪中自动完成，引物与a、β链结合后，温度升至72 ℃左右的目的是让热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)从引物处起始进行互补链的合成。
非选择题
(2)为保证耐干旱基因的定向插入和减少随意连接，需要用表中的限制酶__________________处理含耐干旱基因的DNA片段，同时还需要用限制酶________________处理质粒。
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EcoRⅠ和BamHⅠ
EcoRⅠ和BclⅠ
非选择题
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根据图1中限制酶的种类和限制酶
的切点，若使用限制酶Sau3AⅠ，
则BamHⅠ的切点也将被切掉，且
EcoRⅠ切点在这两种限制酶切点之
外，Sau3AⅠ完成切割后，露出的末端是一样的，且没有EcoRⅠ切点露出的末端，不能保证耐干旱基因的定向插入和减少随意连接，因此，使用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ处理含耐干旱基因的DNA片段。图2中，根据启动子、终止子的位置及目的基因转录的方向，所用的限制酶是EcoRⅠ和BclⅠ。
非选择题
(3)利用农杆菌Ti质粒上T－DNA___________________________________的特性，构建的基因表达载体中______(填写图2中数字序号)之间的碱基序列可转移到水稻细胞中。
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可转移并整合到受体细胞染色体DNA上
①④
非选择题
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基因表达载体构建后，需要将整个的目的基因(含启动子、终止子)(即①④)完整地转移到受体细胞中，这利用了农杆菌Ti质粒上T－DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上的特性。
非选择题
(4)将耐干旱基因导入水稻后，为检测抗旱基因是否成功表达，可通过________________技术从分子水平上检测。
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抗原－抗体杂交
要检测耐干旱基因是否翻译成蛋白质，可以从导入耐干旱基因的植物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交的方法进行判断。
非选择题
(5)过量Na＋对植物有害，通过调控Na＋、K＋运输，维持细胞质较低Na＋/K＋比，可提高耐盐性。科研人员尝试利用小麦细胞液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因(AINHX基因)培育转基因耐盐水稻。请完成表格。
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实验步骤的目的 简要操作过程
获得目的基因 从小麦①__________中获取AINHX基因
构建载体质粒 将目的基因克隆导入Ti质粒
②_________________ 经脱分化培养获得大量细胞
转化细胞 用农杆菌转化法导入水稻细胞
基因文库
大量培养水稻细胞
非选择题
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实验步骤的目的 简要操作过程
转基因细胞筛选 用含抗生素的选择培养基筛选
转基因植株培育 ③______________获得转基因植株
转基因植株分析 转基因幼苗转入④___________________________中培养
植物组织培养
高盐溶液(或高浓度NaCl溶液)模块检测试卷(二)
(分值：100分)　
一、单项选择题：共14小题，每小题2分，共28分。每小题只有一个选项符合题意。
1．实验室有一瓶标签上培养基名称缺失的细菌培养基粉末，根据标签(如图)所配制的培养基(　　)
A．属于液体培养基 B．属于基础培养基
C．可鉴定产酸微生物 D．可分离固氮菌
2．艺术不止存在于纸笔之间，我们可以用培养皿当纸，接种环当笔，各种形态颜色的细菌和真菌当颜料，画出别具风格的作品。在如图作品培养过程中，白色毛霉菌带有毛茸茸的感觉，可描绘大熊猫的皮毛，红色大肠杆菌可以描绘鹅嘴，水波则由假单胞杆菌绘就。下列说法错误的是(　　)
A．制备培养基时要经过计算—称量—溶化—调pH—灭菌—倒平板等步骤
B．图甲作品的毛霉菌是真核生物，图乙作品的假单胞杆菌是原核生物
C．使用接种环接种时，取菌种前和接种后都需将接种环进行湿热灭菌
D．培养成型的作品应低温保存，以免菌株疯长影响整体效果
3．下列关于微生物实验的基本安全规则的叙述，不正确的是(　　)
A．一定不要在实验室吃喝东西
B．凡是实验操作一定要戴上防护镜等
C．一定要遵守无菌操作的规程
D．微生物实验材料丢弃前一定要灭菌
4．下列有关传统发酵技术的说法，不正确的是(　　)
A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡
B．酸奶一般是以牛奶为原料、乳酸菌参与发酵制作而成的奶制品
C．制作泡菜时需要控制严格的有氧条件、发酵温度和发酵时间
D．在葡萄酒、泡菜的自然发酵过程中，菌种可由原料本身提供
5．(2024·南通高二检测)如图是利用大豆与奶粉混合，经乳酸菌发酵制成酸豆奶的生产工艺流程。下列相关叙述正确的是(　　)
A．豆浆煮沸后需立即与奶粉混合以利于发酵的进行
B．混合后常采用巴氏消毒法以杀死大部分微生物
C．接种后需不断通入无菌氧气以利于乳酸菌发酵
D．发酵过程中随时间的增加，酸度先逐渐增加后减少
6．下列关于天竺葵组织培养的叙述，错误的是(　　)
A．天竺葵的组织培养需要经过细胞的脱分化和再分化过程
B．要控制好培养基中所需植物激素的浓度及比例
C．为避免环境中微生物的污染，要对外植体进行灭菌处理
D．接种外植体到培养基时，一般将天竺葵叶背面接触培养基
7．通过体细胞核移植技术培育克隆牛的过程中，未涉及的操作是(　　)
A．用显微操作技术处理次级卵母细胞，去除细胞核
B．将精子放入适宜的培养液中培养，使其获能
C．用物理或化学方法激活重组细胞，使其完成发育进程
D．选择合适时期的胚胎进行移植，使其发育成完整个体
8．悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等因素而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内，一边不断注入新鲜培养基，一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是(　　)
A．灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象
B．灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行
C．灌流速率越高，营养物质利用越充分
D．培养管通常放置在只含O2的环境中
9．治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的免疫排斥反应，如图表示治疗性克隆的部分过程。下列有关叙述错误的是(　　)
A．过程①表示细胞核移植
B．细胞A通常为去核的卵母细胞
C．过程②表示脱分化过程
D．胚胎干细胞可增殖也可分化
10．如图为某生物工程操作流程模式图，①②为具体制备方法。下列叙述正确的是(　　)
A．若此图表示植物体细胞杂交，则①表示脱分化，②表示再分化
B．若此图表示单克隆抗体的制备，则①可用灭活的病毒进行诱导
C．若此图表示克隆羊的培育，则①涉及体外受精、核移植等技术
D．若此图表示胚胎分割移植，则②要对囊胚或原肠胚进行分割处理
11．(2024·常州高二期中)琼脂糖凝胶电泳常用于基因工程中不同DNA片段的检测，研究人员用EcoRⅠ和SmaⅠ两种限制酶处理某DNA分子，得到图2所示图谱，其中1号泳道是标准DNA样品，2号、3号、4号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理、两种酶共同处理后的电泳结果；图1为EcoRⅠ切割该DNA分子后的结果。下列说法错误的是(　　)
　　
A．EcoRⅠ的识别序列为GAATTC，切割位点在G和A之间
B．该DNA分子最可能是含1 000碱基对的环状DNA
C．据图2可知，该DNA分子中EcoRⅠ和SmaⅠ的酶切位点各有一个
D．EcoRⅠ和SmaⅠ共同处理后，形成2个游离的磷酸基团
12．以洋葱为材料提取DNA后，用PCR技术对目的基因进行扩增，并对扩增产物进行电泳检查。若电泳结果有多个条带，则导致该结果的原因是(　　)
A．洋葱研磨离心后，取沉淀物进行了纯化
B．所用的引物结合了其他DNA序列
C．进行扩增时，变性温度设置成了72 ℃
D．配制琼脂糖溶液时，没有加入核酸染料
13．下列有关基因工程的叙述，错误的是(　　)
A．基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异
B．以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2＋处理细胞以使其处于感受态
C．基因的载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源DNA插入
D．DNA连接酶能将单个脱氧核苷酸结合到引物链上
14．下列有关蛋白质工程的叙述，不正确的是(　　)
A．蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶
B．蛋白质工程只能改造现有的蛋白质而不能制造新的蛋白质
C．T4溶菌酶中引入二硫键提高了它的热稳定性是蛋白质工程应用的体现
D．蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要
二、多项选择题：共4小题，每小题3分，共12分。每小题有不止一个选项符合题意。
15．(2024·苏州高二期中)利用生物技术可将废水、废料变废为宝，如图为某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白质的技术路线图，下列有关叙述正确的是(　　　　)
A．沼气池废料在加入反应器之前可不进行灭菌处理
B．该生产过程中不一定有CO2等气体生成
C．图中微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水
D．通过上述发酵过程可以从酵母菌细胞中提取蛋白质
16．(2024·连云港高二质检)紫罗兰(2n＝14)花色丰富、抗虫性强、种子富含亚麻酸。为了让油菜(2n＝38)具有紫罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了如图所示实验。下列有关叙述正确的是(　　　　)
A．制备原生质体时，可使植物细胞处于微弱的质壁分离状态后再用酶解法处理
B．原生质体融合依赖膜的流动性，融合的原生质体形成细胞壁后再进行有丝分裂
C．制备人工种子时，需将愈伤组织和养分、生长调节剂等物质一起用人工种皮包裹
D．获得的紫罗兰－油菜植株为二倍体，产生的配子中含有26条染色体
17．下列关于“试管牛”培养流程的叙述，正确的是(　　)
A．过程①可对供体母牛注射雌性激素，使其超数排卵
B．过程②完结的标志是在卵细胞质膜和透明带的间隙观察到两个极体、雌雄原核融合
C．大量的研究已经证明，过程③基本不会发生免疫排斥反应
D．移入受体的供体胚胎的遗传特性在孕育过程中受受体的影响
18．治疗性克隆的一般流程是把患者(供体)体细胞的细胞核转移到去核卵母细胞中形成重组细胞，再把重组细胞体外培养到囊胚，然后从中分离出胚胎干细胞，并诱导胚胎干细胞定向分化为所需的特定细胞类型用于移植。下列说法正确的是(　　)
A．供体细胞核注入去核卵母细胞后还需诱导融合
B．胚胎干细胞在核遗传上和供体细胞相同
C．治疗性克隆是治疗遗传病的根本措施
D．治疗性克隆可解决器官移植时的免疫排斥问题
三、非选择题：共5小题，共60分。
19．(每空1分，共11分)聚羟基丁酸酯(PHB)是某些细菌在碳源充足、氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的PHB产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产PHB合成菌。请回答下列问题：
(1)PHB合成菌的分离培养基的成分有水、葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和__________，其中能提供维生素的有__________________，为使PHB合成菌细胞内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是________________________________________________________。
(2)将等浓度土壤稀释液接种在PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。倒置培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，原因是_______________________。通过显微观察法初筛PHB合成菌的具体操作是在培养基中加入______________，然后在显微镜下观察，有较多橘黄色颗粒的细菌即为PHB合成菌。复筛时需要提取细胞体内的PHB，将细胞破碎后用__________来萃取PHB，从而提取细胞内的PHB。
(3)对复筛得到的A～E五个菌株单独培养，检测PHB产量，结果如图。A～E菌株中适合作为工程菌的是菌株________，依据是__________________________、_______________。
(4)在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。连续发酵生产PHB时，要随时检测培养液中PHB合成菌的数量、______________________等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制__________________和溶解氧等发酵条件。
20．(每空1分，共10分)如图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题：
(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用______________和________处理。在用促融剂处理时，使用的促融剂主要是__________________________________________________。
(2)融合细胞中可能包括________种类型(仅考虑细胞两两融合)的情况，其中杂种细胞的遗传物质组成是_________________________________________________________________。
(3)由杂种细胞经人工诱导培养，经______________分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C杂种植株。该植株的性状与亲本植物的性状区别是_____________________________。
(4)整个培养过程应用了细胞工程的________________和______________两大技术，这种方法培育杂种植株的意义是_________________________________________________________。
21．(11分)癌症的免疫疗法通过重新激活抗肿瘤的免疫细胞，克服肿瘤的免疫逃逸，在癌症治疗方法中取得越来越突出的地位，科研人员在不断研究中发现多种免疫治疗方法的结合是提高治疗效果的途径之一。回答下列问题：
(1)(3分)某些种类癌细胞表面具有高表达膜蛋白PSMA和PD－L1，如图1。PD－L1能抑制T细胞的活化，使癌细胞发生免疫逃逸。单克隆抗体最主要的优点在于_______________，临床上可利用PD－1的单克隆抗体进行癌症治疗。将等量的纯化PD－1蛋白分别注射到5只小鼠体内，经过二次免疫后测定小鼠抗PD－1抗体的免疫效果，取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。在融合前三天，对1号小鼠加强免疫一次，目的是________________________________。然后取小鼠的脾脏细胞用____________试剂诱导与骨髓瘤细胞融合，用选择培养基进行筛选得到杂交细胞。
(2)(4分)一段时间后，将(1)所得细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，检测原理如图2。
①在检测时需要将PD－1蛋白固定于固相载体表面制成______________，并加入多孔板培养槽中的__________(填“细胞”或“上清液”)，即待测样本。
②加入酶标抗体后一段时间，需要用洗涤剂将未与____________________结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表________________________________。
(3)CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。因此，科研人员尝试构建既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，诱导T细胞定向杀伤癌细胞，如图3。制备过程：先将__________________分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会____________________，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
22．(每空1分，共12分)(2024·扬州高二检测)如图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①～⑤表示操作过程。请回答下列问题：
(1)哺乳动物体内受精的场所是________。图中①过程中防止多精入卵的两道屏障依次为________________________________。
(2)对图中良种母牛注射促性腺激素的目的是______________________。③过程是____________________，胚胎发育到________________________阶段，可做胚胎移植。
(3)图中b、c分别代表囊胚的__________________、__________________，图中c将来发育成__________________。
(4)图中由一个囊胚经④过程得到B、C牛，则④过程表示_________________________，由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同的概率为________________，可以取囊胚的滋养层细胞做____________________，鉴定性别。
(5)胚胎移植后，要对受体母牛进行______________的检查。
23．(16分)低温、干旱、高盐等均是植物遭受的逆境胁迫，某研究团队欲培育某种抗旱水稻，利用了表中有关限制酶(表中“↓”处表示限制酶作用位点)、图1中耐干旱基因和图2中的质粒展开研究。请分析回答下列问题：
限制酶 BamHⅠ Sau3AⅠ BclⅠ EcoRⅠ
识别序列 －G↓GATCC－ －↓GATC－ －T↓GATCA－ －G↓AATTC－
(1)(3分)用PCR技术扩增耐干旱基因时，需选用的引物为____________，PCR过程可以在______________中自动完成，引物与a、β链结合后，温度升至72 ℃左右的目的是________________________________________________________________________。
(2)(2分)为保证耐干旱基因的定向插入和减少随意连接，需要用表中的限制酶______________处理含耐干旱基因的DNA片段，同时还需要用限制酶____________________处理质粒。
(3)(2分)利用农杆菌Ti质粒上T－DNA__________________________________________的特性，构建的基因表达载体中__________(填写图2中数字序号)之间的碱基序列可转移到水稻细胞中。
(4)(1分)将耐干旱基因导入水稻后，为检测抗旱基因是否成功表达，可通过____________________技术从分子水平上检测。
(5)过量Na＋对植物有害，通过调控Na＋、K＋运输，维持细胞质较低Na＋/K＋比，可提高耐盐性。科研人员尝试利用小麦细胞液泡膜Na＋/K＋逆向转运蛋白基因(AINHX基因)培育转基因耐盐水稻。请完成表格。
实验步骤的目的 简要操作过程
获得目的基因 从小麦①__________中获取AINHX基因
构建载体质粒 将目的基因克隆导入Ti质粒
②______________ 经脱分化培养获得大量细胞
转化细胞 用农杆菌转化法导入水稻细胞
转基因细胞筛选 用含抗生素的选择培养基筛选
转基因植株培育 ③________________获得转基因植株
转基因植株分析 转基因幼苗转入④______________中培养
答案精析
1．B　[根据标签中“主要成分”可知，培养基中含有琼脂，不属于液体培养基，A不符合题意；根据基础培养基的有关知识，该培养基含有最基本的物质，可满足大多数微生物对营养条件的基本需求，可判断该培养基属于基础培养基，B符合题意；该培养基为基础培养基，不能鉴定产酸微生物，C不符合题意；蛋白胨中含有有机氮源，所以该培养基不能分离固氮菌，D不符合题意。]
2．C
3．B　[实验操作不一定都要戴防护镜，B错误；微生物实验室培养的关键是防止杂菌污染，一定要遵守无菌操作的规程，C正确；微生物实验材料丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境，D正确。]
4．C　[酵母菌发酵产生酒精时需要无氧的环境，所以制作果酒时瓶口应密闭，而醋酸菌是好氧细菌，所以制作果醋时要适时通气，中断通氧会引起醋酸菌死亡，A正确；制作泡菜时需要控制严格的无氧条件、发酵温度和发酵时间等，C错误；葡萄酒发酵的酵母菌可来自葡萄皮表面的野生型酵母菌，泡菜发酵所需要的乳酸菌可来自蔬菜表面，D正确。]
5．B　[豆浆煮沸后不冷却会使乳酸菌失活，使发酵不能进行，A错误；巴氏消毒法的消毒温度较低，时间较短，能在杀死大部分微生物的同时不破坏营养成分，B正确；乳酸菌为厌氧菌，发酵过程中需密封，不需要通入无菌氧气，C错误；一定范围内，随着发酵时间的增加，乳酸含量增加，因此酸度会逐渐增加，D错误。]
6．C　[培养基中生长素和细胞分裂素的浓度及比例会影响愈伤组织的生长和分化，故要控制好培养基中所需植物激素的浓度及比例，B正确；植物组织培养时需要对外植体消毒，既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害，不能对其进行灭菌处理，C错误。]
7．B　[体细胞核移植过程中，对于受体卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期，然后利用显微操作技术去除其细胞核，A不符合题意；该技术需要的是供体细胞核和受体卵母细胞，不需要精子的参与，B符合题意。]
8．B　[过高的灌流速率会导致培养的细胞不能及时利用营养物质，而使营养物质不能得到充分利用，C错误；培养管通常置于含有O2和CO2的混合气体的环境中，D错误。]
9．C　[过程②表示胚胎干细胞的分裂和分化过程，C错误。]
10．B　[若此图表示植物体细胞杂交，则①表示植物原生质体融合，②表示植物组织培养，A错误；若此图表示单克隆抗体的制备，则①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，可用灭活的病毒诱导二者融合，B正确；克隆羊是无性繁殖，不涉及体外受精，C错误；胚胎分割移植时的胚胎应选择形态正常、发育良好的桑椹胚或囊胚，D错误。]
11．D　[2号、3号分别是EcoRⅠ单独处理、SmaⅠ单独处理后的电泳结果，两个泳道均只出现一个DNA片段，且分子量是1 000 bp，说明该DNA分子最可能是含1 000碱基对的环状DNA，B正确；图2中4号是EcoRⅠ和SmaⅠ两种酶共同处理后的电泳结果，显示800 bp和200 bp两个条带，说明在该DNA分子中，两种限制酶的酶切位点各有一个，C正确；图2中4号是EcoRⅠ和SmaⅠ两种酶共同处理后的电泳结果，显示800 bp和200 bp两个条带，每个DNA片段有2个游离的磷酸基团，故共有4个游离的磷酸基团，D错误。]
12．B　[洋葱研磨离心后，应该取上清液，取沉淀物进行纯化可能提取不到DNA，不会导致电泳结果有多个条带，A不符合题意；所用的引物结合了其他DNA序列，引物设计不合理，它们与非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚体，则电泳结果有多个条带，B符合题意；进行扩增时，变性温度应该为94 ℃，若设置成72 ℃，DNA双链不会解开，最后扩增不到DNA，电泳结果不会有多个条带，C不符合题意；配制琼脂糖溶液时，没有加入核酸染料，会导致看不到条带，D不符合题意。]
13．D　[DNA连接酶能将两个DNA分子片段连接起来，D错误。]
14．B　[蛋白质工程是对编码蛋白质的基因进行有目的的设计改造，然后进行表达，故蛋白质工程需要用到限制酶和DNA连接酶，A正确；通过蛋白质工程，可产生自然界中不存在的蛋白质，B错误；蛋白质工程能通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质分子的结构进行定向改造，使之更加符合人类需要，D正确。]
15．ACD　[沼气生产利用的是厌氧微生物，在连续搅拌反应器中厌氧微生物会被抑制，因此沼气池废料可不进行灭菌处理，A正确；据图可知，该生产过程中有酿酒酵母的参与，酵母菌细胞呼吸会产生CO2，故该生产过程中一定有CO2等气体生成，B错误；糖类是主要的能源物质，微生物生长所需的碳源主要来源于果糖生产废水，C正确。]
16．AB　[用酶解法制备原生质体时，可先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处于微弱的质壁分离状态，然后用酶解法去除细胞壁，获得原生质体，A正确；原生质体融合依赖膜的流动性，融合的原生质体只有重新形成细胞壁后，才可进行有丝分裂，B正确；制备人工种子时，需将愈伤组织培养成胚状体，再通过人工种皮包装得到人工种子，C错误；获得的紫罗兰－油菜植株为异源四倍体，共含有14＋38＝52(条)染色体，产生的配子中含有26条染色体，D错误。]
17．BC　[过程①可对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，A错误；过程②表示体外受精作用，在实际胚胎工程操作中，常以在卵细胞质膜和透明带之间观察到两个极体、雌雄原核融合作为受精完成的标志，B正确；胚胎移植时，受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植成功的理论基础，C正确；试管牛的遗传物质来自供体母牛和供体公牛，胚胎遗传性状取决于供体，在孕育过程中不会受受体的影响，D错误。]
18．ABD　[治疗遗传病的根本措施是基因治疗，C错误。]
19．(1)琼脂　牛肉膏、蛋白胨　氮源较低　(2)紫外线会杀死细菌　苏丹染料　氯仿　(3)D　菌株D的PHB产量较高且稳定　合成效率高　(4)产物浓度　温度、pH
解析　(1)题中分离PHB合成菌的培养基中氮源主要来自蛋白胨，碳源充足、氮源缺乏的状态下可以刺激细菌合成更多的PHB，为了使PHB合成菌细胞内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是氮源较低。(2)甲组用紫外线照射，乙组不作处理，培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，故推测造成这种差异的原因是紫外线会杀死细菌；由题干可知，PHB能被苏丹染料染色，故通过显微观察法初筛PHB合成菌的具体操作是在培养基中加入苏丹染料，然后在显微镜下观察，被染色的细菌即为PHB合成菌；由题干可知，PHB可溶于氯仿，复筛时需要提取细胞体内的PHB，故方法是将细胞破碎后用氯仿来萃取PHB，从而提取细胞体内的PHB。(3)据图可知，适合作为工程菌的是菌株D，因为它的PHB含量较高且稳定，而其他菌株的PHB产量较低且不稳定、合成效率较差，不适合作为工程菌。
20．(1)纤维素酶　果胶酶　聚乙二醇(或PEG)　(2)3　A和B植物的遗传物质之和　(3)有丝　具有A和B两种植物的性状　(4)植物体细胞杂交　植物组织培养　克服了不同种植物之间杂交不亲和的障碍
解析　(2)两两融合细胞中可能包括3种类型，分别是A—A、B—B、A—B，其中杂种细胞的遗传物质组成是A和B植物的遗传物质之和。
21．(1)特异性强、灵敏度高、可大量制备　刺激机体产生更多的B淋巴细胞　PEG(聚乙二醇)　(2)①固相抗原　上清液
②抗PD－1抗体　③抗PD－1抗体的量　(3)PSMA、CD28
产生多种抗体
解析　(2)①在检测时需要将PD－1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原。单克隆抗体是分泌蛋白，分布在上清液中，所以在固定抗原上加入多孔板培养槽中的上清液，即待测样本。②加入酶标抗体后一段时间，为了排除干扰，则需要用洗涤剂将未与抗PD－1抗体结合的酶标抗体洗去。③PD－1蛋白与抗PD－1抗体的结合量越多颜色越深，所以加入相应酶促反应底物显色后，颜色的深浅可代表抗PD－1抗体的量。(3)抗体具有特异性，所以为了获取既能结合PSMA，还能结合CD28的双特异性抗体PSMA×CD28，则需要先将PSMA、CD28分别注射到小鼠体内，分离出B淋巴细胞，诱导其与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交细胞，再诱导两种细胞融合。成功融合的细胞会表达两种L链和两种H链，由于L链和H链的随机组合会产生多种抗体，但所需的双特异性抗体PSMA×CD28是特定的L链和H链结合，因此还需进行筛选才能获得所需的双特异性抗体PSMA×CD28。
22．(1)输卵管　透明带反应、卵细胞质膜反应　(2)促使其超数排卵　早期胚胎培养　桑椹胚或囊胚　(3)囊胚腔　内细胞团　胎儿的各种组织　(4)胚胎分割和胚胎移植(或胚胎分割移植)　100%　DNA分析(或染色体组型分析)　(5)是否妊娠
23．(1)引物B、C　PCR扩增仪　有利于热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)从引物处起始合成新的DNA链　(2)EcoRⅠ和BamHⅠ　EcoRⅠ和BclⅠ　(3)可转移并整合到受体细胞染色体DNA上　①④　(4)抗原－抗体杂交　(5)①基因文库　②大量培养水稻细胞　③植物组织培养　④高盐溶液(或高浓度NaCl溶液)
解析　(1)在PCR扩增的过程中，引物与解旋后的单链结合，结合在单链DNA的3′端，随后热稳定的DNA聚合酶从引物的3′端进行互补链的合成，完成子链的合成。因此，图1中的DNA进行扩增时，选用的引物是引物B、C。PCR过程可以在PCR扩增仪中自动完成，引物与a、β链结合后，温度升至72 ℃左右的目的是让热稳定的DNA聚合酶(或Taq酶)从引物处起始进行互补链的合成。(2)根据图1中限制酶的种类和限制酶的切点，若使用限制酶Sau3AⅠ，则BamHⅠ的切点也将被切掉，且EcoRⅠ切点在这两种限制酶切点之外，Sau3AⅠ完成切割后，露出的末端是一样的，且没有EcoRⅠ切点露出的末端，不能保证耐干旱基因的定向插入和减少随意连接，因此，使用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ处理含耐干旱基因的DNA片段。图2中，根据启动子、终止子的位置及目的基因转录的方向，所用的限制酶是EcoRⅠ和BclⅠ。(3)基因表达载体构建后，需要将整个的目的基因(含启动子、终止子)(即①④)完整地转移到受体细胞中，这利用了农杆菌Ti质粒上T－DNA可转移到受体细胞，并整合到受体细胞染色体DNA上的特性。(4)要检测耐干旱基因是否翻译成蛋白质，可以从导入耐干旱基因的植物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交的方法进行判断。

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